close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

Патент BY16663

код для вставкиСкачать
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ПАТЕНТУ
РЕСПУБЛИКА БЕЛАРУСЬ
(46) 2012.12.30
(12)
(51) МПК
НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР
ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ
СОБСТВЕННОСТИ
(54)
G 01N 33/48 (2006.01)
СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ УСТОЙЧИВОСТИ ЛЮПИНА
УЗКОЛИСТНОГО К АНТРАКНОЗУ
(21) Номер заявки: a 20081184
(22) 2008.09.19
(43) 2010.04.30
(71) Заявитель: Государственное научное
учреждение "Институт экспериментальной ботаники имени В.Ф.Купревича Национальной академии наук Беларуси" (BY)
(72) Авторы: Мунтян Мария Сергеевна;
Домаш Валентина Иосифовна; Купцов Николай Семенович; Шарпио
Тамара Петровна; Забрейко Светлана Алексеевна (BY)
(73) Патентообладатель: Государственное научное учреждение "Институт
экспериментальной ботаники имени В.Ф.Купревича Национальной
академии наук Беларуси" (BY)
(56) ЯКУШЕВА А.С. и др. Состояние и
перспективы развития люпиносеяния в XXI веке. Тез. докл. Международной научно-практической конференции. - Брянск, 2001. - С. 62-64.
BY 16663 C1 2012.12.30
BY (11) 16663
(13) C1
(19)
ЯКУШЕВА А.С. Защита растений на
рубеже XXI века. Материалы научнопрактической конференции. - Минск:
Белбизнеспресс, 2001. - С. 273-275.
ГРИЩЕНКО Е.Р. и др. Регуляция роста, развития и продуктивности растений. Материалы V Международной научной конференции. - Минск: ИООО
"Право и экономика", 2007. - С. 46.
ПУГАЧЕВ П.М. Биология продуктивности сельскохозяйственных культур:
Сб. науч. трудов. - Горки, 1994. С. 20-24.
ИГНАТОВИЧ А.В. и др. Биология и
совершенствование агротехники сельскохозяйственных культур. Вып. 2. Минск: ИООО "Право и экономика",
2006. - С. 36-39.
ЕВСИКОВ Д.О. и др. Известия Академии аграрных наук Республики Беларусь. - 2001. - № 4. - С. 57-62.
(57)
Способ определения устойчивости люпина узколистного к антракнозу, отличающийся тем, что готовят первый образец путем проведения реакции азоказеина с протеолитическими ферментами из Colletotrichum gloesporioides и второй образец путем проведения
реакции азоказеина с протеолитическими ферментами из Colletotrichum gloesporioides в
присутствии белков, экстрагированных 10-25 мл 0,15-0,2 М раствора NaCl из 0,5-2 г размолотых семян люпина, измеряют оптическую плотность образцов, рассчитывают показатель ингибиторной активности (ИА) экстрагированных из размолотых семян люпина
белков по формуле:
(Д - Д о )V
ИА = г
,
m
где V - объем раствора NaCl, взятого для экстракции белков, мл;
m - масса размолотых семян люпина, взятых для экстракции, г;
Дг - оптическая плотность первого образца;
До - оптическая плотность второго образца,
BY 16663 C1 2012.12.30
и вывод об устойчивости люпина узколистного к антракнозу делают при получении значения показателя ИА выше 0,7.
Изобретение относится к сельскому хозяйству и может быть использовано в селекции
люпина узколистного для определения устойчивости к антракнозу.
Известен способ определения устойчивости люпина узколистного к антракнозу, описанный в заявке на изобретение "Способ отбора растений, устойчивых к фитопатогену",
методом клеточной инженерии путем культивирования эксплантов и выращивания регенерантов, которые заражают инокулюмом фитопатогена, определение устойчивости производят инвитро на стадии регенерантов, начиная с появления первого листа отбирают
устойчивые растения и доращивают их до семенного материала [1].
Но данный способ обладает недостатком, заключающимся в том, что требует больших
затрат времени и труда, так как основан на клеточной инженерии, требующей специального дорогостоящего оборудования и навыков.
Эти недостатки частично устранены в способе определения устойчивости люпина узколистного к антракнозу путем выращивания семян в лабораторных условиях на искусственной инфекционной среде и визуальной лабораторной оценки 8-дневных проростков
на пораженность Colletotrichum gloesporioides [2].
Однако этот способ также обладает недостатком, заключающимся в том, что требует
много времени, так как определение устойчивости производится на стадии 8-дневных
проростков, а также требует относительно большого расхода семенного материала.
Задачей настоящего изобретения является упрощение технологии процесса определения
устойчивости люпина узколистного к антракнозу и сокращение времени, требуемого для этого.
Поставленная задача достигается тем, что в способе определения устойчивости люпина узколистного к антракнозу готовят первый образец путем проведения реакции азоказеина с протеолитическими ферментами из Colletotrichum gloesporioides и второй образец
путем проведения реакции азоказеина с протеолитическими ферментами из Colletotrichum
gloesporioides в присутствии белков, экстрагированных 10-25 мл 0,15-0,2 М раствора NaCl
из 0,5-2 г размолотых семян люпина, измеряют оптическую плотность образцов, рассчитывают показатель ингибиторной активности (ИА) экстрагированных из размолотых семян люпина белков по формуле:
(Д − Д о ) × V
ИА = г
,
m
где V- объем раствора NaCl, взятого для экстракции белков, мл;
m - масса размолотых семян люпина, взятых для экстракции, г;
Дг - оптическая плотность первого образца;
До - оптическая плотность второго образца,
и вывод об устойчивости люпина узколистного к антракнозу делают при получении значения показателя ИА выше 0,7.
Предлагаемый способ с использованием заявленных признаков в их совокупности и в
заявленных интервалах времени, pH, объемов, компонентного состава смесей, температурного режима позволяет сократить время, требуемое для определения устойчивости семян люпина узколистного к антракнозу, и упростить технологию процесса. Изменение
указанных интервалов в сторону уменьшения или увеличения не позволит достичь поставленной задачи.
Пример осуществления способа определения устойчивости люпина узколистного к
антракнозу.
Сухие семена люпина узколистного размалывают на мельнице до муки. Берут навеску
муки 800 мг и экстрагируют 15 мл 0,2 М раствора NaCl в течение 2 часов при 25 °С. Экстракт
центрифугируют при 5000 g в течение 15 минут и получают таким образом надосадочную
2
BY 16663 C1 2012.12.30
жидкость (НЖ). Надосадочную жидкость сливают и осаждают 0,1 Н раствором НС1 до pH,
равного 4,0. После полного осаждения полученный экстракт снова центрифугируют в течение
15 мин при 5000 g, получают ингибиторную фракцию надосадочной жидкости.
Затем из предварительно выращенного инфекционного агента Colletotrichum gloesporioides экстрагируют протеолитические ферменты путем добавления фосфатного буфера с
pH 6,8.
Для осуществления способа определения устойчивости люпина узколистного к антракнозу готовят первый образец путем проведения реакции азоказеина с протеолитическими ферментами из Colletotrichum gloesporioides и второй образец путем проведения
реакции азоказеина с протеолитическими ферментами из Colletotrichum gloesporioides в
присутствии белков, экстрагированных 10-25 мл 0,15-0,2 М раствора NaCl из 0,5-2 г размолотых семян люпина, измеряют оптическую плотность образцов, рассчитывают показатель ингибиторной активности (ИА) экстрагированных из размолотых семян люпина
белков по формуле:
(Д − Д о ) × V
ИА = г
,
m
где V- объем раствора NaCl, взятого для экстракции белков, мл;
m - масса размолотых семян люпина, взятых для экстракции, г;
Дг - оптическая плотность первого образца;
До - оптическая плотность второго образца,
и вывод об устойчивости люпина узколистного к антракнозу делают при получении значения показателя ИА выше 0,7 (таблица).
Сорт люпина узкоАктивность ингибиторов экзо- Степень устой- Тип устойчиволистного
генных протеиназ
чивости
сти
Эдельвейс
0,64±0,05
0
неустойчивые
П-УБПЛ-12
0,68±0,04
0
неустойчивые
П-УБПЛ-32
1,8±0,09
70
устойчивые
Митан
1,56±0,06
72
устойчивые
Першацвет
1,33±0,04
83
устойчивые
Верас
0,50±0,01
6
неустойчивые
Миртан
1,14±0,05
88
устойчивые
П-УБПЛ-11
0,44±0,02
27
неустойчивые
Способ позволяет определить устойчивость к антракнозу большого количества образцов за короткий промежуток времени (2 рабочих дня, в то время как в прототипе определяли за 8 суток). Для определения требуется незначительное количество семенного
материала люпина (800 мг). Способ прост в исполнении, не требует дорогостоящих реактивов.
Источники информации:
1. Заявка RU на изобретение 94034770/13, МПК A 01H 1/04; A 01G 7/00, 1997.
2. Якушева А.С., Пономарева, Л.Т. Изучение коллекции белого (Lupinus albus L.) и узколистного (L. angustifilius L.) люпина на устойчивость к антракнозу Состояние и перспективы люпиносеяния в XXI веке. Тезисы докл. Международной науч.-практ. конф.
Брянск, 17-19 июля 2001. Российская академия сельскохозяйственных наук; Редкол.
И.П. Такунов и др. - Брянск, 2001. - С. 62-64 (прототип).
Национальный центр интеллектуальной собственности.
220034, г. Минск, ул. Козлова, 20.
3
Документ
Категория
Без категории
Просмотров
1
Размер файла
83 Кб
Теги
патент, by16663
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа