close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

Патент BY17972

код для вставкиСкачать
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ПАТЕНТУ
РЕСПУБЛИКА БЕЛАРУСЬ
(46) 2014.02.28
(12)
(51) МПК
НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР
ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ
СОБСТВЕННОСТИ
(54)
BY (11) 17972
(13) C1
(19)
A 61K 36/38 (2006.01)
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЭКСТРАКТА ЗВЕРОБОЯ
(21) Номер заявки: a 20101902
(22) 2010.12.28
(43) 2012.08.30
(71) Заявитель: Государственное научное учреждение "Институт физикоорганической химии Национальной
академии наук Беларуси" (BY)
(72) Авторы: Агабалаев Александр Андреевич; Каранкевич Елена Григорьевна; Куваева Зоя Ивановна; Попова
Ольга Павловна (BY)
(73) Патентообладатель: Государственное
научное учреждение "Институт физико-органической химии Национальной
академии наук Беларуси" (BY)
(56) CN 1385412 A, 2002.
БАЯНДИНА И.И. и др. Новые достижения в химии и химической технологии растительного сырья. Материалы
IV Всероссийской конференции. Кн. 2. Барнаул: Издательство Алтайского государственного университета, 2009. С. 266-267.
CN 1247071 A, 2000.
CN 101224225 A, 2008.
RU 2067452 C1, 1996.
BY 8087 C1, 2006.
BY 17972 C1 2014.02.28
(57)
Способ получения экстракта зверобоя, включающий обработку измельченной травы
зверобоя экстрагентом и фильтрацию, отличающийся тем, что в качестве экстрагента используют 10-92 %-ный водный раствор этанола, содержащий 0,001-1,0 моль/л щелочи.
Изобретение относится к медицинской промышленности и касается способа получения экстракта зверобоя.
Известен способ получения экстракта зверобоя, содержащий гиперицин, описанный в
патенте [1]. Согласно данному способу, измельченная трава зверобоя обрабатывается водно-этанольным раствором с содержанием спирта 50 об. % до полного смачивания растительного сырья, затем систему нагревают до 60 °С и проводят непрерывную экстракцию
при нагревании 60 °С и давлении около 1,5 бар в течение 16 ч. Полученный экстракт содержит сумму гиперицинов в концентрации 0,25 мг/мл. Экстракт далее высушивают на
роторном испарителе.
Также известен способ получения экстракта зверобоя горячим щелочным раствором
[2]. Траву зверобоя двукратно кипятят с водным раствором гидроксида натрия (концентрация 0,01-1 %), затем полученные экстракты объединяют, регулируют pH раствором соляной кислоты и промывают спиртом до обесцвечивания. Данный метод позволяет
минимизировать использование органических растворителей.
Недостатком этих способов является невозможность избирательной экстракции гиперицина. В траве зверобоя всегда присутствует гидроксипроизводное гиперицина - псевдогиперицин, содержание которого существенно выше. Псевдогиперицин обладает наряду
со сходной физиологической активностью намного большим клиренсом (вымыванием из
BY 17972 C1 2014.02.28
организма) по сравнению с гиперицином, что делает затруднительным создание постоянного терапевтического эффекта введением экстракта травы зверобоя, содержащего как гиперицин, так и псевдогиперицин [3].
Наиболее близким по технической сущности к предлагаемому способу является способ получения экстракта зверобоя, описанный в [4]. Экстракт получают обработкой измельченной травы зверобоя кипящим водным раствором щелочи с дальнейшей
фильтрацией и промывкой растворами спиртов.
Недостатком способа прототипа является невозможность избирательной экстракции
гиперицина по отношению к псевдогиперицину.
Задачей изобретения является разработка способа получения экстракта зверобоя с повышенным отношением содержания гиперицина к псевдогиперицину.
Поставленная задача достигается способом, включающим обработку измельченной
травы зверобоя экстрагентом и фильтрацию, в котором в качестве экстрагента используют
10-92 %-ный водный раствор этанола, содержащий 0,001-1,0 моль/л щелочи. При этом гиперицин переходит в фазу экстрагента без заметного уменьшения достигаемой концентрации, псевдогиперицин переходит в экстракт в значительно меньшем количестве, что
демонстрируют хроматограммы, приведенные на фигуре.
Анализ экстракта проводили методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с помощью флюоресцентного детектора на хроматографе AGILENT 1100. Использовали обращенно-фазовую колонку Hypersil AA-ODS, 2,1×200 мм, зерно 5 мкм. Длина
волны экстинкции - 315 нм, эмиссии - 590 нм. Режим изократический, мобильная фаза:
этилацетат: раствор натрия дигидрофосфата (15,6 г/л): метанол = 39:41:160. Скорость потока - 0,6 мл/мин. Инжекционный объем - 5 мкл, температура колонки 20 °С. Полученные
данные сравнивали со стандартными образцами гиперицина (SIGMA) (tуд = 2,4 мин). Количество гиперицина в образце было рассчитано с использованием внешнего стандарта по
калибровке в области концентраций 0,1-6 мг/л (r = 0,9972). Идентификация псевдогиперицина (tуд = 1,22 мин) была осуществлена по литературным данным [5]. Все растворители и
стандарт гиперицина были хроматографической чистоты.
На фигуре приведены две хроматограммы экстрактов, полученных при экстрагировании в СВЧ печи (частота 2450 МГц, мощность 700 Вт) до закипания экстрагента из 1,000 г
измельченной травы зверобоя разными экстрагентами:
а) 40 мл 70 %-го раствора этанола в воде,
б) 40 мл 70 %-го раствора этанола в воде, содержащего 0,01 моль/л гидроксида натрия.
Полученные экстракты отфильтровывали от растительного сырья через бумажный
фильтр.
Предлагаемый способ иллюстрируется следующими примерами.
Пример 1.
К 1,000 г измельченной травы зверобоя добавляют 10 мл 70 %-го водного раствора
этанола, содержащего 1*10-4 моль NaOH. Система перемешивается в течение 90 минут
при 20 °С. Далее раствор фильтруют через бумажный фильтр. Полученный экстракт содержит 0,025 мг/мл гиперицина, на хроматограмме соотношение площадей пиков гиперицина и псевдогиперицина 0,55.
Пример 2.
К 1,000 г измельченной травы зверобоя добавляют 10 мл 70 %-го водного раствора
этанола, содержащего 1*10-4 моль NaOH. Система перемешивается в течение 90 мин при
60 °С. Далее раствор фильтруют через бумажный фильтр. Полученный экстракт содержит
0,028 мг/мл гиперицина, на хроматограмме соотношение площадей пиков гиперицина и
псевдогиперицина 0,59.
Пример 3.
К 1,000 г измельченной травы зверобоя добавляют 50 мл 70 %-го водного раствора
этанола, содержащего 5*10-4 моль NaOH. Система перемешивается в течение 120 мин при
2
BY 17972 C1 2014.02.28
20 °С. Далее раствор фильтруют через бумажный фильтр. Полученный экстракт содержит
0,006 мг/мл гиперицина, на хроматограмме соотношение площадей пиков гиперицина и
псевдогиперицина 4,78.
Пример 4.
К 1,000 г измельченной травы зверобоя добавляют 50 мл 10 %-го водного раствора
этанола, содержащего 5*10-4 моль NaOH. Система перемешивается в течение 120 мин при
20 °С. Далее раствор фильтруют через бумажный фильтр. Полученный экстракт содержит
0,002 мг/мл гиперицина, на хроматограмме соотношение площадей пиков гиперицина и
псевдогиперицина 0,32.
Пример 5.
К 1,000 г измельченной травы зверобоя добавляют 50 мл 92 %-го водного раствора
этанола, содержащего 5*10-4 моль NaOH. Система перемешивается в течение 120 мин при
20 °С. Далее раствор фильтруют через бумажный фильтр. Полученный экстракт содержит
0,004 мг/мл гиперицина, на хроматограмме соотношение площадей пиков гиперицина и
псевдогиперицина 4,66.
Пример 6.
К 1,000 г измельченной травы зверобоя добавляют 50 мл 70 %-го водного раствора
этанола, содержащего 5*10-4 моль КОН. Система нагревается в микроволновой печи (частота 2450 МГц, мощность 700 Вт) до закипания. Далее раствор фильтруют через бумажный фильтр. Полученный экстракт содержит 0,002 мг/мл гиперицина, на хроматограмме
соотношение площадей пиков гиперицина и псевдогиперицина 0,48.
Пример 7.
К 1,000 г измельченной травы зверобоя добавляют 50 мл 70 %-го водного раствора
этанола, содержащего 5*10-4 моль КОН. Система нагревается в микроволновой печи (частота 2450 МГц, мощность 700 Вт) до закипания. Далее раствор фильтруют через бумажный фильтр. Полученный экстракт содержит 0,003 мг/мл гиперицина, на хроматограмме
соотношение площадей пиков гиперицина и псевдогиперицина 3,66.
Пример 8.
К 1,000 г измельченной травы зверобоя добавляют 10 мл 70 %-го водного раствора
этанола, содержащего 5*10-4 моль NaOH. Система нагревается в микроволновой печи
(частота 2450 МГц, мощность 700 Вт) до закипания. Далее раствор фильтруют через бумажный фильтр. Полученный экстракт содержит 0,023 мг/мл гиперицина, на хроматограмме соотношение площадей пиков гиперицина и псевдогиперицина 0,56.
Пример 9.
К 1,000 г измельченной травы зверобоя добавляют 50 мл 50 %-го водного раствора
этанола, содержащего 5*10-4 моль NaOH. Система нагревается в микроволновой печи
(частота 2450 МГц, мощность 700 Вт) до закипания. Далее раствор фильтруют через бумажный фильтр. Полученный экстракт содержит 0,006 мг/мл гиперицина, на хроматограмме соотношение площадей пиков гиперицина и псевдогиперицина 26,88.
Использование при получении экстракта зверобоя в качестве экстрагента щелочного
раствора в водно-этанольной смеси позволяет снизить концентрацию псевдогиперицина в
экстракте и увеличить отношение содержания гиперицина к псевдогиперицину.
Источники информации:
1. DE 3935772, 1991.
2. CN 1247071, 2000.
3. Kerb R., Brockmouller J., Staffeldt В., Ploch M., Roots I. // Antimicrobial Agents and
Chemotherapy. - 1996. - Vol. 40. - Is. 9. - P. 2087-2093.
4. CN 1385412, 2002.
5. Zotou A., Loukou Z. // Chromatographia. - 2001. - Vol. 54. - No. 3-4. - P. 218-224.
3
BY 17972 C1 2014.02.28
Национальный центр интеллектуальной собственности.
220034, г. Минск, ул. Козлова, 20.
4
Документ
Категория
Без категории
Просмотров
0
Размер файла
320 Кб
Теги
патент, by17972
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа