close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

Патент BY20176

код для вставкиСкачать
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ПАТЕНТУ
РЕСПУБЛИКА БЕЛАРУСЬ
BY (11) 20176
(13) C1
(19)
(46) 2016.06.30
(12)
(51) МПК
НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР
ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ
СОБСТВЕННОСТИ
(54)
A 61K 36/258
A 61K 36/484
A 61K 36/725
A 61P 25/24
A 61P 25/22
(2006.01)
(2006.01)
(2006.01)
(2006.01)
(2006.01)
ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЕ КОМПОЗИЦИИ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ
ДЕПРЕССИИ И ТРЕВОГИ
(21) Номер заявки: a 20100844
(22) 2007.11.30
(85) 2010.06.30
(86) PCT/CN2007/003386, 2007.11.30
(87) WO 2009/070915, 2009.06.11
(43) 2011.02.28
(71) Заявители: ЧИ Ю-ФЕН; ЖАНГ,
ЗУОГУАНГ (CN)
(72) Автор: ЖАНГ, ЗУОГУАНГ (CN)
(73) Патентообладатели: ЧИ Ю-ФЕН; ЖАНГ,
ЗУОГУАНГ (CN)
(56) CN 1836687 A, 2006.
RU 2132694 C1, 1999.
(57)
1. Фармацевтическая композиция для лечения депрессии или тревожного расстройства, содержащая:
2-25 мас. ч. гинзенозидов Rg1 и Rb1,
3-46 мас. ч. глицирризиновой и/или глицирретовой кислот и
BY 20176 C1 2016.06.30
0,002-0,4 мас. ч. циклического аденозинмонофосфата (цАМФ) ююбы.
2. Фармацевтическая композиция по п. 1, отличающаяся тем, что содержит 4-12 мас. ч.
гинзенозидов, 5-15 мас. ч. глицирризиновой и/или глицирретовой кислот и 0,01-0,08 мас. ч.
цАМФ ююбы.
3. Фармацевтическая композиция по п. 1, отличающаяся тем, что содержит гинзенозиды, экстрагированные из женьшеня, глицирризиновую и/или глицирретовую кислоты,
экстрагированные из солодки, и цАМФ ююбы, экстрагированный из ююбы.
4. Фармацевтическая композиция по п. 3, отличающаяся тем, что содержит цАМФ
ююбы, полученный из вторичного экстракта ююбы, экстрагированного из первичного
экстракта ююбы и имеющего более высокую концентрацию цАМФ ююбы, чем первичный
экстракт ююбы.
5. Фармацевтическая композиция для лечения депрессии или тревожного расстройства, содержащая:
BY 20176 C1 2016.06.30
2-25 мас. ч. гинзенозидов Rg1 и Rb1 и
3-46 мас. ч. глицирризиновой и/или глицирретовой кислот.
6. Фармацевтическая композиция по п. 5, отличающаяся тем, что содержит гинзенозиды Rg1 и Rb1, экстрагированные из женьшеня.
7. Фармацевтическая композиция по п. 5, отличающаяся тем, что содержит 4-12 мас. ч.
гинзенозидов и 5-15 мас. ч. глицирризиновой и/или глицирретовой кислот.
8. Фармацевтическая композиция по п. 5, отличающаяся тем, что дополнительно содержит по меньшей мере один фармацевтически приемлемый носитель и одну фармацевтически приемлемую добавку.
9. Фармацевтическая композиция по п. 5, отличающаяся тем, что выполнена в виде
лекарственной формы, выбранной из группы, включающей таблетку, капсулу, порошок,
драже, пудру, раствор, микрокапсулу, суспензию, эмульсию, гранулу, капельное средство
и шарик.
10. Фармацевтическая композиция по п. 1, отличающаяся тем, что выполнена в виде
продукта лечебного питания или пищевой добавки.
2
вY
2017б
с1
201б.0б.30
ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ
,Щанное изобретение относится
к фармацевтической композиции или
лечебному питанию, произведенным из сырьевых материалов, в том числе
гинзенозидов
Rg1 и Rbl,
аденозинмонофосфата ююбы
расстройства.
В
глицирризиновой кислоты
(йМФ
и
циклического
ююбы) для лечения депрессии и тревожного
частности, данное изобретение относится
композиции или лечебному питанию
к
фармацевтической
для лечения депрессии и
тревожного
расстройства; фармацевтическая композиция имеет определенные функции
и
компоненты, очевидное лечебное действие, меньше побочных эффекIов и высокую
безопасность при длительном употреблении.
ПРЕДПОСЫЛКИ СОЗДАНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Психологические расстройства вызваны дисфункцией мозга,
и
пораженные
индивидуумы проявляют нарушения сознания, мышления, эмоций, поведения, воли
и
интеллекта и т.д.. Психологические расстройства занимают четыре из десяти
заболеваний, оказывающих наиболее серьезное воздействие
настоящее время люди обращают все больше внимания
на общество.
на
В
психологическую
дисфункцию в ходе общественного развития. Медицинское сообщество и общество
в целом срочно пытаются найти
психологическую медицину
для борьбы с
психологическим и расстройствами. Тревожное расстройство и депрессия являются
самой распространенной психологической дисфункцией, причем подавляющие
тревоry
и
антидепрессивные лекарственные препараты являются основным
способом лечения.
Тревожное расстройство представляет собой психическое расстройство,
которое проявляется главным образом в виде тревожной эмоции. Главные
J
вY
2017б
с1
201б.0б.30
особенности представляют собоЙ вспышки или длительные тревожные чувства,
такие как тревога, кататония, страх и т.д., в сочетании с синдромами, такими как
нарушение вегетативной нервной системы, мышечная ригидность и нарушение при
физической нагрузке
расстройство
и т.д.. С тех пор как 3игмунд Фрейд отделил
от неврастении, ученые во всем мире начали
тревожное
крупномасштабные
исследования тревожного расстройства и накопили большое количество сведений.
В соответствии с современными медицинскими исследованиями,
этиология
тревожного расстройства включает в себя дефеrты в анатомии психологии, системе
нейромедиатор/модулятор-рецептор
и нейроэндокринной системе и т.д.
Современное доминирующее подавляющие тревоry лекарственное средство
представляет собой бензодиазепин, механизм которого состоит
в
модуляции
активности ингибирующего нейротрансмиттера, гамма-аминобугировой кислоты
(гамма-аминомасляной кислоты (ГАМК)) для уменьшения и ослабления симптомов.
Однако бензодиазепин имеет много побочных эффекгов, в том числе бессонницу,
аллергию, мышечную боль, слабость, тошноry, физическую дисфункцию,
заryманенное зрение, усталость, нарушение психического равновесия, бред и т.д.
,Щепрессия представляет собой распространенное заболевание. Всемирная
организация здравоохранения (ВОЗ) опубликовала: "Частота возникновения
депрессии в мире составляет приблизительно 117о.
существует приблизительно
З40
В
настоящее время
миллионов пациентов
с
в
мире
психологической
депрессией, и их число растет". Во время исследования было обнаружено, что
депрессия будет расти для того, чтобы стать вторым по значению распространенным
заболеванием в мире с настоящего времени на последующие 20 лет".
Современные доминирующие антидепрессивные лекарственные средства
представляют собой прозак, паксил, золофт и т.д., которые относятся к селективным
ингибиторам обратного захвата серотонина (SSRI), ингибиторам обратного захвата
,1
вY
2017б
с1
201б.0б.30
серотонина, норэпинефрина (SNRl)
норэпинефрина
гидрокситриптам
и
ингибиторам обратного захвата
и допамина (NDR|),
ингибирующим поглощение
5-
ина (5-НТ), норэпинефрина (NE) и допамина (DA). Механизм,
посредством которого данные антидепрессивные лекарственные препараты
функционируют, состоит в увеличении уровня нейротрансмиттеров человека, таких
как
5-НТ, для
облегчения симптомов депрессии. Однако предлагаемые
антидепрессивные лекарственные препараты обладают побочными эффектами с
различными уровнями, такими
как
повышенная интенсивность суицида, головная
боль, головокружение, вертиго, бессонница, rиперсомния, шум в ушах, жажда,
отвращение
к пище, орексия, повышенная масса тела, повышенное
давление, расстройство желудка, реryргитация
с
кровяное
тоlлнотой, рвота, диспепсия,
диарея, запор, боль в ногах, кожная сыпь, озноб, судороги, гипергидроз, отек,
половое влечение, импотенция и т.д.
В последние годы
антидепрессивные лекарственные препараты, такие как
прозак и т.д. стали серьезной социальной проблемой. В 2004 году Управление по
контролю качества пищевых продуктов
и
лекарственных средств (FDА) США
дополнительно потребовало от фармацевтических компаний пересмотреть
инструкции по медицинскому применению для четкого указания побочных эффекrов
и предостережений в инструкциях 32 важнейших антидепрессивных лекарственных
препаратов на рынке и акцентировало внимание врачей и медицинских сестер на
том, что данные лекарственные препараты могуг повыtлать интенсивность суицида у
детей и подростков. Однако многие пациенты с депрессией имеют терапевтическое
состояние
и
терапевтическое стремление остановить или отказаться
лечения, что обусловлено волнениями
по поводу
от
своего
побочных эффекrов или
неспособностью противостоять многим побочным эффекгам данных
антидепрессивных лекарственных препаратов. На данный момент поиск нового
5
вY
2017б
с1
201б.0б.30
поколения лекарственных препаратов с меньшими побочными эффекгами, высокой
степенью безопасности при продолжительном применении и более ясно
выраженными/сильными антидепрессивными и подавляющими тревоry качествами,
стали центром внимания всего мира фармацевтики.
Поэтому авторами заявки предпринята попытка
рассмотреть
вышеизложенную сиryацию, обнарркенную в известном уровне техники.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
L{елью данного изобретения является обеспечение фармацевтической
композиции или лечебного питания для преодоления недостаточности доступных в
настоящее время способов лечения депрессии и тревожного расстройства.
Фармацевтическую композицию или лечебное питание изготавливают из сырья, в
том числе гинзенозидов Rg1 и Rb1, глицирризиновой иlили глиццирретовой кислот и
йМФ
ююбы для лечения депрессии и тревожного расстройства. В чаgгности, новая
техническая схема предполагает точные функции
и компоненты,
очевидный
лечебный эффекг, меньше побочных эффекгов и высокую степень безопасности при
длительном применении.
Схема решения фармацевтического препарата данного изобретения является
результатом, предпринятым заявителем
в соответствии с
фармакологическими теориями современной медицины
тревожноrо расстройства. Схему,
с
мя
патологическими
лечения депрессии
и
и
применением трех видов сырья, в том числе
женьшеня, солодки (лер., другие названия: лакрица, солодка голая, солодка гладкая,
лакричник) и ююбы разрабатывают на основе патологических и фармакологических
теорий современной медицины для лечения тревоги; в частности, схема объединяет
прошлое исследование, направленное на фармацевтические препараты, с
последними сведениями, полученными в отношении пострецепторного механизма.
6
BY
2017б
с1
2016.0б.30
Гинзенозид женьшеня обладает аденилатциклазной (АС) активностью в отношении
стимуляции синтеза сАМР и
фосфодиэстеразы
ингибирующей активностью в
сАМР (CAPD) для
отношении
уменьшения разрушения сАМР;
глицирризиновая кислота (и глицирретовая кислота) из солодки являются сильными
ингибиторами
CAPD. В
организме гинзенозиды Rg1
и Rb1 и
глицирризиновая
кислота в сочетании и совместном использовании дополнительно повышают
концентрацию
и активность цАМФ и
Увеличение концентрации
и
протеинкиназы
А (РКА),
соответственно.
активности цАМФ может (1) повышать синтез
высвобояqqение нейромедиатора, такого как норэпинефрин
и т.д., (2)
и
повышать
экспрессию нейротрофического факгора головного мозга (BDNF) и (3) ингибировать
гиперактивность гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковой
оси (НРА) и секрецию
глюкокортикоида для достижения существенной антидепрессивной функции.
Повышенная концентрация
и активность РКА могуг усиливать
ингибирующую
функцию ГАМК на нейроны для достижения важной противотревожной функции.
Кроме того, цАМФ ююбы, являясь экзогенным неrидролизуемым цАМФ, может
в перемещении ЦМФ в организме, имитировать функцию
фермента и усиливать экспрессию ЦМФ и РКА в организме для достижения
принимать участие
антидепрессивных и противотревожных функций. Таким образом, гинзенозиды Rg1
и Rbl соединяются с глицирризиновой кислотой и ЦМФ ююбы; ожидается, что
данное сырье действуют совместно для дополнительного повышения
антидепрессивного эффекrа и подавляющего тревоry эффекга данного изобретения.
Женьшень, солодка и ююба являются обычно используемым сырьем для
фармацевтической промышленности и пи|левыми продукrами в китайской медицине
и были
использованы
в диетическом
калорийном лечебном питании
в
течение
нескольких тысяч лет. В этой длительной клинической истории и истории питания
безопасность и эффекгивность комплексного использования женьшеня, солодки
и
ююбы были полностью доказаны. Исследование изобретателя и экспериментальные
7
BY
2017б
с1
201б.0б.30
результаты показали, что если указанные три вида фармацевтического сырья
обычно лишь настаиваются и экстрагируются для получения экстракта, то экстракт
не
обладает существенными антидепрессивными
и
подавляющими тревоry
эффектами по сравнению с доминирующими антидепрессивными и подавляющими
тревоry лекарственными препаратами уровня техники. Однако при дополнительной
очистке экстракта данных трех видов фармацевтического сырья для повышения
концентрации эффекrивных компонентов, содержащих гинзенозиды Rg1
и
Rb1
,
rлицирризиновую кислоry, цАМФ ююбы и т.д., как описано в данном изобретении,
получают фармацевтическую композицию
со
значительной антидепрессивной
и
подавляющей тревоry функцией. Экспериментальный результат доказал, что данное
изобретение имеет существенные антидепрессивные
и
подавляющие тревоry
эффекгы по сравнению с доминирующими лекарственными
препаратами
пароксетином и диазепамом для лечения депрессии и тревожного расстройства,
соответственно. !ебрис, полученный из данных трех видов фармацевтического
сырья, после экстракции и очистки, Talot(e собирали и анализировали
в
экспериментах на животных. Несмотря на то, что дебрис содержит незначительное
количество гинзенозидов Rg1 и Rb1 , rлицирризиновой кислоты и
ЦМФ
ююбы, он не
обнару)(ивает существенные антидепрессивные и подавляющие тревоry функции в
экспериментах на животных. Важно, чтобы прием женьшеня, солодки и ююбы не
вызывал побочные эффекrы широко распространенных антидепрессивных
и
подавляющих тревоry лекарственных препаратов уровня техники. У пациентов будет
отсrгствовать необходимость волноваться
о
побочных эффекгах, таким образом,
они не будуг прекращать или навсегда отказываться от фармацевтической терапии.
Таким образом, автор изобретения представляет, что гинзенозиды
глицирризиновая кислота
и ЦМФ ююбы являются сырьем для
Rgl и
Rb1,
производства
фармацевтической композиции или лечебного питания для лечения депрессии
и
тревожноrо расстройства. В частности, новая техническая схема предлагает точные
tl
ву
20|7б
с1
201б.0б.30
функции и компоненты, высокую безопасность в течение длительного употребления
без побочных эффекгов, тем самым существенно исправляя недостатки, полученные
в известном уровне техники.
Глицирретовая кислота имеет более высокую липорастворимость по сравнению
с глицирризиновой кислотой и может легко проникать в мозг
через
гемоэнцефалический барьер. Поскольку глицирризиновая кислота превращается в
глицирретовую кислоry в человеческом теле почти со 100% эффекгивностью, то
ингибирование CAPD глицирризиновой кислотой происходит пrгем превращения
глицирризиновой кислоты в глицирретовую кислоry в теле человека. Таким образом,
глицирризиновая кислота или глицирретовая кислота могrт быть сырьем для
производства фармацевтической композиции данного изобретения.
В соответствии с одним из аспектов данного изобретения
обеспечивается
фармацевтическая композиция для лечения, по меньшей мере, депрессии или
тревожного расстройства. Фармацевтическая композиция включает в себя:
гинзенозиды Rg1 и Rb1 ; производное глицирризиновой кислоты, причем производное
выбрано из группы, состоящей из глицирризиновой кислоты и/или глицирретовой
кислоты; и цАМФ ююбы.
Предпочтительно фармацевтическая композиция включает в сrебя 2 - 25 масс.
частей гинзенозидов, 3 - 46 масс. частей производного глицирризиновой кислоты
и
0,002 - 0,4 масс. частей цАМФ ююбы.
Предпочтительно фармацевтическая композиция включает в себя 4 - 12 масс,
частеЙ гинзенозида, 5
- 15 масс. частей
производного глицирризиновоЙ кислоты и
0,01 - 0,08 масс. частей цАМФ ююбы.
Предпочтительно гинзенозид экстрагируют
из женьшеня,
производное
глицирризиновой кислоты экстрагируют из солодки и цАМФ ююбы экстрагируют из
ююбы.
9
вY
20176
с|
Предпочтительно ююбу эксграгируют
201б.0б.30
для получения первичного
имеющего первичную концентрацию йМФ
дополнительно экстрагируют
экстракта,
ююбы; первичный
для получения вторичного экстакта,
экстракт
имеющего
вторичную концентрацию цАМФ ююбы; вторичная концентрация цАМФ ююбы выше,
чем первичная концентрация цАМФ ююбы, причем вторичный экстракт является
сырьем для фармацевтической композиции.
В
соответgгвии
с еще одним
аспектом данноrо изобретения обеспечивается
фармацевтическая композиция для лечения, по меньшей мере, депрессии или
тревожного расстройства, Фармацевтическая композиция включает в себя:
гинзенозид и глицирризиновую иiили глицирретовую кислоry.
Предпочтительно гинзенозид включает в себя Rg1 и Rb1.
Предпочтительно фармацевтическая композиция включает в
себя 2 - 25 масс.
частей гинзенозида и 3 - 46 масс. частей глицирризиновой и/или глицирретовой
кислот.
Предпочтительно фармацевтическая композиция включает в
частей гинзенозида
и
себя 4 -
,|2
масс.
5 - 15 масс. частей глицирризиновой и/или глицирретовой
кислот.
Предпочтительно фармацевтическая композиция дополнительно включает в
себя, по меньшей мере, один фармацевтически приемлемый носитель и одну
добавку.
Предпочтительно фармацевтическая композиция выполнена в
лекарственной формы, выбранную
из группы,
виде
включающей таблетку, капсулу,
порошок, драже, пудру, раствор, микрокапсулу, суспензию, эмульсию, гранулу,
капельное средство
и
шарик.
Предпочтительно фармацевтическую композицию производят в виде продукга
лечебного питания или пищевой добавки.
l0
вY
2017б
с1
201б.0б.30
Фармацевтическая композиция, представленная в описании и формуле данного
для лечения депрессии и тревожного расстройства, завершает
основное содержание данного изобретения. После опубликования данного
изобретения
изобретения любой специалист
в этой области сможет
продолжить нормальное
увеличение/снижение или заменить на другие эффекrивные компоненты медицины
на основе лекарственных трав (такие как онджисапонин, сайкоc:lпонин, кумарин
солодки и т.д.), имеющие эффекты/функции, идентичные вышеуказанному
лекарственному средсrву
родственной
в
теорией
соответствии
с
теорией китайской медицины или
современной
увеличение/снижение
фармакологии. Нормальное
или замещение указанного вещества на средства из
растительного сырья
на основе
лекарственных трав, имеющие аналоrичный
механизм, другие идентичные ингибиторы
CAPD,
соответствующие эффективные компоненты, относится
активаторы
АС
к нормальным
или
видам
деятельности обычного специалиста в данной области. Таким образом, замещения
находятся в области защиты данного изобретения.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ПРЕДПОЧТИТЕЛЬНОГО ВАРИАНТА ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
,Щанное изобретение теперь будет описано
более подробно со ссылкой на
последующие варианты осуществления. Нркно отметить, что последующие
опис:lния
предпочтительных вариантов осуществления данного изобретения
представлены ниже только в целях иллюстрации и описания; не предполагается, что
они
будр ио]ерпывающими или будут ограничены раскрытой точной формой.
Для
выполнения цели данного изобретения технические схемы данного
изобретения являются подробно представленными, как изложено ниже,
В данном изобретении раскрывается фармацевтическая
композиция для
лечения депрессии и тревожного расстройства, и фармацевтическая композиция
l]
вY
изготавливается
с
20176
с1
201б.Oб.30
помощью сырьевых материалов гинзенозидов
Rg1
и
Rb1,
глицирризиновой ulи или глицирретовой кислот и цАМФ ююбы.
Пример
1:
Фармацевтическую композицию данного изобретения изготавливают из
сырьевых материалов, в том числе всего 2 - 25 масс. частей гинзенозидов Rg1 и Rb1
и З - 46 масс. частей глицирризиновой кислоты (или глицирретовой кислоты).
Пример 2:
Фармацевтическую композицию данного изобретения изготавливают из
сырьевых материалов, в том числе всего 4 - 12 масс. частей rинзенозидов Rg1 и Rb1
и 5 -'15 масс. частей глицирризиновой кислоты (или глицирретовой кислоты).
Пример
3:
Фармацевтическую композицию данного изобретения изготавливают из
сырьевых материалов,
в
том числе всего 2 - 25 масс. частей гинзенозидов Rg1 и Rb1,
3 - 46 масс. частей глицирризиновой кислоты (или глицирретовой кислоты) и 0,002 0,4 масс. частей цАМФ ююбы.
Пример 4:
Фармацевтическую композицию данного изобретения изготавливают из
сырьевых материалов, в том числе всего 4 - 12 масс. частей гинзенозидов Rg1 и Rb1
,
и 5 - 15 масс. частей глицирризиновой кислоты (или глицирретовой кислоты) и 0,01 0,08 масс. частей цАМФ ююбы.
Пример
5:
Фармацевтическая композиция данного изобретения представлена из
сырьевых материалов, имеющих цАМФ ююбы, которые представляют собой
вторичный экстракт, как описано ниже. Сначала ююбу экстрагируют для получения
первичного экстракта, затем первичный экстракг дополнительно экстраrируют для
l2
вY
20176
с|
201б.0б.30
получения вторичного экстракта, где концентрация ЦМФ ююбы вторичного
экстракта выше чем концентрация цАМФ ююбы первичного экстракта.
Пример 6:
Обеспечивают фармацевтическую композицию данного изобретения,
в
которой способ получения сырьевого материала, содержащего йМФ ююбы,
включает в себя стадии:
(а) экстрагирования ююбы для получения первичного экстракта; и
(Ь) экстрагирования первичного экстракга
для получения вторичного экстракта,
и концентрация ЦМФ ююбы вторичного экстракта выше чем концентрация ЦМФ
ююбы первичного экстракта.
Для достижения цели данного изобретения способы
фармацевтической композиции опис€lны
Способ
получения
следующим образом.
1:
Фармацевтическую композицию данного изобретения производят из сырьевых
материалов, всего 2 - 25 масс. частей гинзенозидов Rg1 и
Rbl
и 3 - 46 масс. частей
rлицирризиновой кислоты (или глицирретовой кислоты).
способ
2:
Фармацевтическую композицию данного изобретения производят из сырьевых
материалов, всего 4 - 12 масс. частей гинзенозидов Rg1 и Rb1 и 5
-15 масс. частей
глицирризиновой кислоты (или глицирретовой кислоты).
Способ
3:
Фармацевтическую композицию данного изобретения производят из сырьевых
материалов всего 2 - 25 масс. частей гинзенозидов
Rgl и
Rb1 ,
глицирризиновой кислоты (или глицирретовой кислоты) и 0,002
цАМФ ююбы.
lj
3 - 46 масс. часгей
- 0,4 масс. частей
вY
Способ
2017б
с1
201б.0б.30
4:
Фармацевтическую композицию данного изобретения производят из сырьевых
материалов всеrо 4 - 12 масс. частей гинзенозидов Rg1 и Rb1
,5 -
15 масс. частей
глицирризиновой кислоты (или глицирретовой кислоты) и 0,01 - 0,08 масс. частей
цАМФ ююбы.
Способ
5:
Обеспечивают фармацевтическую композицию данного изобретения,
в
которой способ получения сырьевого материала, содержащего цАМФ ююбы,
включает в себя стадии:
(а) экстрагирования ююбы для получения первичного экстракта; и
(Ь) очистки первичного экстракта мя получения вторичного экстракта,
и
концентрация цАМФ ююбы вторичного экстракта выше чем концентрация цАМФ
ююбы первичного экстракта.
прЕдпочтитЕльныЙ вАриАнт осуlлЕствлЕния изоБрЕтЕния
.Qанное изобретение дополнительно иллюстрируют, как изложено ниже,
предпочтительные варианты изобретения,
Эксперимент 1: Влияние варианта
1в
эксперименте подвешивания мыши за
хвост
1.1 Экспериментальные животные: мыши lCR, самцы, Macc€l тела 22,0
a2
l,
вторичные, предоставлены Научным департаментом экспериментальных животных
Столичного медицинского университета, Пекин.
1.2 Экспериментальные лекарственные
препараты: лекарственный препарат
варианта 1 предоставлен компанией Beijing Wоппеr Biotech. Ltd. Со., и пароксетин
(паксил) является продуктом компании Zhong Mei Tianjin Smith Kline pharmaceuticals
Со. Ltd.
l4
вY
2017б
с1
201б.0б.30
1.3 Экспериментальное оборудование: секундомер.
1.4
Виды доз: 1. Высокая доза варианта 1 (80 мг/кйень); 2. Средняя доза
варианта 1 (40 мг/кг/день); и 3, Низкая доза варианта 1 (20 мг/кйень).
1.5 Экспериментальный метод и результат:
1,5.1 ,Qеление на группы
и
введение лекарственного средства: Мышей
произвольно делят на группы, и в кац,qой группе находится 10 мышей.
1
. Высокая
доза варианта 1 (80 мг/кг, перорально (Р.О.), вводили в течение 7 дней); 2. средняя
доза варианта 1 (40 мг/кг, Р.О., вводили в течение 7 дней); З. низкая доза варианта
1
(20 мг/кг, Р.О., вводили в течение 7 дней); 4. пароксетин (3 мг/кг, Р.О., вводили в
течение 7 дней); и 5. физиологический раствор (Р.О.). Через 1 час после последнего
введения лекарственного средства выполняют эксперимент подвешивания мыши за
хвост.
1.5.2 Метод эксперимента: Хвост мыши (1 см до кончика хвоста) приклеивают
липкой лентой к деревянной планке, на 5 см выше чем платформа, и подвешивают
на б минуr. Регистрируют время неподвижности мыши в течение, по меньшей мере,
5 минут.
1.5.3 Статистический расчет: Экспериментальные данные представляют в
виде
7t
sD , и результат эксперимента вычисляют в виде дисперсионного анализа
(ANOVA) с помощью пакета программ обработки статистических данных SPSS 11.5.
1.5.4 Результат эксперимента: см. таблицу 1.
Таблица 1. Влияние варианта 1 на время неподвижности мыши
Группа
Физиологический
раствор
(контроль)
Пароксетин
Высокая доза варианта
1
Число
Время
животных
(секунд)
неподвижности
.
10
113,22
10
75,33 п 22,91-
10
54,67 п 26,38*
15
21,18
вY
Средняя доза варианта
Низкая доза варианта
2017б
с1
1
1
201б.0б.30
10
72,68 f, 27,06-
10
95,26 п 49,91
По сравнению с контрольной группой: *Р < 0,05 и **Р < 0,01
.
Вывод: В соответствии с вышеуказанным экспериментом может быть
обнаружено, что все высокие и средние дозы варианта 1 данного изобретения
и
пароксетин сокращали время неподвижности после подвешивания за хвост мыши,
существенно отличающееся от группы физиологического раствора (контроль). Таким
образом, вариант
1
данного изобретения, имеющий антиэкспериментальную
функцию депрессии, может быть экстрапол ирован.
Эксперимент 2: Влияние варианта
l
в эксперименте индуцированного
резетпином снижения температуры тела мышей
2.1 Экспериментальные
животные: мыши lCR, самцы, масса тела 22,0 1 2
г,
вторичные, предоставлены Научным департаментом экспериментальных животных
Столичного медицинского университета, Пекин.
2.2 Экспериментальные лекарственные
препараты: лекарственный препарат
варианта 1 предоставлен компанией Beijing Wоппеr Biotech. Ltd. Со., пароксетин
(паксил) является продукгом компании Zhong Mei Tianjin Smith Кliпе pharmaceuticals
Со. Ltd. и резетпин является продукгом компании Guangdong BangMin Pharmaceutical
Со., Ltd.
2,3
Экспериментальное оборудование: Элекгронный термометр (модель:
GМ222) и секундомер.
2,4
Видьl доз: 1. Высокая доза варианта 1 (80 мг/кйень); 2. Средняя доза
варианта 1 (40 мг/кг/день); и 3. Низкая доза варианта 'l (20 мг/кг/день).
2.5 Экспериментальный метод
2.5.,t .Щеление
и результат:
на группы и введение
лекарственного средства: Мышей
произвольно делят на группы, и в кахqцой группе находится 10 мышей. 1. Высокая
16
вY
20176
с1
2016.0б.30
доза варианта 1 (80 мг/кг, перорально (Р,О.), вводили в течение 7 дней); 2. средняя
доза варианта 1 (40 мг/кг, Р.О., вводили в течение 7 дней); 3. низкая доза варианта
'1
(20 мг/кг, Р.О., вводили в течение 7 дней); 4. пароксетин (3 мг/кг, Р.О., вводили в
течение 7 дней); и 5. физиологический раствор (Р.О.).
2.5.2
Экспериментальный метод: Через 1 час после последнего введения
лекарственного средства на восьмой день определяют анальную темпераryру у
мышей. 3атем 2 мг резетпина на килограмм массы тела дают интраперитонеал ьной
иньекцией. Через
4 часа
анальную темпераryру
посr]е инъецирования резетпина еще раз определяют
у мышей. Глубина и время
в
введения термометра
анус
мышей являются идентичными при ка)t(цом измерении темпераryры.
виде
2.5.3
Статистический расчет: Экспериментальные данные представляют в
Гt sD
, и результат эксперимента вычисляют в виде дисперсионного анализа
ANOVA с помощью пакета программ обработки статистических данных SPSS
1
1.5.
2.5.4 Результат эксперимента: см. таблицу 2.
2,
Таблица
Влияние варианта
1 на
пониженную темпераryру
тела
мыши,
индуцированную с помощью Резетпина
Число
Группа
животных
Физиологический
раствор
Снижение темпераryры
10
3,65 п 0,77
Пароксетин
,10
2,38 _ 0,69*
Высокая доза варианта
1
,10
Средняя доза варианта
1
(контроль)
Низкая доза варианта
1
1
,85
10
2,05
,10
2,35
По сравнению с контрольной группой: -Р < 0,05 и **Р < 0,01
r
t
1
(
-)
,01*-
1,03*
0,69*
.
Вывод: В соответствии с вышеуказанным экспериментом может быть
обнаружено, что высокая, средняя и низкая дозы варианта 1 данного изобретения и
пароксетина снизили пониженную темпераryру тела, индуцированную резетпином, и
17
BY
2017б
с1
это означает, что вышеуказанные
201б.0б.30
антиэкспериментальные функции депрессии
могли быть связаны с моноаминовым нейротрансмиттером и затрагивать количество
моноаминового нейротрансмиттера. Таким образом, вариант'1 данного изобретения,
имеющий
антиэкспериментал
ьную
функцию депрессии, может
быть
экстрапол ирован.
Эксперимент 3: Влияние варианта 1 на перемещение мышей в тесте темносветлая камера
3.1 Экспериментальные животные: мыши Kunming (КМ), самцы, масса тела 24
-
26 r, вторичные, предоставлены Научным департаментом экспериментальных
животных Столичного медицинского университета, Пекин.
3.2 Экспериментальные лекарственные препараты: лекарственный препарат
варианта 1 предоставлен компанией Beijing Wоппеr Biotech. Ltd. Со., и диазепам
является продуктом компании Тiапjiп Jinhuei Amino Acid Со. Ltd.
3.3
Экспериментальное оборудование: Самодельная камера для
перемещения в темно-светлый отсек.
3.4 Виды доз: 1. Высокая доза варианта 1 (80 мг/кйень); 2. Средняя доза
варианта 1 (40 мг/кг/день); и 3. Низкая доза варианта 1 (20 мгiкйень).
3.5 Экспериментальный метод и результат:
З.5.'l ,Щеление на группы
и
введение лекарственного средства: Мышей
произвольно делят на группы и в каlqцой группе находится 10 мышей.
'1
. Высокая
доза варианта 1 (80 мг/кг); 2. средняя доза варианта 1 (40 мг/кг); 3. низкая доза
варианта 1 (20 мг/кг); 4. диазепам (2,5 мг/кг); и 5. физиологический раствор (0,9%
раствор хлорида натрия, NS). Лекарственные средства вводят в желудок мыши один
раз в день и вводят мышам в течение последующих 7 дней. В период введения
ltt
вY
2017б
с1
201б.06.30
мышь ест и пьет обильно, и эксперимент продолжают спустя 1 час после последнего
введения лекарственного средства на восьмой день.
3.5.2 Экспери ментальный метод:
Перемещение мышей в тесте темно-светлая камера: Темная камера занимает
одну треть пространства камеры перемещения из темного в светлый отсек (44 см ?
21 см ? 21 см) и верх закрыт. Светлая камера занимает две трети пространства
и
является ярко освещенной. Дверь мех(ду двумя камерами располагают для прохода
мыцtи. Мышь помещают в центр светлой камеры в начале теста и заднюю часть
мыши в темную камеру. Определяют число раз, которое мышь проникает в темную
камеру и возвращается в светлую камеру в течение 10 минут, и данное число раз
является показателем оценки подавляющей тревоry функции лекарственного
средства.
3.5.3 Статистический расчет: Экспериментальные данные представляют в
виде
'1sD
, и результат эксперимента вычисляют в виде дисперсионноrо анализа
ANOVA с помощью пакета программ обработки статистических данных SPSS
1
1.5.
3.5.4 Результат эксперимента: см., таблицу 3.
Таблица 3. Влияние варианта 1 на число раз перемещения
в
мыlлином тесте
темно-светлая камера
Группа
Число
Число прохождений из
животных
камеры в светлую камеру
Высокая доза варианта
1
10
Средняя доза варианта
1
10
Низкая доза варианта
1
!иазепам
Физиологический раствор
(контроль)
11,2
.
3,84-
f
4,54-
13,1 : 5,38*
,t3,5 t] 4,65*
10
10
,l
10
6,2 ? 4,32
1,3
По сравнению с контрольной группой: -Р < 0,05 и --Р < 0,01
19
.
темной
BY
с1
20176
201б.0б.30
3.6 Описание: Перемещение в тесте темно-светлая камера, принятом
в
данном эксперименте, строится на основе врощденной ненависти мыши к яркому
свеry и свободному
ориенти ровочно-исследовательскому характеру поведения в
новых окружающих условиях. Клинический фармацевтический препарат (диазепам)
для лечения тревоги
у
людей
и
вариант
1
имеют прекрасную корреляцию
относительно улучшения функции свободного ориентировочно-исследовательскоrо
харакгера поведения мыши в данной модели. В соответствии с вышеприведенным
экспериментом может быть обнаружено,
варианта
что высокая, средняя и
1 данного изобретения и диазепам существенно
прохощдений мыши из темной камеры
увеличивают число
в светлую камеру и имеют
с
достоверные значения при сравнении
низкая дозы
статистически
физиологическим раствором. Результат
эксперимента доказал, что вариант 1 обладает подавляющей тревоry функцией.
3,7 Вывод: В соответствии
высокая, средняя
и
с
вышеизложенным результатом эксперимента,
низкая дозы варианта '| данного изобретения
и
диазепам
существенно увеличивают число прохох(qений мыши из темной камеры в светлую
камеру. В соответствии
с результатом вариант 1 обладает подавляющим
тревоry
эффектом.
Эксперимент 4: влияние варианта 2 в эксперименте подвешивания мыlли за
хвост
4.1 Экспериментальные животные: мыши lCR, с€lмцы, Macc€l тела 22,0
a 2l,
вторичные, предоставлены Научным департаментом экспериментальных животных
Стол ич ного медицинского ун иверситета, Пекин.
4.2
Экспериментальные лекарственные препараты: лекарственный препарат
варианта 1 предоставлен компанией Beijing Wоппеr Biotech. Ltd. Со,, и пароксетин
(паксил) является продуктом компании Zhong Mei Тiапjiп Smith Kline pharmaceuticals
Со. Ltd.
20
BY
2017б
с1
201б.0б.30
4.3 Экспериментальное оборудование: Секундомер.
4.4
Виды доз: 'l. Высокая доза варианта 2 (80 мг/кгhень); 2. Средняя доза
варианта 2 (40 мг/кйень); и 3. Низкая доза варианта 2 (20 мг/кг/день).
4.5 Экспериментальный метод и результат:
4.5.'t !еление на группы
и
введение лекарственного средства: Мышей
произвольно делят на группы, и в кац,цой группе находится 10 мышей. 1. Высокая
доза варианта 2 (80 мг/кг, Р.О., вводили в течение 7 дней); 2. средняя доза варианта
2 (40 мгiкг, Р.О., вводили в течение 7 дней); З. низкая доза варианта 2 (20 мг/кг, Р.О.,
вводили в течение 7 дней); 4. пароксетин (3 мr/кг, Р.О., вводили в течение 7 дней); и
5.
физиологический раствор (Р,О.). Через
1час
после последнего введения
лекарственного средства выполняют эксперимент подвешивания мыши за хвост.
4.5.2 Метод эксперимента: Хвост мыши (1 см до кончика хвоста) приклеивают
липкой лентой к деревянной планке на 5 см выше чем платформа и подвешивают на
6 минр, Регистрируют время неподвижности мыши в течение последних 5 минуг.
4.5.3 Статистический расчет: Экспериментальные данные представляют
виде
F t sD
,и
в
результат эксперимента вычисляют в виде ANOVA с помощью пакета
программ обработки статистических данных SPSS 11.5.
4.5.4 Экспериментальный результат: см. таблицу 4.
Таблица 4. Влияние варианта 2 на время нёподвижности мыши
Время
неподвижности
Группа
Число животных
Физиологический раствор (контроль)
10
113,22
Пароксетин
,10
75,33 п 22,91-
Высокая доза варианта 2
10
9з,27
Средняя доза варианта 2
10
76,21 п 2в,36-
Низкая доза варианта 2
10
107,79 п 32,56
(секунд)
По сравнению с контрольной группой: *Р < 0,05 и **Р < 0,01
2|
.
.
.21,18
з6,42
вY
2017б
с1
201б.0б.30
Вывод: В соответствии с выtUеуказанным экспериментом может быть
обнарркено, что средняя доза варианта
2 данного
изобретения
и
пароксетин
сокращали время неподвижности после подвешивания мыши за хвост, существенно
отличающееся от группы физиолоrического раствора (контроль). Таким образом,
вариант
2
данного изобретения, имеющий антиэкспериментальную функцию
депрессии, может быть экстрапол ирован.
Эксперимент 5: Влияние варианта 2 в эксперименте индуцированного
резетпином снижения температуры тела мыцrей
5.1 Экспериментальные животные: мыши lCR, самцы, масса тела 22,0 a 2
г,
вторичные, предоставлены Научным департаментом экспериментальных животных
Столичного медицинского университета, Пекин.
5,2 Экспериментальные лекарственные
препараты: лекарственный препарат
варианта 1 предоставлен компанией Beijing Wоппеr Biotech. Ltd. Со., пароксетин
(паксил) является продукгом компании Zhong Mei Tianjin Smith Кliпе pharmaceuticals
Со. Ltd. и резетпин является продуктом компании Guangdong BangMin Pharmaceutical
Со., Ltd.
5.3 Экспериментальное оборудование: Электронный термометр
(модель:
GM222) и секундомер.
5.4
Виды доз: 'l. Высокая доза варианта 2 (80 мr/кйень); 2. Средняя доза
варианта 2 (40 мr/кг/день); и З. низкая доза варианта 2 (20 мг/кг/день).
5,5 Метод эксперимента
5.5.1
.Qеление
и результат:
на группы и введение лекарственного средства:
Мышей
произвольно делят на группы, и в кащqой группе находится "l0 мышей. 1. Высокая
доза варианта 2 (80 мгiкг, перорально (Р.О.), вводили в течение 7 дней); 2. средняя
доза варианта 2 (40 мг/кг, Р.О., вводили в течение 7 дней); 3. низкая доза варианта 2
22
BY
20176
с1
201б.0б.30
(20 мг/кг, Р.О., вводили в течение 7 дней); 4. пароксетин (3 мriкг, Р.О., вводили в
течение 7 днеЙ); и 5. физиологическиЙ раствор (Р.О.).
5.5,2 Экспериментальный метод: Через 1 час после последнего
введения
лекарственного средства на восьмой день определяют анальную темпераryру у
мышей. 3атем 2 мг
резетпина
на
килограмм массы
тела
вводят
интраперитонеальной инъекцией. Через 4 часа после инъецирования резетпина еще
раз определяют анальную темпераryру
у
мышей. Глубина
и время
введения
термометра в анус мышей являются идентичными при кажцом измерении
темпераryры.
виде
5.5.3
Статистический расчет: Экспериментальные данные представляют в
Гt s,
, и результат эксперимента вычисляют в виде дисперсионноrо анализа
ANOVA с помощью пакета программ обработки статистических данных SPSS 11.5.
5.5.4 Экспериментальный результат: см., таблицу 5.
5.
Таблица
Группа
Влияние варианта
2 на
пониженную темпераryру
индуцированную с помощью резетпина
Ч исло
животных
Физиологический
раствор
мыtlJи,
Снижение темпераryры ( П)
]
,10
3,65
Пароксетин
10
2,38 п 0,69*
Высокая доза варианта 2
10
2,93 п 0,74-
Средняя доза варианта 2
10
2,31 п 0,82**
Низкая доза варианта 2
10
3,21 Е 0,71
(контроль)
тела
По сравнению с контрольной группой: -Р < 0,05 и ""Р < 0,01
0,77
.
Вывод: В соответствии с вышеуказанным экспериментом может быть
обнар)Dкено,
что средняя доза варианта 2 данного изобретения и пароксетин
уменьшиили пониженную темпераryру тела, индуцированную резетпином,
и
это
означает, что вышеуказанные антиэкспериментальные функции депрессии могли
2з
BY
2017б
с1
201б.Oб.30
быть связаны с моноаминовым нейротрансмиттером и затрагивать количество
моноаминового нейротрансмиттера. Таким образом, вариант 2 данного изобретения,
имеющий антиэкспериментальную функцию депрессии, может
быть
экстраполирован.
Эксперимент 6: влияние варианта 3 в эксперименте подвешивания мыlли за
хвост
6.1 Экспериментальные животные: мыши lCR, самцы, Macc€l тела 22,0
'2
г,
вторичные, предоставлены Научным департаментом экспериментальных животных
Столичного медицинского университета, Пекин.
6.2
Экспериментальные лекарственные препараты: лекарственный препарат
варианта 1 предоставлен компанией Beijing Wоппеr Biotech. Ltd. Со., и пароксетин
(паксил) является продуктом компании Zhong Mei Tianjin Smith Kline pharmaceuticals
Со. Ltd.
6.3 Экспериментальное оборудование: секундомер.
6.4
Виды доз: '1. Высокая доза варианта 3 (80 мг/кйень); 2. Средняя доза
варианта 3 (40 мг/кг/день); и 3. Низкая доза варианта 3 (20 мr/кйень).
6.5 Экспериментальный метод и результат:
6.5.'l !еление на группы
и
введение лекарственного средства: Мышей
произвольно делят на группы, и в кац,qой группе находится 10 мышей.
,1
. Высокая
доза варианта 3 (80 мг/кг, Р.О., вводили в течение 7 дней); 2. средняя доза варианта
3 (40 мг/кг, Р.О., вводили в течение 7 дней); 3. низкая доза варианта 3 (20 мг/кг, Р,О.,
вводили в течение 7 дней); 4. пароксетин (3 мг/кг, Р.О., вводили в течение 7 дней); и
5.
физиологический раствор (Р.О.). Через
1час
поФrе посJrеднего введения
лекарственного средства выполняют эксперимент подвешивания мыши за хвост.
z1
BY
20176
с7
201б.Oб.30
6.5.2 Метод эксперимента: Хвост мыtли (1 см до кончика хвоста) приклеивают
лентой к деревянной планке на 5 см выше чем платформа и подвешивают на 6
минр. Регистрируют время неподвижности мыши в течение, по меньшей мере,
5
минуг.
6.5.3 Статистический расчет: Экспериментальные данные представляют
виде
х t sD
,и
в
результат эксперимента вычисляют в виде ANOVA с помоlлью пакета
программ обработки статистических данных SPSS 11.5.
6.5.4 Результат эксперимента: см. таблицу 6.
Таблица 6. Влияние варианта З на время неподвижности мышей
Группа
Физиологический
раствор
Число
Время
животных
(секунд)
неподвижности
,10
113,22
Пароксетин
10
75,33 t] 22,91-
Высокая доза варианта З
10
7о,37 , ,2в,14"
Средняя доза варианта 3
10
76,26 п 23,81-
Низкая доза варианта 3
,10
90,40 п
(контроль)
21,18
31 ,32
По сравнению с контрольной группой: -Р < 0,05 и **Р < 0,01.
Вывод: В соответствии с вышеуказанным экспериментом может быть
обнарlоt<ено, что
все высокие и средние дозы варианта 3 данного изобретения
и
пароксетин сокращали время неподвижности после подве]ливания мыши за хвост,
существенно отличающееся от rруппы физиологического раствора (контроль). Таким
образом, вариант
3
данного изобретения, имеющий антиэкспериментальную
функцию депрессии, мохет быть экстраполирован.
25
вY
Cl
20176
201б.Oб.30
Эксперимент 7: Влияние варианта 3 в эксперименте индуцированного
резетпином снижения температуры тела мышей
7.1 Экспериментальные животные: мыши lCR, самцы, масса тела
22,О
Z2
г,
вторичные, предоставлены Научным департаментом экспериментальных животных
Столичного медицинского университета, Пекин.
7.2 Экспериментальные лекарственные
варианта
3
препараты: лекарственный препарат
предоставлен компанией Beijing Wоппеr Biotech. Ltd. Со,, пароксетин
(паксил) является продуктом компании Zhong Mei Тiапjiп Smith Kline pharmaceuticals
Со, Ltd. и резетпин является продуlстом компании Guangdong BangMin Pharmaceutical
Со., Ltd.
7,3
Экспериментальное оборудование: элекrронный термометр (модель:
GМ222) и секундомер.
7.4
Виды доз: 1. Высокая доза варианта З (80 мг/кйень); 2. Средняя доза
варианта 3 (40 мг/кг/день); и 3. низкая доза варианта
7.5 Экспериментальный метод
7,5.1 !еление на
группы
3
(20 мг/кйень).
и результат:
и
введение лекарственного средства: Мышей
произвольно делят на группы, и в кахl,дой группе находится 't 0 мышей.
1
. Высокая
доза варианта З (80 мг/кг, перорально (Р.О.), вводили в течение 7 дней); 2. средняя
доза варианта 3 (40 мг/кг, Р.О., вводили в течение 7 дней); 3. низкая доза варианта 3
(20 мг/кг, Р,О., вводили в течение 7 дней); 4. пароксетин (3 мг/кг, Р.О., вводили в
течение 7 дней); и 5. физиологический раствор (Р.О.).
7.5,2 Экспериментальный метод: Через 1 час после последнего
введения
лекарственного средства на восьмой день определяют анальную темпераryру у
мышей. 3атем 2 мг
резетпина
на
килограмм массы
тела
вводят
интраперитонеальной инъекцией, Через 4 часа после инъецирования резетпина еще
раз определяют анальную темпераryру
26
у
мыч.lей. Глубина
и
время введения
вY
20176
с1
201б.0б.30
термометра в анус мычJей являются идентичными при ка(qом измерении
темпераryры.
7.5.3
виде
Гt
Статистический расчет: Экспериментальные данные представляют в
so , и результат эксперимента вычисляют в виде дисперсионного анализа
ANOVA с помощью пакета программ обработки статистических данных SPSS 11.5.
7.5.4 Результат эксперимента: см. таблицу
7. Влияние варианта 3 на
Таблица
Группа
7.
пониженную темпераryру
индуцированную с помощью резетпина
Число
Физиологически
животн ых
раствор
мыtlJи,
Снижение темпераryры ( П)
t
10
3,65
Пароксетин
10
2,38 п 0,69-"
Высокая доза варианта 3
10
2,18 п 0,92--
Средняя доза варианта 3
,10
2,36 п 0,83--
Низкая доза варианта 3
10
2,97 п 0,67-
(контроль)
тела
0,77
По сравнению с контрольной группой: -Р < 0,05 и *-Р < 0,01.
Вывод: В соответствии с вышеуказанным экспериментом может быть
обнарркено, что высокая, средняя и низкая дозы варианта 3 данного изобретения и
пароксетин снизили пониженную темпераryру тела, индуцированную резетпином, и
это означает, что вышеуказанные
антиэкспериментальные функции депрессии
могли быть связаны с моноаминовым нейротрансмиттером и затрагивать количество
моноаминового нейротрансмиттера. Таким образом, вариант 3 данного изобретения,
имеющий антиэкспериментальную функцию депрессии, может
экстраполирован.
27
быть
BY
2017б
с1
201б.0б.30
Эксперимент 8: Влияние варианта 4 в эксперименте поражения
обонятельных луковиц у мыч.lей
8.1 Экспериментал ьные животные:
Модель поражения обонятельных луковиц: здоровые самцы крыс Wistar,
вторичные, масса тела 330 П 20 г, приобретают
у Beijing Vital River
Experimental
Animal Technology Ltd. Со. (номер сертификата качества: SCXK (JlNG) 2002-2003),
7.2 Реагенты и лекарственные препараты: Лекарственный препарат Варианта
4
обеспечивается компанией Beijing Wоппеr Biotech Ltd.
пароксетин является продуктом компании Zhong
Со. (Lot: 0603'l3),
Mei Tianjin Smith
и
Кliпе
pharmaceuticals Со. Ltd. (Lot 04050011). Вышеуказанные лекарственные препараты
получают
в
0,5% натрий-карбоксиметилцеллюлозе (CMC-Na)
мя
введения
в
желудок. Бензилпенициллин натрия для инъекции представляет собой продукг North
China Pharmaceutical Huasheng Со. Ltd. (Lot: 50511204) и стандарты норэпинефрин
(NE) и 5-гидротриптамин (5-НТ) являются продуктами Sigma
Со.. !ругие
реагенты
являются промышленно поставляемыми.
8.3 Оборудование: Самодельная камера для изучения поведения в открытом
поле, ступенька через камеру, стереотаксический инструмент для
высокоэффекгивная жидкостная хроматография (ВЭЖХ, HPLC)
и
крыс,
10-канальный
помехоустойчивый счетчик для П-радиации (тип: DFM-96).
8.4 Экспериментальные методы:
8.4.1 !еление на группы и введение лекарственного средства: Крыс
произвольно делят на б групп 'l. Ложная терапевтическая группа; 2. модельная
группа (контроль);
варианта
4
З. высокая доза варианта 4 (60
мгiкгiдень);
4. средняя доза
(30 мг/кг/день); 5. низкая доза варианта 4 (15 мг/кг/день), и 6, пароксетин
(2 мг/кйень).
Тестируемые лекарственные средства
лекарственное средство готовят с 0,5% CMC-Na
мя
и
положительное
введения в желудок раз в день.
BY
с1
2017б
2016.0б.30
8.4.2 Способ приготовления модели: Крыс анестезируют хлоралгидратом.
После анестезии производят разрез по серединной линии родничка крысы от 1 см до
до 1 см за лобным
лобного родничка
Открывают окна
родничком
и
обнажают кости черепа.
на черепе, имеющие диаметр 2 мм от 8 мм перед
лобным
родничком и по 2 мм с двух сторон серединной линии. Специально изготовленный
элекгрический паяльник вставляют перпендикулярно
в
череп на
2
секунды
и
разрушают обонятельную луковицу, Гемостатическую ryбку погружают в окна черепа
и кожу заtuивают. После терапии 40 000 единиц бензилпенициллина натрия
килограмм массы тела, выполненной
и
нтраперитонеал ьной инъекцией
в
на
течение
кащцых четырех дней, дают тестируемое лекарственное средство постоянно в
течение 24 дней.
8.5 Показатель визуального наблюдения:
8.5.1 Эксперимент поведения в камере открытое поле: Камеру для изучения
поведения в открытом поле ('1 м
a
1м
i
0,4 м) конструируют
светло-голубой фанеры и Kapкac;l из алюминиевого сплава.
квадратов (20
см
i
20 см
периферические квадраты
центральные квадраты
мя
с
использованием
!но камеры делят на 25
кацдого квадрата), периметр представляет собой
(16 квадратов),
а
остальные представляют собой
(9 квадратов). Крысу помеlцают в центр
центральных
квадратов и число пересеченных крысой квадратов (число пересечений соседнего
квадрата более чем тремя когтями) и число стоящих крыс (две передние конечности,
оставляющие дно на более чем
1 см)
подсчитывают/получают наблюдением в
течение 3 минр.
8,5.2 Эксперимент пассивного избегания (тест
на
перешагивание):
Перегородку через камеру формируют меlцу светлой камерой и темной камерой, и
проход связывает светлую камеру и темную камеру для выхода и входа мыши.
Решетку темной камеры соединяют с оборудованием для поражения электрическим
29
вY
20176
с1
201б.0б.з0
током и там в промеltолке устанавливают мобильную пластину. Если крыса входит в
темную камеру, то крыса будет подвержена электрошоку. Во время обучения крысу
помещают в светлую камеру и затем обратно в нору для адаптации в течение 5
минр. Затем
пластину убирают и за крысой наблюдают в течение последующих 5
минр. Регистрируют время, когда крыс:l входит первый раз (элекгроltlоковый
латентный период) и это время является результатом изучения. Через 24 часа тест
повторяют. Пластину удаляют и темную камеру подвергают воздействию
электрическим током в течение 5 минр для установки времени, когда крыса входит в
темную камеру первый раз. Это время представляет собой запись памяти.
8.6 Статистический расчет: Экспериментальные данные представляют в виде
х t sa , и результат
эксперимента вычисляют
в
виде дисперсионного анализа
ANOVA с помощью пакета программ обработки статистических данных SPSS 11.5.
8.7 Результаты экспериментов:
8.7.'1 Результат эксперимента поведения в камере открытое поле: см, таблицу
8.
Таблица
8.
Результат модели поражения обонятельных луковиц крыс
эксперименте поведения в камере открытое поле
Группа
Число
Горизонтальное
Вертикальное
животны
движение
движение
х
(число пересеченных
квадратов)
(число
вертикальных
стоек)
Высокая доза варианта 4
11
49"18 п 27,68-,
,10,9,1
Средняя доза варианта 4
11
54,55 п 23,о1
1з,45 п 5,72"
Низкая доза варианта 4
11
61,82 п 21,43
15,18 п 4,47
Пароксетин
11
55,36 п 25,96-
14,36 п 5,55
Модельная группа (контроль)
11
79,55 п 24,зз
19,09 п 8,5з
Ложная терапевтическая группа
11
45,36 п 26,.84*
,10,45
По сравнению с контрольной группой: "Р < 0,05
30
и -"Р
<
0,01.
п 6,91,-
п 6,19*
в
BY
20176
с1
201б.0б.30
8.7.2 Результат теста перешагивания: см., таблицу 9
Таблица 9. Результат модели поражения обонятельных луковиц крыс в тесте
перешагивания
Латентный
Число
латентный
животны
первого
х
(секунд)
Высокая доза варианта 4
11
187,00 п 87,59-
289,82 п 28,59-
Средняя доза варианта 4
11
191 ,71
п 72,95-
288,82 п 37,09"
Низкая доза варианта 4
11
152,44 п 76,81
Пароксетин
11
181 ,87
Модельная rруппа (контроль)
11
111,21 п 82,93
236,88 п 74,17
терапевтическая
11
211,46 п 82,10*
292,82 п 14,37,
Группа
Ложная
период
дня
п 90,54-
период
второго дня (секунд)
271,18 гl 38,61
265,00 п 65,з9
группа
По сравнению с контрольной группой: -Р < 0,05 и *-Р < 0,01
.
Вывод: Результат эксперимента 8 демонстрирует, что высокая доза варианта
4
может заметно улучшать рост горизонтальных и вертикальных движений крыс,
вызванных поражением обонятельных луковиц, и средняя доза варианта 4 таюке
имеет заметное улучшенное действие на рост вертикального
вызываемого моделью поражения обонятельных луковиц
движения,
у крыс. Кроме
того,
высокая и средняя дозы варианта 4 обладают заметными улучшенными эффектами
на снижение функции обучения и памяти у крыс, вызываемую
поражением
обонятельных луковиц.
Эксперимент 9: Влияние варианта 4 в эксперименте непредсказуемых
длительных стимулов у крыс
9. 1
Экспериментальные животные:
з1
вY
2017б
с1
201б.0б.30
Модель непредсказуемых длительных стимулов: самцов крыс Health Wistar,
вторичные, 240
-
270 г массы тела, приобретают у Beijing Vital River Experimenta|
Апimаl Тесhпоlоgу Ltd. Со. (Номер сертификата качества: SCXK (JlNG) 2002-2003).
9.2
варианта
Реагенты и фармацевтические препараты: Фармацевтический препарат
4
обеспечен Beijing Wоппеr Biotech Ltd. Со. (Lot: 060313) и пароксетин
является продуктом компании Zhong Mei Tianjin Smith Кliпе pharmaceuticals Со. Ltd.
(Lot: 0405001 '1). Вышеуказанные лекарственные препараты получают в 0,5% натрий-
карбоксиметилцеллюлозе (CMC-Na) для введения в желудок. Бензилпенициллин
для инъекции представляет собой продукr North Сhiпа Pharmaceutical
Huasheng Со. Ltd. (Lot 50511204) и стандарты норэпинефрин (NE) и 5натрия
гидротриптамин (5-НТ) являются продуктами Sigma Со., !ругие реагенты являются
поставленными.
9,3 Оборудование: Самодельная камера для изучения поведения в открытом
поле, сryпенька через камеру, стереотаксический инструмент для
высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭХС(, HPLC)
и
крыс,
10_канальный
помехоустойчивый Фlетчик для :l-ра/циации (тип: DFM-96).
9.4 Метод эксперимента:
9,4.1 !еление на группы
произвольно делят на
группа (контроль);
варианта
(2
4
б
групп
,1
и
введение лекарственного средства: Крыс
. Ложная терапевтическая группа; 2. модельная
З. высокая доза варианта 4 (60 мг/кйень); 4. средняя
доза
(30 мгiкгlдень); 5. низкая доза варианта 4 (15 мг/кйень); и 6. пароксетин
мг/кг/день). Тестируемые лекарственные средства
и
положительное
лекарственное средство готовят с 0,5% CMC-Na для введения в желудок раз в день.
9.4.2 Способ получения модели:
Модель непредсказуемых длительных стимулов: Крысы в контрольной группе
едят и пьют нормально, и нет никаких выполненных стимулов, В других 5 группах
вY
одна крысу кормят
2017б
в к (qой
с1
201б.0б.30
клетке
и
крысу подвергают
24-дневным
непредсказуемым стресс/стимулам, в том числе 24-часовой абсистенции 3 раза,24-
часов без питья
3
раза, 24-часовая влажная подстилка
3 раза
(200 мл воды
выливают в клетку крысы), освещение всю ночь 3 раза, плавание при
5 минrr 3 раза, нагревание при
45Е
в
4'С
в течение
дцовке в течение 5 минр 3 раза, наложение
зажимов на хвост крысы в течение 'l минры 3 раза и 30-минутная высокоскоростное
встряхивание
в
горизонтальном направлении
произвольно ках(дый день и всего 24
дня,
3
раза. Один стимул выполняют
Ках(qый стимул не может выполняться
постоянно, Фармацевтический препарат подают в желудок крысы один раз в день
и
всего 24 дня.
9.5 Показатель визуального наблюдения:
9.5,1 Эксперимент изучения поведения
в
открытом поле: Такой же, как
вышlеуказанный.
9.5.2 Эксперимент пассивного избегания: Такой же, как вышеуказанный.
9.5.3 Плавание крыс в тесте принудительного плавания: flанный эксперимент
продолжают
в течение двух дней после последнего введения
лекарственного
средства. На первый день эксперимент выполняют предварительно в течение
15
минуг. Темпераryра воды в стеклянном резервуаре составляет 25'Ю и глубина воды
составляет 25 см. Через 24 часа формальный эксперимент продолжают. Через 1 час
после введения лекарственного средства крысу помещают в резервуар
и
регистрируют время неподвижности крысы для последних 5 минр.
9.5.4 Измерение массы тела: Сравнивают возрастающие значения до и после
ках(дого эксперимента с животными.
9.5.5 Объемный тест питья сахарозы: Сравнивают объемы поглощенной
крысами сахарозы. Крысы
в
кащдой группе пьют 1% сахарозу в течение 1 часа.
Объемы питья определяют до стимула
и
зз
после 3 недель стимула. После того как
вY
2017б
с1
201б.06.з0
крыса находится в абсистенции и в воде в течение 14 часов, в клетку помещают 1%
сахарозу и заменяют на обычную питьевую воду. Измеряют и регистрируют разницу
веса бугылки до и после питья сахарозы крысой в течение 1 часа и высчитывают
объем выпитой сахарозы для каждого момента времени. Сравнивают объем
поглощенной сахарозы для кащдого момента времени.
9.5.6 ВЭЖХ-электрохимически й тест: Измеряют количества норэпинефрина и
5-гидротриптамина в коре головного мозга крысы.
9.6 Статистический расчет: Экспериментальные данные представляют в виде
х t so
,и
результат эксперимента вычисляют
в виде
дисперсионного анализа
ANOVA с помощью пакета программ обработки статистических данных SPSS
1
1.5.
9.7 Результат эксперимента:
9.7.1 Объемный тест питья сахарозы: См., таблицу 10.
Таблица '|0, Объем сахарозы, поглощенной крысой в модели непредсказуемых
длительных стимулов
Группа
Число
объем
животных
сахарозы (г)
поглощенной
Высокая доза варианта 4
13
22,55 п 5,03
Средняя доза варианта 4
13
26,53 п 4,99*
Низкая доза варианта 4
13
26,97 п 6,93*
Пароксетин
13
26,29 п 4,87--
Модельная группа (контроль)
13
19,42 п 4,25
Ложная
13
29,41 п 3,83*
терапевтическая
группа
По сравнению с контрольной группой: -Р < 0,05 и --Р < 0,01
,
9.7.2 Результат увеличения массы тела крысы: См., таблицу 11.
Таблица
11
,
Увеличение массы тела крысы
в
модели непредсказуемых
длительных стимулов
Груп па
Число
Увеличение массы тела
з4
(г)
BY
20176
Cl
2016.0б.30
животных
Высокая доза варианта 4
13
86,08 п 10,84
Средняя доза варианта 4
13
96,00
Низкая доза варианта 4
13
95,15 п 15,46*
Пароксетин
,13
96,85
Модельная группа (контроль)
13
84,92.
Ложная
13
терапевтическая
t,l1,05*
.
9,30-12,61
120,54 п ,l0,60*
группа
По сравнению с контрольной группой: -*Р < 0,01
.
9.7.3 Время неподвижности крысы при принудительном плавании: см., таблицу
12,
Таблица '12. Время неподвижности
в
модели непредсказуемых длительных
стимулов
в
тесте принудительного плавания крыс
Ч
Группа
исло
Время
животных
неподвижности
(секунд)
Высокая доза варианта 4
13
23,28 п 18,05--
Средняя доза варианта 4
13
18,95 п 12,55--
Низкая доза варианта 4
13
25,20 п 13,60"
Пароксетин
13
31
Модельная группа (контроль)
13
39,95 п 17,46
Ложная
13
26,96 п 12,76"
терапевтическая
,з8 п 19,59
группа
По сравнению с контрольной группой: *Р < 0,05 и --Р < 0,01.
9.7.4 Результат эксперимента поведения в открытом поле: см., таблицу 13.
з5
BY
20176
с|
2016.0б.30
Таблица 1З. Результат модели непредсказуемых мительных стимулов
в
эксперименте поведения в открытом поле
Горизонтальное
движение
(число пересеченных
квадратов)
58,31 п 15,з5-
Число
Группа
животных
Вертикальное
(число
вертикальных
стоек)
движение
1в,54.4,24*
Высокая доза варианта 4
14
Средняя доза варианта 4
14
49,15 п 14,26
13,54 Il 4,48
Низкая доза варианта 4
14
52,62
.
21,83
16,15 п 7,32"
Пароксетин
14
6,1,85 п
21,68*
14,69
группа
14
39,54 t-l ,l6,31
терапевтическая
14
64,00 п
Модельная
11
4,2
11,46 п з,26
(контроль)
Ложная
11,97*
16,85 п 3,18*
группа
По сравнению с контрольной группой: -Р < 0,05 и *-Р < 0,01
.
9.7.5 Результат эксперимента пассивного избегания крысы: см. таблицу 14.
Таблица 14, Результат модели непредсказуемых длительных стимулов
эксперименте пассивного избегания крыс
латентный
животны
первого
х
(секунд)
Высокая доза варианта 4
13
65,43
Средняя доза варианта 4
1з
58,18 _ 18,0
212,76 п 77,27
Низкая доза варианта 4
1з
75,98
з2,22"
204,85 п 94,99
Пароксетин
13
75,75
46,52-
257,46 п 66,92
группа
13
50,01
15,7
189,25 п
терапевтическая
13
в0,00 п
39,17-
263,38 п 59,68
Модельная
г
-
,
(контроль)
Ложная
период
Латентный
Число
Группа
дня
31,44
группа
По сравнению с контрольной группой: *Р < 0,05 и -*Р < 0,0,t
36
период
второго дня (секунд)
259,22 п 56,51
,l
11,99
в
вY
2017б
с1
201б.0б.30
9.7.6 Результат содержания NE и 5-НТ в коре rоловного мозга крысы: см.,
таблицу 14.
Таблица 14. Результат содержания NE и 5-НТ в коре головного мозrа крысы
модели непредсказуемых мительных стимулов
Число
(нмоль/л
5-нт
экстракта
мозговой
животны
Группа
4
Высокая доза варианта
Средняя доза варианта
Низкая доза варианта
х
12
NE
экстракrа
ткани)
(нмоль/л
мозговои
+
269,5409
t 58,86389*
+
227
t
201,В688
*
220,5419 t 38,31681*
ткан и)
230,4157
в
47,78554-
4
12
303,4418
70,з1711*,
4
12
З32,7343
,2s76 t 28,95101"-
t 29,80775*
76,25168*
Пароксетин
12
Модельная
(контроль)
группа 12
Ложная терапевтическая
12
227,0637
46,53838,l79,3866 !2о,49з74
228,1478
t
57,667,|
132,8598
t 77,66958
t 20,84756--
28,40з97-
группа
По сравнению с контрольной группой: *Р < 0,05 и *-Р < 0,01.
Вывод: Результаты эксперимента
дозы варианта
4 могр
снижать массу тела
в
9
представлены ниже. Средняя и низкая
заметно повышать сниженный объем питья сахарозы
и
непредсказуемых длительных стресс/стимулах. Высокая,
средняя и низкая дозы варианта 4 все заметно повышают время неподвижности в
тесте принудительного плавания крыс, Высокая доза варианта 4 может заметно
улучшать пониженные горизонтальные и вертикальные движения крыс, вызываемые
непредсказуемыми длительными стресdстимулами. Низкая доза варианта 4 таюке
обладает заметной функцией улучшения пониженного вертикального движения крыс,
вызываемого непредсказуемыми длительными стресdстимулами. Низкая доза
варианта 4 обладает функцией улучшения на сниженную способность к обучению
з7
вY
20176
с|
201б.0б.30
крыс, вызываемую непредсказуемыми длительными стресс/стимулами. Высокая,
средняя и низкая дозы варианта 4 все заметно повышают содержание NE и 5-НТ в
коре головного мозга крысы.
Эксперимент 10: Влияние варианта 4 в эксперименте перемещений мышей из
светлого в темный отсек
10.1 Экспериментальные животные: мыши Kunming (КМ), самцы, масса тела
24
-
26 г, вторичные, предоставлены Научным департаментом экспериментальных
животных Столичного медицинского университета, Пекин,
,l0.2 Экспериментальные лекарственные препараты: лекарственный препарат
варианта 1 предоставлен компанией Beijing Wоппеr Biotech. Ltd. Со., и пароксетин
(паксил) является продуктом компании и диазепам является продукгом компании
Tianjin Jinhuei Amino Acid Со. Ltd.
10.3 Экспериментальное оборудование: Самодельная камера
для
перемещений мышей из светлого в темный отсек,
10.4 Виды доз: 1 . Высокая доза варианта 4 (80 мг/кйень); 2. средняя доза
варианта
4
(40 мг/кгlдень); и З. низкая доза варианта 4 (20 мг/кг/день).
10.5 Экспериментальный метод и результат:
,10,5.,1
!еление на группы и введение лекарственного средства: Мышей
произвольно делят на 5 групп, и в каlцдой группе находится 10 мышей. 1. Высокая
доза варианта 4 (80 мг/кг); 2. средняя доза варианта 4 (40 мг/кг); 3. низкая доза
варианта 4 (20 мг/кг); 4. диазепам (2,5 мг/кг); и 5. физиологический раствор (0,9%
раствор хлорида натрия, NS). Лекарственные средства вводят в желудок мыши один
раз в день и вводят мышам в течение последующих 7 дней, В период введения
мышь ест и пьет обильно, и эксперимент продолжают спустя 1 час после последнего
введения лекарственного средства на восьмой день.
jl]
вY
10.5.2 Э кспер
и м
2017б
ентал ьн
ы
с1
201б.06.30
й метод:
Перемещение мышей в тесте темно-светлая камера: Темная камера занимает
одну треть пространства камеры перемещения из темного в светлый отсек (44 см ?
21 см
? 21 см) и верх
закрыт. Светлая камера занимает две трети пространства и
является ярко освещенной. Дверь ме)1ду двумя камерами располагают для прохода
мыши, Мыtль помещают в центр светлой камеры в начале теста, и заднюю часть
мыши в темную камеру. Определяют число раз, которые мышь проникает в темную
камеру и возвращается в светлую камеру в течение 10 минут, и данное число раз
является показателем оценки подавляющей тревоry функции лекарственных
средств.
10.5.3 Статистический расчет: Экспериментальные данные представляют в
виде 7 t sD , и результат эксперимента вычисляют в виде дисперсионного анализа
ANOVA с помощью пакета программ обработки статистических данных SPSS 11.5.
10.5.4 Результат эксперимента: см. таблицу16.
Таблица 16. Влияние варианта 4 на число раз перемещения в мыluином тесте
темно-светлая камера
Группа
Высокая доза варианта 4
Число
животных
10
Число прохощцений из
камеры в светлую камеру
11,6 L 4,53
Средняя доза варианта 4
10
13,9
Низкая доза варианта 4
10
13,4
г 4,12--
!иазепам
Физиологический раствор
,10
11,7
|
10
6,8 f, 3,85
(контроль)
темной
3,76*
4,47-
По сравнению с контрольной группой: -Р < 0,05 и -*Р < 0,01.
10.6 Описание: Перемещение
в
эксперименте
в
темно-светлой камере,
принятом в данном эксперименте, строится на основе врощqенной ненависти мыши
яркому свеry
и
свободному ориентировочно-исследовательскому
к
харакгеру
поведения в новых окружающих условиях. Клинический фармацевтический препарат
з9
BY
201,1б
с|
201б.Oб.30
(диазепам) для лечения тревоги у людей и вариант 4 имеют прекрасную корреляцию
относительно улучшения функции свободного ориентировочно-исследовательского
характера поведения мыши в данной модели. В соответствии с вышеприведенным
экспериментом может быть обнаруrкено, что высокая, средняя
и
низкая дозы
варианта 4 данного изобретения и диазепам все существенно увеличивают число
в светлую камеру и имеют
прохощдений мыllJи из темной камеры
статистически
достоверные значения при сравнении с физиологическим раствором. В результате
эксперимента было доказано, что вариант
4
обладает подавляющим тревоry
эффекгом.
10.7 Вывод: В соответствии
высокая, средняя
и
с
вышеизложенным результатом эксперимента,
низкая доэы варианта
4
данного изобретения
и
диазепам
существенно увеличивают число прохо)t(дений мыцlи из темной камеры в светлую
камеру, В соответствии
с
результатом вариант 4 обладает подавляющим тревоry
свойством.
Эксперимент 11: Влияние варианта 5 в эксперименте подвешивания мыши за
хвост
11,1
Экспериментальные лекарственные препараты: фармацевтический
препарат варианта
5
предоставлен компанией Beijing Wоппеr Biotech. Ltd. Со.
(опытный продуlст накопления) и пароксетин является продуктом компании Zhong Mei
Tianjin Smith Кliпе pharmaceuticals
Со. Ltd (Lot:
05070384). Вышеуказанные
фармацевтические препараты готовят с физиологичеGким раствором для подачи в
желудок.
11.2 Экспериментальные животные: мыши lCR, с€lмцы,
масса тела 20,0
!
1
г,
вторичные, предоставлены Научным департаментом экспериментальных животных
40
BY
20176
с1
201б.0б.30
Столичного медицинского университета, Пекин. Номер сертификата качества мышей
представляет собой SCXK (JlNG) 2006-2008.
1
1.3 Экспериментальное оборудование; Секундомер.
11.4
Метод: Семьдесят (70) мышей произвольно делят на 5 групп: группа
физиологический солевой раствор (NS), пароксетин (3 мг/кг/день), высокая доза
варианта 5 (80 мг/кйень), средняя доза варианта 5 (40 мг/кг/день) и низкая доза
варианта 5 (20 мг/кг/день). Лекарственные препараты вводят в желудок мыши раз в
день. Через 1 час после последнего введения лекарственного средства на восьмой
день хвост мыши (1 см до кончика хвоста) приклеивают липкой лентой
горизонтальной опоре
в
и мышь
открытой камере,
находится
в
к
перевернrгом
висячем положении. Голова мыши находится приблизительно на 10 см ниже дна
открытой камеры, и мышь находится в подвешенном состоянии в течение б минр.
Регистрируют неподвижность мыlли в течение последних 5 минр.
1,1.5
Гt
Статистический рас"]ет: Экспериментальные данные представляют в виде
sл , и результат эксперимента вычисляют в виде однонаправленного ANOVA с
помощью пакета программ обработки статистических данных SPSS 11.5.
11.6 Результат эксперимента: Результат времени неподвижности
эксперименте подвешивания мыши за хвост: см. таблицу 17.
Таблица 17. Влияние варианта на 5 суммарное время неподвижности
!оза
мы1,1Jи
Группа
Число
животных
Высокая доза варианта 5
14
80
64,75 п 42,22*
Средняя доза варианта 5
14
4о
55,41 п 33,83--
Низкая доза варианта 5
14
20
Пароксетин
14
3
62,75126,61-"
53,27 .20,02--
Группа
14
физиологического
раствора (NS)
(
м
г/кг/ден ь
)
Время неподвижности
(секунд)
113,59 п 36"1
По сравнению с группой NS: -Р < 0,05 и *-Р < 0,01.
4l
1
в
вY
201,76
с|
2016.06.30
Вывод: Результат исследования демонстрирует, что высокая, средняя
и
низкая дозы варианта 5 и клинически эффекгивное антидепрессивное лекарственное
средство, пароксетин заметно снижают суммарное время неподвижности мы[ли,
подвешенной за хвост. Результат показывает, что вариант 5 данного изобретения
обладает в эксперименте антидепрессивной способностью.
Эксперимент 12: Влияние варианта 5 в эксперименте принудительного
плавания мышей
12.1
Экспериментальные лекарственные препараты: фармацевтический
препарат варианта
5
предоставлен компанией Beijing Wоппеr Biotech. Ltd. Со.
(опытный продукr накопления) и пароксетин является продуlстом компании Zhong Mei
Tianjin Smith Kline pharmaceuticals Со. Ltd
(Lot
05070З84). Вышеуказанные
фармацевтические препараты готовят с физиологическим раствором для подачи в
желудок.
,l2.2 Экспериментальные животные: мыши lCR, самцы, масса тела 20,0 П 1
г,
вторичные, предоставлены Научным департаментом экспериментальных животных
Столичного медицинского университета, Пекин. Номер сертификата качества мышей
представляет собой SCXK (JlNG) 2006-200В.
12.3 Экспериментальное оборудование: Секундомер.
12.4 Метод эксперимента: Группы мышей и введение лекарственного средства
являются такими же, как и в эксперименте
с
подвешиванием мыши за
хвост.
В
кащцой группе тестируемых мышей продолжают эксперимент через '1 час после
введения лекарственного средства. Мышей учат плаванию в течение 15 минуг перед
экспериментом
и на восьмой день. Эксперимент выполняют за 24 часа.
помещают в воду при
25t
Мышей
в стеклянный резервуар, имеющий глубину воды 10 см,
12
вY
2017б
с1
201б.0б.30
диаметр 14 см. Регистрируют суммарное время неподвижности в течение поGледних
5 минут.
'l2.5 Статистический раоlет: Экспериментальные данные представляют в виде
Г+ so , и результат эксперимента вычисляют в виде однонаправленного ANOVA с
помощью пакета программ обработки статистических данных SPSS
12.6 Результат
11
.5.
эксперимента: Результат принудительного плавания мышей:
см. таблицу 18.
Таблица 18. Влияние варианта 5 на время принудительного плавания мышей в
тесте
Доза
Высокая доза варианта 5
Число
животны
х
14
в0
вв,35
Средняя доза варианта 5
14
40
65,в7 п 38,96*
Низкая доза варианта 5
14
2о
88,12
Пароксетин
14
J
57,80 t] 38,07--
Группа
14
Группа
физиологического
раствора (NS)
(мг/кг/день)
Время
(секунд)
неподвижности
f
]
132,47
По сравнению с группой NS: -Р < 0,05 и *-Р < 0,01
5,t,64-
38,57-
-
40,64
.
Вывод: Результат эксперимента показывает, что высокая, средняя и низкая
дозы варианта
5и
клинически эффекгивное антидепрессивное лекарственное
средство пароксетин заметно снижают суммарное время неподвижности мышей
в
тесте принудительного плавания. Результат показывает, что вариант 5 данного
изобретения обладает в эксперименте антидепрессивной способностью.
Эксперимент
13:
Девять (9) кг оставшегося продукта женьшеня и 7 кг оставшегося продукта
солодки, экстрагированных из варианта
1 и варианта 4, собирают,
высушивают,
измельчают в порошок и хорошо перемешивают для получения смеси продуктов,
43
вY
20176
Cl
2016.06.30
содержащей следовые количества гинзенозидов Rg1
и Rb1,
глицирризиновой
кислоты и цАМФ ююбы. Проводят контрольный эксперимент влияния в эксперименте
подвешивания мыши за хвост.
1З.1 Экспериментальные животные: мыlчи lCR, с€lмцы,
масса тела 22,0 a 2
r,
вторичные, предоставлены Научным департаментом экспериментальных животных
Столичного медицинского университета, Пекин.
1З,2 Экспериментальные лекарственные препараты: Смесь
остатков
продукгов предоставлена компанией Beijing Wоппеr Biotech. Ltd. Со.и пароксетин
(паксил) является продуктом компании Zhong Mei Тiапjiп Smith Kline pharmaceuticals
Со. Ltd.
13.3 Экспериментальное оборудование: Секундомер.
13.4 Виды доз: 1 . Высокая доза смеси остатков продуктов (160 мг/кйень); 2,
средняя доза смеси остатков продуктов (80 мг/кг/день) и 3. низкая доза смеси
остатков продуктов (40 мг/кйень).
13.5 Экспериментальный метод и результат:
13.5.1 [еление
на группы и введение
лекарственного средfiва: Мышей
произвольным образом распределяют, по 10 мыщей находится в кащqой rруппе.
1.
Высокая доза смеси остатков продуктов (160 мг/кг, Р.О., вводят в течение 7 дней):2.
средняя доза смеси остатков продукrов (80 мг/к, Р.О., вводят в течение 7 дней); 3.
низкая доза смеси остатков продуктов (40 мг/кг, Р.О., вводят в течение 7 дней); 4.
пароксетин (3 мг/кг, Р.О., вводят в течение 7 дней) и 5. физиологический раствор
(Р.О.). Через 1 час после последнего введения лекарственного средства проводят
эксперимент подвешивания мыtли за хвост.
13.5,2 Метод эксперимента: Хвост мыtли
(,1
см до кончика хвоста) приклеивают
липкой лентой к деревянной планке на 5 см выше чем платформа,и подвешивают на
6 минуг. Регистрируют время неподвижности мыtlJи в течение последних 5 минр.
14
вY
2017б
с1
2016.0б.30
13.5.3 Статистический расчет: Экспериментальные данные представляют в
виде
7t
sD
,и
результат эксперимента вычисляют
в виде
однонаправленного
ANOVA с помощью пакета программ обработки статистических данных SPSS 11.5.
1З.5.4 Результат эксперимента: см. таблицу 19.
Таблица 19. Влияние смеси остатков продуктов на время неподвижности мышей
Ч
Группа
исло
животных
Ф ИЗИОЛОгичеСкий РаСТВОР 1о
(контроль)
,10
Пароксетин
Высокая доза смеси остатков
продуктов
Низкая доза смеси остатков
продуктов
неподвижности
82,03
l
43,01
зв,37 ] 20,76-
,10
76,91
10
7в,в9 , l 48,18
10
81,31 U 58,68
продуlстов
Средняя доза смеси остатков
Время
(секунд)
]
31 ,09
По сравнению с контрольной группой: -Р < 0,05 и -*Р < 0,01.
Вывод: В соответствии с вышеприведенным экспериментом может быть
и низкая доза смеси остатков продуктов
обнаружено, что хотя высокая, средняя
могуг сокращать время неподвижности подвешенной за хвост мыши, данные три
группы не имеют статистической значимости по сравнению
с
физиологическим
раствором (контроль), Таким образом, смесь остатков продукгов может быть
экстраполирована как лишенная антидепрессивной функции в эксперименте.
Промышленная применимость:
Область применения фармацевтической композиции данного изобретения для
лечения депрессии и тревожного расстройства состоит в том, что:
1. описанная фармацевтическая композиция данного изобретения
депрессии и тревожного расстройства может включать в
приемлемую добавку;
;+
_5
себя
мя
лечения
фармакологически
вY
20176
Cl
2016.0б.30
2. описанная фармацевтическая композиция данного изобретения
мя
лечения
депрессии и тревожного расстройсrва может быть изготовлена в виде известных
лекарственных форм, таких как порошок, капсула, таблетка иr,д.,, и
3. описанная фармацевтическая композиция данного изобретения для лечения
депрессии и тревожного расстройства может быть изготовлена
в виде
продукга
лечебного питания для лечения депрессии и тревожного расстройства,
Тогда как изобретение было описано в контексте того, что, как полагают в
настоящее время, является наиболее практичными и предпочтительными
вариантами изобретения, HyDKHo понимать, что изобретение
не должно
быть
ограничено раскрытыми вариантами изобретения. Напротив, изобретение
предназначено
включенных
для
покрытия различных модификаций
в рамки сущности и объема
и подобных
композиций,
приложенной формулы изобретения,
которые должны согласовываться с самой ч.lирокой интерпретацией, чтобы охватить
вс€ такие модификации и аналогичные струкгуры.
LIациоtlаtьньй IlcI{Tp иtI,I,сJI]Iек,rуа,;Iт,rrой собствеrrrrос,ги
220О34, г. Миltск, ул. Коз;lова,20,
Документ
Категория
Без категории
Просмотров
0
Размер файла
13 047 Кб
Теги
by20176, патент
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа