close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

Патент BY16006

код для вставкиСкачать
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ПАТЕНТУ
РЕСПУБЛИКА БЕЛАРУСЬ
(46) 2012.06.30
(12)
(51) МПК
НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР
ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ
СОБСТВЕННОСТИ
(54)
G 01N 33/48
(2006.01)
СПОСОБ ИНДИВИДУАЛЬНОГО ПОДБОРА ХИМИОПРЕПАРАТА
ИЛИ КОМБИНАЦИИ ХИМИОПРЕПАРАТОВ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ
ЭПЕНДИМОМЫ У РЕБЕНКА
(21) Номер заявки: a 20100578
(22) 2010.04.17
(43) 2011.12.30
(71) Заявитель: Государственное научное
учреждение "Институт физиологии
Национальной академии наук Беларуси" (BY)
(72) Авторы: Чернов Александр Николаевич; Талабаев Михаил Владимирович;
BY 16006 C1 2012.06.30
BY (11) 16006
(13) C1
(19)
Григорьев Дмитрий Григорьевич; Калюнов Владимир Николаевич; Кульчицкий Владимир Адамович (BY)
(73) Патентообладатель: Государственное
научное учреждение "Институт физиологии Национальной академии наук
Беларуси" (BY)
(56) RU 2189587 C1, 2002.
RU 94026026 A1, 1997.
(57)
Способ индивидуального подбора химиопрепарата или комбинации химиопрепаратов
для лечения эпендимомы у ребенка, заключающийся в том, что выделяют клетки эпендимомы из биоптата, выращивают в течение 2 суток в питательной среде при температуре
37 °С, влажности воздуха 95 % и парциальном давлении CO2 5 %, снимают 0,25 %-ным
раствором трипсина в версене, переносят на чашки Петри в количестве 300 000 клеток на
чашку и выращивают в течение суток в среде DMEM, содержащей 15 % эмбриональной
телячьей сыворотки и 10-4 г/л сульфата гентамицина, после чего в чашки Петри с клетками добавляют тестируемые химиопрепараты или комбинации химиопрепаратов в концентрациях, уменьшенных в 100 раз по сравнению с используемыми для лечения, через 1
сутки окрашивают клетки в чашках 0,02 %-ным раствором трипанового синего, выявляют
образец с наибольшим процентом погибших клеток эпендимомы и выбирают для лечения
эпендимомы химиопрепарат или комбинацию химиопрепаратов, использованные для данного образца.
Изобретение относится к медицине, к разделу клиническая и экспериментальная онкология.
Для лечения многих опухолей, в том числе и эпендимомы у ребенка, используют метод
химиотерапии [1]. В основе хемотерапевтического подхода к лечению эпендимомы у детей
лежит ряд стандартных протоколов: HIT-91, HIT-2000, PCV [2], в которых пациентам
циклично вводятся различные комбинации цитостатических препаратов: цисплатин, карбоплатин [2], темозоломид и др. [3]. Эффективность лечения пациентов с использованием
таких режимов химиотерапии зависит от многих факторов, в первую очередь от возраста
больного, стадии заболевания [1] и индивидуальной чувствительности организма к указанным медикаментам, и на сегодняшний день составляет от 24 до 75 % [1]. Однако если
первые два признака онкологи стараются учитывать при выборе режимов и тактики лечения
больного, то специфическая восприимчивость клеток эпендимомы у детей к воздействию
BY 16006 C1 2012.06.30
цитостатических средств не может быть решена в клинике в силу отсутствия технологии и
соответствующей организационной структуры.
Заявителю не известен способ индивидуального подбора химиопрепарата или комбинации химиопрепаратов для лечения эпендимомы у ребенка, в силу чего не может быть
указан ближайший аналог заявляемого изобретения.
Задачей заявляемого изобретения является создание способа индивидуального подбора in vitro химиопрепарата или комбинации химиопрепаратов для лечения эпендимомы у
ребенка.
Поставленная задача достигается следующим образом. Предложен способ индивидуального подбора химиопрепарата или комбинации химиопрепаратов для лечения эпендимомы у ребенка, заключающийся в том, что выделяют клетки эпендимомы из биоптата,
выращивают в течение 2 суток в питательной среде при температуре 37 °С, влажности
воздуха 95 % и при парциальном давлении CO2 5 %, снимают 0,25 % раствором трипсина
в версене, переносят в чашки Петри в количестве 300 000 клеток на чашку и выращивают
в течение суток в среде DМЕМ, содержащей 15 % эмбриональной телячьей сыворотки и
10-4 г/л раствора сульфата гентамицина, после чего в чашки Петри с клетками добавляют
тестируемые химиопрепараты или комбинации химиопрепаратов в концентрациях,
уменьшенных в 100 раз по сравнению с используемыми для лечения, через 1 сутки окрашивают клетки в чашках 0,02 % раствором трипанового синего, выявляют образец с наибольшим процентом погибших клеток эпендимомы и выбирают для лечения эпендимомы
химиопрепарат или комбинацию химиопрепаратов, используемые для данного образца.
Данные проведенных заявителем экспериментов показывают, что при таком способе
предварительной оценки на культуре клеток действия указанных химиопрепаратов определяются наибольшая чувствительность и специфика действия цитостатиков в сравнении
друг с другом и контролем, что затем может быть использовано в клинике. Заявителем
были применены известные, зарегистрированные МЗ РБ химиотерапевтические препараты.
На фигуре А представлено: Контроль. Клетки эпендимомы ребенка, полученные из
биоптата пациента на 2 сутки культивирования в среде без химиопрепаратов. Увеличение
× 312,5.
На фигуре Б представлено: Опыт. Клетки эпендимомы ребенка, полученные из биоптата пациента на 2 сутки культивирования в среде при действии гемцитабина (2 мкг/мл).
Увеличение ×312,5.
Пример.
Выделяют из биоптата по стандартной методике клетки эпендимомы [4], выращивают
в течение 2 суток в питательной среде при температуре 37 °С, влажности воздуха 95 % и
при парциальном давлении CO2 5 %, снимают 0,25 % раствором трипсина в версене, переносят в чашки Петри в количестве 300 000 клеток на чашку и выращивают в течение суток
в среде DМЕМ, содержащей 15 % эмбриональной телячьей сыворотки и 10-4 г/л раствора
сульфата гентамицина, после чего в чашки Петри с клетками добавляют тестируемые химиопрепараты или комбинации химиопрепаратов в концентрациях, уменьшенных в 100 раз
по сравнению с используемыми для лечения, через 1 сутки окрашивают клетки в чашках
0,02 % раствором трипанового синего, выявляют образец с наибольшим процентом погибших клеток эпендимомы и выбирают для лечения эпендимомы химиопрепарат или комбинацию химиопрепаратов, используемые для данного образца (для сравнения на фигуре А контрольная культура без действия химиопрепарата, а на фигуре Б - культура эпендимомы
при действии одного из препаратов - гемцитабина). Таким образом устанавливают индивидуальную чувствительность клеток эпендимомы к химиопрепарату или к комбинации
химиопрепаратов, выявляя, какой из препаратов обладает наибольшим летальным действием на злокачественные клетки. Полученные в процессе проведенного исследования
данные являются основой для разработки метода индивидуального подбора терапевтических средств в лечении эпендимомы у ребенка, коррекции режимов, дозировок и в целом
тактики терапии этого вида новообразований.
2
BY 16006 C1 2012.06.30
Следовательно, достигнутый технический результат заявляемого способа заключается
в следующем. Способ позволяет определить индивидуальную чувствительность клеток к
цитостатикам, установить специфику их действия, выявить самый эффективный препарат
или комбинацию химиопрепаратов и его концентрацию для данной опухоли, затем рекомендовать последний клиницистам для использования у исследуемого больного, что дает
клиницисту основание для изменения тактики лечения эпендимомы у ребенка.
Источники информации:
1. Zacharoulis S., Moreno L. Ependymoma: an update. // J Child Neurol. - 2009. - Vol. 24. –
No. 11. - P. 1431-1438.
2. Fouladi M., Gururangan S., Moghrabi A., Phillips P., Gronewold L., Wallace D.,
Sanford R.A., Gajjar A., Kim L.E., Heideman R. Carboplatin-based primary chemotherapy
for infants and young children with CNS tumors // Cancer. 2009. - Vol. 115. - No. 14. P. 3243-3253.
3. Chamberlain M.C., Johnston S.K. Temozolomide for recurrent intracranial supratentorial
platinum-refractory ependymoma // Cancer. - 2009. - Vol. 115. - No. 20. - P. 4775-4782.
4. Ali-Osman F. Culture of human normal brain and malignant brain tumors for cellular, molecular, and pharmacological studies / Methods in molecular medicine. Human cell culture protocols. Edited by G.E. Jones. Chapter 7, 2000. Humana Press inc., Totowa, NJ. - P. 63-80.
Национальный центр интеллектуальной собственности.
220034, г. Минск, ул. Козлова, 20.
3
Документ
Категория
Без категории
Просмотров
0
Размер файла
243 Кб
Теги
by16006, патент
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа