close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

Патент BY18213

код для вставкиСкачать
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ПАТЕНТУ
РЕСПУБЛИКА БЕЛАРУСЬ
(46) 2014.06.30
(12)
(51) МПК
НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР
ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ
СОБСТВЕННОСТИ
(54)
BY (11) 18213
(13) C1
(19)
A 01H 4/00
(2006.01)
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПОЧЕК ДУБА ЧЕРЕШЧАТОГО,
ПРИГОДНЫХ ДЛЯ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ В КАЧЕСТВЕ
ЭКСПЛАНТОВ
(21) Номер заявки: a 20101165
(22) 2010.08.02
(43) 2012.04.30
(71) Заявитель: Государственное научное учреждение "Институт леса
Национальной академии наук Беларуси" (BY)
(72) Авторы: Кулагин Дмитрий Валерьевич; Падутов Владимир Евгеньевич
(BY)
(73) Патентообладатель: Государственное
научное учреждение "Институт леса
Национальной академии наук Беларуси" (BY)
(56) SU 1311673 A1, 1987.
SU 1790350 A3, 1993.
RU 2180165 C2, 2002.
САМУСЬ В.А. и др. Плодоводство. 2006. - Т. 18. - Ч. 2. - С. 146-155.
BY 18213 C1 2014.06.30
(57)
Способ получения почек дуба черешчатого, пригодных для использования в качестве
эксплантов, заключающийся в том, что механически отделенные от побега дуба черешчатого почки промывают последовательно моющим средством, проточной водой, стерилизующим раствором и стерильной водой, удаляют кроющие чешуи почек в 50 %-ном
этаноле, проводят стерилизацию поверхности почек путем их выдерживания в течение 13 мин в диациде, после чего отмывают почки от диацида стерильной водой.
Изобретение относится к области культуры клеток, тканей и органов растений и может быть использовано в лесной селекции и биотехнологии, при производстве лесного посадочного материала и озеленении для получения асептической культуры меристем дуба
черешчатого.
Большинство известных способов стерилизации эксплантов, выделяемых из почек, на
начальном этапе включают обработку материала раствором поверхностно-активных веществ с последующим промыванием проточной водой. В имеющихся источниках литературы описаны два основных варианта последующей стерилизации. В первом из них
сначала осуществляется основной этап стерилизации, а затем проводится снятие кроющих
чешуй, во втором последовательность действий обратная (сначала снятие чешуи, а затем
стерилизация). Основным этапом стерилизации является последовательная обработка эксплантов раствором этанола в концентрации 70 %, затем растворами, содержащими активный хлор в концентрации, близкой к 2 %, или соединениями ртути [1-5].
Недостатком данных способов стерилизации при работе с почечными эксплантами
дуба черешчатого является высокий процент эксплантов, загрязненных нежелательной
микрофлорой и не способных давать начало культуре меристем.
Задача, на решение которой направлено наше изобретение, заключается в таком способе стерилизации эксплантов дуба черешчатого, при котором значительно снижается
уровень контаминации во вновь получаемых культурах тканей.
BY 18213 C1 2014.06.30
Задача решается выполнением технологических операций, приведенных ниже, в две
стадии. Для выполнения первой из них производится механическое отделение верхушечных и боковых почек от побега растения.
Для удаления пыли и других нежелательных загрязнений почки сначала промывают в
растворе моющего средства, а затем в проточной воде в течение 40-60 мин. После чего
проводится поверхностная стерилизация эксплантов (первая стадия) посредством их промывания в растворе 1-3 %-ного хлорсодержащего агента (гипохлорид натрия) и детергента в течение 10-15 мин, остатки стерилизующего раствора удаляют с поверхности
эксплантов посредством их промывания стерильной водой.
Последующая стерилизации проводится в условиях ламинарного шкафа. Кроющие
чешуи почек удаляют в 50 %-ном растворе этанола, после чего проводят поверхностную
стерилизацию полученных эксплантов посредством их выдерживания в течение 1-3 мин в
растворе ртутьсодержащего стерилизующего агента диацида. Остатки стерилизующего
раствора удаляют с поверхности эксплантов путем их промывания стерильной водой.
На фигуре изображен сравнительный анализ использования различных способов стерилизации почечных эксплантов дуба черешчатого.
Пример. Эффективность предложенного способа иллюстрирует фигура, где: 1 - одноэтапная стерилизация до снятия кроющих чешуй (последовательно 70 %-ный р-р этанола
и диацид), 2 - одноэтапная стерилизация проводится после снятия кроющих чешуй (последовательно 70 %-ный р-р этанола и раствор моющего средства "Domestos"), 3 - одноэтапная стерилизация проводится после снятия кроющих чешуй (последовательно 70 %-ный
р-р этанола и диацид), 4 - стерилизация осуществляется до и после снятия кроющих чешуй, которое производится в условиях ламинар-бокса (заявляемый способ стерилизации).
Описанный способ стерилизации отличается простотой и позволяет без освоения особых навыков в значительной мере (в 2-5 раз) повысить выход эксплантов, не имеющих
признаков микробной контаминации.
Источники информации:
1. Самусь В.А. Методика микроразмножения подвоев яблони in vitro // Плодоводство. 2006. - Т. 18. - Ч. 2. - С. 146-155.
2. Durkovic J. Micropropagation of mature Cornus mas 'Macrocarpa' // Trees. - 2008. - Vol.
22. - P. 597-602.
3. Prehn D. Regeneration of whole plants from apical meristems of Pinus radiate // Plant
cell, tissue, and organ culture. - 2003. - Vol.73. - P. 91-94.
4. Hosier M., Flatebo G., Read P.P. In vitro propagation of Lingonberry // HortScience. 1985. - Vol. 20(3). - P. 364-365.
5. Vila S., Scocchi A., Mroginski L. Plant regeneration from shoot apical meristems of Melia
azeda-rach (Meliaceae) // Acta physiologiae plantarum. - 2002. - Vol. 24. - No. 2. - P. 195-199.
Национальный центр интеллектуальной собственности.
220034, г. Минск, ул. Козлова, 20.
2
Документ
Категория
Без категории
Просмотров
0
Размер файла
95 Кб
Теги
by18213, патент
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа