close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

Патент BY15767

код для вставкиСкачать
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ПАТЕНТУ
РЕСПУБЛИКА БЕЛАРУСЬ
BY (11) 15767
(13) C1
(19)
(46) 2012.04.30
(12)
(51) МПК
C 07D 209/04 (2006.01)
C 09B 23/06 (2006.01)
A 61P 35/00 (2006.01)
НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР
ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ
СОБСТВЕННОСТИ
(54)
ФОТОСЕНСИБИЛИЗАТОР ДЛЯ ФОТОДИНАМИЧЕСКОЙ
ТЕРАПИИ ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ ОПУХОЛЕЙ
(21) Номер заявки: a 20101007
(22) 2010.06.30
(43) 2010.12.30
(71) Заявитель: Белорусский государственный университет (BY)
(72) Авторы: Самцов Михаил Петрович;
Луговский Анатолий Петрович; Воропай Евгений Семенович; Петров
Петр Тимофеевич; Луговский Александр Анатольевич; Демид Дмитрий Иосифович; Ляшенко Людмила
Сергеевна; Александрова Елена
Николаевна; Истомин Юрий Петрович (BY)
(73) Патентообладатель: Белорусский государственный университет (BY)
(56) BY 7296 C1, 2005.
BY 3569 C1, 2000.
ISTOMIN Y.P. et al. Exp. Oncol., 2006. Vol. 28. - No. 1. - P. 80-82.
EA 009386 B1, 2007.
RU 2001129707 A, 2003.
RU 2367434 C1, 2009.
(57)
Применение индотрикарбоцианинового красителя общей формулы
H3 C
CH3
R
R
Cl
BY 15767 C1 2012.04.30
N+
N
(CH2)3COOH
HOOC(CH2)3
,
Br-
где R представляет собой CH3 или C2H5,
или его комплекса с кремофором в качестве фотосенсибилизатора для фотодинамической
терапии злокачественных опухолей.
Применение индотрикарбоцианинового красителя формулы
H3C
CH3
R
Cl
N+
R
N
(CH2)3COOH
HOOC(CH2)3
Br-
где I - R = С2Н5; II - R = СН3
,
(I, II)
BY 15767 C1 2012.04.30
и их комплексов с кремофором в качестве фотосенсибилизаторов для фотодинамической
терапии злокачественных опухолей при фотовоздействии излучением ближнего инфракрасного диапазона.
Наиболее близким по структуре и проявляющим аналогичную биологическую активность является соединение формулы III:
CH3
CH3
C2H5
CH
C2H5
CH
CH
CH
N
CH2
N
CH2
Cl
Br
CH2
CH2
CH2
O
COO
CH2
OH
O
CH2
COO
OH
OH
.
(III)
OH
OH
OH
OH
CH2
OH
Данное соединение при выделении сложно отделить от его моноэтерифицированного
и неэтерифицированного аналога. Хроматографическая очистка приводит к значительному удорожанию соединения III [1]. Кроме того, лекарственная форма соединения III при
рабочей концентрации получается в виде суспензии красителя в водно-спиртовом растворе и плохо подвергается стерилизации посредством фильтрации. Поэтому внутривенное
введение этого соединения недопустимо.
Лучшим из известных соединений, используемых для фотодинамической терапии, является хлорин E6 [2].
Однако использование последнего позволяет проводить лечение преимущественно
поверхностных опухолей, максимум спектра поглощения хлорина E6 660-670 нм. При использовании хлорина глубина проникновения лазерного излучения достигает глубины
20 мм. Фотосенсибилизаторы с полосой поглощения, лежащей в более длинноволновой
области, обеспечивают проникновение лазерного излучения на большую глубину. Кроме
того, хлорин E6 обладает относительно невысоким значением коэффициента поглощения:
ε = 5 ⋅ 104 M −1см −1
Задачей изобретения является фотосенсибилизатор, который проявляет выраженную
противораковую активность при облучении светом в ближнем инфракрасном диапазоне.
Кроме того, рабочие вещества препарата должны получаться по простой синтетической
схеме, обладать хорошей растворимостью в воде, иметь максимум полосы поглощения в
ближнем инфракрасном диапазоне.
Данная задача решалась путем применения в качестве фотосенсибилизаторов неэтерифицированных аналогов I, II со свободной карбоксильной группой и их более водорастворимых комплексов с кремофором. Для выделения соединений I, II не требуется стадии
хроматографической очистки, что упрощает и удешевляет схему синтеза.
Введение препаратов для фотодинамической терапии в живой организм производится
внутривенно, поэтому необходимым требованием является его растворимость в системах,
разрешенных для внутривенного введения: 0,9 %-ный водный раствор NaCl, водный раствор глюкозы, вводно-спиртовой раствор, раствор кремофора. Наличие N-триметиленкарбоксильного заместителя в молекуле трикарбоцианинового красителя значительно
повышает его растворимость в этих системах, снижает токсичность препарата и не влияет
на фотофизические свойства красителя по сравнению с прототипом III. Для создания лекарственных форм использовались комплексы соединений I, II с кремофором.
2
BY 15767 C1 2012.04.30
Соединения I, II получают конденсацией бромида [2,3-диметил-3-этил-1-триметиленкарбоксииндолия] или бромида [2,3,3-триметил-1-триметиленкарбоксииндолия] с бромидом [5-диметиламино-3-хлор-2,4-(о-фенилено)-2,4-пентадиен-1-илиден]-диметиламмония.
Пример 1.
Бромид 2-{7-[1-(3-карбоксипропил)-3-метил-3-этил-2(1Н)-индолинилиден]-4-хлор-3,5(о-фенилен)-1,3,5-гептатриенил-1-ил}-1-(3-карбокси-пропил)-3-метил-3-этилиндолия.
Смесь 3,4 г (0,001 м) бромида 2,3-диметил-3-этилиндол-1-(γ-масляной кислоты) и
0,0005 м бромида [5-диметиламино-3-хлор-Z-2,4-(о-фенилено)-2,4-пентадиен-1-илиден]диметиламмония в 15 мл уксусного ангидрида и 0,5 мл N-метилморфолина кипятили
5 минут. После охлаждения в реакционную смесь добавляли 150 мл диэтилового эфира и
через 1 час выпавший продукт отфильтровывали, промывали горячей водой и переосаждали из хлористого метилена диэтиловым эфиром. Выход 56 %. Тпл (с разл.) = 162 °С.
В этаноле λпоглмакс = 724 нм, ε = 2,0·105 М-1см-1.
Пример 2.
Бромид 2-{7-[1-(3-карбоксипропил)-3,3-диметил-2(1Н)-индолинилиден]-4-хлор-3,5-(офенилен)-1,3,5-гептатриенил-1-ил}-1-(3-карбокси-пропил)-3,3-диметилиндолия.
Смесь 3,2 г (0,001 м) бромида 2,3,3-триметилиндол-1-(γ-масляной кислоты) и 0,0005 м
бромида [5-диметиламино-3-хлор-Z-2,4-(о-фенилено)-2,4-пентадиен-1-илиден]-диметиламмония в 15 мл уксусного ангидрида и 0,5 мл N-метилморфолина кипятили 5 минут. После
охлаждения в реакционную смесь добавляли 150 мл диэтилового эфира и через 1 час
выпавший продукт отфильтровывали, промывали горячей водой и переосаждали из
хлористого метилена диэтиловым эфиром. Выход 69 %. Тпл (с разл.) = 167 °С. В этаноле
λ поглмакс = 724 нм, ε = 2,0·105 М-1см-1.
Пример 3.
Комплекс соединения (I) с кремофором.
Смесь 0,1 г (0,13 млм) и 5 г кремофора растворяли в 10 мл спирта. Полученный раствор приливали к 200 мл 5 %-ного раствора маннита и выдерживали 10 часов при 5 °С.
Затем раствор фильтровали через стерилизационный фильтр с пористостью 0,22 мкм. Полученный стерилизованный фильтрат подвергался лиофильной сушке.
Строение соединений I, II подтверждено электронными и 1Н ЯМР спектрами, а также
данными элементного анализа. Образование комплексов красителей с кремофором подтверждается электронными спектрами.
Острая токсичность препаратов определялась на белых беспородных крысах обоего
пола весом 100-150 г при внутривенном способе введения.
Таблица 1
Показатели острой токсичности (мг/кг)
комплекс I
I
II
с кремофором
ЛД10
47,1
49,1
64,1
ЛД50
63,8±4,7
65,7±4,7
157,1±26,3
ЛД90
80,6
82,3
250,1
Противораковая активность соединений I, II и комплексов I с кремофором определялась на белых беспородных крысах массой 100-150 г с перевитыми опухолями: саркомы
М-1, рак печени РС-1, лимфосаркомы Плисса (ЛФС). Препарат вводили внутривенно в
5 %-ном водном растворе глюкозы в дозе 4-5 мг/кг. Кинетику накопления препарата исследовали путем регистрации флуоресценции in vivo. Максимальное содержание препарата в опухоли наблюдалось через 2-3 часа после введения. В быстрорастущих опухолях
отмечалось увеличение (более чем в 4 раза) содержания препарата в опухоли по сравнению со здоровой тканью. Локальное фотооблучение опухоли проводили излучением полупроводникового лазера с λ = 740 нм в дозе 90-280 Дж/см2. Плотность мощности
3
BY 15767 C1 2012.04.30
фотооблучения составляла 150 мВт/см2. Для оценки степени повреждения опухолевой
ткани после фотодинамического воздействия проводили морфологическое исследование
опухолей с помощью метода витального окрашивания [3]. Результаты исследований приведены в табл. 2.
Таблица 2
Результаты прижизненной окраски опухолей крыс
после фотодинамического воздействия с лекарственной формой
Вид
Лекарственная
Воздействие (концентрация
Глубина некроза
опухоли
форма
препарата + доза облучения)
опухоли, мм
2
ЛФС
5 мг/кг + 90 Дж/см
15±2
I
2
РС-1
5 мг/кг + 90 Дж/см
19±2
ЛФС
5 мг/кг + 90 Дж/см2
16±1
II
2
РС-1
5 мг/кг + 90 Дж/см
18±2
М-1
4 мг/кг + 200 Дж/см2
19±3
комплекс I с
2
М-1
4 мг/кг + 280 Дж/см
18±3
кремофором
2
М-1
5 мг/кг + 200 Дж/см
18±2
Данные табл. 2 свидетельствуют о том, что заявляемый препарат на основе комплексов соединений I, I) с кремофором характеризуется выраженным эффектом фотодинамического воздействия на злокачественные образования, низкой острой токсичностью,
высокой растворимостью в воде, высокой избирательностью накопления в опухолевой
ткани и может найти применение для лечения злокачественных опухолей.
Источники информации:
1. BY 7296 C1.
2. EP 0445627 A1.
3. Kostenich G.A., Zhuravkin I.N., Zhavrid E.A. Experimental grounds for using chlorine e6
in the photodynamic therapy of malignant tumors // J. Photochem. Photobiol. В.: Biol. - 1994.V. 22. - P. 211-217.
Национальный центр интеллектуальной собственности.
220034, г. Минск, ул. Козлова, 20.
4
Документ
Категория
Без категории
Просмотров
3
Размер файла
91 Кб
Теги
by15767, патент
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа