close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

Патент BY17487

код для вставкиСкачать
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ПАТЕНТУ
РЕСПУБЛИКА БЕЛАРУСЬ
(46) 2013.08.30
(12)
(51) МПК
НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР
ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ
СОБСТВЕННОСТИ
(54)
BY (11) 17487
(13) C1
(19)
C 12N 1/20
C 12R 1/22
(2006.01)
(2006.01)
ШТАММ БАКТЕРИЙ KLEBSIELLA PNEUMONIAE КМИЭВ В-132 ШТАММ-АНТИГЕН
(21) Номер заявки: a 20101340
(22) 2010.09.16
(43) 2012.04.30
(71) Заявитель: Республиканское научноисследовательское дочернее унитарное предприятие "Институт экспериментальной ветеринарии им. С.Н.Вышелесского" (BY)
(72) Авторы: Ломако Юрий Васильевич;
Опарина Ирина Владимировна; Гусев Анатолий Алексеевич; Новикова Оксана Николаевна (BY)
(73) Патентообладатель: Республиканское
научно-исследовательское дочернее
унитарное предприятие "Институт
экспериментальной ветеринарии
им. С.Н.Вышелесского" (BY)
(56) RU 2224019 C2, 2004.
RU 2221864 C2, 2004.
RU 2105809 C1, 1998.
RU 2054477 C1, 1996.
БОРИСОВЕЦ Д.С. Экология и животный мир. - 2009. - № 1. - С. 4-10.
КИЧА Е.И. Ученые записки учреждения образования "Витебская ордена
"Знак Почета" государственная академия ветеринарной медицины", 2006. Т. 42. - Вып. 2. - Ч. 1. - С. 91-93.
АНДРОСИК Н.Н. Эпизоотология, иммунобиология, фармакология, санитария. - 2008. - № 1. - С. 9-15.
BY 17487 C1 2013.08.30
(57)
Штамм бактерий Klebsiella pneumoniae КМИЭВ В-132 - штамм-антиген.
Изобретение относится к области ветеринарной микробиологии и может быть использовано в биотехнологии для приготовления вакцины для профилактики клебсиеллеза
сельскохозяйственных животных, а также ассоциированных вакцин для профилактики
желудочно-кишечных инфекций животных.
В ветеринарной микробиологии применяют ряд штаммов-антигенов для производства
вакцин против клебсиеллеза сельскохозяйственных животных.
За прототип взят штамм бактерий Klebsiella pneumoniae № 24, обладающий следующими свойствами.
Таксономическая принадлежность. Штамм бактерий Klebsiella pneumoniae № 24 отнесен к семейству Enterobacteriaceae, к роду Klebsiella, виду Klebsiella pneumoniae.
Культурально-морфологические признаки. Грамотрицательные короткие палочки, не
образует спор, образует капсулу, не имеет жгутиков, неподвижен. На МПБ через 5-6 часов
роста наблюдается равномерное помутнение среды с последующим образованием тонкой
поверхностной пленки, на МПА - полупрозрачные с ровными краями крупные колонии
BY 17487 C1 2013.08.30
слизистой консистенции, на среде Эндо - бледно розовые колонии с красноватым центром, на среде Плоскирева - розовые колонии с желтым центром.
Физико-биологические свойства. Аэроб, способный расти в микроанаэробных условиях. Оптимум pH 7,2 при температуре 37 °С.
Ферментативные свойства. Активно расщепляет глюкозу и глицерин с образованием
кислоты и газа, а также сахарозу, лактозу, рамнозу, мальтозу, сорбит, маннит, инозит, не
образует индол, сероводород, образует ацетилметилкарбинол в реакции ФогесПроскауэра.
Антигенная структура. Серотипирован набором клебсиеллезных К-сывороток НИИВС
им. Мечникова как Klebsiella pneumoniae К 2.
Патогенен для белых мышей, LD50 составляет 3,1*108 клеток при внутрибрюшинном
заражении [1].
Недостатком указанного штамма является то, что он выделен не в Республике Беларуси и поэтому менее специфичен, что может отразится на эффективности вакцины на его
основе, а также данный штамм менее вирулентный.
Задачей предлагаемого изобретения является селекционирование штамма бактерий
Klebsiella pneumoniae, пригодного для конструирования профилактических препаратов
при клебсиеллезе и ассоциированных желудочно-кишечных инфекциях животных, высоковирулентного и специфичного для Республики Беларусь
Поставленная задача достигается тем, что в качестве штамма-антигена был селекционирован штамм Klebsiella pneumoniae КМИЭВ В-132 - штамм-антиген, обладающий стабильными свойствами и высокой вирулентностью по отношению к эпизоотическим штаммам,
циркулирующим в хозяйствах Республики Беларусь. Штамм выделен в 2008 году в Государственном природоохранном учреждении "Национальный парк Припятский" Петриковского района Гомельской области из печеночной ткани павшего зубра пятилетнего
возраста, больного гастроэнтеритом, путем посева ткани печени на среду Эндо с последующим выделением чистых культур и отбора из них активного в антигенном отношении
штамма вида Klebsiella pneumoniae, из которого путем селекции выделен штамм Klebsiella
pneumoniae КМИЭВ В-132, отличающийся высокой вирулентностью.
Штамм бактерий Klebsiella pneumoniae КМИЭВ В-132 - штамм-антиген депонирован в
коллекции РУП "Институт экспериментальной ветеринарии им. С.Н.Вышелесского".
Штамм бактерий Klebsiella pneumoniaе КМИЭВ В-132 - штамм-антиген обладает следующими свойствами.
Таксономическая принадлежность. Предложенный штамм бактерий Klebsiella pneumoniaе КМИЭВ В-132 - штамм-антиген отнесен к семейству Enterobacteriaceae, к роду
Klebsiella, виду Klebsiella pneumoniae.
Морфологические признаки. Грамотрицательные, неподвижные, толстые палочки
размером 1,0 × 6,0 мкм, спор не образуют, образуют капсулу.
Культуральные признаки. На МПБ дает помутнение и образование осадка, поднимающегося при встряхивании в виде косички, при росте на МПА - крупные (4-5 мм), выпуклые, влажные, часто сливающиеся колонии слизистой консистенции, на агаре Эндо –
крупные, влажные, сливающиеся малиновые колонии с металлическим блеском.
Биохимические свойства. Образует индол, расщепляет глюкозу, маннит, сахарозу, мочевину, утилизирует цитраты, дает положительную реакцию Фогес-Проскауэра.
Патогенность. Патогенен для белых мышей, LD50 составляет 123 млн микробных клеток при внутрибрюшинном заражении.
Условия хранения. Штамм хранится в защитной среде в лиофилизированном состоянии при влажности не более 3 %, от минус 2 °С до минус 10 °С.
Заявленный штамм бактерий Klebsiella pneumoniae КМИЭВ В-132 - штамм-антиген
выделен в животноводческом хозяйстве Республики Беларусь и поэтому является специфичным для крупного рогатого скота в пределах Республики, его включение в вакцину
2
BY 17487 C1 2013.08.30
против клебсиеллеза позволяет усилить ее специфичность и повысить эффективность
профилактики клебсиеллеза.
Пример 1.
Приготовление среды Эндо для культивирования штамма-антигена Klebsiella pneumoniae КМИЭВ В-132.
Штамм-антиген Klebsiella pneumoniae КМИЭВ В-132 выращивали на среде Эндо следующего состава, г:
дистиллированная вода
1000,0
питательный агар, сухой
26,5
ЭКДА
1,22
фуксин основной
0,23
сахар молочный
10,7
динатрий фосфат
0,48
сульфит натрия безводный
0,83
натрий углекислый
0,03.
Оптимальная температура инкубирования 37 °С, срок инкубации 18-20 ч, pН 7,2 ± 0,2.
Пример 2.
Определение LD50 штамма бактерий Klebsiella pneumoniae КМИЭВ В-132 - штаммаантигена на белых мышах.
Для определение LD50 штамма бактерий Klebsiella pneumoniae КМИЭВ В-132 - штамма-антигена сформировали 4 группы белых мышей массой 16-18 г по 4 головы в каждой.
Для этого готовили последовательные разведение бактериальных клеток на физиологическом растворе, с концентрацией 500, 250, 125, 62,5 млн клеток в 1 мл, которые инъецировали внутрибрюшинно в объеме 0,5 мл. Учет гибели животных вели в течение 4 дней.
Расчет LD50 проводили по формуле Кербера в модификации Ашмарина. LD50 штамма бактерий Klebsiella pneumoniae КМИЭВ В-132 - штамма-антигена для белых мышей составила 123 млн микробных клеток при внутрибрюшинном заражении.
Источники информации:
1. Патент RU 2224019 МПК7 C 1N 1/20, A 61K 39/108, 2004 (прототип).
2. Бедоева З.М. Тест-системы для иммунологического мониторинга и прогнозирования острых кишечных инфекций животных и усовершенствование средств специфической
профилактики: автореф. дис. докт. биол. наук: 16.00.03; 03.00.23. - М., 2006. - 51 с.
Национальный центр интеллектуальной собственности.
220034, г. Минск, ул. Козлова, 20.
3
Документ
Категория
Без категории
Просмотров
0
Размер файла
74 Кб
Теги
by17487, патент
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа