close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

Патент BY15567

код для вставкиСкачать
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ПАТЕНТУ
РЕСПУБЛИКА БЕЛАРУСЬ
BY (11) 15567
(13) C1
(19)
(46) 2012.02.28
(12)
(51) МПК
A 61K 31/341
A 61P 31/22
НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР
ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ
СОБСТВЕННОСТИ
(2006.01)
(2006.01)
ИНГИБИТОРЫ РАЗМНОЖЕНИЯ ВИРУСА ГЕРПЕСА
В КУЛЬТУРЕ КЛЕТОК
(54)
(21) Номер заявки: a 20100196
(22) 2010.02.10
(43) 2011.10.30
(71) Заявители: Учреждение Белорусского государственного университета
"Научно-исследовательский институт физико-химических проблем";
Государственное учреждение "Республиканский научно-практический центр эпидемиологии и микробиологии" (BY)
(72) Авторы: Бореко Евгений Иванович;
Бринкевич Святослав Дмитриевич;
Павлова Наталья Ильинична; Савинова Ольга Владимировна; Сосновская Анна Алексеевна; Едимечева
Ирина Петровна; Шадыро Олег
Иосифович (BY)
(73) Патентообладатели: Учреждение Белорусского государственного университета "Научно-исследовательский институт физико-химических проблем";
Государственное учреждение "Республиканский научно-практический
центр эпидемиологии и микробиологии" (BY)
(56) US 4424232, 1984.
RU 2205000 C2, 2003.
BY 4670 C1, 2002.
BY 12612 C1, 2009.
RU 2012335 C1, 1994.
JP 60-215626 A, 1985.
US 2006/0142190 A1.
US 5767149 A, 1998.
BY 15567 C1 2012.02.28
(57)
Применение 2-O-α-D-гликозилированных производных L-аскорбиновой кислоты общей формулы
OR
OH
HO
O
OH
O
O
OH
HO
O
HO
,
где R означает H или
O
C
C15H31 ,
в качестве соединений, проявляющих активность при подавлении размножения вируса
герпеса простого I типа в культуре клеток.
BY 15567 C1 2012.02.28
Изобретение относится к области медицины, в частности вирусологии, и может быть
использовано при подавлении размножения вируса герпеса.
Известны
противогерпетические
свойства
препаратов
4,6-ди-трет-бутил-2фениламинофенола [1]
CH 3
H 3C
CH 3
OH
H 3C
N
H
H 3C
CH 3
и 4,6-ди-трет-бутил-2-[(N-ацетил)амино]фенола [2]
CH 3
H 3C
CH 3
OH
H 3C
H 3C
CH 3
N
H
O
CH 3
.
Известно использование L-аскорбиновой кислоты в качестве вспомогательного компонента композиций для лечения вирусных заболеваний [3, 4]. Продукты ее 2-O-α-Dгликозилирования применяются в качестве нетоксичных антиоксидантов, витаминизирующих добавок и стабилизаторов пищевых, фармацевтических и косметических субстанций, а также в качестве фотозащитных компонентов средств по уходу за кожей [5, 6].
Задачей изобретения является расширение ассортимента средств, обладающих противовирусным действием в отношении вируса герпеса простого I типа.
Поставленная задача достигается применением ранее известных соединений - 2-O-αD-гликозилированных производных L-аскорбиновой кислоты общей формулы
OR
OH
O
O
O
HO
R=
HO
OH
H
(I)
O
OH
R=
C
C 15H 31 (II)
HO
для подавления вируса герпеса простого I типа в культуре клеток. Производное, содержащее в качестве R атом водорода, называется 2-O-α-D-глюкопиранозил-L-аскорбиновая
кислота (I), а содержащее остаток пальмитиновой кислоты - 6-O-пальмитоил-2-O-α-Dглюкопиранозил-L-аскорбиновая кислота (II).
Авторами обнаружены неочевидные свойства веществ, позволяющие применить их
для подавления вируса герпеса простого в культуре клеток.
Сущность изобретения иллюстрируется примерами.
O
2
BY 15567 C1 2012.02.28
Пример 1.
Определение вирусингибирующих свойств 2-O-α-D-глюкопиранозил-L-аскорбиновой
кислоты. При проведении исследований используют вирус герпеса простого I типа (ВГП-1,
штамм 1 С) и линию клеток рабдомиосаркомы человека (RD). Монослойную культуру
клеток RD, выращенную во флаконах, отмывают от ростовой среды, инфицируют 0,010,001 ТЦД50/клетка вирусов путем нанесения на клетки разведения вируссодержащей суспензии в объеме 0,1 мл на 1 ч при 37 °C. Затем жидкость удаляют и клетки покрывают
средой поддержки (среда 199), содержащей различные концентрации 2-O-α-Dглюкопиранозил-L-аскорбиновой кислоты. После 48 ч инкубации при 37 °C регистрируют
морфологические изменения монослоя клеток (цитопатическое действие (ЦПД) вируса,
увеличение ×80). Находят минимальную концентрацию соединения, подавляющую развитие ЦПД вируса на 50 % (EC50). Критерием противовирусного действия считают наличие
различий в сравнении с контролем вируса. Максимальную переносимую концентрацию
(МПК) изучаемого вещества определяют как его максимальную концентрацию с отсутствием морфологических изменений неинфицированных клеток RD после 48 ч инкубации.
Отношение МПК/ЕС50 показывает диапазон нетоксических концентраций с антивирусным
действием (таблица).
Как видно, 2-O-α-D-глюкопиранозил-L-аскорбиновая кислота обладает выраженными
вирусингибирующими свойствами в отношении вируса герпеса простого I типа в широком диапазоне концентраций, не токсичных для культуры клеток. Максимально достигаемое снижение титра вируса в сравнении с контролем при этом превышает 2 lg ТЦД50/мл
(99 %). В то же время, исходное соединение, аскорбиновая кислота, не проявило вирусингибирующих свойств в отношении вируса герпеса простого I типа.
Пример 2.
Определение
вирусингибирующих
свойств
6-O-пальмитоил-2-O-α-Dглюкопиранозил-L-аскорбиновой кислоты. При проведении исследований согласно методике, описанной в примере 1, используют 6-O-пальмитоил-2-O-α-D-глюкопиранозил-Lаскорбиновую кислоту. Результат приводят в таблице.
Как видно, 6-O-пальмитоил-2-O-α-D-глюкопиранозил-L-аскорбиновая кислота обладает выраженными вирусингибирующими свойствами в отношении вируса герпеса простого в широком диапазоне концентраций, не токсичных для культуры клеток.
Максимально достигаемое снижение титра вируса в сравнении с контролем при этом превышает 2 lg ТЦД50/мл (99 %).
Таким образом, заявляемое решение позволяет решить поставленную задачу. При использовании 2-O-α-D-гликозилированных производных L-аскорбиновой кислоты удается
получить выраженное подавление размножения вируса герпеса простого I типа в культуре
клеток. Исходное соединение, аскорбиновая кислота, не проявило вирусингибирующих
свойств в отношении вируса герпеса простого I типа.
Заявляемое химическое соединение может быть использовано в исследовательской
лабораторной практике непосредственно в настоящий момент для подавления размножения вируса герпеса. Для использования 2-O-α-D-гликозилированных производных
L-аскорбиновой кислоты в качестве субстанции нового противовирусного лекарственного
средства требуется разработка лекарственной формы, проведение лабораторных и клинических испытаний эффективности и безвредности.
3
BY 15567 C1 2012.02.28
Противовирусные свойства 2-O-α
α-D-глюкопиранозил-L-аскорбиновой кислоты (I),
6-O-пальмитоил-2-O-α
α-D-глюкопиранозил-L-аскорбиновой кислоты (II)
и аскорбиновой кислоты
Разность с конТитр вируса±Sх,
МПК/
Вещество Концентрация, мкг/мл
тролем,
EC50
ТЦД50/мл
EC50
ТЦД50/мл
50
<4,0
>2,0
25
<4,0
>2,0
12,5
4,70±0,43
1,3
5,5
I
72,7
(5,9÷5,1)
6,25
5,30±0,30
0,7
3,0
6,00±0,53
0
0
6,00±0,53
25
<4,0
>2,0
12,5
<4,0
>2,0
6,25
<4,0
>2,0
2,6
II
19,2
(2,8÷2,5)
3,0
5,30±0,30
0,7
1,5
6,00±0,53
0
0
6,00±0,53
400
5,18±0,26
0
200
5,18±0,26
0
100
5,18±0,26
0
Аскорби50
5,18±0,26
0
новая кис>400
<1
25
5,18±0,26
0
лота
12,5
5,18±0,26
0
6,25
5,18±0,26
0
0
5,18±0,26
Источники информации:
1. Патент BY 6594, МПК A 61K 31/05, A 61P 31/22.
2. Патент BY 6506, МПК A 61P 31/16, 31/22.
3. Патент EP 1242073B1, МПК7 A 61K 31/4015, A 61K 31/19, 2004.
4. Патент US 4424232, МПК3 A 61K 31/335, 1984.
5. Патент US 5767149, МПК6 А 61К 31/375 A 61K 7/00 C 07D 307/62, 1998.
6. Taia A., Gotoa S., Ishigurob Y., Suzukib K., Nitodac T., Yamamoto I. Permeation and
metabolism of a series of novel lipophilic ascorbic acid derivatives, 6-O-acyl-2-O-α-d-glucopyranosyl-1-ascorbic acids with a branched-acyl chain, in a human living skin equivalent model//Bioorg. Med. Chem. Lett. - 2004. - V. 14. - No. 3. - P. 623-627.
Национальный центр интеллектуальной собственности.
220034, г. Минск, ул. Козлова, 20.
4
Документ
Категория
Без категории
Просмотров
0
Размер файла
84 Кб
Теги
by15567, патент
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа