close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

Патент BY15534

код для вставкиСкачать
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ПАТЕНТУ
РЕСПУБЛИКА БЕЛАРУСЬ
(46) 2012.02.28
(12)
(51) МПК
НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР
ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ
СОБСТВЕННОСТИ
(54)
BY (11) 15534
(13) C1
(19)
A 61K 31/7056 (2006.01)
A 61K 31/52 (2006.01)
A 61P 37/06 (2006.01)
ИММУНОСУПРЕССИВНАЯ КОМПОЗИЦИЯ
(21) Номер заявки: a 20101001
(22) 2010.06.29
(71) Заявитель: Государственное научное
учреждение "Институт биоорганической химии Национальной академии
наук Беларуси" (BY)
(72) Авторы: Калиниченко Елена Николаевна; Кузьмицкий Болеслав
Брониславович; Голубева Марина
Брониславовна; Любин Геннадий
Семенович; Рубинова Елена Брониславовна; Зинченко Анатолий
Иванович; Ерошевская Людмила
Анатольевна (BY)
(73) Патентообладатель: Государственное
научное учреждение "Институт биоорганической химии Национальной академии наук Беларуси" (BY)
(56) BY 5693 C1, 2003.
US 2006/0276419 A1.
HURST E.A. et al. Arch Dermatol. 2005. - No. 141. - P. 865-868.
VOLLMER J. et al. Antimicrob. Agents
Chemother. - 2004. - Vol. 48. - No. 6. P. 2314-2317.
БАЙДА А.Г. и др. Медицинские новости. - 2006. - № 2. - С. 148-153.
BY 15534 C1 2012.02.28
(57)
Иммуносупрессивная композиция, содержащая в качестве активных компонентов
лейкладин и рибавирин в массовом соотношении 1 : 100.
Изобретение относится к области фармации и медицины, в частности к новой композиции на основе лейкладина и рибавирина, обладающей иммуносупрессивной активностью.
Одним из активных веществ заявляемой композиции является лейкладин (син.
кладрибин, лейстатин).
Лейкладин является аналогом 2'-дезоксиаденозина, который входит в состав ДНК.
Лейкладин - цитотоксический метаболит, тормозящий пролиферацию бластных форм
лимфоцитов и других гемопоэтических клеток. На Т-лимфоциты он влияет более селективно по сравнению с супрессорами азатиоприном, циклофосфаном. Лейкладин изменяет
соотношение Т-лимфоцитов в сторону преобладания супрессорной функции T-клеток,
уменьшает образование провоспалительных цитокинов. Лейкладин способен проникать
через гематоэнцефалический барьер, поэтому лучше влияет на аутореактивные лимфоциты и на аутоиммунные воспалительные очаги, выполняющие ключевую роль в патогенезе
рассеянного склероза. Лейкладин эффективен при введении парентерально (внутривенно,
подкожно), так как в кислой среде он теряет за 1 час около 50 % своей активности.
Описано использование лейкладина в комбинации с цитарабином для супрессии различных типов лимфобластных клеток и достижения высокого синергического эффекта [1].
Вторым активным веществом заявляемой композиции является рибавирин (син. виразол, ребетол, трибавирин) - синтетический аналог пуринового нуклеозида дезоксигуанидина.
BY 15534 C1 2012.02.28
Основная фармакологическая группа рибавирина - противовирусное средство. Однако
рибавирин привлекает внимание и как средство, проявляющее значительное иммуносупрессивное действие [2]. Рибавирин угнетает продукцию антител субпопуляцией
В-лимфоцитов, тормозит Т-клеточноопосредованный иммунный ответ, изменяет баланс
регуляторных и воспалительных цитокинов [3, 4]. Рибавирин обладает относительно низким общетоксическим действием.
Описаны композиции рибавирина с интерферонами как рекомбинантными, так и выделенными из клеток организма [5, 6]. Однако такие комбинированные препараты известны как иммуномодулирующие средства, которые дополняют механизм противовирусного
действия рибавирина. Такие комбинации применяют при вирусном гепатите С и других
вирусных инфекциях.
Известных аналогов заявляемой иммуносупрессивной композиции на основе лейкладина и рибавирина не выявлено.
Задача изобретения - новая композиция, содержащая в качестве активных веществ
лейкладин и рибавирин, проявляющая более сильное супрессивное влияние, чем активность каждого ингредиента в отдельности.
Поставленная задача решается заявляемой композицией при следующем соотношении
активных компонентов: лейкладин - 1; рибавирин - 100.
Широкий спектр противовирусной активности рибавирина (вирус герпеса простого 1
и 2 типа, вирус оспы, вирус гриппа типа A и B, парамиксовирусы и др.) дополняет фармакотерапевтический потенциал заявляемой композиции. Создаваемая композиция может
быть надежным средством в тех случаях, когда частые вирусные заболевания провоцируют развитие или осложнение рассеянного склероза и могут выполнять функцию реле пускового механизма аутоиммунного заболевания, к которому уже имеется генетическая
предрасположенность.
Принимая во внимание, что иммуносупрессивные свойства лейкладина являются ведущим подходом к терапии множественного склероза, данное изобретение направлено на
решение задачи создания более эффективной иммуносупрессивной композиции сравнительно с каждым отдельным ингредиентом.
Способ получения заявляемой композиции приведен в примере.
Пример.
Навеску рибавирина 1,0 г добавляют в 10 мл стерильного раствора натрия хлорида
0,9 %, pH которого при необходимости доводят до 7,2-7,4 1N раствором NaOH. Раствор
тщательно перемешивают на магнитной мешалке до полного растворения рибавирина. Затем в этот раствор вносят навеску лейкладина 0,01 г. Смесь растворов тщательно перемешивают. Полученный раствор лиофильно высушивают или упаривают досуха.
Раствор рибавирина в пределах физиологических значений pH стабилизирует лейкладин в составе композиции. Так, при pH = 1-2 через 3,5 часа сохраняется 95,4 % рибавирина и 45 % лейкладина; при pH = 10 за это же время обнаруживается рибавирина - 95 %;
лейкладина - 100 %. При pH = 1-2 потеря лейкладина за 1-1,5 ч составляет 50 %, в присутствии рибавирина она достигает около 26 %.
Заявляемая композиция обладает иммуносупрессивным действием, ингибируя или частично ограничивая процесс активирования аутореактивных T-лимфоцитов, и позволяет
добиваться максимальной коррекции иммунной системы у большинства больных рассеянным склерозом.
Иммуносупрессивная активность заявляемой композиции подтверждена в испытаниях
на стандартной модели оценки влияния фармакологических веществ на клеточный иммунный ответ, с использованием реакции гиперчувствительности замедленного типа
(ГЗТ). В качестве тест-модели используют мышей-гибридов CBAxC57B1/6⋅F1. В качестве
сенсибилизирующей и разрешающей дозы антигена служат эритроциты барана (ЭБ). Учет
интенсивности воспалительной реакции ГЗТ осуществляют через 24 часа после введения
2
BY 15534 C1 2012.02.28
разрешающей дозы антигена. По разнице размера опытной и контрольной лап определяют
индекс воспалительной реакции [7].
Общетоксическое действие и параметры острой токсичности заявляемой композиции
сравнивают в экспериментах на мышах ICR обоих полов при введении внутрижелудочно
однократно согласно методике [8].
Результаты исследований сравнивают и оценивают статистически с использованием
параметрического метода и критерия t Стьюдента [9] (табл. 1).
Таблица 1
Сравнительная иммуносупрессивная активность заявляемой композиции
и действующих веществ композиции - лейкладина и рибавирина на модели
T-клеточноопосредованного иммунного ответа в реакции ГЗТ на мышах-гибридах
Заявляемая композиция К-во живот- Доза, мг/кг, Индекс реакции Эффект,
P
или вещество
ных в группе
внутрь
ГЗТ, %
%
Контроль
5
плацебо
17,8 ± 0,93
Композиция
5
101
4,65 ± 0,52
74
<0,001
Контроль
5
плацебо
43,8 ± 2,90
Рибавирин
5
100
33,6 ± 2,91
21
<0,05
Контроль
5
плацебо
31,7 ± 2,71
Лейкладин
5
1
21,9 ± 0,85
31
<0,01
Представленные в табл. 1 данные испытаний иммуносупрессивной активности заявляемой композиции и составляющих ее активных ингредиентов показывают, что супрессорный эффект композиции в 1,4 раза выше суммарного эффекта отдельных ингредиентов,
что доказывает синергический эффект композиции. Следовательно, заявляемая композиция может быть более эффективным средством в терапии рассеянного склероза по сравнению с базовым монопрепаратом - лейкладином.
Результаты испытания токсичности заявляемой композиции представлены в табл. 2.
Таблица 2
Параметры острой токсичности композиции и составляющих ингредиентов
при введении в желудок (орально), мг/кг
Тесты
Препарат
LD50
LD16
LD84
LD10
S
Композиция
2400
1520
3700
1320
1,53
Лейкладин
420
280
640
134
1,48
Рибавирин
7750
7000
8600
6000
1,09
Данные, приведенные в табл. 2, характеризуют заявляемую композицию как относительно малотоксичный иммуносупрессор, LD50 композиции в 5,7 раза превышает тот же
показатель лейкладина.
3
BY 15534 C1 2012.02.28
Источники информации:
1. Chow K.U., Boehrer S., Napieralski S. et al. In AML Cell Lines Ara-C Combined with
Purine Analogues is Able to Exert Synergistic as Well as Antagonistic Effects on Proliferation,
Apoptosis and Disruption of Mitochondrial Membrane Potential // Leuk. Lymphoma. - 2003. V. 44. - P. 165-173.
2. Vollmer J., Rankin R., Hartmann H. et al. Immunopharmacology of CpG Oligodeoxynucleotides and Ribavirin // Antimicrob Agents Chemother. - 2004. - V. 48. - No. 6. - P. 2314-2317.
3. Powers C.N., Peavy D.L., Knight V. Selective inhibition of functional lymphocyte subpopulations by ribavirin // Antimicrob. Agents Chemother. - 1982. -V. 22. - No. 1. - P. 108-114.
4. Tam R.C., Pai B., Bard J. et al. Ribavirin polarizes human T cell responses towards a
Type 1 cytokine profile // J. Hepatol. - 1999. - V. 30. - No. 3. - P. 376-382.
5. Патент WO 2005087725, МПК7 C 07K 5/06; C 07K 5/065; C 07K 5/08, 2005.
6. Патент WO 2006020082 Международный. МКИ A 61K 31/55; A 61P 31/14; C 07D
471/04, 2006.
7. Технический кодекс установившейся практики. ТКП 125-2008 (02040). Надлежащая
лабораторная практика. Издание официальное. - МЗ РБ. - Минск. - С. 24-26.
8. Правила доклинических исследований безопасности и эффективности фармакологических веществ. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. - М., 2000. - С. 7-17.
9. Статистическая обработка результатов доклинических испытаний. Руководство по
экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. М., 2000. - С. 360.
Национальный центр интеллектуальной собственности.
220034, г. Минск, ул. Козлова, 20.
4
Документ
Категория
Без категории
Просмотров
0
Размер файла
90 Кб
Теги
патент, by15534
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа