close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

соединения феноксикарбоновой кислоты и композиции для доставки активных веществ

код для вставки
РОССИЙСКАЯ ФЕДЕРАЦИЯ
RU
(19)
(11)
2 300 516
(13)
C2
(51) МПК
C07C 59/68
C07C 59/90
C07C 65/24
C07C 65/40
C07C 205/37
ФЕДЕРАЛЬНАЯ СЛУЖБА
C07C 217/84
ПО ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ,C07C 233/25
ПАТЕНТАМ И ТОВАРНЫМ ЗНАКАМ
C07C 235/46
A61K 38/21
A61K 38/23
(12)
(45) Опубликовано: 10.06.2007 Бюл. № 16
(73) Патентообладатель(и):
ЭМИСФЕРЕ ТЕКНОЛОДЖИЗ, ИНК. (US)
(85) Дата перевода за вки PCT на национальную фазу:
05.06.2002
(86) За вка PCT:
US 00/30662 (06.11.2000)
(87) Публикаци PCT:
WO 01/32596 (10.05.2001)
Адрес дл переписки:
190068, Санкт-Петербург, ул. Садова , 51,
офис 303, пат.пов. М.И.Ниловой рег.№ 378
(54) СОЕДИНЕНИЯ ФЕНОКСИКАРБОНОВОЙ КИСЛОТЫ И КОМПОЗИЦИИ ДЛЯ ДОСТАВКИ
АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ
(57) Реферат:
Изобретение относитс к новым соединени м,
предназначенным дл доставки активных веществ
к ткан м, следующей формулы
Страница: 1
C 2
(56) Список документов, цитированных в отчете о
поиске: US 4412041 A, 25.10.1983. EP 0548711
A1, 30.06.1993. US 4410537 A, 18.10.1983. US
4499299 A, 12.02.1985. US 5783593 A,
21.07.1998. DE 3206030 A1, 09.09.1982.
CASSEBAUM H. «Radiopaque media based on
iodinated phenoxy fatty acids» CHEMICAL
ABSTRACTS, 1964, vol 56, p.7191. US 5747537
A, 05.05.1998. SU 668569 A, 15.06.1979. SU
730270 A, 28.04.1980. SU (см. прод.)
2 3 0 0 5 1 6
(43) Дата публикации за вки: 27.11.2003
C 2
(2006.01)
(2006.01)
(2006.01)
(2006.01)
R U
(30) Конвенционный приоритет:
05.11.1999 US 60/163,806
2 3 0 0 5 1 6
38/27
38/28
47/12
47/18
(72) Автор(ы):
ЛЕОНЕ-БЭЙ Андреа (US),
КРАФТ Келли (US),
МОЙЕ-ШЕРМАН Дестарди (US),
ГШНАЙДНЕР Дэвид (US),
БОЙД Мари А. П. (US),
ЛИУ Пучун (US),
ТАНГ Пингвах (US),
ЛИАО Дзун (US),
СМАРТ Джон Е. (US),
ФРИМЭН Джон Дж. мл. (US)
(24) Дата начала отсчета срока действи патента:
06.11.2000
R U
A61K
A61K
A61K
A61K
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ
(21), (22) За вка: 2002114698/04, 06.11.2000
RU
(2006.01)
(2006.01)
(2006.01)
(2006.01)
(2006.01)
(2006.01)
(2006.01)
(2006.01)
(2006.01)
(2006.01)
где значени дл радикалов R 1-R 7 определены
в п.1 формулы, и их фармацевтически приемлемым
сол м. Изобретение относитс также к
композици м, предназначенным дл доставки
активных веществ к ткан м, содержащим: (А)
активное вещество и (В) по меньшей мере, одно
соединение, предназначенное дл доставки
активного вещества к ткан м животного, формулы
где значени дл радикалов R 1-R 7 определены
в пп.3-5 формулы. Данное изобретение относитс также к стандартной лекарственной форме,
предназначенной дл доставки активных веществ к
ткан м организма, способу получени указанных
композиций и введени активных веществ дл их
доставки к ткан м организма. 9 н. и 14 з.п. ф-лы,
11 табл.
(56) (продолжение):
824892 A, 23.04.1981. SU 544353 A, 15.05.1977. SU 577256 A, 09.11.1977. SU 170782 A, 10.05.1965. SU
1825378 A3, 30.06.1993. SU 876058 A, 23.10.1981. SU 798091 A, 25.01.1981. SU 656501 A, 05.04.1979. SU
299048 A, 09.08.1971. EP 0555938 A1, 18.08.1993. US 5824638 A, 20.10.1998. US 5585379 A, 17.12.1996.
R U
R U
2 3 0 0 5 1 6
C 2
C 2
2 3 0 0 5 1 6
Страница: 2
RUSSIAN FEDERATION
RU
(19)
(11)
2 300 516
(13)
C2
(51) Int. Cl.
FEDERAL SERVICE
FOR INTELLECTUAL PROPERTY,
PATENTS AND TRADEMARKS
(12)
C07C 59/68
C07C 59/90
C07C 65/24
C07C 65/40
C07C 205/37
C07C 217/84
C07C 233/25
C07C 235/46
A61K 38/21
A61K 38/23
A61K
A61K
A61K
A61K
(2006.01)
(2006.01)
(2006.01)
(2006.01)
(2006.01)
(2006.01)
(2006.01)
(2006.01)
(2006.01)
(2006.01)
38/27
38/28
47/12
47/18
(2006.01)
(2006.01)
(2006.01)
(2006.01)
ABSTRACT OF INVENTION
(21), (22) Application: 2002114698/04, 06.11.2000
(86) PCT application:
US 00/30662 (06.11.2000)
(73) Proprietor(s):
EhMISFERE TEKNOLODZhIZ, INK. (US)
(24) Effective date for property rights: 06.11.2000
(30) Priority:
05.11.1999 US 60/163,806
(43) Application published: 27.11.2003
Mail address:
190068, Sankt-Peterburg, ul. Sadovaja, 51,
ofis 303, pat.pov. M.I.Nilovoj reg.№ 378
C 2
C 2
(87) PCT publication:
WO 01/32596 (10.05.2001)
ACTIVE SUBSTANCES
(57) Abstract:
FIELD: organic chemistry, pharmacy, pharmacy.
SUBSTANCE:
invention
relates
to
novel
compounds designated for delivery of active
substances to tissues of the following formula:
wherein
R U
2 3 0 0 5 1 6
(54) PHENOXYCARBOXYLIC ACID COMPOUNDS AND COMPOSITIONS FOR DELIVERY OF
values of radicals R 1-R 7 are determined in claim 1
of
the
invention
claim,
and
to
their
pharmaceutically
acceptable
salts.
Also,
invention relates to compositions designated for
delivery of active substances to tissues and
containing: (A) active substance and (B) at least
one compound designated for delivery of active
substance
to
animal
tissues
of
the
formula:
wherein
values of radicals R 1-R 7 are determined in claims 35 of the invention claim. Also, proposed
invention
relates
to
a
standard
medicinal
formulation designated for delivery of active
substances to body tissues and to a method for
preparing
indicated
compositions
and
administration of substances for their delivery
to body tissues.
EFFECT: valuable properties of compounds.
23 cl, 11 tbl, 11 ex
Страница: 3
EN
2 3 0 0 5 1 6
(45) Date of publication: 10.06.2007 Bull. 16
R U
(85) Commencement of national phase: 05.06.2002
(72) Inventor(s):
LEONE-BEhJ Andrea (US),
KRAFT Kelli (US),
MOJE-ShERMAN Destardi (US),
GShNAJDNER Dehvid (US),
BOJD Marija A. P. (US),
LIU Puchun (US),
TANG Pingvakh (US),
LIAO Dzun (US),
SMART Dzhon E. (US),
FRIMEhN Dzhon Dzh. ml. (US)
RU 2 300 516 C2
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
Область техники
Насто щее изобретение относитс к соединени м феноксикарбоновой кислоты,
предназначенным дл доставки активных веществ, таких как биологически или химически
активные вещества, к ткан м-мишен м. Указанные соединени пригодны дл образовани нековалентных смесей с активными веществами, предназначенными дл перорального,
внутрикишечного, легочного и других способов введени лекарственных средств животным.
Данное изобретение относитс также к способам получени и введени таких композиций.
Предпосылки изобретени Применение известных средств доставки активных веществ к ткан м часто ограничено
биологическими, химическими и физическими барьерами. Указанные барьеры обычно
создаютс средой, в которой производитс доставка, средой, окружающей ткани-мишени,
куда осуществл етс доставка, и/или самими ткан ми-мишен ми. Биологически и
химически активные вещества особенно чувствительны к таким барьерам.
В организме животного существуют различные барьеры, преп тствующие
проникновению биологически и химически активных фармакологических и лекарственных
средств. В качестве примеров физических барьеров можно привести кожу, двойные
липидные слои и оболочки различных органов, которые вл ютс относительно
непроницаемыми дл некоторых активных веществ, но должны быть преодолены на пути к
мишен м, таким как сердечно-сосудиста система. Химические барьеры включают, но не
ограничиваютс ими, разные значени рН в желудочно-кишечном тракте (GI) и
расщепл ющие ферменты.
Преодоление указанных барьеров особенно важно при создании пероральных систем
доставки лекарственных средств. Пероральное введение многих биологически или
химически активных веществ вл етс предпочтительным способом введени лекарственных средств животным, если ему не преп тствуют биологические, химические и
физические барьеры. К многочисленным средствам, которые обычно непригодны дл перорального введени , относ тс биологически или химически активные пептиды, такие
как кальцитонин и инсулин; полисахариды и, в частности, мукополисахариды, включающие,
но не ограничивающиес ими, гепарин; гепариноподобные вещества; антибиотики и другие
органические вещества. Указанные средства быстро станов тс неэффективными или
разрушаютс в желудочно-кишечном тракте под действием кислотного гидролиза,
ферментов и тому подобное. Кроме того, всасыванию могут преп тствовать размер и
структура макромолекул рных лекарственных средств.
Нестойкие фармацевтические средства ранее вводили вместе с адъювантами
(например, резорцинами и неионогенными поверхностно-активными веществами, такими
как полиоксиэтилен-олеиловый эфир и н-гексадецилполиэтиленовый эфир), позвол ющими
искусственно улучшить проницаемость стенок кишечника, а также с ингибиторами
ферментов (например, ингибиторы трипсина поджелудочной железы, диизопропилфторфосфат (DFF) и тразилол), позвол ющими ингибировать ферментативное
расщепление. В качестве систем доставки, инсулина и гепарина используют также
липосомы. Однако спектр действи таких систем доставки лекарственных средств весьма
ограничен по следующим причинам: (1) необходимость использовать адъюванты или
ингибиторы в токсических количествах; (2) отсутствие приемлемых низкомолекул рных
активных веществ; (3) плоха стабильность и недостаточный срок годности; (4)
сложность изготовлени ; (5) неспособность таких систем защитить активное вещество;
(6) неблагопри тное изменение активного вещества под действием системы; или (7)
неспособность таких систем стимулировать всасывание активного вещества.
Дл доставки фармацевтических средств недавно было предложено использовать
белковые микросферы. См., например, патенты США №№ 5401516, 5443841 и замен ющий
патент 35862. Кроме того, дл доставки лекарственных средств используют некоторые
модифицированные аминокислоты. См., например, патенты США №№ 5629020, 5643957,
5766633, 5776888 и 5866536.
Однако по-прежнему существует потребность в простых и дешевых системах доставки
Страница: 4
DE
RU 2 300 516 C2
5
10
лекарственных средств, которые можно легко изготовить и которые обеспечивают доставку
широкого спектра активных веществ при различных способах введени .
Краткое изложение существа изобретени Насто щее изобретение относитс к соединени м, облегчающим доставку активных
веществ, и/или композици м дл доставки активных веществ к ткан м организма
нуждающегос в этом животного, а также к применению вышеуказанных соединений дл доставки активных веществ к ткан м организма нуждающегос в этом животного.
Соединени дл доставки активных веществ к ткан м организма нуждающегос в этом
животного согласно насто щему изобретению включают соединени нижеследующей
формулы:
15
Где:
20
25
30
35
40
45
50
Соединение № R 1
R2
R3
R4
R5
R6
R7
1
Н Н
Н
Н
С(O)СН3
СН2
пара-Ph*
2
Н Н
Н
Н
OH
СН2
пара-Ph
5
Н Н
Н
Н
OH
(CH2)5
св зь
6
Н Н
Н
Н
OH
(СН2)6
св зь
7
Н Н
Н
Н
OH
(CH2)7
св зь
8
Н Н
Н
Н
OH
(CH2)9
св зь
9
Н Н
Н
Н
С(O)СН3
(СН2)3
св зь
10
Н Н
Н
Н
С(O)СН3
(CH2)4
св зь
11
Н Н
Н
Н
С(O)СН3
(CH2)5
св зь
12
Н Н
Н
Н
С(O)СН3
(СН2)7
св зь
18
Н Н
Н
Н
СН=СНСН3
(CH2)7
св зь
19
Н Н
Н
Н
NH2
(CH2)7
св зь
20
Н Н
Н
Н
NO2
(СН2)7
св зь
22
Н Н
Cl
Н
NH2
(СН2)7
св зь
23
Н Н
Cl
Н
NH2
(СН2)4
св зь
24
Н Н
Н
Н
NHC(O)СН3
(СН2)7
св зь
25
Н Н
Н
Н
СН=СНСО2Н
(СН2)7
св зь
26
Н Н
Н
Н
С(O)СН2СН3
(СН2)3
св зь
27
Н Н
Н
Н
С(O)СН2СН3
(СН2)5
св зь
28
Н Н
Н
Н
С(O)СН2СН3
(СН2)7
св зь
29
Н Н
Н
Н
С(O)СН2СН3
(СН2)9
св зь
30
Н Н
Н
Н
C(O)NH2
(СН2)7
св зь
31
Н Н
Н
Н
С(O)NHCH3
(СН2)7
св зь
32
Н Н
Н
Н
СООН
(СН2)7
св зь
33
Н Н
Н
Н
C(O)NHCH2CH3
(СНг)7
св зь
34
Н Н
Н
Н
С(O)NHCH(СН3)2
(СН2)7
св зь
35
Н Н
Н
Н
ОСН3
(СН2)7
св зь
36
Н Н
Н
Н
СН(ОН)СН3
(СН2)7
37
Н Н
Н
Н
С(СН3)2OH
СН2
38
Н Н
Н
OH
С(O)СН3
(СН2)7
св зь
39
Н Н
Н
ОСН3
С(O)СН3
(СН2)7
св зь
43
Н OH
Н
Н
Н
(СН2)7
св зь
44
Н OH
Н
Н
Н
(СН2)9
св зь
45
Н OH
Н
Н
Н
(СН2)5
св зь
51
Н Н
Н
Н
С(O)NHCH3
(СН2)9
52
Н Н
Н
Н
C(O)NH2
СН2
Страница: 5
св зь
пара-Ph
св зь
пара-Ph
RU 2 300 516 C2
5
10
15
20
54
Н Н
Н
Н
С(O)СН3
(СН2)9
св зь
55
Н Н
ОСН3
Н
С(O)СН3
(СН2)7
св зь
56
Н ОСН3
Н
Н
С(O)СН3
(СН2)7
св зь
57
Н Н
OH
Н
С(O)СН3
(СН2)7
св зь
58
Н Н
СН3
Н
С(O)СН3
(СН2)5
св зь
62
Н Н
С(O)СН3
Н
Н
(СН2)7
св зь
63
Н Н
С(O)СН2СН3 Н
Н
(СН2)7
св зь
64
Н С(O)СН 3 Н
Н
Н
(СН2)7
св зь
68
Н Cl
Н
Н
Н
(СН2)7
св зь
71
Н Н
Н
Н
F
(СН2)7
св зь
72
Н Н
Н
Н
ОН
(СН2)10
св зь
73
Н Н
Н
Н
Cl
(СН2)7
св зь
74
Н NO2
Н
Н
ОН
(СН2)7
св зь
75
Н Н
Н
Н
F
(СН2)4
св зь
76
Н Н
Н
Н
CF3
(СН2)4
св зь
77
F
Н
Н
F
CF3
(СН2)7
79
Н Н
Н
Н
OH
СН2СН(ОН)
(СН2)6-СН(СН 3)
св зь
пара-Ph
80
H Н
ОСН3
Н
Н
88
Н Н
Н
Н
-C(O)NH-(CH2)9-OH СН2
св зь
св зь
92
Н Н
Н
Н
-O(СН2)5СООН
(СН2)5
св зь
93
Н СН3
Н
Н
СН3
(СН2)7
св зь
94
Н СН3
Н
Н
СН3
(СН2)5
св зь
98
Н Н
Н
С(O)-NH 2 O-(СН2)7-СООН
-(СН2)7-
св зь
и их фармацевтически приемлемые соли.
* Термин «napa-Ph» означает парафенилен.
25
30
Более предпочтительные соединени без ограничени включают соединени №№5, 7,
11, 12, 43 и 75.
Данное изобретение относитс также к композиции, предназначенной дл доставки
активных веществ к ткан м организма нуждающегос в этом животного, котора содержит
по меньшей мере одно из ниже приведенных соединений, и по меньшей мере одно
активное вещество. В частности, указанное композици содержит по меньшей мере одно из
соединений формулы
35
40
45
50
выбранное из группы, включающей:
Соединение № R 1
R2
R3
R4
R5
R6
R7
1
Н Н
Н
Н
С(O)СН3
CH2
пара-Ph
2
Н Н
Н
Н
OH
CH2
пара-Ph
3
Н Н
Н
Н
OH
СН2
св зь
4
Н Н
Н
Н
OH
(СН2)3
св зь
5
Н Н
Н
Н
OH
(СН2)5
св зь
6
Н Н
Н
Н
OH
(СН2)6
св зь
7
Н Н
Н
Н
OH
(СН2)7
св зь
8
Н Н
Н
Н
OH
(СН2)9
св зь
9
Н Н
Н
Н
С(O)CH3
(СН2)3
св зь
10
Н Н
Н
Н
С(O)CH3
(СН2)4
св зь
11
Н Н
Н
Н
С(O)CH3
(СН2)5
св зь
12
Н Н
Н
Н
С(O)CH3
(СН2)7
св зь
13
Н Н
Н
Н
Н
СН2
св зь
14
Н Н
Н
Н
Н
(СН2)3
св зь
Страница: 6
RU 2 300 516 C2
5
10
15
20
15
Н Н
Н
Н
Н
(СН2)5
св зь
16
Н Н
Н
Н
Н
(СН2)9
св зь
17
Н Н
Н
Н
Н
(СН2)10
св зь
18
Н Н
Н
Н
СН=CHCH3
(СН2)7
св зь
19
Н Н
Н
Н
NH2
(СН2)7
св зь
20
Н Н
Н
Н
NO2
(СН2)7
св зь
21
Н Н
Н
Н
NH2
(СН2)4
св зь
22
Н Н
Cl
Н
NH2
(СН2)7
св зь
23
Н Н
Cl
Н
NH2
(СН2)4
св зь
24
Н Н
Н
Н
NHC(O)CH 3
(СН2)7
св зь
25
Н Н
Н
Н
CH=CHCO2H
(СН2)7
св зь
26
Н Н
Н
Н
С(O)СН2CH3
(СН2)3
св зь
27
Н Н
Н
Н
C(O)CH2CH3
(СН2)5
св зь
28
Н Н
Н
Н
С(O)СН2CH3
(СН2)7
св зь
29
Н Н
Н
Н
С(O)СН2CH3
(СН2)9
св зь
30
Н Н
Н
Н
C(O)NH2
(СН2)7
св зь
31
Н Н
Н
Н
С(O)NHCH 3
(СН2)7
св зь
32
Н Н
Н
Н
COOH
(СН2)7
св зь
33
Н Н
Н
Н
С(O)NHCH 2CH3
(СН2)7
св зь
34
Н Н
Н
Н
С(O)NHCH(СН3)2
(СН2)7
св зь
35
Н Н
Н
Н
OCH3
(СН2)7
св зь
Н
СН(ОН)CH 3
(СН2)7
св зь
36
25
30
35
40
45
50
Н Н
Н
37
Н Н
Н
Н
С(CH3)2ОН
СН2
пара-Ph
38
Н Н
Н
OH
С(O)CH3
(CH2)7
св зь
39
Н Н
Н
OCH3
С(O)CH3
(CH2)7
св зь
43
Н OH
Н
Н
Н
(CH2)7
св зь
44
Н OH
Н
Н
Н
(СН2)9
св зь
45
Н OH
Н
Н
Н
(CH2)5
св зь
46
Н OH
Н
Н
Н
(СН2)3
св зь
47
Н Н
OH
Н
Н
(CH2)7
св зь
48
Н Н
OH
Н
Н
(СН2)9
св зь
49
Н Н
OH
Н
Н
(СН2)5
св зь
50
Н Н
OH
Н
Н
(СН2)3
св зь
51
Н Н
Н
Н
С(O)NHCH 3
(СН2)9
св зь
52
Н Н
Н
Н
C(O)NH2
СН2
пара-Ph
54
Н Н
Н
Н
С(O)CH3
(СН2)9
св зь
55
Н Н
OCH3
Н
С(O)CH3
(СН2)7
св зь
56
Н OCH3
Н
Н
С(O)CH3
(СН2)7
св зь
57
Н Н
OH
Н
С(O)CH3
(СН2)7
св зь
58
Н Н
CH3
Н
С(O)CH3
(СН2)5
св зь
59
Н Н
Н
Н
С(O)Н
СН2
пара-Ph
60
Н Н
Н
Н
С(O)Н
(СН2)5
св зь
61
Н Н
Н
Н
С(O)Н
(СН2)7
св зь
62
Н Н
С(O)CH3
Н
Н
(СН2)7
св зь
63
Н Н
С(O)СН2CH3 Н
Н
(СН2)7
св зь
64
Н С(O)CH 3 Н
Н
Н
(СН2)7
св зь
65
Н Н
Н
Н
Н
(СН2)7
св зь
66
Н Н
Н
Н
Н
СН2
пара-Ph
67
Н Н
OH
Н
Н
СН2
пара-Ph
68
Н Cl
Н
Н
Н
(СН2)7
св зь
69
Н OCH3
Н
Н
Н
(СН2)7
св зь
71
Н Н
F
Н
F
(СН2)7
св зь
72
Н Н
Н
Н
OH
(СН2)10
св зь
73
Н Н
Н
Н
Cl
(СН2)7
св зь
74
Н NO2
Н
Н
OH
(СН2)7
св зь
75
Н Н
Н
Н
F
(СН2)4
св зь
76
Н Н
Н
Н
CF3
(СН2)4
св зь
Страница: 7
RU 2 300 516 C2
5
10
15
20
25
30
35
77
F
Н
Н
Н
F
(СН2)7
78
Н Н
Н
Н
Cl
СН2
св зь
пара-Ph
79
Н Н
Н
Н
OH
CH2CH(ОН)
пара-Ph
80
Н Н
OCH3
Н
Н
(СН2)6-СН(CH 3)
св зь
81
Н Н
OH
Н
Н
(СН2)6-СН(CH 3)
св зь
82
Н Н
OH
Н
Н
(СН2)6-СН(СН 2СН2CH3) св зь
88
Н Н
Н
Н
-C(O)NH-(CH2)9-ОН CH2
св зь
92
Н Н
Н
Н
-O(СН2)5СООН
(CH2)5
св зь
93
Н CH3
Н
Н
CH3
(СН2)7
св зь
94
Н CH3
Н
Н
CH3
98
Н Н
Н
С(O)-NH2 O-(СН2)7-СООН
(CH2)5
св зь
-(СН2)7-
св зь
и их фармацевтически приемлемые соли.
Указанные композиции доставл ют активные вещества в выбранные биологические
системы, обеспечива более высокую или улучшенную биологическую доступность
активного вещества по сравнению с введением активного вещества без соединени доставл ющего агента. Предпочтительным соединением дл применени в вышеуказанной
композиции вл ютс соединени №11, 12, 43, 47 и 75 и их фармацевтически приемлемые
соли.
Насто щее изобретение относитс также к стандартным (унифицированным)
лекарственным формам, содержащим указанные композиции. Стандартна (унифицированна ) лекарственна форма может быть жидкой или твердой, такой как
таблетка, капсула или частицы, включа порошок или саше.
Другой вариант реализации изобретени относитс к способу введени активного
вещества нуждающемус в этом животному в виде композиции, содержащей по меньшей
мере одно соединение доставл ющего агента вышеуказанной формулы, включа соединени , исключенные оговоренными услови ми, и активное вещество.
Предпочтительные способы введени включают пероральный, внутрикишечный и легочный
способы.
Другой вариант реализации изобретени относитс к способу лечени заболевани или
достижени требуемого физиологического эффекта у животного в результате введени композиции по насто щему изобретению.
Другой вариант реализации изобретени относитс к способу получени композиции по
насто щему изобретению путем смешивани по меньшей мере одного соединени доставл ющего агента вышеуказанной формулы, включа соединени , исключенные
оговоренными услови ми, и по меньшей мере одного активного вещества.
Еще один вариант реализации насто щего изобретени относитс к применению
соединени дл доставки активных веществ к ткан м организма нуждающегос в этом
животного, где указанное соединение, имеет следующую формулу
40
45
и выбрано из группы, включающей:
Соединение № R 1
3
50
R2
H H
R3 R4
H
R5
H OH
R6
R7
CH2
св зь
4
H H
H
H OH
(СН2)3
св зь
13
H H
H
H H
CH2
св зь
14
H H
H
H H
(СН2)3
св зь
15
H H
H
H H
(CH2)5
16
Н Н
Н
Н Н
(СН2)9
Страница: 8
св зь
св зь
RU 2 300 516 C2
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
17
Н Н
Н
Н Н
(СН2)10
св зь
21
Н Н
Н
Н NH2
(СН2)4
св зь
46
Н OH
Н
Н Н
(СН2)3
св зь
47
Н Н
OH Н Н
(СН2)7
св зь
48
Н Н
OH Н Н
(СН2)9
св зь
49
Н Н
OH Н Н
(СН2)5
св зь
50
Н Н
OH Н Н
(СН2)3
св зь
59
Н Н
Н
Н С(O)Н
СН2
пара-Ph
60
Н Н
Н
Н С(O)Н
(СН2)5
св зь
61
Н Н
Н
Н С(O)Н
(СН2)7
св зь
65
Н Н
Н
Н Н
(СН2)7
св зь
66
Н Н
Н
Н Н
СН2
пара-Ph
67
Н Н
OH Н Н
СН2
пара-Ph
69
Н ОСН3 Н
Н Н
(СН2)7
св зь
78
Н Н
Н Cl
СН2
пара-Ph
св зь
Н
81
Н Н
OH Н Н
(СН2)6-СН(СН 3)
82
Н Н
OH Н Н
(СН2)6-СН(СН 2СН2СН3) св зь
Н -C(O)NH-(CH2)9-ОН СН2
св зь
88
Н Н
Н
95
Н Н
NO2 Н Н
пара-Ph
св зь
96
Н Н
NH2 Н Н
пара-Ph
св зь
97
Н СН3
Н
(СН2)3-(С(СН3)2)
св зь
Н СН3
и их фармацевтически приемлемые соли.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Соединени доставл ющих агентов
Термины «алкил» и «алкенил» в используемом здесь значении означают соответственно
алкильные и алкенильные заместители с линейной и разветвленной цепью.
Соединени доставл ющих агентов могут представл ть собой карбоновую кислоту или
ее соли. Приемлемые соли включают, но не ограничиваютс ими, органические и
неорганические соли, например соли щелочных металлов, таких как натрий, калий и литий;
соли щелочно-земельных металлов, таких как магний, кальций или барий; соли аммони ;
основные аминокислоты, такие как лизин или аргинин; и органические амины, такие как
диметиламин или пиридин. Предпочтительными сол ми вл ютс соли натри . Указанные
соли могут быть одно- или многовалентными сол ми, такими как мононатриевые и
динатриевые соли. Предпочтительной динатриевой солью вл етс данатриева соль
соединени 47. Данные соли могут быть также сольватами, включа сольваты этанола, и
гидратами.
Соли соединений доставл ющих агентов по насто щему изобретению можно получить
способами, известными в данной области. Например, натриевые соли можно получить,
раствор соединение доставл ющего агента в этаноле и добавл водный раствор
гидроксида натри .
Соединение доставл ющего агента можно очистить перекристаллизацией или
фракционированием на одном или нескольких твердых хроматографических носител х,
используемых отдельно или соединенных последовательно. Приемлемые системы
растворителей дл перекристаллизации включают, но не ограничиваютс ими,
ацетонитрил, метанол и тетрагидрофуран. Фракционирование может быть выполнено на
приемлемом хроматографическом носителе, таком как оксид алюмини , использу смеси
метанол/н-пропанол в качестве подвижной фазы; хроматографией с обращенной фазой,
использу смеси трифторуксусна кислота/ацетонитрил в качестве подвижной фазы; и
ионообменной хроматографией, использу воду или приемлемый буфер в качестве
подвижной фазы. При выполнении анионообменной хроматографии предпочтительно
используют градиент 0-500 мМ хлорида натри .
Активные вещества
Активными веществами, пригодными дл использовани в насто щем изобретении,
вл ютс биологически и химически активные вещества, которые включают, но не
Страница: 9
RU 2 300 516 C2
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
ограничиваютс ими, пестициды, фармакологические и лекарственные средства.
Например, биологически или химически активные вещества, пригодные дл использовани в насто щем изобретении, включают, но не ограничиваютс ими, белки;
полипептиды; пептиды; гормоны; полисахариды и, в частности, смеси мукополисахаридов;
углеводы; липиды; небольшие пол рные органические молекулы (то есть пол рные
органические молекулы с молекул рной массой 500 Дальтон или менее); другие
органические соединени ; и, в частности, соединени , которые сами по себе не способны
(или способны лишь частично) проникать сквозь оболочку желудочно-кишечного тракта
и/или подвержены химическому расщеплению кислотами и ферментами в желудочнокишечном тракте; либо комбинации указанных веществ.
Другие примеры включают, но не ограничиваютс ими, синтетические, природные или
рекомбинантные источники нижеследующих соединений, таких как гормоны роста, включа гормоны роста человека (hGH), рекомбинантные гормоны роста человека (rhGH), бычьи
гормоны роста и гормоны роста свиней; гормоны, стимулирующие выделение гормона
роста; интерфероны, включа ?, ? и ?; интерлейкин-1; интерлейкин-2; инсулин, включа инсулин свиней, бычий инсулин, инсулин человека и рекомбинантный инсулин человека,
необ зательно имеющий противоионы цинка, натри , кальци и аммони ;
инсулиноподобный фактор роста, включа IGF-1; гепарин, включа нефракционированный
гепарин, гепариноподобные вещества, дерматаны, хондроитины, низкомолекул рный
гепарин, очень низкомолекул рный гепарин и ультранизкомолекул рный гепарин;
кальцитонин, включа кальцитонин лосос , угр , свиньи и человека; эритропоэтин;
естественный фактор предсерди ; антигены; моноклональные антитела; соматостатин;
ингибиторы протеазы; адренокортикотропин; гормон, стимулирующий выделение
гонадотропина; окситоцин; гормон, стимулирующий выделение лютеинизирующего
гормона; фолликулостимулирующий гормон; глюкоцереброзидазу; тромбопоэтин;
филграстим; простагландины; циклоспорин; вазопрессин; кромолиннатрий (натрий- или
динатрийхромогликат); ванкомицин; десферриоксамин (DFO); бисфосфонаты, включа алендронат, тилудронат, этидронат, клодронат, памидронат, олпадронат и инкадронат;
паращитовидный гормон (РТН), включа его фрагменты; противомикробные средства,
включа антибиотики, антибактериальные средства и противогрибковые средства;
витамины; аналоги, фрагменты, миметики или модифицированные полиэтиленгликолем
(PEG) производные указанных соединений; или любые их комбинации. Неограничивающие
примеры антибиотиков включают воздействующие на грамположительные бактерии,
бактерицидные, липопептидные и циклические пептидные антибиотики, такие как
даптомицин и его аналоги.
Предпочтительным активным веществом вл етс даптомицин. Даптомицин описан в
публикации Baltz, Biotechnology of Antibiotics, 2 nd Ed., ed, W.R. Strohl (New York: Marcel
Dekker, Inc.), 1997, pp. 415-435. Даптомицин представл ет собой циклический
липопептидный антибиотик, который может быть получен ферментацией Streptomyces
roseosporus. Даптомицин вл етс членом семейства антибиотиков фактора А-21978С0 S.
roseosporus и имеет н-деканоильную боковую цепь, св занную цепью из трех аминокислот
с N-концевым триптофаном циклического пептида, состо щего из 10 аминокислот. В
насто щее врем указанное соединение используетс в различных составах дл лечени серьезных инфекций, вызываемых бактери ми, которые включают, но не ограничиваютс ими, устойчивые к метициллину Staphylococcus aureus (MRSA) и устойчивые к ванкомицину
энтерококки (VRE). Способы синтеза даптомицина описаны в патентах США №№ 32333,
32455, 5800157, 4885243, 32310, 32311, 4537717, 4482487 и 4524135.
Системы доставки активного вещества к ткан м
Композици по насто щему изобретению содержит одно или несколько соединений
доставл ющих агентов по данному изобретению, включа соединени , исключенные
оговоренными услови ми, и одно или несколько активных веществ. Соединение
доставл ющего агента и активное вещество обычно смешивают до введени , получа таким образом предназначенную дл введени композицию.
Страница: 10
RU 2 300 516 C2
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
Предпочтительные комбинации соединений доставл ющих агентов и активных веществ
включают, но не ограничиваютс ими, соединение 12 и кальцитонин, в частности
кальцитонин лосос ; соединение 12 и гепарин; соединение 5 и кальцитонин, в частности
кальцитонин лосос ; любое из соединений 7, 11 и 43 и даптомицин; соединение 7 и
кромолин, в частности кромолиннатрий; и соединение 47 и гормон роста человека.
Предназначенные дл введени композиции могут быть жидкост ми. В качестве
раствор ющей среды можно использовать воду (например, дл кальцитонина лосос ,
паращитовидного гормона и эритропоэтина), 25% водный раствор пропиленгликол (например, дл гепарина) и фосфатный буфер (например, дл rhGH). Еще одним
растворителем вл етс полиэтиленгликоль. Лекарственные растворы получают,
смешива раствор соединени доставл ющего агента с раствором активного вещества
непосредственно перед введением. Альтернативно, раствор соединени доставл ющего
агента (или активного вещества) можно смешивать с активным веществом (или
соединением доставл ющего агента) в твердой форме. Соединение доставл ющего агента
и активное вещество можно также смешивать в виде сухих порошков. Соединение
доставл ющего агента и активное вещество можно смешивать в процессе изготовлени лекарственного средства.
Лекарственные растворы могут необ зательно содержать добавки, такие как соли
фосфатного буфера, лимонную кислоту, гликоли или другие диспергаторы. В указанный
раствор можно вводить стабилизирующие добавки, предпочтительно в концентрации от 0,1
до 20% (мас./об.).
Предназначенные дл введени композиции альтернативно могут быть получены в
твердой форме, такой как таблетка, капсула или частицы, например порошок или саше.
Твердые лекарственные формы можно получить, смешива твердое соединение
доставл ющего агента с твердым активным веществом. Альтернативно, твердое вещество
можно получить из раствора соединени доставл ющего агента и активного вещества
способами, известными в данной области, такими как сушка вымораживанием
(лиофилизаци ), осаждение, кристаллизаци и диспергирование в твердом состо нии.
Предназначенные дл введени композиции по насто щему изобретению могут также
включать один или несколько ингибиторов ферментов. Указанные ингибиторы ферментов
включают, но не ограничиваютс ими, такие соединени , как актинонин или эпиактинонин
и их производные. Другие ингибиторы ферментов включают, но не ограничиваютс ими,
апротинин (тразилол) и ингибитор Боумана-Бирка.
Количество активного вещества в предназначенной дл введени композиции по
насто щему изобретению должно обеспечивать эффективное воздействие конкретного
активного вещества на ткань-мишень. Количество активного вещества в указанных
композици х обычно вл етс фармакологически, биологически, терапевтически или
химически эффективным количеством. Однако фактическое количество может быть
меньше указанного количества при использовании данной композиции дл изготовлени стандартной лекарственной формы, так как така лекарственна форма может содержать
несколько композиций соединени доставл ющего агента/активного вещества или
разделенную дозу фармакологически, биологически, терапевтически или химически
эффективного количества. В данном случае общее эффективное количество ввод т в виде
кумул тивных (суммарных) доз, содержащих эффективное количество активного вещества.
Общее количество активного вещества можно определить способами, известными
специалистам в данной области. Однако благодар тому что композиции по данному
изобретению обеспечивают более эффективную доставку активных веществ, чем
композиции, содержащие только активное вещество, нуждающемус субъекту можно
вводить более низкие дозы биологически или химически активных веществ по сравнению с
ранее использовавшимис лекарственными формами или системами доставки
лекарственного средства при достижении таких же уровней в крови и/или аналогичного
лечебного действи .
Описываемые соединени доставл ющих агентов облегчают доставку биологически и
Страница: 11
RU 2 300 516 C2
5
10
15
20
25
30
35
40
химически активных веществ, в частности, при пероральном, назальном, подъ зычном,
интрадуоденальном, подкожном, трансбуккальном, внутрикишечном, ректальном,
вагинальном, слизистом, легочном, чрескожном, внутрикожном, парентеральном,
внутривенном, внутримышечном и глазном введении, а также преодоление
гематоэнцефалического барьера.
Стандартные (унифицированные) лекарственные формы могут также содержать
используемые отдельно или в комбинации наполнители, разбавители, дезинтеграторы,
смазывающие вещества, пластификаторы, красители, ароматизаторы, маскирующие вкус
вещества, сахара, подслащивающие вещества, соли и растворители, включающие, но не
ограничивающиес ими, воду, 1,2-пропандиол, этанол, оливковое масло или любые их
комбинации.
Соединени и композиции по насто щему изобретению пригодны дл введени биологически или химически активных веществ любым животным, включа , но не
ограничива сь ими, птиц, таких как куры; млекопитающих, таких как грызуны, крупный
рогатый скот, свиньи, собаки, кошки, приматы и, в частности, человек; а также насекомых.
Указанна система вл етс особенно пригодной дл введени таких химически или
биологически активных веществ, которые в противном случае были бы разрушены или
стали менее эффективными под действием условий, существующих в организме
животного, прежде чем активное вещество достигнет участка действи (то есть участка,
где должно происходить высвобождение активного вещества из композиции, используемой
дл его доставки). Соединени и композиции по насто щему изобретению пригодны дл перорального введени активных веществ, которые обычно не предназначены дл такого
способа введени или требуют более эффективной доставки.
Композиции, содержащие указанные соединени и активные вещества, обеспечивают
эффективную доставку активных веществ к выбранным биологическим системам и более
высокую или лучшую биологическую доступность активного вещества по сравнению с
введением данного активного вещества без доставл ющего агента. Действие
лекарственного средства можно улучшить, доставл большее количество активного
вещества в течение определенного периода времени или доставл активное вещество в
требуемый период времени (то есть осуществл более быструю или медленную доставку)
или через определенный период времени (то есть осуществл пролонгированную
доставку).
Другой вариант осуществлени изобретени относитс к способу лечени или
профилактики заболевани , а также достижени требуемого физиологического действи ,
указанного в нижеследующей таблице, благодар введению животному композиции по
насто щему изобретению. Специальные показани дл использовани активных веществ
представлены в справочнике Physicians? Desk Reference (54 th Ed., 2000, Medical
Economics Company, Inc., Montvale, NJ), который включен в данное описание изобретени в качестве ссылки. Активные вещества, приведенные в нижеследующей таблице, включают
их аналоги, фрагменты, миметики и производные, модифицированные
полиэтиленгликолем.
Активное вещество
45
Заболевание и физиологическое
действие
Гормоны роста, включа гормоны роста человека (hGH), рекомбинантные гормоны роста человека (rhGH), Нарушени роста
бычьи гормоны роста (гормоны роста крупного рогатого скота) и гормоны роста свиней; гормоны,
стимулирующие выделение гормонов роста
Интерфероны, включа ?, ? и ?
Вирусные инфекции, включающие
зат жной рак и рассе нный склероз
Интерлейкин-1; интерлейкин-2
Вирусна инфекци ; рак
Инсулин, включа инсулин свиней, бычий инсулин (инсулин крупного рогатого скота), человека и
рекомбинантный инсулин человека, необ зательно содержащий противо-ионы цинка, натри , кальци и
аммони ; инсулиноподобный фактор роста, включающий IGF-1
Диабет
50
Активное вещество
Заболевание и физиологическое
действие
Гепарин, включа нефракционированный гепарин, гепариноподобные вещества, дерматаны,
хондроитины, низкомолекул рный гепарин, очень низкомолекул рный гепарин и
ультранизкомолекул рный гепарин
Страница: 12
Тромбоз; профилактика свертывани крови
RU 2 300 516 C2
Кальцитонин, включа кальцитонин лосос , угр , свиньи и человека
Остеопороз; заболевани костей
Эритропоэтин
Анеми Естественный фактор предсерди Расширение кровеносных сосудов
Антигены
Инфекци Моноклональные антитела
Предотвращение отторжени трансплантата; рак
Соматостатин
Кровоточаща зва; эрозивный гастрит
Ингибиторы протеазы
СПИД
Адренокортикотропин
Высокий уровень холестерина (снижение
уровн холестерина)
Гормон, стимулирующий выделение гонадотропина
Нарушение овул ции (стимул ци овул ции)
Окситоцин
Нарушени родового акта (стимул ци сократительной де тельности матки)
5
10
Гормон, стимулирующий выделение лютеинизирующего гормона; фолликулостимулирующий гормон Регул ци репродуктивной функции
Глюкоцереброзидаза
Болезнь Гоше (улучшение обмена
липопротеина)
Тромбопоэтин
Тромбоцитопени 15
Активное вещество
20
25
Заболевание и физиологическое действие
Филграстим
Усиление иммунитета к инфекци м у
субъектов, проход щих курс химиотерапии
Простагландины
Гипертензи Циклоспорин
Отторжение трансплантата
Вазопрессин
Ночное недержание мочи;
антидиуретическое средство
Кромолиннатрий (натрий или динатрийхромогликат)
Астма; аллергии
Десферриоксамин (DFO)
Повышенное содержание железа
Паращитовидный гормон (РТН), включа его фрагменты
Остеопороз; заболевани костей
Противомикробные средства, включа антибиотики, антибактериальные средства и
противогрибковые средства; воздействующие на грамположительные бактерии, бактерицидные,
липопептидные и циклические пептидные антибиотики, такие как даптомицин и его аналоги
Инфекционные заболевани , включа болезни, вызываемые
грамположительными бактери ми
Витамины
Витаминна недостаточность
Бисфосфонаты, включа алендронат, тилудронат, этидронат, клодронат, памидронат, олпадронат Остеопороз и болезнь Педжета;
и инкадронат
ингибирование остеобластов
30
35
40
45
50
Один вариант осуществлени насто щего изобретени относитс , например, к способу
лечени субъекта, страдающего или подверженного диабету, путем введени инсулина и
по меньшей мере одного из соединений доставл ющих агентов по насто щему
изобретению.
После введени лекарственного препарата активное вещество, присутствующее в
композиции или стандартной унифицированной лекарственной форме, всасываетс в
систему кровообращени . Биологическую доступность активного вещества можно легко
оценить, определ известную фармакологическую активность в крови, например
увеличение времени свертывани крови, вызываемое гепарином, или уменьшение уровней
кальци в крови, вызываемое кальцитонином. Альтернативно, можно произвести пр мое
измерение уровней активного вещества в крови.
Описание предпочтительных вариантов осуществлени изобретени Приведенные ниже примеры иллюстрируют данное изобретение, не ограничива его
объем. Все части вл ютс массовыми част ми, за исключением особо оговоренных
случаев.
Нижеследующие соединени анализируют спектроскопией протонного дерного
магнитного резонанса ( 1Н ЯМР), которую выполн ют при помощи спектрометра Брукера
300 МГц, использу в качестве растворител диметилсульфоксид (ДМСО-d6), за
исключением особо оговоренных случаев.
Пример 1. Получение соединений
Получение соединени 1
Гидроксид кали (8,82 г, 157,2 ммоль) измельчают в ступке до порошкообразного
состо ни и перенос т в 125 мл колбу Эрленмейера, содержащую 60 мл
диметилсульфоксида. Полученную смесь перемешивают в течение 5 минут, после чего
добавл ют 5,35 г (39,3 ммоль) 2?-гидроксиацетофенона. Смесь перемешивают еще 15
Страница: 13
RU 2 300 516 C2
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
минут и добавл ют 5,39 г (25,1 ммоль) 4-(бромметил)бензойной кислоты. Реакционную
смесь перемешивают при комнатной температуре в течение примерно четырех часов. К
коричневой реакционной смеси добавл ют дистиллированную воду (200 мл) и полученный
раствор охлаждают до 0°С. Затем добавл ют концентрированный водный раствор сол ной
кислоты до достижени рН раствора около 5. Образовавшеес твердое вещество собирают
фильтрованием и перекристаллизовывают из смеси этанол:вода (50:50), получа 3,59 г
(52,9%) светло-коричневого порошка. Температура плавлени : 170,5-172,0°С. Анализ
сжиганием: %С: 71,10 (вычислено), 70,81 (найдено); %Н: 5,22 (вычислено), 5,25
(найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): ? 13,0, с, 1Н; 8,00-7,97, д, 2Н; 7,64-7,59, м, 3Н; 7,557,49, дт, 1Н; 7,25-7,22, д, 1Н; 7,07-7,01, дт, 1Н; 5,33, с, 2Н; 2,54, с, ЗН.
Соединени 63, 62 и 64 получают вышеописанным способом, использу соответствующие исходные вещества.
Соединение 63. Температура плавлени : 91-94°С. Анализ сжиганием: %С: 69,62
(вычислено), 69,91 (найдено); %Н: 8,53 (вычислено), 8,28 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): ?
12,0, шир.с, 1Н; 7,9, д, 2Н; 7,0, д, 2Н; 4,0, т, 2Н; 3,0, kb, 2H; 2,2, т, 2Н; ? 1,7, п, 2H; 1,5,
п, 2H; 1,35, м, 6Н; 1,05, т, 3Н.
Соединение 62. Температура плавлени : 125-129°С. Анализ сжиганием: %С: 69,04
(вычислено), 68,91 (найдено); %Н: 7,97 (вычислено), 8,04 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): ?
12,0, шир.с, 1Н; 7,9, д, 2H; 7,02, д, 2H; 4,01, т, 2H; 2,52, с, 3Н; 2,23, т, 2Н; 1,7,
п, 2Н; 1,5, п, 2Н; 1,38, м, 6Н.
Соединение 64. Температура плавлени : 62-65°С. Анализ сжиганием: %С: 69,06
(вычислено), 69,32 (найдено); %Н: 7,91 (вычислено), 7,97 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): ?
12,0, с, 1Н; 7,5, д, 1Н; 7,4, м, 2Н; 7,19, дд, 1Н; 4,02, т, 2Н; 2,55, с, 3Н; 2,2, т,
2Н; 1,7, п, 2Н; 1,5, п, 2Н; 1,3, м, 6Н.
Соединени 66 и 52 также получают аналогично способу получени соединени 1,
замен 2?-гидроксиацетофенон указанным в скобках соединением: 66 (фенол) и 52
(салициламид).
Соединение 66. Температура плавлени : 219-221°С. Анализ сжиганием: %С: 73,67
(вычислено), 73,70 (найдено); %Н: 5,30 (вычислено), 5,22 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): ?
13,0, с, 1Н; 7,97, д, 2Н; 7,57, д, 2Н; 7,30, м, 2Н; 7,01, м, 2Н; 6,95, м, 1Н; 5,19, с, 2Н.
Соединение 52. Температура плавлени : 242-243°С. Анализ сжиганием: %С: 66,08
(вычислено), 65,74 (найдено); %Н: 4,86 (вычислено), 4,79 (найдено); %N: 5,14
(вычислено), 4,78 (найдено) 1H ЯМР (ДМСО-d6): ? 13,0, с, 1Н; 7,97, д, 2Н; 7,75, дд, 1Н;
7,64, шир.с, 1Н; 7,62, д, 2Н; 7,56, шир.с, 1Н; 7,44, дт, 1Н; 7,17, д, 1Н; 7,03, т, 1Н; 5,35, с, 2Н.
Получение соединени 2
Гидроксид кали (9,88 г, 176 ммоль) измельчают в ступке до порошкообразного
состо ни и перенос т в 125 мл колбу Эрленмейера, соде??жащую 80 мл
диметилсульфоксида и 5,54 г (50,3 ммоль) катехина. Полученную смесь перемешивают в
течение 45 минут, слегка нагрева до 35°С. Темную смесь обрабатывают раствором 6,94 г
(40,7 ммоль) 4-(хлорметил)бензойной кислоты и 30 мл диметилсульфоксида. Реакционную
смесь перемешивают при комнатной температуре в течение примерно 17 часов. Смесь
подкисл ют 4% водным раствором сол ной кислоты, что вызывает образование твердого
вещества. Твердое вещество собирают фильтрованием. Полученный продукт
перекристаллизовывают из смеси этилацетат/метил трет-бутиловый эфир/гексаны и
подвергают флэш-хроматографии с использованием в качестве элюента смеси 70%
гексанов/этилацетат/1% уксусной кислоты, получа соединение 2 в виде белого твердого
вещества (1,10 г) (выход 11%). Температура плавлени : 196-198°С. Анализ сжиганием: %С:
68,85 (вычислено), 68,60 (найдено); %Н: 4,95 (вычислено), 4,82 (найдено). 1H ЯМР
(ДМСО-d6): ? 12,96, с, 1H; 9,03, с, 1H; 7,97, д, 2Н; 7,61, д, 2Н; 6,95, дд, 1Н; 6,83,
дд, 1Н; 6,78, тд, 1H; 6,70, дт, 1H; 5,18, с, 2Н.
Соединени 79 и 59 получают аналогично способу получени соединени 2.
Страница: 14
RU 2 300 516 C2
Соединение 79. Температура плавлени : 176-178°С. Анализ сжиганием: %С: 65,69
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
(вычислено), 65,53 (найдено); %Н: 5,15 (вычислено), 5,00 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): ?
13,0, шир.с, 1H; 8,7, шир.с, 1H; 7,9, д, 2Н; 7,6, д, 2Н; 6,9, д, 1H; 6,75, м, 2Н;
6,7, м, 1H; 5,9, шир.с, 1H; 5,0, м, 1H; 4,1, дд, 1H; 3,85, дд, 1H.
Соединение 59. Температура плавлени : 164-167°С. Анализ сжиганием: %С: 70,31
(вычислено), 70,18 (найдено); %Н: 4,72 (вычислено), 4,83 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): ?
13,0, шир.с, 1Н; 10,5, с, 1Н; 8,7, шир.с, 1Н; 7,9, д, 2Н; 7,6, д, 2Н; 6,9, д, 1Н;
6,75, м, 2Н; 6,7, м, 1Н; 5,9, шир.с, 1Н; 5,0, м, 1Н; 4,1, дд, 1Н; 3,85, дд, 1Н.
Получение соединени 3
Соединение 3 предоставлено фирмой Lancaster Synthesis Inc. (Windham, NH).
Получение соединени 6
В 200 мл круглодонную колбу помещают 11,2 г (4 экв.) порошкообразного гидроксида
кали и 100 мл диметилсульфоксида. Полученную смесь перемешивают при комнатной
температуре в течение 5 минут. Добавл ют 2-бензилоксифенол (10 г, 1 экв.), после чего
сразу же добавл ют этил 7-бромгептаноат (14,6 мл, 1,5 экв.). Полученный раствор
перемешивают при комнатной температуре в течение 1 часа.
Реакционную смесь выливают в 200 мл дистиллированной воды и экстрагируют 5Ч100
мл метиленхлорида. Объединенные органические слои промывают водой и насыщенным
раствором соли (по 20 мл) и концентрируют. Полученную жидкость раствор ют в 125 мл
водного метанола. Добавл ют твердый гидроксид натри (3 экв., 3,7 г) и полученный
раствор нагревают до 80°С в течение 2 часов. Реакционную смесь охлаждают до
комнатной температуры и выпаривают метанол. Водный слой экстрагируют 150 мл
простого эфира и подкисл ют до рН ~ 2 концентрированным водным раствором сол ной
кислоты. Водный слой экстрагируют этилацетатом (2Ч300 мл), фильтруют и сушат,
получа 19 г (2-бензилоксифенил)- 7-оксигептановой кислоты.
Получают суспензию (2-бензилоксифенил)-7-оксигептановой кислоты (19 г, 58 ммоль),
150 мл этилового спирта и 150 мг палладиевой черни и помещают в автоклав Парра. В
реакторе повышают давление до 7 атм (100 фунтов/кв.дюйм), подава водород. Смесь
перемешивают при 50°С в течение 17 часов. Палладий отфильтровывают и фильтрат
концентрируют, получа продукт в виде бледно-желтого твердого вещества. Сырое
вещество очищают хроматографией на силикагеле, использу в качестве элюента смесь
30-60% этилацетат/гексаны, и получают 5 г (42%) (2-гидроксифенил)-7-оксигептановой
кислоты в виде не совсем белого твердого вещества. Температура плавлени : 47-50°С.
Анализ сжиганием: %С: 65,53 (вычислено), 65,12 (найдено); %Н: 7,61 (вычислено), 7,82
(найдено). МС (EI): 238 (вычислено), 238 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): ? 12,0, с, 1Н;
8,8, с, 1Н; 6,89-6,86, м, 1Н; 6,80-6,87, м, 3Н; 3,94, т, 2Н; 2,21, т, 2Н; 1,72-1,67,
м, 2Н; 1,55-1,25, м, 6Н.
Получение соединени 7
В 200 мл круглодонную колбу помещают 22,9 г (3 экв.) только что измельченного
гидроксида кали и 100 мл диметилсульфоксида. Полученную смесь перемешивают при
25°С в течение 5 минут. Добавл ют катехин (15 г, 1 экв.), после чего сразу же
добавл ют этил 8-бромоктаноат (34,2 г, 1 экв). Темно-коричневый раствор перемешивают
при 25°С в течение 2 часов.
Добавл ют дистиллированную воду (100 мл) и полученный раствор нагревают до 85°С
в течение 2 часов. Смесь охлаждают, подкисл ют до рН ~2 концентрированным водным
раствором сол ной кислоты и экстрагируют этилацетатом (2Ч300 мл). Объединенные
органические слои сушат над сульфатом магни , фильтруют и выпаривают растворитель.
Сырое вещество очищают хроматографией на силикагеле, использу в качестве элюента
смесь 30-60% этилацетат/гексаны. Требуемый продукт собирают и сушат, получа 6,6 г
(19%) 8-(2-гидроксифенокси)октановой кислоты в виде не совсем белого твердого
вещества. Температура плавлени : 60-64°С. Анализ сжиганием: %С; 66,65 (вычислено),
66,65 (найдено); %Н: 7,99 (вычислено), 8,10 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): ? 12,0, с, 1Н;
Страница: 15
RU 2 300 516 C2
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
8,8, с, 1Н; 6,90-6,86, м, 1Н; 6,80-6,76, м, 3Н; 3,92, т, 2Н; 2,21, т, 2Н; 1,75-1,66,
м, 2Н; 1,56-1,29, м, 8Н.
Соединени 4, 35, 38, 92 и 98 также получают вышеописанным способом, использу соответствующие исходные вещества.
Соединение 4. Температура плавлени : 64-66°С. Анализ сжиганием: %С: 61,22
(вычислено), 61,32 (найдено); %Н: 6,16 (вычислено), 6,27 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): ?
12,1, с, 1Н; 8,75, с, 1Н; 6,90-6,87, м, 1Н; 6,81-6,68, м, 3Н; 3,98, т, 2Н; 2,51, т,
2Н; 1,98-1,89, м, 2Н.
Соединение 35. Температура плавлени : 77-80°С. Анализ сжиганием: %С: 67,65
(вычислено), 67,40 (найдено); %Н: 8,33 (вычислено), 8,37 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): ?
11,9, с, 1Н; 6,96-6,85, м, 4Н; 3,94, т, 2Н; 3,74, с, 3Н; 2,23, т, 2Н; 1,72-1,65, м,
2Н; 1,53-1,48, м, 2Н; 1,39-1,29, м, 6Н.
Соединение 38. Температура плавлени : 75-76°С. Анализ сжиганием: %С: 65,29
(вычислено), 65,42 (найдено); %Н: 7,53 (вычислено), 7,47 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): ?
12,0, с, 1Н; 11,9, с, 1Н; 7,35, т, 1Н; 6,56, дд, 2Н; 4,04, т, 2Н; 2,55, с, 3Н; 2,27,
т, 2Н; 1,79-1,70, м, 2Н; 1,55-1,48, м, 2Н; 1,45-1,37, м, 2Н; 1,32-1,14, м, 4Н.
Соединение 92. Температура плавлени : 107-108°С. Анализ сжиганием: %С: 63,89
(вычислено), 63,98 (найдено); %Н: 7,74 (вычислено), 7,72 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): ?
12,0, шир.с, 2Н; 6,95, м, 2Н; 6,85, м, 2Н; 3,9, т, 4Н; 3,0, кв, 2H; 2,2, т, 4Н; 6
1,7, п, 4Н; 1,55, п, 4Н; 5 1,4, п, 4Н.
Соединение 98. Температура плавлени : 75-77°С. Анализ сжиганием: %С: 63,16
(вычислено), 62,81 (найдено); %Н: 8,01 (вычислено), 8,17 (найдено); %N: 3,2
(вычислено), 3,05 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): ? 12,0, с, 2H; 7,60, с, 1Н; 7,45, с, 1Н;
7,03-7,21, м, ЗН; 3,9, м, 4Н; 2,14, т, 4Н; 1,61, м, 4Н; 1,22-1,55, м, 16Н.
Альтернативное получение соединени 7
В 500 мл колбу Эрленмейера помещают 28 г (4 экв.) порошкообразного гидроксида кали и 400 мл диметилсульфоксида. Полученную смесь перемешивают при комнатной
температуре в течение 5 минут. Добавл ют 2-бензилоксифенол (25 г, 1 экв.), после чего
сразу же добавл ют этил 8-бромоктаноат (37,6 г, 1,2 экв.). Полученный раствор
перемешивают при комнатной температуре в течение 2 часов.
Реакционную смесь выливают в 200 мл дистиллированной воды и нагревают до 80°С в
течение 3 часов. Затем смесь подкисл ют концентрированным водным раствором сол ной
кислоты до рН около 2. Образуетс осадок не совсем белого твердого вещества.
Образовавшеес твердое вещество выдел ют вакуумным фильтрованием и сушат в
течение ночи при комнатной температуре в вакууме. Полученное вещество
этерифицируют, подверга сырую кислоту взаимодействию с 1 л метанола и 5 мл серной
кислоты, и нагревают до 80°С в течение ночи. Смесь охлаждают и трижды экстрагируют
400 мл этилацетата, сушат над сульфатом магни , фильтруют и упаривают, получа сложный метиловый эфир с количественным выходом.
Сырой сложный эфир раствор ют в 150 мл этанола и смешивают с 1 г 10% паллади на
активированном угле. Полученную смесь помещают в автоклав Парра. В реакторе
повышают давление до 14 атм (200 фунтов/кв.дюйм), подава водород. Гетерогенную
смесь перемешивают при 50°С в течение 18 часов. Палладий отфильтровывают и
фильтрат концентрируют, получа дебензилированный продукт.
Сложный метиловый эфир омыл ют, использу 10 г гидроксида натри , 400 мл
метанола и 50 мл воды. Раствор нагревают до 80°С в течение одного часа и перемешивают
при комнатной температуре в течение ночи. Метанол выпаривают. Добавл ют еще 100 мл
воды и водный слой подкисл ют концентрированным водным раствором сол ной кислоты
до рН 2. Водную фазу экстрагируют этилацетатом (3Ч300 мл), сушат и упаривают, получа целевое вещество. Сырое вещество очищают хроматографией на силикагеле, использу в
качестве элюента смесь 30-60% этилацетат/гексаны, и получают 22,24 г (71%) 8-(2-
Страница: 16
RU 2 300 516 C2
гидроксифенокси)октановой кислоты в виде не совсем белого твердого вещества.
Температура плавлени : 65-68°С. Анализ сжиганием: %С: 66,65 (вычислено), 66,98
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
(найдено); %Н: 7,99 (вычислено), 8,22 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): ? 12,0, с, 1Н; 8,8,
с, 1Н; 6,90-6,87, м, 1Н; 6,80-6,67, м, 3Н; 3,94, т, 2Н; 2,23, т, 2Н; 1,73, п, 2Н; 1,53-1,29, м, 8Н.
Соединени 5, 8 и 72 также получают вышеописанным способом, использу соответствующие исходные вещества.
Соединение 5. Температура плавлени : 51-53°С. Анализ сжиганием: %С: 64,27
(вычислено), 64,26 (найдено); %Н: 7,19 (вычислено), 7,00 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): ?
12,0, шир.с, 1Н; 8,80, шир.с, 1Н; 6,90-6,85, м, 1Н; 6,80-6,68, м, 3Н; 3,94, т, 2Н;
2,26, т, 2Н; 1,76-1,67, м, 2Н; 1,61-1,52, м, 2Н; 1,48-1,40, м, 2Н.
Соединение 8. Температура плавлени : 54-57°С. Анализ сжиганием: %С: 68,55
(вычислено), 68,78 (найдено); %Н: 8,63 (вычислено), 8,43 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): ?
8,8, шир.с, 1Н; 6,92-6,89, м, 1Н; 6,82-6,71, м, 3Н; 3,96, т, 2Н; 2,24, т, 2Н; 1,751,68, м, 2Н; 1,54-1,39, м, 4Н; 1,30, шир.с, 8Н.
Соединение 72. Температура плавлени : 58-60°С. Анализ сжиганием: %С: 69,36
(вычислено), 69,12 (найдено); %Н: 8,90 (вычислено), 8,89 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): ?
6,88-6,85, м, 1H; 6,80-6,66, м, 3Н; 3,93, т, 2Н; 2,20, т, 2Н; 1,74-1,65, м, 2Н; 1,501,35, м, 4Н; 1,25, шир.с, 10Н.
Получение соединени 12
Гидроксид кали (10,72 г, 191,1 ммоль) измельчают в ступке до порошкообразного
состо ни и помещают в 250 мл круглодонную колбу, содержащую 80 мл
диметилсульфоксида. Полученную смесь перемешивают в течение 5 минут, после чего
добавл ют 6,47 г (47,5 ммоль) 2-гидроксиацетофенона и 24,04 г (95,7 ммоль) этил 8бромоктаноата. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение
одного часа. Оранжевую реакционную смесь выливают в 200 мл дистиллированной воды,
затем п ть раз экстрагируют 300 мл (всего) метиленхлорида. Органические слои
промывают двум 50 мл порци ми воды, затем концентрируют, получа рко-желтую
жидкость.
Полученную жидкость раствор ют в 25 мл диоксана. Добавл ют водный раствор
гидроксида натри (1 н. раствор, 20 мл) и полученную жидкость перемешивают и
нагревают (65°С) в течение двух часов. Реакционную смесь охлаждают до 0°С, подкисл ют
до рН 1 концентрированным водным раствором сол ной кислоты, затем экстрагируют
двум 100 мл порци ми этилацетата. Органический слой концентрируют, получа ркожелтое масло. Масло кристаллизуют смесью метанол:вода (1:1), затем
перекристаллизовывают один раз смесью метанол:вода (1:1) и еще один раз смесью
метиленхлорид:гексаны (1:4), получа 5,70 г (43,1%) твердого вещества от бледножелтого до не совсем белого цвета. Температура плавлени : 71,5-73,5°С. Анализ
сжиганием: %С: 69,04 (вычислено), 68,77 (найдено); %Н: 7,97 (вычислено), 8,04
(найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): ? 12,0, с, 1Н; 7,57, дд, 1Н; 7,52, дт, 1Н; 7,15, д, 1Н;
7,00, дт, 1Н; 4,09, т, 2Н; 2,52, с, 3Н; 2,20, т, 2Н; 1,78, п, 2Н; 1,46, м, 4Н; 1,32, м, 4Н.
Соединени 9, 10, 11 и 71 также получают вышеописанным способом, использу соответствующие исходные вещества.
Соединение 9. Температура плавлени : 94,5-9°С. Анализ сжиганием: %С: 64,85
(вычислено), 64,81 (найдено); %Н: 6,35 (вычислено), 6,30 (найдено). 1H ЯМР (300 МГц,
ДМСО-d6): ? 12,0 (с, 1Н), 7,58, дд, 1Н; 7,5, дт, 1Н; 7,15, дд, 1Н; 7,0, дт, 1Н; 4,15,
т, 2Н; 2,55, с, 3Н; 2,45, т, 2Н; 2,0, п, 2Н.
Соединение 10. Температура плавлени : 76-77°С. Анализ сжиганием: %С: 66,09
(вычислено), 65,83 (найдено); %Н: 6,83 (вычислено), 6,76 (найдено). 1H ЯМР (300 МГц,
ДМСО-d6): ? 7,58, дд, 1Н; 7,5, дт, 1Н; 7,15, дд, 1Н; 7,0, дт, 1Н; 4,1, т, 2Н; 2,55,
с, 3Н; 2,3, т, 2Н; 1,8, дп, 2Н; 1,6, дп, 2Н.
Соединение 11. Температура плавлени : 44-4°С. Анализ сжиганием: %С: 67,18
Страница: 17
RU 2 300 516 C2
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
(вычислено), 67,32 (найдено); %Н: 7,25 (вычислено), 7,26 (найдено). 1H ЯМР (300 МГц,
ДМСО-d6): ? 12,0, с, 1Н; 7,58, дд, 1Н; 7,5, дт, 1Н; 7,15, д, 1Н; 7,0, т, 1Н; 4,1, т,
2Н; 2,55, с, 3Н; 2,25, т, 2Н; 1,8, п, 2Н; 1,6, п, 2Н; 1,45, п, 2Н.
Соединение 71. Температура плавлени : 62-63°С. Анализ сжиганием: %С: 61,76
(вычислено), 61,69 (найдено); %Н; 6,66 (вычислено), 6,59 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): ?
12,0, шир.с, 1Н; 7,13-7,30, м, 2Н; 6,94-7,02, м, 1Н; 3,98-4,02, т, 2Н; 2,17-2,22, т,
2Н; 1,65-1,72, м, 2Н; 1,28-1,52, м, 8Н.
Приведенные ниже соединени также получают вышеописанным способом,
замен 2?-гидроксиацетофенон указанным в скобках соединением: 18 (2-пропенилфенол),
20 (2-нитрофенол), 24 (2-ацетамидофенол), 26-29 (2-гидроксипропиофенон), 32
(метилсалицилат) и 39 (6-метокси-2-гидроксиацетофенон). Соединени 18 и 20 далее
очищают колоночной хроматографией, использу в качестве элюента 50% этилацетат в
гексанах.
Соединение 18. Температура плавлени : 79-81°С. Анализ сжиганием: %С: 73,88
(вычислено), 73,85 (найдено); %Н: 8,75 (вычислено), 8,77 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): ?
12,0, с, 1Н; 7,38-7,41, дд, 1Н; 7,13-7,18, м, 1Н; 6,93-6,95, д, 1Н; 6,84-6,89, т, 1Н;
6,59-6,65, дд, 1Н; 6,21-6,28, м, 1Н; 3,94-3,98, т, 2Н; 2,18-2,23, т, 2Н; 1,83-1,86,
дд, 2Н; 1,69-1,78, м, 2Н; 1,31-1,53, м, 9Н.
Соединение 20. Температура плавлени : 81-88°С. Анализ сжиганием: %С: 59,78
(вычислено), 59,66 (найдено); %Н; 6,81 (вычислено), 6,96 (найдено); %N: 4,98
(вычислено), 4,69 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): ? 12,0, с, 1Н; 7,82-7,85, дд, 1Н; 7,607,65, м, 1Н; 7,33-7,36, дд, 1Н; 7,06-7,11, м, 1Н; 4,12-4,16, т, 2Н; 2,15-2,27, т, 2Н;
1,66-1,75, м, 2Н; 1,28-1,54, м, 8Н.
Соединение 24. Температура плавлени : 110-111°С. Анализ сжиганием: %С: 65,51
(вычислено), 65,47 (найдено); %Н: 7,90 (вычислено), 7,73 (найдено); %N: 4,77
(вычислено), 4,65 (найдено). 1H ЯМР (300 МГц, ДМСО-d6): ? 12,0, с, 1Н; 8,9, с, 1Н;
7,8, д, 1Н; 7,08-6,99, м, 2Н; 6,89-6,84, м, 1Н; 3,99, т, 2Н; 2,20, т, 2Н; 2,07, с, 3Н;
1,75, п, 2Н; 1,56-1,30, м, 8Н.
Соединение 26. Температура плавлени : 70-71,5°С. Анализ сжиганием: %С: 66,09
(вычислено), 65,92 (найдено); %Н: 6,83 (вычислено), 6,67 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): ?
12,15, с, 1Н; 7,56-7,45, м, 2Н; 7,12, д, 1Н; 7,00, т, 1Н; 4,10, т, 2Н; 2,92, кв, 2Н;
2,42, т, 2Н; 2,00, п, 2Н; 1,05, т, 3Н.
Соединение 27. Температура плавлени : 68-69,5°С. Анализ сжиганием: %С: 68,16
(вычислено), 68,40 (найдено); %Н: 7,63 (вычислено), 7,60 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): ?
12,0, с, 1Н; 7,54-7,46, м, 2Н; 7,13, д, 1Н; 6,99, т, 1Н; 4,08, т, 2Н; 2,93, кв, 2Н;
2,24, т, 2Н; 1,77, п, 2Н; 1,47, м, 2Н; 1,05, т, 3Н.
Соединение 28. Температура плавлени : 85-86°С. Анализ сжиганием: %С: 69,84
(вычислено), 69,59 (найдено); %Н: 8,27 (вычислено), 7,98 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): ?
12,0, с, 1Н; 7,54-7,46, м, 2Н; 7,13, д, 1Н; 6,99, т, 1Н; 4,08, т, 2Н; 2,93, кв, 2Н;
2,20, т, 2Н; 1,74, п, 2Н; 1,52-1,30, м, 8Н; 1,05, т, 3Н.
Соединение 29. Температура плавлени : 67-69°С. Анализ сжиганием: %С: 71,22
(вычислено), 71,06 (найдено); %Н: 8,81 (вычислено), 9,02 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): ?
12,0, с, 1Н; 7,54-7,45, м, 2Н; 7,12, д, 1Н; 6,99, т, 1Н; 4,06, т, 2Н; 2,93, кв, 2H;
2,18, т, 2Н; 1,76, п, 2Н; 1,51-1,36, м, 12Н; 1,05, т, 3Н.
Соединение 32. Температура плавлени : 89-92°С. Анализ сжиганием: %С: 64,27
(вычислено), 63,96 (найдено); %Н: 7,19 (вычислено), 7,40 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): ?
12,2, шир.с, 2H; 7,59, дд, 1Н; 7,45, дт, 1Н; 7,09, д, 1Н; 6,97, т, 1Н; 4,00, т, 2H;
2,20, т, 2H; 1,70, п, 2H; 1,54-1,27, м, 8Н.
Соединение 39. Температура плавлени : 69-70,5°С. Анализ сжиганием: %С: 65,35
(вычислено), 65,39 (найдено); %Н: 7,89 (вычислено), 7,80 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): ?
Страница: 18
RU 2 300 516 C2
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
7,27, т, 1Н; 6,67, д, 2H; 3,95, т, 2H; 3,73, с, 3Н; 2,34, с, 3Н; 2,18, т, 2H; 1,63,
п, 2H; 1,49, п, 2H; 1,40-1,27, м, 6Н.
Соединени 19, 21, 22 и 23 также получают вышеописанным способом, за исключением
того, что используют один эквивалент соответствующего алкилирующего агента и два
эквивалента гидроксида кали и промежуточные сложные эфиры очищают жидкостной
хроматографией среднего давлени (MPLC), использу в качестве подвижной фазы
этилацетат и гексаны. Используют следующие составы растворителей: 19 и 21 (20%
этилацетат ) и 22 и 23 (10% этилацетат).
Соединение 19. Температура плавлени : 58-59°С. Анализ сжиганием: %С: 66,91
(вычислено), 66,73 (найдено); %Н: 8,42 (вычислено), 8,01 (найдено); %N: 5,57
(вычислено), 5,27 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): ? 6,74-6,78, д, 1Н; 6,60-6,68, м, 2H;
6,46-6,52, м, 1Н; 3,88-3,93, т, 2H; 2,17-2,22, т, 2H; 1,66-1,76, м, 2H; 1,30-1,56, м, 8Н.
Соединение 21. Температура плавлени : 115-117°С. Анализ сжиганием: %С: 63,14
(вычислено), 62,05 (найдено); %Н: 7,23 (вычислено), 7,11 (найдено); %N: 6,69
(вычислено), 6,37 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): ? 6,74-6,77, дд, 1Н; 6,60-6,68, м, 2Н;
6,46-6,52, м, 1Н; 3,90-3,94, т, 2Н; 2,26-2,31, т, 2Н; 1,63-1,78, м, 4Н.
Соединение 22. Температура плавлени : 69-71°С. Анализ сжиганием: %С: 58,84
(вычислено), 58,84 (найдено); %Н: 7,05 (вычислено), 7,08 (найдено); %N: 4,90
(вычислено), 4,83 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): ? 12,0, с, 1Н; 6,72-6,74, д, 1Н; 6,626,63, д, 1Н; 6,44-6,48, дд, 1Н; 5,0, с, 2Н; 3,87-3,91, т, 2Н; 2,17-2,22, т, 2Н; 1,651,72, м, 2Н; 1,28-1,52, м, 8Н.
Соединение 23. Температура плавлени : 80-81°С. Анализ сжиганием: %С: 54,22
(вычислено), 54,15 (найдено); %Н: 5,79 (вычислено), 5,74 (найдено); %N: 5,75
(вычислено), 5,66 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): ? 12,0, с, 1Н; 6,72-6,75, д, 1Н; 6,626,63, д, 1Н; 6,45-6,49, дд, 1Н; 5,0, шир.с, 2Н; 3,89-3,39, т, 2Н; 2,25-2,30, т, 2Н;
1,63-1,75, м, 4Н.
Получение соединени 77
Соединение 77 в форме свободной кислоты получают аналогично общему способу
получени соединени 12, использу соответствующие исходные вещества. Свободную
кислоту соединени 77 (10,4 г, 38,43 ммоль) раствор ют в этаноле (83,0 мл). Добавл ют
10,0 н. водный раствор гидроксида натри (3,80 мл) и смесь перемешивают при
комнатной температуре в течение примерно 2 часов. Этанол выпаривают, получа гелеобразный мокрый остаток. Полученный остаток раствор ют в деионизированной воде
(200 мл) и экстрагируют этилацетатом (2Ч100 мл). Остаточный этилацетат удал ют,
продува реактор азотом. Водный раствор лиофилизуют, получа белый порошок (6,50 г,
22,1 ммоль, выход 58%). Температура плавлени : >230°С с разложением. МС (FAB)
(положительна ), m/z 295,2 (М + Н) + 317,2 (М + Na) +. 1H ЯМР (ДМСО-d6): ? 7,09-7,15, м,
3Н; 4,05-4,09, т, 2Н; 1,81-1,86, т, 2Н; 1,58-1,68, м, 2Н; 1,22-1,44, м, 8Н.
Альтернативное получение соединени 12
Гидроксид кали (43,28 г, 771,3 ммоль) измельчают в ступке до порошкообразного
состо ни , затем помещают в 500 мл колбу Эрленмейера, содержащую 250 мл
диметилсульфоксида. Полученную смесь перемешивают в течение 15 минут, после чего
добавл ют 27,47 г (201,8 ммоль) 2-гидроксиацетофенона с последующим немедленным
добавлением 50,7 г (201,9 ммоль) этил 8-бромоктаноата. Реакционную смесь
перемешивают при комнатной температуре в течение трех часов. Мутную густую
оранжевую реакционную смесь выливают в 150 мл дистиллированной воды и
перемешивают, пока раствор не становитс прозрачным (примерно 15 минут).
Прозрачный оранжевый раствор охлаждают до 0°С на лед ной бане, затем подкисл ют
концентрированным водным раствором сол ной кислоты до образовани твердого
вещества (рН=7). Твердое вещество собирают фильтрованием и перекристаллизовывают
из смеси этанол:вода (50:50), получа 38,08 г (67,8%) желтого твердого вещества.
Температура плавлени : 72-73°С. Анализ сжиганием: %С: 69,04 (вычислено), 69,10
Страница: 19
RU 2 300 516 C2
5
10
15
20
25
30
35
40
45
(найдено); %Н: 7,97 (вычислено), 7,99 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): ? 12,0, с, 1Н; 7,57,
дд, 1Н; 7,52, дт, 1Н; 7,15, д, 1Н; 7,00, дт, 1Н; 4,09, т, 2Н; 2,52, с, 3Н; 2,20, т,
2Н; 1,78, п, 2Н; 1,46, м, 4Н; 1,32, м, 4Н.
Соединение 54 получают вышеописанным способом, использу соответствующие
исходные вещества. Нижеследующие соединени также получают указанным способом,
замен 2?-гидроксиацетофенон указанным в скобках соединением: 55 (2-гидрокси-5метоксиацетофенон), 56 (2-гидрокси-4-метокси-ацетофенон) и 58 (2-гидрокси-5метилацетофенон).
Соединение 54. Температура плавлени : 71-73,5°С. Анализ сжиганием
дл C18H26О4?0,068Н2О: %С: 70,28 (вычислено), 69,98 (найдено); %Н: 8,56 (вычислено),
8,16 (найдено). 1Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-d6): ? 11,8, с, 1Н; 7,55, дд, 1Н; 7,5, дт, 1Н;
7,15, д, 1Н; 7,0, дт, 1Н; 4,1, т, 2Н; 2,55, с, 3Н; 2,2, т, 2Н; 1,8, п, 2Н; 1,5, м, 2Н; 1,3, м, 10Н.
Соединение 55. Температура плавлени : 120,5-121,5°С. Анализ сжиганием: %С: 66,21
(вычислено), 66,00 (найдено); %Н: 7,84 (вычислено), 7,54 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): ?
12,0, с, 1Н; 7,1, м, 3Н; 4,03, т, 2Н; 3,72, с, 3Н; 2,54, с, 3Н; 2,20, кв, 2Н; 1,76,
п, 2Н; 1,53-1,30, м, 8Н.
Соединение 56. Температура плавлени : 106-107,5°С. Анализ сжиганием: %С: 65,87
(вычислено), 65,76 (найдено); %Н: 7,86 (вычислено), 7,57 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): ?
7,65, д, 1Н; 6,61-6,55, м, 2Н; 4,08, т, 2Н; 3,82, с, 3Н; 2,49, с, 3Н; 2,19, кв, 2Н;
1,78, п, 2Н; 1,54-1,29, м, 8Н.
Соединение 58. Температура плавлени : 121-123°С. Анализ сжиганием: %С: 68,16
(вычислено), 67,88 (найдено); %Н: 7,63 (вычислено), 7,65 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): ?
12,0, с, 1Н; 7,37, м, 1Н; 7,30, м, 1Н; 7,04, д, 1Н; 4,04, т, 2Н; 2,52, с, 3Н; 2,24,
м, 5Н; 1,76, п, 2Н; 1,59-1,41, м, 4Н.
Получение соединени 13
Соединение 13 предоставлено фирмой Aldrich Chemical Co. (Milwaukee, WI).
Получение соединени 15
Гидроксид кали (28,60 г, 0,511 моль) измельчают в ступке и помещают в 500 мл
кругло донную колбу, содержащую диметилсульфоксид (215 мл). Полученную смесь
перемешивают в течение 5 минут. К смеси добавл ют фенол (12,00 г, 0,1277 моль). Затем
сразу же добавл ют этил 6-бромгексаноат (22,70 мл, 0,1277 моль). Смесь перемешивают в
течение примерно 3 часов и выливают в 500 мл воды. Реакционную смесь нагревают при
90°С в течение 1,5 часов, после чего нагревание прекращают. Затем смесь перемешивают
в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь подкисл ют 2 н. водным
раствором сол ной кислоты, в результате чего образуетс осадок белого твердого
вещества. Белое твердое вещество выдел ют вакуумным фильтрованием и сушат в
течение ночи при комнатной температуре в вакууме. Получают 25,09 г (выход 94,5%)
продукта. Температура плавлени : 64-67°С. Анализ сжиганием: %С: 69,23 (вычислено),
68,84 (найдено); %Н: 7,69 (вычислено), 7,78 (найдено); %N: 0,00 (вычислено), <0,02
(найдено). 1H ЯМР (300 МГц, AMCO-d6): ? 11,95, с, 1Н; ? 7,27, м, 2Н; ? 6,90, м, 3Н; 3,93,
т, 2Н; 2,20, т, 2Н; 1,70, п, 2Н; 1,50, п, 2Н; 1,30, м, 6Н.
Соединени 14, 16, 76, 75 и 68 также получают вышеописанным способом, использу соответствующие исходные вещества.
Соединение 14. Температура плавлени : 57-60°С. Анализ сжиганием: %С: 66,67
(вычислено), 66,49 (найдено); %Н: 6,67 (вычислено), 6,56 (найдено). 1H ЯМР (300 МГц,
ДМСО-d6): ? 12,2, (с, 1Н), 7,25 (м, 2Н), 6,90 (м, 3Н), 3,95 (т, 2Н), 2,35 (т, 2Н), 1,90 (п, 2Н).
Соединение 16. Температура плавлени : 72-75°С. Анализ сжиганием: %С: 72,73
50
(вычислено), 72,45 (найдено); %Н: 9,09 (вычислено), 8,92 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): ?
12,0, с, 1Н; 7,24, т, 2Н; 6,88, м, 3Н; 3,89, т, 2Н; 2,15, т, 2Н; 1,35, м, 4Н; 1,21, м, 8Н.
Соединение 75. Температура плавлени : 55-57°С. Анализ сжиганием: %С: 62,26
(вычислено), 61,93 (найдено); %Н: 6,17 (вычислено), 5,89 (найдено); %F: 8,95
Страница: 20
RU 2 300 516 C2
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
(вычислено), 9,11 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): ? 7,25-7,10, м, 3Н; 6,95-6,83, м, 1Н;
4,05, т, 2Н; 2,31, т, 2Н; 1,77-1,62, м, 4Н.
Соединение 76. Температура плавлени : 65-67°С. Анализ сжиганием: %С: 54,96
(вычислено), 54,62 (найдено); %Н: 5,0 (вычислено), 4,97 (найдено); %F: 21,73
(вычислено), 21,73 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): ? 12,0, с, 1Н; 7,61, д, 2Н; 7,26,
шир.д, 1Н; 7,10, шир.т, 1Н; 4,12, т, 2Н; 2,31, т, 2Н; 1,80-1,61, м, 4Н.
Соединение 68. Температура плавлени : 67-68°С. Анализ сжиганием: %С: 62,11
(вычислено), 61,77 (найдено); %Н: 7,07 (вычислено), 6,94 (найдено); %Cl: 13,09
(вычислено), 13,05 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): ? 12,0, с, 1Н; 7,32, т, 1Н; 7,00-6,95,
м, 2Н; 6,91-6,88, м, 1Н; 3,99, т, 2Н; 2,23, т, 2Н; 1,78, п, 2Н; 1,62, п, 2Н; 1,45-1,30, м, 6Н.
Получение соединени 17
Соединение 17 предоставлено фирмой Aldrich Chemical Co. (Milwaukee, WI).
Получение соединени 25
В 250 мл круглодонную колбу поочередно помещают 5,57 г (33,9 ммоль) 2гидроксикоричной кислоты, 80 мл метанола и 6 капель концентрированной серной кислоты.
Полученный прозрачный раствор нагревают при температуре кипени с обратным
холодильником в течение 6 часов и оставл ют охлаждатьс до комнатной температуры.
Растворитель удал ют в вакууме и получают липкое белое твердое вещество. Полученное
твердое вещество раствор ют в 80 мл этилацетата и промывают трем 40 мл порци ми
10% водного раствора бикарбоната натри , одной 40 мл порцией воды и двум 25 мл
порци ми насыщенного раствора соли. Органический слой концентрируют в вакууме,
получа 5,51 г (91,4%) метил 2-гидроксициннамата в виде белого твердого вещества.
Гидроксид кали (7,63 г, 136,0 ммоль) измельчают в ступке до порошкообразного
состо ни , затем помещают в 125 мл колбу Эрленмейера, содержащую 75 мл
диметилсульфоксида. Полученную смесь перемешивают в течение 10 минут, после чего
добавл ют 5,49 г (30,8 ммоль) метил 2-гидроксициннамата и 7,81 г (31,1 ммоль) этил 8бромоктаноата. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение
примерно п ти часов, после чего добавл ют 50 мл дистиллированной воды. Желтый
раствор перемешивают при комнатной температуре в течение ночи, затем промывают
двум 80 мл порци ми этилацетата. Водный слой охлаждают до 0°С. Добавл ют
концентрированный водный раствор сол ной кислоты до достижени рН раствора, равного
примерно 5. Полученное твердое вещество собирают фильтрованием и
перекристаллизовывают из смеси этанол:вода (50:50), получа 4,31 г (45,7%) белого
порошка. Температура плавлени : 148-150°С. Анализ сжиганием: %С: 66,65 (вычислено),
66,59 (найдено); %Н: 7,24 (вычислено), 7,24 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): ? 12,0, шир.с,
2Н; 6 7,86, с; 7,81, с, 1Н; 7,67-7,63, дд, 1Н; 7,39-7,33, дт, 1Н; 7,07-7,04, д, 1Н;
6,98-6,93, т, 1Н; 6,55, с; 6,50, с, 1Н; 4,04, т, 2Н; 2,19, т, 2Н; 1,76, п, 2Н; 1,50,
м, 2Н; 1,43-1,28, м, 6Н.
Получение соединени 30
Салициламид (5,3 г, 0,03875 моль) помещают в одногорлую круглодонную колбу,
содержащую (15,0 г, 0,03875 моль) этил 8-бромоктаноат. К полученной смеси одной
порцией добавл ют карбонат кали (6,43 г, 0,0465 моль), использу 35 мл ацетона в
качестве растворител . Реакционную смесь нагревают в течение примерно 4 часов. Затем
нагревание прекращают, реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры и
перемешивают в течение выходных дней в конце недели. Реакцию прекращают, когда
данные ВЭЖХ указывают на наличие одного пика, соответствующего времени
удерживани , равному 6,44 минуты. Реакционную смесь подвергают вакуумному
фильтрованию и лепешку на фильтре промывают ацетоном. Фильтрат концентрируют в
вакууме, чтобы удалить избыток растворител (ацетона).
Твердые вещества перемешивают в гексанах в течение нескольких часов, фильтруют,
выдел ют и сушат под вакуумом в течение ночи. Твердые вещества (10,93 г, 0,0439 моль)
перемешивают в 1,5 экв. 2 н. раствора гидроксида натри (32 мл, 0,0658 моль).
Страница: 21
RU 2 300 516 C2
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
Реакционную смесь нагревают и перемешивают до окончани реакции в соответствии с
данными ВЭЖХ. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры. Реактор
помещают на водно-лед ную баню и подкисл ют суспензию 2 н. водным раствором
сол ной кислоты. Твердые вещества выдел ют вакуумным фильтрованием и лепешку на
фильтре промывают водой. Твердые вещества сушат в вакууме в течение ночи, затем
перенос т в колбу Эрленмейера и перекристаллизовывают, использу смесь этанол/вода.
Твердые вещества выпадают в осадок в течение ночи, после чего их отдел ют и сушат,
получа 8,08 г 8-(2-карбоксамидофенокси)каприловой кислоты. Температура плавлени :
114-116°С. Анализ сжиганием: %С: 64,51 (вычислено), 64,50 (найдено); %Н: 7,52
(вычислено), 7,55 (найдено); %N: 5,02 (вычислено), 4,86 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): ?
12,0, с, 1Н; 7,82, дд, 1Н; 7,55, шир.с, 2Н; 7,45, дт, 1Н; 7,12, д, 1Н; 7,01, т, 1Н;
4,10, т, 2Н; 2,20, т, 2Н; 1,77, п, 2Н; 1,54-1,29, м, 8Н.
Получение соединени 33
Получение N-этилсалициламида. Диметилацетамид (50 мл) и карзалам (10,00 г, 0,0613
моль) помещают в круглодонную колбу, оснащенную устройством дл продувки азотом,
конденсатором с вод ным охлаждением и магнитной мешалкой. Добавл ют карбонат
натри (6,50 г, 0,0613 моль) и иодэтан (4,38 мл, 0,0548 моль) и начинают нагревать
реакционную смесь. Смесь нагревают при 80°С в течение 16 часов, после чего
нагревание прекращают и реакционную смесь оставл ют охлаждатьс до комнатной
температуры. Затем реакционную смесь фильтруют через воронку из спекшегос стекла и
собирают фильтрат. К фильтрату добавл ют воду до осаждени белого твердого вещества.
Твердое вещество выдел ют фильтрованием и перенос т в колбу Эрленмейера,
содержащую 2 н. водный раствор гидроксида натри (200 мл). Полученную смесь
нагревают при температуре кипени с обратным холодильником в течение примерно 1 часа
и перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. Смесь подкисл ют 2 н.
водным раствором сол ной кислоты, в результате выдел етс желтое масло. Реакционную
смесь дважды экстрагируют 200 мл порци ми этилацетата. Объединенные этилацетатные
слои дважды промывают 200 мл порци ми деионизированной воды, сушат сульфатом
натри и концентрируют в вакууме. N-этилсалициламид выдел ют в виде желтого масла,
которое сушат в течение ночи в вакууме и получают в количестве 7,93 г.
Получение О-ацетил-N-этилсалициламида. Полученный выше N-этилсалициламид (7,93
г, 0,0481 моль) и метиленхлорид (100 мл) помещают в круглодонную колбу, оснащенную
устройством дл продувки азотом, капельной воронкой и магнитной мешалкой. Полученный
раствор охлаждают на водно-лед ной бане и добавл ют триэтиламин (14,71 мл, 0,1057
моль). Ацетилхлорид (3,76 г, 0,0529 моль) помещают в капельную воронку и по капл м
медленно добавл ют к реакционной смеси в течение примерно 10 минут. Через 1 час
водно-лед ную баню удал ют и реакционную смесь оставл ют нагреватьс до комнатной
температуры в течение ночи. Реакционную смесь разбавл ют дихлорметаном (100 мл) и
экстрагируют сначала 100 мл 2 н. водного раствора сол ной кислоты и затем двум 100
мл порци ми деионизированной воды. Метиленхлоридный слой сушат сульфатом натри и
концентрируют в вакууме. Полученное масло очищают элюированием через колонку с
силикагелем. В качестве элюента используют смесь гексан:этилацетат (60:40) и собирают
75 мл фракции. Фракции, содержащие требуемый О-ацетил-N-этилсалициламид,
объедин ют и концентрируют в вакууме, получа 4,28 г продукта в виде желтого масла.
Получение 8-(2-(N-этилбензамид)окси)октановой кислоты. Вышеуказанный O-ацетил-Nэтилсалициламид (4,28 г, 0,0207 моль) и диметилформамид (75 мл) помещают в 250 мл
круглодонную колбу, оснащенную устройством дл продувки азотом, капельной воронкой и
магнитной мешалкой. Полученную смесь охлаждают на водно-лед ной бане. После
перемешивани смеси в течение примерно 10 минут добавл ют гидрид натри (0,76 г,
0,0316 моль), после чего по капл м добавл ют раствор этил 8-бромоктаноата (7,78 г,
0,0310 моль) в диметилформамиде (25 мл) в течение 25 минут. Затем водно-лед ную баню
удал ют и реакционную смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре.
К реакционной смеси добавл ют деионизированную воду (75 мл) и экстрагируют трем 75
Страница: 22
RU 2 300 516 C2
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
мл порци ми дихлорметана. Объединенные дихлорметановые слои промывают трем 75
мл порци ми деионизированной воды, сушат сульфатом натри и концентрируют в
вакууме. Полученное коричневое масло поглощают водным раствором гидроксида натри (2 н. раствор, 200 мл), нагревают при температуре кипени с обратным холодильником в
течение примерно 2 часов и оставл ют охлаждатьс до комнатной температуры в течение
ночи. Смесь подкисл ют 2 н. водным раствором сол ной кислоты и экстрагируют трем 100
мл порци ми этилацетата. Объединенные этилацетатные слои промывают трем 100 мл
порци ми деионизированной воды и затем трем 100 мл порци ми насыщенного раствора
соли. Этилацетатный слой сушат сульфатом натри и концентрируют в вакууме.
Полученное масло кристаллизуют из смеси этилацетат:гексан (30:70), получа 3,24 г
требуемого продукта 8-(2-(N-этилбензамид)окси)октановой кислоты. Температура
плавлени : 94-95°С. Анализ сжиганием: %С: 67,29 (вычислено), 67,18 (найдено); %Н:
8,41 (вычислено), 8,55 (найдено); %N: 4,36 (вычислено), 4,26 (найдено). 1H ЯМР
(ДМСО-d6): ? 12,0, с, 1Н; 7,93, д, 1H; 7,75, дд, 1Н; 7,40, тд, 1H; 7,10, д, 1H; 6,98,
тд, 1H; 4,00, м, 3Н; 2,15, т, 2Н; 1,71, п, 2Н; 1,25, м, 8Н; 1,10, д, 6Н.
Соединени 31 и 34 также получают вышеописанным способом, использу соответствующее исходное вещество.
Соединение 31. Температура плавлени : 91,5-94°С. Анализ сжиганием: %С: 65,51
(вычислено), 65,35 (найдено); %Н: 7,90 (вычислено), 8,03 (найдено); %N: 4,77
(вычислено), 4,46 (найдено). 1Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-d6): ? 12,0, с, 1H; 8,02, шир.д, 1H;
7,72, дд, 1H; 7,42, дт, 1H; 7,11, д, 1H; 7,00, т, 1H; 4,08, т, 2Н; 2,80, д, 3Н; 2,20,
т, 2Н; 1,77, п, 2Н; 1,53-1,25, м, 8Н.
Соединение 34. Температура плавлени : 94-95°С. Анализ сжиганием: %С: 67,29
(вычислено), 67,18 (найдено); %Н: 8,41 (вычислено), 8,55 (найдено); %N: 4,36
(вычислено), 4,26 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): ? 12,0 (с, 1H), 7,93 (д, 1H), 7,75 (дд,
1H), 7,40 (тд, 1H), 7,10 (д, 1H), 6,98 (тд, 1H), 4,00 (м, 3Н), 2,15 (т, 2Н), 1,71 (п,
2Н), 1,25 (м, 8Н), 1,10 (д, 6Н).
Получение соединени 36
В 250 мл круглодонную колбу, оснащенную конденсатором, помещают 5,00 г (17,4
ммоль) соединени 12 и 170 мл этанола. Колбу продувают азотом. Борогидрид натри (1,15 г, 30,4 ммоль) добавл ют трем порци ми к прозрачному желтому раствору
соединени 12. Реакционную смесь перемешивают в течение двух часов и провер ют
окончание реакции по ВЭЖХ. Добавл ют еще 0,38 г (10,0 ммоль) борогидрида натри и
реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи.
Реакционную смесь гас т добавлением 30 мл 10% водного раствора бикарбоната натри ,
затем фильтруют через подушку из целита. Фильтрат концентрируют в вакууме, получа бледно-желтый гель. Полученный гель перемешивают в 60 мл 1 н. водного раствора
гидроксида натри в течение двух часов, охлаждают до 0°С, затем подкисл ют до рН=1
концентрированным водным раствором сол ной кислоты. Водный слой экстрагируют
четырьм 30 мл порци ми этилацетата. Объединенные органические слои сушат над
сульфатом натри и концентрируют в вакууме, получа 2,46 г (48,8%) продукта в виде
прозрачного в зкого желтого масла. Анализ сжиганием: %С: 67,51 (вычислено), 67,16
(найдено); %Н: 8,67 (вычислено), 8,56 (найдено). (Следует отметить, что при
выполнении анализа сжиганием использовано 0,176 моль Н2О (исход из значени KF) и
0,068 моль этилацетата (как показано в ЯМР). 1H ЯМР (300 МГц, ДМСО-d6): ? 7,45-7,42,
дд, 1Н; 7,18-7,12, дт, 1Н; 6,93-6,88, т, 2Н; 5,03-4,97, 1Н; 3,99-3,91, м, 2Н; 2,20,
т, 2Н; 1,72, п, 2Н; 1,51, м, 2Н; 1,39-1,30, м, 6Н; 1,27-1,25, д, 3Н.
Получение соединени 37
Раствор 10,0 мл (11,31 г, 83,1 ммоль) 2?-гидрокси-ацетофенона и 50 мл
тетрагидрофурана помещают на лед ную баню и обрабатывают 120,0 мл (168,0 ммоль) 1,4
М раствора метиллити в тетрагидрофуране, который добавл ют по капл м в течение 30
минут. Реакционна смесь сначала мутнеет и затем становитс прозрачной. После
Страница: 23
RU 2 300 516 C2
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
перемешивани в течение 18 часов раствор подкисл ют 4% водным раствором сол ной
кислоты. Слои раздел ют. Органическую фазу промывают 30 мл насыщенного раствора
соли, сушат над сульфатом натри и концентрируют. Получают в общей сложности 12,05 г
2-(диметилгидрокси-метил)фенола.
Получают раствор 6,77 г (44,5 ммоль) 2-(диметилгидрокси-метил) фенола и 50 мл
диметилсульфоксида и обрабатывают его 9,90 г (176 ммоль) только что измельченного
гидроксида кали . Светло-зеленый раствор перемешивают в течение 20 минут и добавл ют
9,85 г (45,8 ммоль) 4-(бромметил)бензойной кислоты и 0,40 г (2,67 ммоль) иодида
натри . Густую суспензию перемешивают в течение 4 часов, после чего добавл ют еще
1,66 г (7,72 ммоль) 4-(бромметил)бензойной кислоты. Реакционную смесь перемешивают
еще 2 часа и обрабатывают 50 мл воды. После перемешивани в течение 20 часов раствор
подкисл ют 4% водным раствором сол ной кислоты, в результате чего образуетс твердое
вещество, которое выдел ют фильтрованием. Твердое вещество перекристаллизовывают
из смеси этанол/вода, получа 5,8 г продукта. Температура плавлени : 171-172°С. Анализ
сжиганием: %С: 71,31 (вычислено), 71,28 (найдено); %Н: 6,34 (вычислено), 6,14
(найдено). 1H ЯМР (300 МГц, ДМСО-d6): ? 13,0, с, 1Н; 8,0, д, 2Н; 7,7, дд, 1Н; 7,6, д,
2Н; 7,2, дт, 1Н; 7,1, д, 1Н; 7,0, т, 1Н; 5,25, с, 2Н; 5,0, с, 1Н; 1,55, с, 6Н.
Получение соединени 67
Раствор 50,1 г (455 ммоль) гидрохинона, 15,52 г (91,0 ммоль) ?-хлор-п-толуиловой
кислоты, 1 г (6,7 ммоль) иодида натри , 75 мл (750 ммоль) 10 н. водного раствора
гидроксида натри и 300 мл воды нагревают до 70°С в течение 24 часов в атмосфере
азота. Охлажденную реакционную смесь подкисл ют 20% водным раствором сол ной
кислоты, в результате чего образуетс коричневое твердое вещество. Полученное твердое
вещество выдел ют фильтрованием. Затем твердое вещество поглощают этилацетатом.
Нерастворившеес твердое вещество отфильтровывают. Фильтрат промывают
насыщенным раствором соли, сушат над сульфатом натри и концентрируют. Остаток
кристаллизуют из смеси этанол/вода, получа 8,1 г соединени 67, температура
плавлени >230°С. Анализ сжиганием: %С; 68,85 (вычислено), 68,44 (найдено); %Н: 4,95
(вычислено), 4,93 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): ? 9,0, с, 1Н; 8,0, д, 2Н; 7,5, д, 2Н;
6,8, д, 2Н; 6,7, д, 2Н; 5,1, с, 2Н.
Соединени 78 и 73 получают аналогично способу получени соединени 67, использу соответствующие исходные вещества.
Соединение 78. Температура плавлени : 178-181°С. Анализ сжиганием: %С: 64,01
(вычислено), 63,95 (найдено); %Н: 4,22 (вычислено), 4,25 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): ?
8,0, д, 2Н; 7,6, д, 2Н; 7,45, дд, 1Н; 7,3, дт, 1Н; 7,2, дд, 1Н; 7,0, дт, 1Н; 5,3, с, 2Н.
Соединение 73. Температура плавлени : 63-65°С. Анализ сжиганием: %С: 62,11
(вычислено), 62,02 (найдено); %Н: 7,07 (вычислено), 7,04 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): ?
12,0, шир.с, 1H; 7,4, дд, 1Н; 7,3, дт, 1H; 7,1, дд, 1Н; 6,95, дт, 1Н; 4,0, т, 2Н;
2,2, т, 2Н; 1,75, п, 2Н; 1,5, м, 4Н; ? 1,35, м, 4Н.
Получение соединени 60
Раствор 3,0 мл (3,44 г, 28,2 ммоль) салицилальдегида, 5,05 мл (6,33 г, 28,4 ммоль)
этил 6-бромгексаноата и 50 мл этанола обрабатывают 5,07 г (36,7 ммоль) карбоната
кали . Суспензию нагревают при температуре кипени с обратным холодильником. Через
20 часов реакционную смесь охлаждают до 25°С, фильтруют через подушку из целита и
концентрируют. Остаток промывают гексанами и поглощают этанолом и 10 мл 2 н. водного
раствора гидроксида натри . Через 6 часов этанол отгон ют. Смесь подкисл ют 4%
водным раствором сол ной кислоты и экстрагируют этилацетатом. Органическую фазу
промывают 30 мл насыщенного раствора соли, сушат над сульфатом натри и
концентрируют. Полученный продукт перекристаллизовывают из смеси этанол/вода,
получа 3,0 г соединени 60 в виде коричневого твердого вещества. Температура
плавлени : 58-60°С. Анализ сжиганием: %С: 66,09 (вычислено), 61,39 (найдено); %Н:
6,83 (вычислено), 6,98 (найдено). МС 236 (М + пик). 1H ЯМР (ДМСО-d6): ? 12,0, шир.с, 1H;
Страница: 24
RU 2 300 516 C2
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
10,4, с, 1H; 7,7, дд, 1H; 7,65, дт, 1H; 7,2, д, 1H; 7,05, 1,5, м, 2Н.
Соединение 61 получают аналогично способу получени соединени 60, использу соответствующие исходные вещества. Температура плавлени : 59-62°С. Анализ
сжиганием: %С: 68,18 (вычислено), 67,59 (найдено); %Н: 7,57 (вычислено), 7,63
(найдено). МС 264 (M + пик). 1H ЯМР (ДМСО-d6): ? 12,0, шир.с, 1H; 10,4, с, 1Н; 8,0, д,
2Н; 7,75, дд, 1Н; 7,65, дт, 1Н; 7,65, д, 2Н; 7,3, д, 1H; 7,1, т, 1H; 5,4, с, 2Н.
Получение соединени 51
Карзалам (30,00 г, 0,1840 моль), иодметан (10,23 мл, 0,1643 моль), карбонат натри (19,51 г, 0,1840 моль) и диметилформамид (150 мл) помещают в 500 мл круглодонную
колбу. Реакционную смесь нагревают в течение ночи при 80°С. Затем реакционную смесь
охлаждают до комнатной температуры, фильтруют и собирают белое твердое вещество.
Полученное вещество промывают водой, после чего оставшеес твердое вещество
перенос т в 250 мл круглодонную колбу. К фильтрату, полученному первоначальным
фильтрованием, добавл ют воду, в результате чего происходит осаждение белого твердого
вещества. Полученное вещество объедин ют с твердым веществом, наход щимс в 250
мл колбе, и добавл ют 2 н. водный раствор гидроксида натри (150 мл). Смесь нагревают
в течение одного часа, после чего нагревание прекращают и реакционную смесь оставл ют
охлаждатьс в течение ночи. Белое твердое вещество, выпавшее в осадок в течение ночи,
выдел ют фильтрованием и сушат в вакууме. Получают 21,52 г N-метилсалициламида.
N-метилсалициламид (21,52 г, 0,1425 моль) и метиленхлорид (300 мл) помещают в
литровую круглодонную колбу. Колбу охлаждают на водно-лед ной бане и добавл ют
триэтиламин (43,62 мл, 0,3135 моль). Затем по капл м добавл ют ацетилхлорид в течение
п ти минут. Баню удал ют и реакционную смесь перемешивают в течение ночи при
комнатной температуре. К реакционной смеси добавл ют метиленхлорид (300 мл). Смесь
промывают двум 300 мл порци ми 1 н. водного раствора сол ной кислоты и затем трем 300 мл порци ми деионизированной воды. Раствор в метиленхлориде сушат сульфатом
натри и концентрируют в вакууме, получа оранжевое твердое вещество, которое
перекристаллизовывают из смеси этилацетат:гексан (70:30). Получают 12,15 г О-ацетил,
N-метилсалициламида.
О-ацетил, N-метилсалициламид (17,74 г, 0,919 моль), полученный вышеописанным
способом, перенос т в литровую круглодонную колбу, содержащую диметилформамид (300
мл). Колбу охлаждают на водно-лед ной бане и добавл ют гидрид натри (3,38 г, 0,1406
моль). Метил 8-бромдеканоат (36,54 г, 0,1379 моль) раствор ют в дополнительной порции
диметилформамида (100 мл) и полученный раствор по капл м добавл ют к реакционной
смеси в течение 25 минут. После перемешивани в течение примерно получаса лед ную
баню удал ют и реакционную смесь продолжают перемешивать еще три дн при комнатной
температуре. Добавл ют воду (300 мл) и смесь экстрагируют двум 250 мл порци ми
метиленхлорида. Объединенные метиленхлоридные слои трижды промывают 150 мл
порци ми воды, сушат сульфатом натри и концентрируют в вакууме, получа коричневое
масло. Полученное масло поглощают 2 н. водным раствором гидроксида натри (200 мл) и
нагревают в течение 45 минут. После перемешивани в течение ночи при комнатной
температуре добавл ют еще 200 мл 2 н. водного раствора гидроксида натри и
реакционную смесь нагревают, пока она не становитс прозрачной. После охлаждени реакционную смесь подкисл ют 2 н. водным раствором сол ной кислоты и экстрагируют
трем 250 мл порци ми этилацетата. Объединенные этилацетатные слои промывают
трем 250 мл порци ми воды и затем трем 250 мл порци ми насыщенного раствора соли.
Этилацетатный слой сушат сульфатом натри и концентрируют в вакууме, получа желтовато-коричневое твердое вещество, которое перекристаллизовывают из смеси
этилацетат:гексан (30:70). Продукт выдел ют в виде белого твердого вещества с
выходом, равным 26,30 г. Данные анализа соединени 51: Температура плавлени : 8184°С. Анализ сжиганием: %С: 67,29 (вычислено), 67,17 (найдено); %Н: 8,41 (вычислено),
8,70 (найдено); %N: 4,36 (вычислено), 4,36 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): ? 12,00, с, 1Н;
7,98, д, 1Н; 7,70-7,75, дд, 1Н; 7,39-7,48, дт, 1Н; 7,09-7,15, д, 1Н; 6,95-7,05, тд,
Страница: 25
RU 2 300 516 C2
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
1Н; 4,05, т, 2Н; 2,75, д, 3Н; 2,15, т, 2Н; 1,70, п, 2Н; 1,20-1,55, м, 12Н.
Получение соединени 65
Гидроксид кали (28,60 г, 0,511 моль) помещают в 500 мл круглодонную колбу.
Добавл ют диметилсульфоксид (215 мл) и начинают перемешивать смесь. После
перемешивани в течение примерно 35 минут, добавл ют фенол (12,00 г, 0,1277 моль) и
этил 8-бромоктаноат (32,04 г, 0,1277 моль). Полученную смесь перемешивают при
комнатной температуре в течение 3 часов и добавл ют 500 мл деионизированной воды.
Смесь нагревают при температуре кипени с обратным холодильником. Реакционную
смесь охлаждают до комнатной температуры и подкисл ют 2 н. водным раствором сол ной
кислоты. Полученное белое твердое вещество выдел ют фильтрованием и сушат в
вакууме в течение ночи. Получают 27,74 г 8-феноксиоктановой кислоты. Данные анализа
соединени 65: Температура плавлени : 65-68°С. Анализ сжиганием: %С: 71,19
(вычислено), 70,98 (найдено); %Н: 8,47 (вычислено), 8,70 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): ?
11,95, с, 1Н; 7,23-7,31, м, 2Н; 6,87-6,95, м, 3Н; 3,90, т, 2Н; 2,15, т, 2Н; 1,62, п,
2Н; 1,45, п, 2Н; 1,22-1,45, м, 6Н.
Получение соединени 43
Гидроксид кали (2,62 г, 0,0467 моль) и диметилсульфоксид (90 мл) помещают в 500 мл
круглодонную колбу в атмосфере азота. После перемешивани в течение 5 минут
добавл ют монобензоат резорцина (10,0 г, 0,0467 моль) и этил 8-бромоктаноат (11,73 г,
0,0467 моль). После перемешивани в течение ночи при комнатной температуре к
полученной смеси добавл ют дополнительную порцию гидроксида кали (2,62 г, 0,0467
моль) дл завершени реакции. После перемешивани в течение дополнительных 5,5
часов к смеси добавл ют воду (200 мл) и экстрагируют трем порци ми дихлорметана (100
мл порции). Объединенные дихлорметановые порции сушат сульфатом натри и
концентрируют в вакууме. Полученное коричневое масло с запахом диметилсульфоксида
поглощают водой. Затем смесь экстрагируют трем порци ми этилацетата (100 мл порции).
Объединенные этилацетатные слои промывают трем порци ми воды (100 мл порции).
Этилацетатный слой сушат сульфатом натри и концентрируют в вакууме. Полученное
коричневое масло поглощают водным раствором гидроксида натри (2 н. раствор, 100 мл).
Затем добавл ют тетрагидрофуран (50 мл) и смесь нагревают при температуре кипени с
обратным холодильником в течение 2 часов, после чего нагревание прекращают.
Тетрагидрофуран удал ют в вакууме и реакционную смесь подкисл ют 2 н. водным
раствором сол ной кислоты. Полученное желтовато-коричневое твердое вещество
несколько раз промывают водой с температурой 40-50°С и затем перекристаллизовывают
из смеси вода:этанол (80:20). Полученное желтовато-коричневое твердое вещество
сначала перекристаллизовывают из смеси гексан:этилацетат (90:10) и затем добавл ют в
кип щую воду. Этиловый спирт добавл ют до тех пор, пока смесь не становитс прозрачной. Во врем охлаждени осаждаетс желтовато-коричневое твердое вещество,
которое выдел ют фильтрованием. Полученный продукт сушат в вакууме и выдел ют с
выходом 5,96 г. Данные анализа соединени 43: Температура плавлени = 89-91°С.
Анализ сжиганием: %С: 66,67 (вычислено), 66,68 (найдено); %Н: 7,94 (вычислено), 7,92
(найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): ? 12,0, с, 1Н; 9,3, с, 1Н; 7,00, т, 1Н; 6,29, м, 3Н;
3,84, т, 2Н; 2,15, т, 2Н; 1,62, п, 2Н; 1,45, п, 2Н; 1,23, м, 6Н.
Соединени 44, 45, 74 и 46 получают вышеописанным способом, использу соответствующее исходное вещество.
Соединение 44. Температура плавлени : 89-92°С. Анализ сжиганием: %С: 68,57
(вычислено), 68,71 (найдено); %Н: 8,57 (вычислено), 8,58 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): ?
11,9, с, 1Н; 9,2, с, 1Н; 7,00, т, 1Н; 6,29, м, 3Н; 3,84, т, 2Н; 2,15, т, 2Н; 1,62, п,
2Н; 1,30, п, 2Н; 1,23, м, 8Н.
Соединение 45. Температура плавлени : 98-99,5°С. Анализ сжиганием: %С: 64,29
(вычислено), 64,06 (найдено); %Н: 7,14 (вычислено), 7,12 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): ?
12,0, с, 1Н; 9,3, с, 1Н; 7,00, т, 1Н; 6,29, м, 3Н; 3,84, т, 2Н; 2,17, т, 2Н; 1,62, п,
Страница: 26
RU 2 300 516 C2
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
2Н; 1,49, п, 2Н; 1,35, м, 2Н.
Соединение 74. Температура плавлени : 126-128°С. Анализ сжиганием: %С: 56,57
(вычислено), 56,72 (найдено); %Н: 6,39 (вычислено), 6,66 (найдено); %N: 4,71
(вычислено), 4,32 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): ? 11,7, с, 1Н; 10,4, с, 1Н; 7,75-7,8,
дд, 1Н; 7,68-7,73, д, 1Н; 6,92-6,99, д, 1Н; 4,00, т, 2Н; 2,15, т, 2Н; 1,67, п, 2Н; 1,22-1,55, м, 8Н.
Соединение 46. Температура плавлени : 93-95°С. Анализ сжиганием: %С: 61,22
(вычислено), 61,20 (найдено); %Н: 6,12 (вычислено), 6,02 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): ?
12,0, с, 1Н; 9,3, с, 1Н; 7,01, т, 1Н; 6,30, м, 3Н; 3,86, т, 2Н; 2,35, т, 2Н; 1,85, п, 2Н.
Получение соединени 47
Гидроксид кали (11,20 г, 200,0 ммоль) измельчают в ступке до порошкообразного
состо ни и помещают в 0,5 л круглодонную колбу, содержащую 90 мл
диметилсульфоксида. Полученную смесь перемешивают в течение 5 минут, после чего
добавл ют 10,00 г (50,0 ммоль) 4-бензилоксифенола с последующим немедленным
добавлением 12,55 г (50,0 ммоль) этил 8-бромоктаноата. Реакционную смесь
перемешивают при комнатной температуре в течение двух с половиной часов. Затем
реакционную смесь выливают в 200 мл дистиллированной воды. Смесь нагревают при
температуре кипени с обратным холодильником. После окончани реакции реакционную
смесь оставл ют охлаждатьс до комнатной температуры. Смесь подкисл ют 2 н. водным
раствором сол ной кислоты и образовавшеес твердое вещество выдел ют
фильтрованием. Твердое вещество сушат в вакууме в течение ночи. Получают 17,96 г (4бензилоксифенил)-8-оксиоктановой кислоты. Полученное вещество используют на
следующей стадии без очистки.
(4-Бензилоксифенил)-8-оксиоктановую кислоту помещают в 0,5 л круглодонную колбу,
содержащую 120 мл этилового спирта. Реакционную смесь барботируют азотом в течение
15 минут и добавл ют 10% палладий на активированном угле. Затем в колбе создают
вакуум и поверх колбы помещают баллон с водородом так, чтобы содержимое колбы
находилось в атмосфере водорода. Смесь перемешивают в течение ночи при комнатной
температуре и затем фильтруют через целит. Этиловый спирт удал ют в вакууме, получа белое твердое вещество, которое сначала перекристаллизовывают из смеси этиловый
спирт:вода (90:10) и затем раствор ют в 2 н. водном растворе гидроксида натри . Смесь
фильтруют и подкисл ют 2 н. водным раствором сол ной кислоты. Образовавшеес белое
твердое вещество выдел ют фильтрованием и сушат в вакууме. Получают 2,12 г (4гидроксифенил)-8-оксиоктановой кислоты. Данные анализа соединени 47. Температура
плавлени : 97-100°С. Анализ сжиганием: %С: 66,67 (вычислено), 66,43 (найдено); %Н:
7,94 (вычислено), 7,80 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): ? 12,0, с, 1Н; 9,00, с, 1H; 6,63,
м, 4Н; 3,75, т, 2Н; 2,15, т, 2Н; 1,60, п, 2Н; 1,45, п, 2Н; 1,20, м, 6Н.
Соединени 48, 49 и 50 получают вышеописанным способом, использу соответствующее исходное вещество.
Соединение 48. Температура плавлени : 99-100°С. Анализ сжиганием: %С: 68,57
(вычислено), 68,47 (найдено); %Н: 8,57 (вычислено), 8,67 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): ?
6,63, м, 4Н; 3,75, т, 2Н; 2,15, т, 2Н; 1,60, п, 2Н; 1,45, п, 2Н; 1,20, м, 10Н.
Соединение 49. Температура плавлени : 102-104°С. Анализ сжиганием: %С: 64,29
(вычислено), 64,53 (найдено); %Н: 7,14 (вычислено), 7,32 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): ?
11,5, с, 1H; 8,5, с, 1H; 6,63, м, 4Н; 3,75, т, 2Н; 2,15, т, 2Н; 1,60, п, 2Н; 1,45, п, 2Н; 1,30, м, 2Н.
Соединение 50. Температура плавлени : 117-120°С. Анализ сжиганием: %С: 58,43
(вычислено), 58,63 (найдено); %Н: 6,35 (вычислено), 6,40 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): ?
12,0, с, 1H; 8,6, с, 1H; 6,62, м, 4Н; 3,80, т, 2Н; 2,50, т, 2Н; 1,80, п, 2Н.
Получение соединени 57
2,5-Дигидироксиацетофенон (5,00 г, 0,0329 моль), бензил-бромид (3,72 мл, 0,031
моль), карбонат кали (4,31 г, 0,031 моль) и ацетон (150 мл) помещают в 500 мл
круглодонную колбу. Реакционную смесь нагревают в течение ночи при температуре
кипени с обратным холодильником и охлаждают до комнатной температуры. К холодной
Страница: 27
RU 2 300 516 C2
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
реакционной смеси добавл ют деионизированную воду (150 мл) и трижды экстрагируют
100 мл порци ми диэтилового эфира. Объединенные эфирные слои сушат сульфатом
натри и концентрируют в вакууме, получа темное твердое вещество. Темное твердое
вещество перекристаллизовывают из смеси этанол:вода (50:50), получа 3,09 г 2гидрокси-5-бензилоксиацетофенона в виде желтых игл.
Гидроксид кали (11,11 г, 0,1983 моль) и диметил-сульфоксид (90 мл) помещают в 250
мл круглодонную колбу. Через 10 минут добавл ют полученный выше 2-гидрокси-5бензилоксиацетофенон (12,00 г, 0,0496 моль), затем этил 8-бромоктаноат (12,45 г,
0,496 моль). Реакционную смесь перемешивают в течение ночи при комнатной
температуре. Добавл ют деионизированную воду и реакционную смесь нагревают при
температуре кипени с обратным холодильником в течение п ти часов. Затем реакционную
смесь оставл ют охлаждатьс до комнатной температуры и подкисл ют 2 н. водным
раствором сол ной кислоты. Полученное желтовато-коричневое твердое вещество
выдел ют фильтрованием и дважды промывают порци ми деионизированной воды. После
сушки в течение ночи в вакууме получают 16,75 г (4-бензилокси-2-ацетилфенил)-8оксиоктановой кислоты.
(4-Бензилокси-2-ацетилфенил)-8-оксиактановую кислоту (16,75 г, 0,0435 моль) и
этилацетат (85 мл) помещают в 300 мл реактор Парра. Добавл ют 10% палладий на
активированном угле (0,75 г), после чего реактор герметично закрывают, откачивают
воздух и подают водород. Реактор нагревают при 50°С в течение ночи, открывают и
добавл ют еще 0,5 г 10% паллади на активированном угле. Реактор снова герметично
закрывают, откачивают воздух и подают водород. Если реакционна смесь не измен етс ,
наход сь в течение двух дней при комнатной температуре, реактор снова открывают и
реакционную смесь фильтруют. Фильтрат концентрируют в вакууме и остаток снова
помещают в реактор Парра. Затем остаток поглощают этилацетатом и добавл ют 10%
палладий на активированном угле. Реактор герметично закрывают, откачивают воздух,
подают водород и нагревают в течение ночи при 50°С. После охлаждени до комнатной
температуры реактор открывают, палладий на активированном угле отфильтровывают и
реакционную смесь концентрируют в вакууме. Образовавшеес желтое твердое вещество
перекристаллизовывают из смеси вода:этиловый спирт (80:20). Желтое твердое вещество,
полученное в результате перекристаллизации, поглощают кип щим гексаном. Затем
добавл ют этилацетат, пока не образуетс прозрачный раствор, и смесь оставл ют
охлаждатьс до комнатной температуры. Осажденное желтовато-коричневое твердое
вещество выдел ют фильтрованием и сушат в вакууме. Получают 6,23 г (4-гидрокси-2ацетилфенил)-8-оксиактановой кислоты. Данные анализа соединени 57. Температура
плавлени : 112-115°С. Анализ сжиганием: %С: 65,31 (вычислено), 65,32 (найдено); %Н:
7,48 (вычислено), 7,39 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): ? 6,88-7/02, м, 3Н; 3,92, т, 2Н;
2,49, с, 3Н; 2,15, т, 2Н; 1,69, п, 2Н; 1,20-1,59, м, 8Н.
Получение соединени 81
Получение этилового эфира 8-(4-бензилоксифенокси)-2-метилоктановой кислоты
Перенос жидкостей осуществл ют в безвоздушных услови х. 14,0 г этилового эфира 8(4-бензилоксифенокси)октановой кислоты (0,03778 моль, 1 экв.) помещают в высушенную
пламенем 250 мл трехгорлую круглодонную колбу, оснащенную мешалкой. Затем
добавл ют 80 мл безводного ТГФ. Смесь перемешивают в течение 10 минут или до
полного растворени твердого вещества. Смесь охлаждают до -78°С на бане со смесью
сухого льда с ацетоном. К полученной смеси добавл ют 19,84 мл 2 М раствора
диизопропиламида лити (0,03967 моль, 1,05 экв.). Добавление производ т медленно,
поддержива температуру ниже -60°С. Закончив добавление, смесь перемешивают в
течение 2,0 часов при -78°С, после чего суспензию медленно гас т 4,70 мл иодметана
(0,07556 моль, 2,0 экв). Во врем добавлени не допускают повышени температуры
выше -50°С. Реакционную смесь оставл ют медленно нагреватьс до комнатной
температуры и перемешивают в течение 3 дней. Из раствора отфильтровывают осадок и
Страница: 28
RU 2 300 516 C2
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
супернатант концентрируют в вакууме до образовани остатка. Полученный остаток
поглощают 60 мл этилацетата и обрабатывают насыщенным раствором бикарбоната
натри (50 мл) и насыщенным раствором NaCl (50 мл). Этилацетатный слой сушат 4,5 г
безводного сульфата натри и фильтруют. Органический слой концентрируют в вакууме до
образовани остатка. Конечный продукт получают в виде золотистого масла с выходом
сырого продукта, равным 9,10 г (выход 62,6%). Данные ВЭЖХ показывают, что полученный
продукт содержит небольшое количество исходного вещества вместе с некоторым
количеством диметилированного побочного продукта. Промежуточный продукт не
исследуют и используют без очистки на следующей стадии.
Указанное соединение дебензилируют при помощи Pd/C и H2, как описано в способе
получени соединени 47. Полученный продукт гидролизуют способами, описанными дл соединени 47, получа соединение 81.
Выход равен 67,85%. Продукт представл ет собой белое твердое вещество. Т.пл. равна
67-70°С. Элементный анализ: теоретические значени С=67,65%, Н=8,33%; найдено С=
67,56%, Н=8,56%. Количественный анализ 13С ЯМР (ДМСО-d6): С=0 (1С, 177,477); CAr-O
(2С, 151,467 и 151,015 м.д.); СAr-Н (4С, 115,617 и 115,209 м.д.); CH2-CH2-O (1C, 67,939
м.д.); СН-СН3 (1С, 38,689 м.д.); -CH2- (5C, 33,211, 28,769, 26,645, 25,451 м.д.); СН-СН3 (1C,
16,944 м.д.).
Получение соединени 82
Получение этилового эфира 8-(4-бензилоксифенокси)-2-(пропен-2-ил)октановой кислоты
Перенос жидкостей осуществл ют в безвоздушных услови х. 10,0 г этилового эфира 8(4-бензилоксифенокси)октановой кислоты (0,02699 моль, 1 экв.) помещают в высушенную
пламенем 250 мл трехгорлую круглодонную колбу, оснащенную мешалкой. Затем
добавл ют 100 мл безводного ТГФ. Смесь перемешивают течение 10 минут или до полного
растворени твердого вещества.
Смесь охлаждают до -78°С на бане со смесью сухого льда с ацетоном. К смеси
добавл ют 24,0 мл 2 М раствора диизопропиламида лити (0,0480 моль, 1,7 экв.).
Добавление производ т медленно, поддержива температуру ниже -60°С. Закончив
добавление, смесь перемешивают в течение 2,0 часов при -78°С, после чего суспензию
медленно гас т 5,0 мл аллилбромида (0,0577 моль, 2,13 экв.). Во врем добавлени не
допускают повышени температуры выше -50°С. Реакционную смесь оставл ют медленно
нагреватьс до комнатной температуры и перемешивают в течение 16 часов. Из раствора
отфильтровывают осадок и супернатант концентрируют в вакууме до образовани остатка.
Полученный остаток поглощают 60 мл этилацетата и обрабатывают насыщенным
раствором бикарбоната натри (50 мл) и насыщенным раствором NaCl (50 мл). Затем
этилацетатный слой сушат 4,5 г безводного сульфата натри и фильтруют. Органический
слой концентрируют до образовани масла и хроматографируют на силикагеле, использу смесь гексанов с этилацетатом (9:1). Конечный продукт получают в виде золотистого
масла с выходом, равным 7,0 г (выход 64,1%). Количественный анализ 13С ЯМР (CDCl3-d):
С=O (1С, 175,462 М.д.); СBn (6С, 137,188, 128,36, 127,679, 127,298 м.д.); СAr-O (2С, 153,303
и 152,683 м.д.); СAr-Н (4С, 115,607 и 115,176 м.д.); =СН2 (1С, 116,484 м.д.); (СН2)Bn (1С,
70,439 м.д.); (CH2-CH2-O (1С, 68,242 м.д.); СН3-СН2-O (1С, 59,946 м.д.); СН-СН3 (1С,
45,147 м.д.); -СН2-СН= (1С, 36,404 м.д.); -СН2- (5С, 31,609, 29,121, 27,054, 25,745 м.д.);
CH2-СН3 (1С, 14,221 м.д.).
Указанное соединение дебензилируют при помощи Pd/C и Н2, как описано в способе
получени соединени 47. Полученный продукт гидролизуют способами, описанными дл соединени 47, получа соединение 82. Выход равен 67,66%. Продукт вл етс белым
твердым веществом. Т.пл. равна 98-100°С. Элементный анализ: теоретические значени С=69,36%, Н=8,90%, найдено С=69,33%, Н=8,96%. Количественный анализ 13С ЯМР
(AMCO-d6): С=O (1С, 177,226); CAr-O (2С, 151,660 и 151,216 м.д.); СAr-Н (4С, 115/786 и
115,368 м.д.); CH2-CH2-O (1C, 67,908 м.д.); СН-СН2 (1С, 44,887 м.д.); -СН2- (5С, 34,341,
28,968, 27,071, 25,614 м.д.); CH-CH2 (1C, 32,060 м.д.); CH2-СН3 (1C, 20,312 м.д.); СН2-СН3
Страница: 29
RU 2 300 516 C2
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
(1C, 14,007 м.д.).
Получение соединени 80
Получение этилового эфира 8-(4-метоксифенокси)октановой кислоты
В 500 мл трехгорлую круглодонную колбу помещают 14,90 г 4-метоксифенола (0,12
моль), 30,0 г 8-бромэтилоктаноата (0,1265 моль), 10,36 г карбоната кали (0,075
моль), 150 мл сухого ацетона и 2,5 мол.% иодида кали . Реакционную смесь помещают в
атмосферу азота и нагревают с обратным холодильником в течение 2 дней. Гетерогенную
смесь упаривают в вакууме до образовани твердого остатка и смешивают с 600 мл
используемых в равных част х воды и этилацетата. Две фазы раздел ют и органический
слой экстрагируют 3 н. раствором NaOH (3Ч150 мл). Органический слой еще раз
экстрагируют насыщенным раствором NaCl. Затем органический слой сушат над
безводным сульфатом магни и фильтруют. Затем органический раствор концентрируют до
половины объема (~180 мл) и дополн ют равным количеством гексана. Полученную смесь
помещают на ночь в холодильник. Образовавшиес кристаллы подвергают вакуумному
фильтрованию и затем воздушной сушке. Продукт не анализируют и используют без
очистки на следующих стади х.
Получение этилового эфира 8-(4-метоксифенокси)-2-метил-октановой кислоты
Перенос жидкостей осуществл ют в безвоздушных услови х. 14,0 г полученного выше
соединени (0,03778 моль, 1 экв.) перенос т в высушенную пламенем 250 мл трехгорлую
круглодонную колбу, оснащенную мешалкой. Добавл ют 80 мл безводного ТГФ. Смесь
перемешивают в течение 10 минут или до полного растворени твердого вещества. Затем
смесь охлаждают до -78°С на бане со смесью сухого льда с ацетоном. К смеси добавл ют
19,84 мл 2 М раствора диизопропиламида лити (0,03967 моль, 1,05 экв.). Добавление
производ т медленно, поддержива температуру ниже -60°С. Закончив добавление, смесь
перемешивают в течение 2 часов при -78°С, после чего суспензию медленно гас т 4,70 мл
иодметана (0,07556 моль, 2,0 экв.). Во врем добавлени не допускают повышени температуры выше -50°С. Реакционную смесь оставл ют медленно нагреватьс до
комнатной температуры и перемешивают в течение 16 часов. Из раствора
отфильтровывают осадок и супернатант концентрируют в вакууме до образовани остатка.
Образовавшийс остаток поглощают 60 мл этилацетата и обрабатывают насыщенным
раствором бикарбоната натри (50 мл) и насыщенным раствором NaCl (50 мл).
Этилацетатный слой сушат 4,5 г безводного сульфата натри и фильтруют. Органический
слой концентрируют в вакууме до образовани остатка. Конечный продукт получают в виде
золотистого масла с выходом сырого продукта, равным 9,10 г (выход 62,6 %). Данные
ВЭЖХ показывают, что полученный продукт содержит небольшое количество исходного
вещества вместе с некоторым количеством диметилированного побочного продукта.
Промежуточный продукт не исследуют и используют без очистки на следующей стадии.
Продукт получают в виде прозрачной жидкости, которую подвергают вакуумной
перегонке при 140°С и давлении 1 мм Hg. Конечный выход после перегонки равен 55,38%.
Количественный анализ 13С ЯМР (COCl3-d): C=O (1С, 176,508 м.д.); CAr-O (2С, 153,411
и 152,935 м.д.); СAr-Н (4С, 115,09 и 114,299 м.д.); СН2-СН2-O (1С, 68,186 м.д.); СН3-СН2-О
(1С, 59,782); СН3О (1С, 55,339 м.д.); СН-СН3 (1С, 39,239 м.д.); -СН2- (5С, 33,465, 29,030,
26,888, 25,666 м.д.); СН-СН3 (1С, 16,835); СН2-СН3 (1С, 14,012 м.д.).
Полученный продукт гидролизуют способами, описанными дл соединени 47, получа соединение 80. Выход равен 82,3%. Продукт представл ет собой не совсем белое твердое
вещество. Т.пл. равна 71-73°С. Элементный анализ: теоретические значени С=68,55%, Н=
8,63%; найдено С=68,04%, Н=8,65%. Количественный анализ 13С ЯМР (ДМСО-d6): С=O
(1С, 177,668); CAr-O (2С, 153,243 и 152,773 м.д.); CAr-H (4С, 115,265 и 114,554 м.д.);
СН2-СН2-O (1С, 67,818 м.д.); ОСН3 (1С, 55,305 м.д.); СН-СН3 (1С, 33,340 м.д.); -CH2- (5C,
33,340, 28,805, 26,742, 25,487 м.д.); СН-СН3 (1С, 17,075 м.д.)
Получение соединени 69
Этиловый эфир 8-(4-метоксифенокси)-2-метилоктановой кислоты получают
Страница: 30
RU 2 300 516 C2
вышеописанным способом. Полученный продукт гидролизуют способами, описанными дл соединени 47, получа соединение 69.
Выход равен 74,6%. Продукт представл ет собой белое твердое вещество. Т.пл. равна
96-97°С. Элементный анализ: теоретические значени С=67,65%, Н=8,33%, найдено С=
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
67,74%, Н=8,44%. Количественный анализ 13С ЯМР (ДМСО-d6): С=O (1С, 174,628); CAr-O
(2С, 153,291 и 152,798 м.д.); CAr-H (4С, 115,251 и 114,562 м.д.); СН2-СН2-О (1С, 67,844
м.д.); ОСН3 (1С, 55,301 м.д.); СН2-С=O (1C, 39,343 м.д.); -CH2- (5C, 33,747, 28,700,
25,545, 24,575 м.д.).
Получение соединени 88
Смесь 6,525 г (40 ммоль) карзалама, 10,26 г (44 ммоль) 9-бром-1-нонанола и 5,30 г
(50 ммоль) карбоната натри в 30 мл N,N-диметилацетамида (ДМА) нагревают при 75-80°С
в течение 3 часов. Данные ТСХ (элюент: этилацетат/гептан) свидетельствуют об
окончании реакции. Реакционную смесь осторожно выливают в смесь воды со льдом.
Образовавшеес белое твердое вещество перемешивают в течение 1 часа. Указанное
вещество собирают на фильтре из спекшегос стекла, промывают водой, гексаном и сушат
в вакууме, получа 9,80 г 3-(9-гидроксинонил)-2Н-1,3-бензоксазин-2,4(3Н)-диона (80%).
К суспензии 6,11 г (20 ммоль) 3-(9-гидроксинонил)-2Н-1,3-бензоксазин-2,4(3Н)-диона в
10 мл N,N-диметилацетамида при комнатной температуре добавл ют 20,4 мл (20,4 ммоль)
раствора трет-бутоксида кали в ТГФ. Прозрачный коричневый раствор становитс очень
густым. Добавл ют дополнительное количество ДМА (10 мл) и нагревают смесь при
температуре кипени с обратным холодильником в течение 5 минут. Затем добавл ют
0,664 г (4 ммоль) иодида кали , после чего по капл м добавл ют 3,34 г (20 ммоль)
этилбромацетата. Реакционную смесь кип т т с обратным холодильником в течение 1
часа, охлаждают примерно до 35°С и выливают в смесь воды со льдом. Образуетс камедь. Супернатант сливают и добавл ют свежую воду. Указанную процедуру повтор ют
дважды. Камедь раствор ют в ТГФ. Раствор в ТГФ осторожно выливают в гексан.
Образовавшеес твердое вещество собирают, промывают гексаном и сушат в вакууме.
Масса требуемого продукта равна 2,36 г (35%). ВЭЖХ: 4,39 мин; Т.пл. 125-128°С. 1H ЯМР
(ДМСО-d6): ? 1,25 (12Н, м), 1,37 (2Н, м), 1,53 (2Н, м), 3,28 (2Н, м), 3,36 (2Н, т),
4,85 (2Н, с), 7,07 (2Н, м), 7,45 (1Н, т), 7,88 (1Н, д), 8,70 (1Н, т). Элементный
анализ: вычислено дл C18H27NO5: С, 64,07; Н, 8,07; N, 4,15; найдено: С, 63,71; Н,
8,29; N, 4,31.
Получение соединени 93
Температура плавлени : 57-59°С. Анализ сжиганием: %С: 72,69 (вычислено), 72,75
(найдено); %Н: 9,15 (вычислено), 9,44 (найдено).
Получение соединени 94
Температура плавлени : 59-61°С. Анализ сжиганием: %С: 71,16 (вычислено), 71,08
(найдено); %Н: 8,53 (вычислено), 8,99 (найдено).
Получение соединени 95
Данное соединение предоставлено фирмой Contact Service Company, Москва, Росси .
Получение соединени 96
Данное соединение предоставлено фирмой Contact Service Company, Москва, Росси .
Получение соединени 97
Данное соединение предоставлено фирмой Sigma Company of Milwaukee, WI.
Пример 2. Кальцитонин лосос (sCT) - пероральное введение
Лекарственные композиции дл перорального введени (РО), содержащие соединение
доставл ющего агента и кальцитонин лосос (sCT) в деионизированной воде, получают в
соответствии с приведенной ниже таблицей 2. В частности, 450 мг соединени доставл ющего агента добавл ют к 2,0 мл воды. Обычно используют натриевую соль
указанного соединени , либо свободную кислоту превращают в натриевую соль, дл чего к
перемешиваемому раствору добавл ют один эквивалент гидроксида натри (1,0 н. раствор)
и разбавл ют водой. Раствор подвергают вихревому перемешиванию, нагревают (около
Страница: 31
RU 2 300 516 C2
5
10
15
20
25
30
37°С) и обрабатывают ультразвуком. Показатель рН довод т примерно до 7 (около 6,58,5), добавл NaOH или HCl. К полученному раствору добавл ют 90 мкг sCT из исходного
раствора sCT (раствор с концентрацией 2 мг/мл получают, добавл к sCT 1000%
фосфатного буфера с рН 4, после чего полученную смесь оставл ют в покое примерно на
10-20 минут и периодически осторожно переворачивают). Затем добавл ют воду, довод общий объем до 3,0 мл (указанное количество может измен тьс в зависимости от
растворимости соединени доставл ющего агента). Лекарственные растворы, содержащие
соединени доставл ющих агентов 3 и 15, необходимо дополнительно развести водой,
причем дл достижени требуемого количества соединени доставл ющего агента и sCT
вводимые конечные дозы соответственно должны быть равны 3 и 2 мл/кг. Конечные дозы
соединени доставл ющего агента, sCT и объемы доз приведены в нижеследующей
таблице 2.
Обычно используют описанные ниже методики определени требуемой дозы и отбора
проб. Самцов крыс Sprague-Dawley с массой тела 200-250 г не корм т в течение 24
часов, после чего им ввод т кетамин (44 мг/кг) и хлорпромазин (1,5 мг/кг) за 15 минут
до введени лекарственного средства и при необходимости производ т повторное
введение анестезирующих средств дл обеспечени необходимой степени наркоза.
Экспериментальной группе из п ти животных ввод т один из лекарственных растворов.
Дл перорального введени используют французский катетер Rusch 8 длиной 11 см,
соответствующий 1 мл шприцу с концом в виде пипетки. Шприц заполн ют лекарственным
раствором, пропуска раствор через катетер, который затем вытирают досуха. Катетер
ввод т в пищевод, оставл перед резцами конец трубки длиной 1 см. Подачу раствора
осуществл ют нажатием на поршень шприца.
Пробы крови отбирают из хвостовой артерии через промежутки времени, равные обычно
0, 10, 20, 30, 60 и 90 минутам. Содержание sCT в сыворотке определ ют при помощи тестнабора EIA (набор № EIAS-6003 фирмы Peninsula Laboratories, Inc., San Carlos, CA).
Результаты сравнивают с базовыми значени ми, полученными в промежуток времени = 0.
Результаты, полученные у животных в каждой экспериментальной группе, усредн ют дл каждого промежутка времени. Усредненные максимальные значени приведены в
нижеследующей таблице 2.
Таблица 2
Кальцитонин лосос (sCT) пероральное введение
Соединение
Доза соединени Доза sCT Объем дозы Усредненный максимум sCT в сыворотке (пг/мл ± стандартное
доставл ющего агента (мг/кг)
(мкг/кг) (мл)
отклонение) (стандартна ошибка)
35
40
45
50
1
150
30
1
317±405
1
150
30
1
398±237
1
150
30
1
410±471
2
150
30
1
628±221
2
150
30
1
449±550
2
150
30
1
320±348
3
150
30
3
0±81
4
150
30
1
187±177
4
150
30
1
195±436
5
150
30
1
349±348
6
150
30
1
316±189
6
150
30
1
144±200
7
150
30
1
677±429
7
150
30
1
87±135
7
150
30
1
149±103
7
150
30
1
216±180
7
150
30
1
313±381
Соединение
Доза соединени Доза sCT Объем дозы Усредненный максимум sCT в сыворотке (пг/мл ± стандартное
доставл ющего агента (мг/кг)
(мкг/кг) (МЛ)
отклонение) (стандартна ошибка)
7
150
30
1,16
297±270
7
150
30
1
181±197
Страница: 32
RU 2 300 516 C2
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
7
50
100
0,5
81±137
7
50
100
0,5
273±303
7
50
100
1
116±170
7
150
30
1
148±152
7
150
30
1
0
7
150
30
1
279±369
7
150
30
1
220±126
7
150
30
1
438±154
7
150
30
1
86±146
8
150
30
1
166±190
194±239
8
150
30
1
8
150
30
2
36±49
8
150
30
1
327±323
9
150
30
1
278±286
9
150
30
1
133±172
9
150
30
1
255±249
9
150
30
1
286±126
10
150
30
1
246±212
10
150
30
1
119±131
10
150
30
1
100±224
10
150
30
1
352±445
11
150
30
1
526±415
12
150
30
1
391±278
12
50
100
1
316±476
12
50
100
0,5
445±221
12
150
30
1
224±106
12
150
30
1
170±233
12
150
30
1
286±267
12
150
30
1
195±172
12
150
30
1
150±132
12
150
30
1
273±206
12
150
30
1
170±48
12
150
30
1
0±98
12
150
30
1
151±80
12
150
30
1
314±255
12
150
30
1
184±177
12
150
30
1
412±275
Соединение
Доза соединени Доза sCT Объем дозы Усредненный максимум sCT в сыворотке (пг/мл ± стандартное
доставл ющего агента (мг/кг)
(мкг/кг) (МЛ)
отклонение) (стандартна ошибка)
12
150
30
1
79±92
12
150
30
1
168±169
12
150
30
1
206±286
12
150
30
1
293±414
12
150
30
1
180±263
12
150
30
1
226±148
12
150
30
1
507±413
12
150
30
1
177±188
12
150
30
1
203±227
12
150
30
1
330±462
12
150
30
1
160±188
12
150
30
1
291±269
12
150
30
1
170±246
12
150
30
1
199±236
12
150
30
1
137±133
12
150
30
1
207±164
12
150
30
1
203±120
12
150
30
1
182±153
12
150
30
1
181±270
Страница: 33
RU 2 300 516 C2
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
12
150
30
1
219±262
12
150
30
1
2761163
12
150
30
1
196±131
12
150
30
1
185±192
12
150
30
1
75±169
12
150
30
1
125±164
12
150
30
1
118±265
12
150
30
1
207±207
12
150
30
1
224±313
12
150
30
1
190±244
12
150
30
1
336±347
12
150
30
1
209±118
12
150
30
1
302±257
12
150
30
1
225±258
12
150
30
1
227±233
12
150
30
1
172±296
14
150
30
1
568±247
14
150
30
1
199±180
14
150
30
1
117±166
Соединение
Доза соединени Доза sCT Объем дозы Усредненный максимум sCT в сыворотке (пг/мл ± стандартное
доставл ющего агента (мг/кг)
(мкг/кг) (мл)
отклонение) (стандартна ошибка)
14
150
30
1
196±155
15
150
30
2
116±88
18
150
30
2
14±4183
19
150
30
1
206±131
19
150
30
1
79±176
19
150
30
1
224±501
19
150
30
1
110±125
19
150
30
1
170±161
19
150
30
1
128±155
20
150
30
1
138±107
20
150
30
1
85±82
20
150
30
1
96±135
21
150
30
1
181±128
21
150
30
1
215±232
21
150
30
1
89±98
22
150
30
1
309±152
22
150
30
1
290±174
22
150
30
1
273±281
22
150
30
1
148±162
23
150
30
1
161±150
23
150
30
1
122±273
24
150
30
1
142±135
24
150
30
1
21±48
24
150
30
1
665±1487
25
150
30
1
53±77
27
150
30
1
163±106
28
150
30
1
138±90
29
150
30
1
233±207
29
150
30
1
193±215
29
150
30
1
92±408
30
150
30
1
166±185
30
150
30
1
166±106
30
150
30
1
122±119
30
150
30
1
313±487
31
150
30
1
165±119
31
150
30
1
70±99
31
150
30
1
84±78
Страница: 34
RU 2 300 516 C2
32
150
30
1
175±148
Соединение
Доза соединени Доза sCT Объем дозы Усредненный максимум sCT в сыворотке (пг/мл ± стандартное
доставл ющего агента (мг/кг)
(мкг/кг) (мл)
отклонение) (стандартна ошибка)
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
32
150
30
1
103±75
32
150
30
1
187±135
33
150
30
1
96±209
34
150
30
1
103±72
34
150
30
1
137±178
36
150
30
1
0±62
37
150
30
1
126±48
37
150
30
1
149±184
37
150
30
1
179±232
37
150
30
1
63±91
38
150
30
1
200±158
38
150
30
1
104±130
39
150
30
1
115±120
39
150
30
1
115±178
43
150
30
1
50±71
44
150
30
1
188±184
45
150
30
1
125±187
45
150
30
1
172±158
47
150
30
1
62±99
48
150
30
4
35±49
48
150
30
3
95±156
49
150
30
1
479±291
49
150
30
1
170±75
49
150
30
1
89±129
51
150
30
1
49±45
51
150
30
1
203±227
51
150
30
1
207±207
51
150
30
1
226±220
52
150
30
1
163±300
54
150
30
1
34±47
56
150
30
1
165±243
56
150
30
1
90±125
56
150
30
1
113±115
56
150
30
1
175±150
62
150
30
1
117±158
64
150
30
1
138±148
66
150
30
4
109±244
67
150
30
2
681±419
Соединение
Доза соединени Доза sCT Объем дозы Усредненный максимум sCT в сыворотке (пг/мл ± стандартное
доставл ющего агента (мг/кг)
(мкг/кг) (мл)
отклонение) (стандартна ошибка)
67
150
30
1
142±142
67
150
30
1
256±158
71
150
30
2
302±246
71
150
30
1
45±62
71
150
30
1
146±328
72
150
30
1
558±576
72
150
30
1
224±409
78
150
30
1
54±121
78
150
30
1
154±167
78
150
30
1
107±158
79
150
30
1
133±90
Пример 3. Рекомбинантный гормон роста человека (rhGH) - пероральное введение
Лекарственные растворы дл перорального введени (РО) через желудочный зонд,
Страница: 35
RU 2 300 516 C2
5
10
15
20
25
30
содержащие соединение доставл ющего агента и rhGH, получают в фосфатном буфере,
смешива компоненты. Дл получени раствора соединени доставл ющего агента обычно
используют натриевую соль указанного соединени либо свободную кислоту превращают в
натриевую соль. Раствор соединени доставл ющего агента обычно получают в
фосфатном буфере, причем дл получени натриевой соли к перемешиваемому раствору
добавл ют один эквивалент гидроксида натри (1,0 н. раствор). Конечные лекарственные
растворы получают, смешива раствор соединени доставл ющего агента с исходным
раствором rhGH (раствор с концентрацией 15 мг rhGH/мл получают, смешива в виде
порошков 15 мг rhGH, 75 мг D-маннита, 15 мг глицина и 3,39 мг двухосновного фосфата
натри и разбавл 2% глицерином), после чего полученный раствор развод т до
требуемого объема (обычно 3,0 мл). Показатель рН при необходимости довод т до 7-8,5.
Конечные дозы соединений доставл ющих агентов и rhGH приведены в нижеследующей
таблице 3.
Обычно используют описанные ниже методики определени требуемой дозы и отбора
проб. Самцов крыс Sprague-Dawley с массой тела 200-250 г не корм т в течение 24
часов, после чего им ввод т кетамин (44 мг/кг) и хлорпромазин (1,5 мг/кг) за 15 минут
до введени лекарственного средства и при необходимости производ т повторное
введение анестезирующих средств дл обеспечени необходимой степени наркоза.
Экспериментальной группе из п ти животных ввод т один из лекарственных растворов.
Дл перорального введени используют французский катетер Rusch 8 длиной 11 см,
соответствующий 1 мл шприцу с концом в виде пипетки. Шприц заполн ют лекарственным
раствором, пропуска раствор через катетер, который затем вытирают досуха. Катетер
ввод т в пищевод, оставл перед резцами конец трубки длиной 1 см. Подачу раствора
осуществл ют нажатием на поршень шприца.
Пробы крови отбирают из хвостовой артерии через промежутки времени, равные обычно
15, 30, 45, 60 и 90 минутам. Объедин ют п ть проб, вз тых в каждый промежуток времени
(за исключением проб, дл которых указано стандартное отклонение (SD) и стандартна ошибка (SE)). Количественное определение концентрации rhGH в сыворотке производ т
при помощи набора дл иммуноанализа rhGH (набор № K1F4015 фирмы Genzyme
Corporation Inc., Cambridge, MA). Базовые значени , полученные в предшествующих
исследовани х, практически равны нулю. Максимальные концентрации дл каждой группы
приведены в нижеследующей таблице 3.
Таблица 3. rhGH - пероральное введение
Соединение доставл ющего Доза соединени доставл ющего Доза rhGH Объем дозы Усредненный максимум rhGH в
агента
агента (мг/кг)
(мг/кг)
(мл)
сыворотке (нг/мл)
35
40
45
50
1
200
3
1
95,5
1
200
3
1
30,9
1
200
3
1
76,2
1
200
3
1
37,2±50
4
200
3
1
12,6
5
200
3
1
127
5
200
3
1
223
5
200
3
1
56,5
7
200
3
1
8,8
7
200
3
1
58,9
7
200
3
1
29,1±58,2
8
200
3
1
4,88
9
200
3
1
1
10
200
3
1
34,3
11
200
3
1
35,4
12
200
3
1
12,7
12
200
3
1
44,3
14
200
3
1
19,8
15
200
3
1
83,9
15
200
3
1
47,3
15
200
3
1
44,7
15
200
3
1
27,4±37,3
Страница: 36
RU 2 300 516 C2
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
18
200
3
1
18
162
2,6
1
223
3,1
19
200
3
1
39,5
20
200
3
1
22,6
21
200
3
1
19,6
22
200
3
1
0
24
200
3
1
1,76
25
200
3
1
0
26
200
3
1
8,3
27
200
3
1
12,9
Соединение доставл ющего Доза соединени доставл ющего Доза rhGH Объем дозы Усредненный максимум rhGH в
агента
агента (мг/кг)
(мг/кг)
(мл)
сыворотке (нг/мл)
28
200
3
1
28
200
3
1
90,1
121
28
200
3
1
19,2
29
200
3
1
0
30
200
3
1
40,5
30
200
3
1
0
30
200
3
1
0
30
200
3
1
5,27
32
200
3
L
0
33
200
3
1
10,1
33
200
3
1
6,9
34
200
3
1
0
34
200
3
1
7,8
36
200
3
1
0
37
200
3
1
29
39
200
3
1
0
43
200
3
1
9,49
43
200
3
1
42,2±41
45
200
3
1
11,2
45
200
3
1
22,8
45
200
3
1
42,9
47
200
3
1
11,6
47
200
3
1
144
47
200
3
1
81,7
47
200
3
1
41,7
47
200
3
1
85,7
47
200
3
2
9,9±22,1
47
200
3
1
34,1±42,2
47
200
3
1
9,41
47
200
3
1
132
49
200
3
1
41,3
49
200
3
1
0
49
200
3
1
20,1
52
200
3
1
0
54
200
3
1
6,37
55
200
3
1
12,4
56
200
3
1
0
60
200
3
1
1,5±3,3
62
200
3
1
6,2
64
200
3
1
5
66
200
3
1
0
67
200
3
1
15
67
200
3
1
14,7
71
200
3
3
5,94
Соединение доставл ющего Доза соединени доставл ющего Доза rhGH Объем дозы Усредненный максимум rhGH в
агента
агента (мг/кг)
(мг/кг)
(мл)
сыворотке (нг/мл)
72
200
3
1
78
200
3
1
0
79
200
3
1
1,48
Страница: 37
28
RU 2 300 516 C2
79
5
10
15
20
25
30
35
40
200
3
1
17,8
Пример 4. Гепарин - Пероральное/внутрикишечное введение
Лекарственные растворы дл перорального введени (РО) через желудочный зонд и/или
внутрикишечного введени (IC), содержащие соединение доставл ющего агента и
гепариннатрий фармакопеи США (USP), получают в 25% водном растворе
пропиленгликол . Используют натриевую соль соединени доставл ющего агента или
свободную кислоту превращают в натриевую соль, добавл один эквивалент гидроксида
натри . Соединение доставл ющего агента и гепарин (примерно 166-182 ед./мг (обычно
166,9 ед./мг)) смешивают в виде сухих порошков, подверга их вихревому перемешиванию.
Сухую смесь раствор ют в 25% (об./об.) водном растворе пропиленгликол , подвергают
вихревому перемешиванию и помещают в устройство дл ультразвуковой обработки (около
37°С). Показатель рН довод т примерно до 7 (6,5-8,5) водным раствором NaOH (2 н.
раствор). Лекарственный раствор обрабатывают ультразвуком, получа прозрачный
раствор. Конечный объем довод т примерно до 3,0 мл. Конечные дозы соединени доставл ющего агента, гепарина и объемы доз приведены в нижеследующей таблице 4.
Обычно используют описанные ниже методики определени требуемой дозы и отбора
проб. Самцов крыс Sprague-Dawley с массой тела 275-350 г не корм т в течение 24
часов, после чего животных анестезируют, ввод им внутримышечно гидрохлорид кетамина
(88 мг/кг) непосредственно перед введением лекарственного средства и при
необходимости производ т повторное введение анестезирующего средства дл обеспечени необходимой степени наркоза. Экспериментальной группе из п ти животных
ввод т один из лекарственных растворов. Дл перорального введени (РО) через
желудочный зонд используют французский катетер Rusch 8 длиной 11 см,
соответствующий 1 мл шприцу с концом в виде пипетки. Шприц заполн ют лекарственным
раствором, пропуска раствор через катетер, который затем вытирают досуха. Катетер
ввод т в пищевод, оставл перед резцами конец трубки длиной 1 см. Подачу
лекарственного раствора осуществл ют нажатием на поршень шприца. Дл внутрикишечного введени (IC) используют французский катетер Rusch 8 длиной 7,5 см,
соответствующий 1 мл шприцу с концом в виде пипетки. Катетер ввод т в ободочную кишку
через анальное отверстие так, чтобы трубка была совершенно не видна. Лекарственный
раствор медленно подают в ободочную кишку, нажима на поршень шприца.
Пробы цитратной крови отбирают пункцией в сердце, которую делают после введени кетамина (88 мг/кг), обычно через 0,25, 0,5, 1,0 и 1,5 часа после введени лекарственного раствора. Всасывание гепарина определ ют по увеличению времени
свертывани крови, измер емого с учетом времени по влени частично активированного
тромбопластина (АРТТ) в соответствии со способом, описанным Henry, J.B., Clinical
Diagnosis and Management by Laboratory Methods, Philadelphia, PA, W.B. Saunders
(1979). Базовые значени , полученные в предшествующих исследовани х, равны примерно
20 секундам. Результаты, полученные у животных в каждой группе, усредн ют дл каждого
промежутка времени, при этом наибольшие из указанных средних значений (т.е.
усредненный максимум АРТТ) приведены в нижеследующей таблице 4.
Таблица 4. Гепарин пероральное/внутрикишечное введение
Соединение
Способ Доза соединени Доза гепарина Объем дозы Усредненный максимум АРТТ (сек) ±
доставл ющего агента введени доставл ющего агента (мг/кг) (мг/кг)
(мл)
стандартное отклонение)
45
50
130,84±118,18
1
IC
50
25
1
1
IC
50
25
1
231,34
2
IC
50
25
1
48,788±32,79
3
IC
50
25
1
16,046±0,481
3
IC
50
25
1
16,984±1,45
4
IC
50
25
1
40,3±17,8
4
IC
50
25
1
23,076±4,72
4
IC
50
25
1
37,148±39,67
5
PO
300
100
3
135,7±17,3
6
IC
50
25
1
157,4±33,7
Страница: 38
RU 2 300 516 C2
5
10
6
PO
300
100
3
193±61,2
6
IC
50
25
1
99,8±50,6
7
IC
50
25
1
130,5±42,6
7
IC
50
25
1
92±40,3
7
IC
50
25
1
99,4±25,5
8
IC
50
25
1
251,94±67,96
9
IC
50
25
1
21,45±1,71
10
IC
50
25
1
81,8±7
10
IC
50
25
1
63,5
11
IC
50
25
1
39,53±8,25
12
IC
50
25
1
219,5±128,4
12
IC
50
25
1
169,6±68,6
Соединение
Способ Доза соединени Доза гепарина Объем дозы Усредненный максимум АРТТ (сек) ±
доставл ющего агента введени доставл ющего агента (мг/кг) (мг/кг)
(мл)
стандартное отклонение)
15
20
25
30
35
40
45
50
12
РО
300
100
3
201,4±45,7
12
IC
50
25
1
115,81±159,53
12
IC
50
25
1
236,8
12
IC
50
25
1
300
12
IC
50
25
1
255,452±41,99
12
IC
50
25
1
167,08±81,62
12
IC
50
25
1
195,884±142,628
12
IC
50
25
1
279,076±46,79
12
IC
50
25
1
220,164±109,57
12
IC
50
25
1
300
22
IC
50
25
1
287,9±120,1
26
IC
50
25
1
76,7
26
IC
50
25
1
41,534±25,56
27
IC
50
25
1
85,7
27
IC
50
25
1
279,182±46,55
28
IC
50
25
1
143,6±44
28
IC
50
25
1
251,1±109,34
29
IC
50
25
1
105,01±115,28
29
IC
50
25
1
111,46±108,58
30
IC
50
25
1
50,9±20,5
31
IC
50
25
1
47±23,1
32
IC
50
25
1
26,5±2,3
35
IC
50
25
1
65,8±35,5
370,3±97,8
47
IC
50
25
1
51
IC
50
25
1
92,5±41,5
54
IC
50
25
1
31,56±7,54
62
IC
50
25
1
152,41±136,63
62
IC
50
25
1
91,204±117,43
64
IC
50
25
1
220,988±122,2
64
IC
50
25
1
125,372±114,72
Пример 5. Низкомолекул рный гепарин (LMWH) - пероральное/внутрикишечное
введение
Лекарственные композиции дл перорального введени (РО) и/или внутрикишечного
введени (IC), содержащие соединение доставл ющего агента и низкомолекул рный
гепарин (LMWH), получают в 25% водном растворе пропиленгликол . Используют
натриевую соль соединени доставл ющего агента или свободную кислоту превращают в
натриевую соль, добавл один эквивалент гидроксида натри . Соединение
доставл ющего агента и LMWH (парнапарин, 91 ед./мг, средн молекул рна масса около
5000, фирмы Opocrin, Modena, Italy) (обычно 90-105 ед./мг, средн молекул рна масса
около 5000) смешивают в виде сухих порошков, подверга их вихревому перемешиванию.
Сухую смесь раствор ют в 25% (об./об.) водном растворе пропиленгликол , подвергают
вихревому перемешиванию и помещают в устройство дл ультразвуковой обработки (около
Страница: 39
RU 2 300 516 C2
5
10
15
20
25
30
37°С) дл получени прозрачного раствора. Показатель рН довод т примерно до 7 (6,58,5) 2 н. водным раствором NaOH. Лекарственный раствор обрабатывают ультразвуком,
получа прозрачный раствор. Конечный объем довод т примерно до 3,0 мл. Конечные
дозы соединени доставл ющего агента, LMWH и объемы доз приведены в
нижеследующей таблице 5.
Обычно используют описанные ниже методики определени требуемой дозы и отбора
проб. Самцов крыс Sprague-Dawley с массой тела 275-350 г не корм т в течение 24
часов, после чего животных анестезируют, ввод им внутримышечно гидрохлорид кетамина
(88 мг/кг) непосредственно перед введением лекарственного средства и при
необходимости производ т повторное введение анестезирующего средства дл обеспечени необходимой степени наркоза. Экспериментальной группе из п ти животных
ввод т один из лекарственных растворов. Дл перорального введени (РО) через
желудочный зонд используют французский катетер Rusch 8 длиной 11 см,
соответствующий 1 мл шприцу с концом в виде пипетки. Шприц заполн ют лекарственным
раствором, пропуска раствор через катетер, который затем вытирают досуха. Катетер
ввод т в пищевод, оставл перед резцами конец трубки длиной 1 см. Подачу
лекарственного раствора осуществл ют нажатием на поршень шприца. Дл внутрикишечного введени (IC) используют французский катетер Rusch 8 длиной 7,5 см,
соответствующий 1 мл шприцу с концом в виде пипетки. Катетер ввод т в ободочную кишку
через анальное отверстие так, чтобы трубка была совершенно не видна. Лекарственный
раствор медленно подают в ободочную кишку, нажима на поршень шприца.
Пробы нитратной крови отбирают пункцией в сердце, которую делают после введени кетамина (88 мг/кг), обычно через 0,5, 1,0, 2,0, 3,0 и 4,0 часа после введени лекарственного раствора. Всасывание LMWH определ ют по увеличению концентрации
LMWH в плазме, измер емой при помощи анти-Ха-анализа гепарина с использованием
набора дл тестировани антител к фактору Ха CHROMOSTRATETM (фирмы Organon
Teknika Corporation, Durham, NC). Величины концентрации LMWH в плазме, полученные у
животных в каждой группе, усредн ют дл каждого промежутка времени и стро т график
средних значений концентрации LMWH в плазме в зависимости от времени. Усредненные
максимальные значени концентрации LMWH в плазме приведены в нижеследующей
таблице 5.
Таблица 5. LMWH - пероральное/внутрикишечное введение
Соединение
Способ Доза соединени Доза LMWH Объем дозы Усредненный максимум концентрации LMWH
доставл ющего агента введени доставл ющего агента (ед./кг)
(мл/кг)
в плазме (ед./мл) ± стандартное отклонение)
(мг/кг)
35
40
45
50
1
IC
50
750
1
1,038±0,338
1
IC
50
750
1
1,734±0,192
1
IC
25
750
1
1,022±0,432
2
IC
50
750
1
1,038±0,338
6
IC
25
750
1
0,47±0,17
7
PO
300
3000
3
0,5±0,412
7
IC
50
750
1
1,264±0,207
7
IC
50
750
1
1,716±0,105
7
IC
25
750
1
0,9±0,252
9
IC
50
750
1
0,474±0,095
10
IC
50
750
1
0,088±0,121
11
IC
50
750
1
0,91±0,414
0,137±0,18
12
PO
300
3000
3
12
IC
50
751
1
1,5±0,23
12
IC
50
750
1
1,7±0,308
12
IC
50
750
1
1,74±0,304
12
IC
50
750
1
2,012±0,124
12
IC
25
750
1
1,66±0,302
12
IC
25
750
1
0,974±0,503
12
IC
10
750
1
0,2±0,077
12
IC
25
750
1
0,624±0,247
Страница: 40
RU 2 300 516 C2
5
1,498±0,462
12
IC
50
750
1
19
IC
50
750
1
0,65±0,37
22
IC
50
750
1
1,842±0,205
22
IC
25
750
1
1,496±0,153
22
IC
10
750
1
0,396±0,153
26
IC
50
750
1
0,262±0,106
27
IC
50
750
1
1,622±0,265
Соединение
Способ Доза соединени Доза LMWH Объем дозы Усредненный максимум концентрации LMWH
доставл ющего агента введени доставл ющего агента (ед./кг)
(мл/кг)
в плазме (ед./мл) ± стандартное отклонение)
(мг/кг)
10
15
28
IC
50
750
1
1,64±0,45
28
IC
25
750
1
1,43±0,31
30
IC
50
750
1
0,162±0,094
30
IC
50
750
1
0,288±0,152
31
IC
50
750
1
0,47±0,287
31
IC
50
750
1
0,47±0,332
32
IC
50
750
1
0,07±0,01
54
IC
50
750
1
3,046±0,422
65
IC
50
750
1
0,642
66
IC
50
750
L
0,952
66
IC
50
750
1
1,114±0,254
20
25
30
35
40
45
50
Пример 6. Параддитовидный гормон (РТН 1-34) - пероральное/внутрикишечное
введение
Лекарственные растворы дл перорального введени (РО) через желудочный зонд и/или
внутрикишечного введени (IC), содержащие соединение доставл ющего агента и остатки
1-34 паращитовидного гормона человека (РТН), получают в деионизированной воде. Дл получени раствора соединени доставл ющего агента используют натриевую соль
указанного соединени , либо свободную кислоту превращают в натриевую соль. Раствор
соединени доставл ющего агента обычно получают в воде, дл чего при получении
натриевой соли к перемешиваемому раствору добавл ют один эквивалент гидроксида
натри (1,0 н. раствор). Конечные лекарственные растворы получают, смешива раствор
соединени доставл ющего агента с исходным раствором РТН (обычно в воде в
концентрации 5 мг РТН/мл) и разбавл его до требуемого объема (обычно 3,0 мл).
Показатель рН при необходимости довод т примерно до 7-8,5. Конечные дозы соединени доставл ющего агента, РТН и объемы доз приведены в нижеследующей таблице 6.
Обычно используют описанные ниже методики определени требуемой дозы и отбора
проб. Самцов крыс Sprague-Dawley с массой тела 200-250 г не корм т в течение 24
часов, после чего им ввод т кетамин (44 мг/кг) и хлорпромазин (1,5 мг/кг) за 15 минут
до введени лекарственного средства и при необходимости производ т повторное
введение анестезирующих средств дл обеспечени необходимой степени наркоза.
Экспериментальной группе из п ти животных ввод т один из лекарственных растворов.
Дл перорального введени через желудочный зонд (РО) используют французский катетер
Rusch 8 длиной 11 см, соответствующий 1 мл шприцу с концом в виде пипетки. Шприц
заполн ют лекарственным раствором, пропуска раствор через катетер, который затем
вытирают досуха. Катетер ввод т в пищевод, оставл перед резцами конец трубки длиной
1 см. Подачу раствора осуществл ют нажатием на поршень шприца. Дл внутрикишечного
введени (IC) используют французский катетер Rusch 8 или 6 длиной 7,5 см,
соответствующий шприцу с концом в виде пипетки Эппендорфа. Шприц заполн ют
лекарственным раствором, подава раствор через трубку катетера. Катетер вытирают
досуха. На конец трубки нанос т гель K-J, избега соприкосновени с отверстием
трубки, после чего трубку ввод т в ободочную кишку через анальное отверстие так,
чтобы трубка была совершенно не видна. Лекарственный раствор медленно подают в
ободочную кишку, нажима на поршень шприца, после чего катетер удал ют.
Пробы крови отбирают из хвостовой артерии через промежутки времени, равные обычно
Страница: 41
RU 2 300 516 C2
5
0, 15, 30, 45, 60 и 90 минутам при пероральном введении и 0, 10, 20, 30, 60 и 90
минутам при внутрикишечном введении. Количественное определение концентрации РТН в
сыворотке производ т при помощи набора дл радиоиммуноанализа РТН (набор № RIK
6101 фирмы Peninsula Laboratories, Inc., San Carlos, CA). Базовые значени ,
полученные в предшествующих исследовани х, практически равны нулю. Результаты,
полученные у животных в каждой группе, усредн ют дл каждого промежутка времени.
Максимальные значени средних концентраций (то есть усредненные максимальные
концентрации РТН в сыворотке) приведены в нижеследующей таблице 6.
Таблица 6
Пероральное (РО) введение РТН
10
Соединение доставл ющего Доза соединени доставл ющего Доза РТН Объем дозы Усредненный максимум РТН в сыворотке
агента №
агента (мг/кг)
(мкг/кг)
(мл/кг)
(пг/мл) ± стандартное отклонение
15
100
200
1
100
200
1
78±71
31
100
200
1
460±194
33
100
200
1
837±347
34
100
200
Г
538±328
51
100
200
1
420±305
51
100
200
1
287±120
51
100
200
1
478±230
51
100
200
1
798±518
20
25
30
35
40
45
50
276±252
12
30
Пример 7. Интерферон - пероральное введение
Лекарственные растворы, содержащие соединение доставл ющего агента и интерферон
человека (IFN), получают в деионизированной воде. Свободную кислоту соединени доставл ющего агента превращают в натриевую соль, добавл один эквивалент
гидроксида натри . Раствор соединени доставл ющего агента обычно получают в воде,
дл чего при получении натриевой соли к перемешиваемому раствору добавл ют один
эквивалент гидроксида натри (1,0 н. раствор). Затем смесь подвергают вихревому
перемешиванию и помещают в устройство дл ультразвуковой обработки (около 37°С).
Показатель рН довод т примерно до 7,0-8,5 водным раствором NaOH. Смесь подвергают
вихревому перемешиванию, получа однородную суспензию или раствор, при
необходимости обрабатывают ультразвуком и нагревают. В случае необходимости
добавл ют дополнительное количество NaOH дл достижени однородной растворимости
и рН вновь довод т примерно до 7,0-8,5. Раствор соединени доставл ющего агента
смешивают с исходным раствором IFN (в концентрации примерно от 22,0 до 27,5 мг/мл в
физиологическом растворе с фосфатным буфером) и развод т до требуемого объема
(обычно 3,0 мл). Конечные дозы соединени доставл ющего агента, IFN и объемы доз
приведены в нижеследующей таблице 7.
Обычно используют описанные ниже методики определени требуемой дозы и отбора
проб. Самцов крыс Sprague-Dawley с массой тела 200-250 г не корм т в течение 24
часов, после чего им ввод т кетамин (44 мг/кг) и хлорпромазин (1,5 мг/кг) за 15 минут
до введени лекарственного средства и при необходимости производ т повторное
введение анестезирующих средств дл обеспечени необходимой степени наркоза.
Экспериментальной группе из п ти животных ввод т один из лекарственных растворов.
Дл этой цели используют французский катетер Rusch 8 длиной 11 см, соответствующий 1
мл шприцу с концом в виде пипетки. Шприц заполн ют лекарственным раствором,
пропуска раствор через катетер, который затем вытирают досуха. Катетер ввод т в
пищевод, оставл перед резцами конец трубки длиной 1 см. Подачу раствора
осуществл ют нажатием на поршень шприца.
Пробы крови отбирают из хвостовой артерии через промежутки времени, равные обычно
0, 15, 30, 45, 60 и 90 минутам. Количественное определение концентрации IFN в
сыворотке производ т при помощи набора дл иммуноанализа альфа-IFN человека
Cytoscreen (№ в каталоге КНС4012 фирмы Biosource International, Camarilio, CA).
Базовые значени , полученные в предшествующих исследовани х, практически равны
Страница: 42
RU 2 300 516 C2
нулю. Результаты, полученные у животных в каждой группе, усредн ют дл каждого
промежутка времени. Максимальные значени средних концентраций (то есть усредненные
максимальные концентрации IFN в сыворотке) приведены в нижеследующей таблице 7.
Таблица 7
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
Интерферон - пероральное введение
Соединение
Доза соединени доставл ющего Доза IFN Объем дозы Усредненный максимум IFN в сыворотке (нг/мл) ±
доставл ющего агента агента (мг/кг)
(мг/кг)
(мл/кг)
стандартное отклонение
1
200
1
1
17,357±38
5
200
1
1
5,1042±3,4
5
50
0,5
1
1,54±0,26
5
200
1
1
1,1838±1,42
5
50
0,5
1
2,1±0,95
5
200
1
1
1,51±1,9
5
200
1
1
4,11±2
5
200
1
1
7,5769 ±5
6
200
1
1
0,5696±0,8
7
400
1
1
0,223
7
200
1
1
3,9308±3,2
12
200
1
1
1,6362±1,68
15
200
1
1
6,0324±2,8
28
200
1
1
2,185±2,68
28
200
1
1
0,8±1,7
32
200
1
1
0
43
200
1
1
1±2,1
43
200
1
1
1,206
47
200
1
1
1,1±0,85
59
200
1
1
0,56±1
59
200
1
1
0
67
200
1
1
3,4451±4,5
73
200
1
1
0,76±0,7
73
200
1
1
0,22±0,5
Пример 8. Инсулин - пероральное введение
Композиции дл перорального введени (РО), содержащие соединение доставл ющего
агента и инсулин человека с противоионами цинка (минимум 26 ед./мг, фирмы
Calbiochem - Novabiochem Corp., La Jolla, CA), получают в деионизированной воде.
Обычно, 500 мг соединени доставл ющего агента добавл ют к 1,5 мл воды. Свободную
кислоту соединени доставл ющего агента превращают в натриевую соль, дл чего к
полученному раствору при перемешивании добавл ют один эквивалент гидроксида натри .
Раствор подвергают вихревому перемешиванию, затем нагревают (около 37°С) и
обрабатывают ультразвуком. Показатель рН довод т примерно до 7-8,5, добавл NaOH
или HCl. При необходимости добавл ют дополнительное количество NaOH дл достижени однородной растворимости и показатель рН повторно довод т примерно до 7-8,5. Затем
добавл ют воду до общего объема около 2,4 мл и подвергают раствор вихревому
перемешиванию. К полученному раствору добавл ют примерно 1,25 мг инсулина из
исходного раствора инсулина (раствор с концентрацией 15 мг/мл получают из 0,5409 г
инсулина и 18 мл деионизированной воды, довод рН до 8,15 при помощи HCl и NaOH,
причем дл получени прозрачного раствора используют 40 мл концентрированной HCl, 25
мл 10 н. раствора NaOH и 50 мл 1 н. раствора NaOH) и подвергают вихревому
перемешиванию. Конечные дозы соединени доставл ющего агента, инсулина и объемы
доз приведены в нижеследующей таблице 8.
Обычно используют описанные ниже методики определени требуемой дозы и отбора
проб. Самцов крыс Sprague-Dawley с массой тела 200-250 г не корм т в течение 24
часов, после чего им ввод т кетамин (44 мг/кг) и хлорпромазин (1,5 мг/кг) за 15 минут
до введени лекарственного средства и при необходимости производ т повторное
введение анестезирующих средств дл обеспечени необходимой степени наркоза.
Страница: 43
RU 2 300 516 C2
5
10
15
Экспериментальной группе из п ти животных ввод т один из лекарственных растворов.
Дл перорального введени лекарственного средства используют французский катетер
Rusch 8 длиной 11 см, соответствующий 1 мл шприцу с концом в виде пипетки. Шприц
заполн ют лекарственным раствором, пропуска раствор через катетер, который затем
вытирают досуха. Катетер ввод т в пищевод, оставл перед резцами конец трубки длиной
1 см. Подачу раствора осуществл ют нажатием на поршень шприца.
Пробы крови отбирают из хвостовой артерии через промежутки времени, равные обычно
15, 30, 60, 120 и 180 минутам. Уровни инсулина в сыворотке определ ют при помощи тестнабора дл анализа инсулина методом ELISA (набор № DSL-10-1600 фирмы Diagnostic
Systems Laboratories, Inc., Webster, TX), причем в стандартную процедуру анализа
внос т изменени дл оптимизации чувствительности и линейного диапазона стандартной
кривой, отображающей объемы и концентрации проб, используемых в данном анализе.
Концентрации инсулина человека в сыворотке (мкед./мл) измер ют дл каждого
промежутка времени у каждого из п ти животных в каждой экспериментальной группе. П ть
значений дл каждого промежутка времени усредн ют и стро т график концентрации
инсулина в сыворотке в зависимости от времени. (В предшествующих экспериментах не
были обнаружены измер емые концентрации инсулина человека после перорального
введени одного инсулина человека). Максимальные значени (пики) и величины площади
под кривой (AUC) приведены в нижеследующей таблице 8.
Таблица 8
20
Инсулин - пероральное введение
Соединение
Доза соединени доставл ющего Доза инсулина Объем дозы Усредненный максимум инсулина в сыворотке ±
доставл ющего агента агента (мг/кг)
(мг/кг)
(мл/кг)
стандартное отклонение
25
30
35
40
45
50
74,237±1144,49
1
100
3
1
3
200
0,5
1
29,95±46,13
6
200
0,5
1
129,5±131,5
7
100
3
1
130,9724±83,7
7
200
0,5
1
88,06±33,72
7
200
0,5
1
320,1±520,4
7
200
0,5
1
200,2±118,7
7
200
0,5
1
164,2±134,7
7
200
0,5
1
214,7±100,86
7
200
0,5
1
56,71±47,04
7
200
0,5
1
17,4±21,8
8
200
0,5
1
13,14±6,81
10
100
3
1
63,5884±129,23
12
100
3
0,5
205,4±333,4
15
100
3
1
1332,2 ±1906,4
15
200
0,5
1
540,7±580,12
15
200
0,5
1
18,62±12,54
15
200
0,5
1
155,6±125,2
169,3±140,78
15
200
0,5
1
19
200
0,5
1
4,32±1,39
20
200
0,5
1
27,68±12,5
21
200
0,5
1
14,46±21,61
22
200
0,5
1
24,16±28,11
25
100
3
1
47,2162±31,43
26
100
3
0,5
240,5±528,29
30
200
0,5
1
21,88±13,4
31
100
3
0,5
21,26±6,22
32
200
3
1
6,38±4,42
32
200
0,5
1
3,12±2,26
58,13±52,86
33
100
3
0,5
33
200
0,5
1
110±128
33
200
0,5
1
14,88±11,53
35
200
0,5
1
132,3±154,5
38
100
3
1
74,6542±57,28
Страница: 44
RU 2 300 516 C2
5
10
15
20
43
200
0,5
1
82,81±46,8
43
200
0,5
1
38,68±35,09
44
100
3
0,5
97,49±134,1
Соединение
Доза соединени доставл ющего Доза инсулина Объем дозы Усредненный максимум инсулина в сыворотке ±
доставл ющего агента агента (мг/кг)
(мг/кг)
(мл/кг)
стандартное отклонение
44
200
0,5
1
17,41±10,47
44
200
0/5
1
46,76±41,19
45
200
0,5
1
70,32±149,1
49
100
3
0,5
335,7±227,05
57
200
3
1
3322±2721
315,53 ±154,56
59
200
0,5
1
61
200
0,5
1
58,99±27,15
63
100
3
1
7,843±8,527
68
200
3
1
76,23±76,88
72
200
3
1
4702,5 ±4700,4
108,33±55,98
72
200
0,5
1
72
200
0,5
1
9,81±13,72
72
200
0,5
1
18,56±19,89
147,66 ±176,71
73
100
3
0,5
73
200
0,5
1
51,26±9,44
73
200
0,5
1
16,01±12,21
74
100
3
0,5
70,69±127,89
75
200
0,5
1
33,88±38,49
75
200
0,5
1
32,54±19,78
76
200
0,5
1
24,72±25,53
76
200
0,5
1
38,74±74,4
25
30
35
40
45
50
Пример 9. Инсулин - легочное введение
Лекарственные композиции, содержащие соединение доставл ющего агента и инсулин
человека, получают в воде. В частности, к 1,5 мг соединени доставл ющего агента
добавл ют деионизированную воду, довод объем до 1,0 мл, и подвергают раствор
вихревому перемешиванию. Используют натриевую соль соединени доставл ющего
агента, либо свободную кислоту превращают в натриевую соль, дл чего к полученному
раствору при перемешивании добавл ют один эквивалент гидроксида натри (10 н.
раствор) и разбавл ют водой. Раствор подвергают вихревому перемешиванию, затем
нагревают (около 37°С) и обрабатывают ультразвуком. Показатель рН довод т примерно
до 7,0-8,5, добавл NaOH или HCl. К полученному раствору добавл ют 75 мкл исходного
раствора инсулина человека (2 мг/мл). (Исходный раствор получают следующим образом. К
0,02 г инсулина добавл ют 3 мл раствора HCl с рН 3,0 в деионизированной воде.
Показатель рН полученного раствора понижают до 3,0 (примерно 2,6), добавл HCl и
NaOH, пока раствор не становитс прозрачным. Затем показатель рН повышают до 7,6,
использу NaOH и HCl. Конечный объем довод т до 10 мл деионизированной водой с рН
7,5. Конечный рН равен 7,59). Затем добавл ют воду до достижени общего объема,
равного 2,0 мл, после чего сосуд с раствором несколько раз осторожно переворачивают.
Конечные дозы соединени доставл ющего агента, инсулина и объемы дозы приведены в
нижеследующей таблице 9.
Обычно используют описанные ниже методики определени требуемой дозы и отбора
проб. Самцов крыс Sprague-Dawley с массой тела 200-250 г не корм т в течение 24
часов, после чего им ввод т кетамин (44 мг/кг) и хлорпромазин (3,0 мг/кг) за 15 минут
до введени лекарственного средства и при необходимости производ т повторное
введение анестезирующих средств дл обеспечени необходимой степени наркоза
(используют такое же количество кетамина и 1,5 мг/кг хлорпромазина).
Экспериментальной группе из п ти животных ввод т один из лекарственных растворов.
Контрольной группе из п ти животных ввод т только инсулин. Трахеальный инстилл тор
дл грызунов, оснащенный лампой (фирмы Perm Century, Inc., Pittsburgh, PA), заполн ют
Страница: 45
RU 2 300 516 C2
5
10
15
лекарственным раствором и ввод т в горло так, чтобы игла вошла в трахею (с визуальной
проверкой). Подачу лекарственного раствора осуществл ют нажатием на поршень.
Пробы крови отбирают у всех животных из хвостовой артерии через промежутки
времени, равные обычно 5, 15, 30, 60 и 120 минутам. Уровни инсулина в сыворотке
определ ют при помощи тест-набора дл анализа инсулина методом ELISA (набор № DSL10-1600 фирмы Diagnostic Systems Laboratories, Inc., Webster, TX), причем в
стандартную процедуру анализа внос т изменени дл оптимизации чувствительности и
линейного диапазона стандартной кривой, отображающей объемы и концентрации проб,
используемых в данном анализе. Концентрации инсулина в сыворотке (мкед./мл) измер ют
дл каждого промежутка времени у каждого из п ти животных в каждой экспериментальной
группе. П ть значений дл каждого промежутка времени усредн ют и стро т график
концентрации инсулина в сыворотке в зависимости от времени. Ниже приведены
соотношени площадей под кривой (AUC) дл экспериментальной группы и контрольной
группы. В нижеследующей таблице приведены также соотношени максимальных
концентраций инсулина в сыворотке (Cmax) дл экспериментальной группы и контрольной
группы.
20
25
30
35
40
45
50
Страница: 46
RU 2 300 516 C2
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
Страница: 47
RU 2 300 516 C2
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
Пример 10. Кромолин - пероральное введение
Лекарственные растворы, содержащие соединение доставл ющего агента (полученного
по примеру 1) и динатриевую соль кромолина (кромолин) (фирмы Sigma Chemical Co., St.
Louis, МО), получают в деионизированной воде. Свободную кислоту соединени доставл ющего агента превращают в натриевую соль, добавл один эквивалент
гидроксида натри . Полученную смесь подвергают вихревому перемешиванию и помещают
в устройство дл ультразвуковой обработки (около 37°С). Показатель рН довод т примерно
до 7-7,5 водным раствором NaOH. При необходимости добавл ют дополнительное
количество NaOH дл достижени однородной растворимости и повторно регулируют
показатель рН. Смесь подвергают вихревому перемешиванию дл получени однородного
раствора, при необходимости производ обработку ультразвуком и нагревание. Раствор
соединени доставл ющего агента смешивают с кромолином из исходного раствора (175
мг кромолина/мл в деионизированной воде, показатель рН при необходимости довод т
примерно до 7,0, добавл NaOH или HCl, после чего исходный раствор хран т в
замороженном виде завернутым в фольгу, перед использованием размораживают и
нагревают примерно до 30°С). Смесь подвергают вихревому перемешиванию дл получени однородного раствора, при необходимости производ обработку ультразвуком и
нагревание. Показатель рН довод т примерно до 7-8 водным раствором NaOH. Затем
раствор разбавл ют водой до требуемого объема (обычно 2,0 мл) и концентрации и до
использовани хран т завернутым в фольгу. Конечные дозы соединени доставл ющего
агента и кромолина и объемы доз приведены в нижеследующей таблице 10.
Обычно используют описанные ниже методики определени требуемой дозы и отбора
проб. Самцов крыс Sprague-Dawley с массой тела 200-250 г не корм т в течение 24
часов, после чего их анестезируют кетамином (44 мг/кг) и хлорпромазином (1,5 мг/кг)
за 15 минут до введени лекарственного средства и при необходимости производ т
повторное введение анестезирующих средств дл обеспечени необходимой степени
наркоза. Экспериментальной группе из п ти животных ввод т один из лекарственных
растворов. Дл этой цели используют французский катетер Rusch 8 длиной 11 см,
соответствующий 1 мл шприцу с концом в виде пипетки. Шприц заполн ют лекарственным
раствором, пропуска раствор через катетер, который затем вытирают досуха. Катетер
ввод т в пищевод, оставл перед резцами конец трубки длиной 1 см. Подачу раствора
осуществл ют нажатием на поршень шприца.
Пробы крови отбирают из хвостовой артерии через промежутки времени, равные обычно
0,25, 0,5, 1,0 и 1,5 часам. Концентрации кромолина в сыворотке измер ют при помощи
ВЭЖХ. Образцы получают следующим образом: 100 мкл сыворотки помещают вместе с 100
мкл 3 н. раствора HCl и 300 мкл этилацетата в пробирку Эппендорфа. Содержимое
пробирки подвергают вихревому перемешиванию в течение 10 минут и затем
Страница: 48
RU 2 300 516 C2
5
10
15
центрифугируют в течение 10 минут со скоростью 10000 оборотов/мин. 200 мкл
этилацетатного сло перенос т в пробирку Эппендорфа, содержащую 67 мкл 0,1 М
раствора фосфатного буфера. Содержимое пробирки подвергают вихревому
перемешиванию в течение 10 минут и затем центрифугируют в течение 10 минут со
скоростью 10000 оборотов/мин. Слой фосфатного буфера перенос т в пробирку дл ВЭЖХ
и ввод т в колонку дл ВЭЖХ (колонка длиной 150 мм и внутренним диаметром 2 мм
Keystone Exsil Amino, 5 мкм, 100 ; подвижна фаза = 35% буфера (68 мМ KH2PO4.
доведенного до рН 3,0 при помощи 85% Н3PO4)/65% ацетонитрила; инъецируемый объем =
10 мкл; скорость потока= 0,30 мл/мин; врем удерживани кромолина = 5,5 мин;
оптическую плотность определ ют при 240 нм). Базовые значени , полученные в
предшествующих исследовани х, практически равны нулю.
Результаты, полученные дл животных в каждой группе, усредн ют дл каждого
промежутка времени, при этом наибольшие средние значени (т.е. усредненный максимум
концентрации кромолина в сыворотке) приведены в нижеследующей таблице 10.
Таблица 10. Кромолин - пероральное введение
Соединение
Доза соединени Доза кромолина Объем дозы Усредненный максимум кромолина в сыворотке ±
доставл ющего агента доставл ющего агента (мг/кг) (мг/кг)
(мл/кг)
стандартное отклонение (стандартна ошибка)
20
25
5
200
25
1
0,63±0,47
7
200
25
1
0,81±0,85
7
200
25
1
0,68±0,34
7
200
25
1
0,56±0,39
15
200
25
1
0,38±0,15
47
200
25
2
0,55±0,12
47
200
25
1
0,56±0,39
60
200
25
1
1,57±0,38
60
200
25
1
0,82±0,24
60
200
25
1
0,76±0,34
61
200
25
1
0,54±0,39
61
200
25
1
0,57±0,36
61
200
25
2
0,39±0,21
30
35
40
45
50
Пример 11. Даптомицин - пероральное введение
Лекарственные растворы, содержащие соединение доставл ющего агента и даптомицин
(Cubist Pharmaceuticals, Cambridge, МА.), получают в 0,9% изотоническом растворе. Дл получени раствора соединени доставл ющего агента или используют натриевую соль
указанного соединени , или свободную кислоту превращают в его натриевую соль.
Свободную кислоту соединени доставл ющего агента превращают в натриевую соль,
добавл один эквивалент гидроксида натри . Полученную смесь подвергают вихревому
перемешиванию и помещают в устройство дл ультразвуковой обработки (около 37°С).
Показатель рН довод т примерно до 7,0-7,5 водным раствором HCl или NaOH. При
необходимости добавл ют дополнительное количество NaOH дл достижени однородной
растворимости и повторно регулируют показатель рН. Смесь подвергают вихревому
перемешиванию дл получени однородного раствора, при необходимости производ обработку ультразвуком. Раствор соединени доставл ющего агента смешивают с
даптомицином из исходного раствора (200 мг даптомицина/мл в 0,9% изотоническом
растворе, и при необходимости показатель рН довод т до 6,0-7,0 с помощью NaOH или
HCl). Исходный раствор хран т в замороженном виде (-20°С) завернутым в фольгу, перед
использованием размораживают и постепенно нагревают примерно до 25°С. Смесь
доставл ющего агента и даптомицина подвергают вихревому перемешиванию при низкой
скорости, получа однородный раствор. Показатель рН довод т примерно до 7,0-7,5
водным раствором NaOH. Раствор развод т 0,9% изотоническим раствором до требуемого
объема (обычно 2,0 мл) и концентрации и до использовани хран т завернутым в фольгу.
Конечные дозы соединени доставл ющего агента, даптомицина и объемы доз приведены
в нижеследующей таблице 11.
Страница: 49
RU 2 300 516 C2
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
Обычно используют описанные ниже методики определени требуемой дозы и отбора
проб. Самцов крыс Sprague-Dawley с массой тела 200-250 г не корм т в течение 24
часов, после чего их анестезируют кетамином (44 мг/кг) и хлорпромазином (1,5 мг/кг)
за 15 минут до введени лекарственного средства и при необходимости производ т
повторное введение анестезирующих средств дл обеспечени необходимой степени
наркоза. Экспериментальной группе из п ти животных ввод т один из лекарственных
растворов. Дл этой цели используют французский катетер Rusch 8 длиной 11 см,
соответствующий 1 мл шприцу с концом в виде пипетки. Шприц заполн ют лекарственным
раствором, пропуска раствор через катетер, который затем вытирают досуха. Катетер
ввод т в пищевод, оставл перед резцами конец трубки длиной 1 см. Подачу раствора
осуществл ют нажатием на поршень шприца.
Пробы гепаринизированной крови крыс отбирают из вентральной хвостовой артерии
через промежутки времени, равные обычно 0,25, 0,5, 0,75, 1,0, 2,0 и 4,0 часам, после
введени лекарственного раствора и хран т на льду. Пробы крови центрифугируют со
скоростью 11500 оборотов/мин в течение 4 минут при 4°С, получа плазму (супернатант),
которую хран т при -70°С. Концентрации даптомицина в плазме измер ют при помощи
изократической ВЭЖХ с обращенной фазой, выдержива образцы во врем анализа при
температуре 4°С. Базовые значени , полученные при исследовании чистой плазмы, равны
нулю.
Значени концентрации даптомицина в крови, полученные у животных в каждой
экспериментальной группе, усредн ют дл каждого промежутка времени. Усредненные
максимальные значени концентрации даптомицина (Сmax) и площади, соответствующие
уровню даптомицина, под кривой (AUC) приведены в нижеследующей таблице 11.
Таблица 11. Даптомицин - пероральное введение
Соединение
Доза соединени Доза
Объем дозы Усредненный максимум даптомицина в
AUC мкгдоставл ющего агента доставл ющего агента даптомицина (мл/кг)
плазме (Cmax) ± стандартное отклонение, мин/мл
(мг/кг)
(мг/кг)
мкг/мп
2
200
50
1
5,07±0,61
-
5
200
50
1
7,082±3,86
-
7
200
50
1
10,45±2,87
-
7
100
50
1
13,05±4,62
-
7
100
50
0,5
7,09±5,35
-
7
50
50
0,5
5,77±1,49
-
7
50
50
0,5
59,14±3,11
-
7
200
50
1
6,06±1,73
-
7
200
50
1
8,04±6,03
-
11
200
50
1
13,27±13,43
-
12
200
50
1
16,11±17,58
-
14
200
50
1
14,2±24,84
-
15
200
50
1
9,5±5,49
-
30
200
50
1
3,06±0,78
-
43
200
50
1
21,44±6
4555*
43
200
50
1
10,56±3,37
2895*
43
200
50
1
12,94±6,6
2820*
57
200
50
1
8,59±4,21
-
* AUC = Обща AUC (0 ? ?)
Приведенные выше патенты, за вки на патент, методы испытани и публикации
полностью включены в данное описание изобретени в качестве ссылки.
Из приведенного выше подробного описани изобретени специалистам в данной
области должны быть очевидны многие модификации насто щего изобретени . Все
подобные модификации вход т в объем прилагаемой формулы изобретени .
Формула изобретени 1. Соединение, которое имеет следующую формулу:
Страница: 50
CL
RU 2 300 516 C2
5
и выбрано из группы, включающей
10
15
20
25
30
35
40
45
50
Соед. № R 1
R2
R3
R4
R5
R6
R7
1
Н
Н
Н
Н
С(O)СН3
СН2
пара-Ph
2
Н
Н
Н
Н
ОН
СН2
пара-Ph
5
Н
Н
Н
Н
ОН
(СН2)5
св зь
6
Н
Н
Н
Н
ОН
(CH2)6
св зь
7
Н
Н
Н
Н
ОН
(CH2)7
св зь
8
Н
Н
Н
Н
ОН
(СН2)9
св зь
9
Н
Н
Н
Н
С(O)СН3
(СН2)3
св зь
10
Н
Н
Н
Н
С(O)СН3
(CH2)4
св зь
11
Н Н
Н
Н
С(O)СН3
(CH2)5
св зь
12
Н Н
Н
Н
С(O)СН3
(СН2)7
св зь
18
Н Н
Н
Н
СН=СНСН3
(СН2)7
св зь
19
Н Н
Н
Н
NH2
(CH2)7
св зь
20
Н Н
Н
Н
NO2
(СН2)7
св зь
22
Н Н
Cl
Н
NH2
(CH2)7
св зь
23
Н Н
Cl
Н
NH2
(СН2)4
св зь
24
Н Н
Н
Н
NHC(O)СН3
(СН2)7
св зь
25
Н Н
Н
Н
СН=CHCO2Н
(СН2)7
св зь
26
Н Н
Н
Н
С(O)СН2СН3
(СН2)3
св зь
27
Н Н
Н
Н
С(O)СН2СН3
(СН2)5
св зь
28
Н Н
Н
Н
С(O)СН2СН3
(CH2)7
св зь
29
Н Н
Н
Н
С(O)СН2СН3
(СН2)9
св зь
30
Н Н
Н
Н
C(O)NH2
(CH2)7
св зь
31
Н Н
Н
Н
С(O)NHCH3
(СН2)7
св зь
32
Н Н
Н
Н
СООН
(СН2)7
св зь
33
Н Н
Н
Н
C(O)NHCH2CH3
(СН2)7
св зь
34
Н Н
Н
Н
C(O)NHCH(CH3)2
(СН2)7
св зь
35
Н Н
Н
Н
ОСН3
(СН2)7
св зь
36
Н Н
Н
Н
СН(ОН)СН3
(СН2)7
св зь
37
Н Н
Н
Н
С(СН3)2OH
СН2
пара-Ph
38
Н Н
Н
ОН
С(O)СН3
(СН2)7
св зь
39
Н Н
Н
ОСН3
С(O)СН3
(СН2)7
св зь
43
Н ОН
Н
Н
Н
(CH2)7
св зь
44
Н ОН
Н
Н
Н
(СН2)9
св зь
45
Н ОН
Н
Н
Н
(СН2)5
св зь
51
Н Н
Н
Н
С(O)NHCH3
(СН2)7
св зь
52
Н Н
Н
Н
C(O)NH2
СН2
пара-Ph
54
Н Н
Н
Н
С(O)СН3
(СН2)9
св зь
55
Н Н
ОСН3
Н
С(O)СН3
(СН2)7
св зь
56
Н ОСН3
Н
Н
С(O)СН3
(СН2)7
св зь
57
Н Н
ОН
Н
С(O)СН3
(СН2)7
св зь
58
Н Н
СН3
Н
С(O)СН3
(СН2)5
св зь
62
Н Н
С(O)СН3
Н
Н
(СН2)7
св зь
63
Н Н
С(O)СН2СН3 Н
Н
(СН2)7
св зь
64
Н С(O)СН3 Н
Н
Н
(CH2)7
св зь
68
Н CL
Н
Н
Н
(СН2)7
св зь
71
Н Н
F
Н
F
(СН2)7
св зь
72
Н Н
Н
Н
OH
(CH2)10
св зь
Страница: 51
RU 2 300 516 C2
5
10
73
Н Н
Н
Н
CL
(СН2)7
св зь
74
Н NO2
Н
Н
ОН
(СН2)7
св зь
75
Н Н
Н
Н
F
(СН2)4
св зь
76
Н Н
Н
Н
CF3
(СН2)4
св зь
77
F
Н
Н
Н
F
(CH2)7
св зь
79
Н Н
Н
Н
ОН
СН2СН(ОН)
пара-Ph
80
Н Н
ОСН3
Н
Н
(СН2)6-СН(СН3) св зь
88
Н Н
Н
Н
-C(O)NH-(CH2)9-OH СН2
св зь
92
Н Н
Н
Н
-O(СН2)5СООН
(СН2)5
св зь
93
Н СН3
Н
Н
СН3
(СН2)7
св зь
94
Н СН3
Н
Н
СН3
(СН2)5
св зь
98
Н Н
Н
С(O)-NH2 O-(СН3)7-СООН
-(СН2)7-
св зь
и их фармацевтически приемлемые соли.
2. Соединение, которое имеет следующую формулу:
15
20
и выбрано из группы, включающей
Соед. № R 1 R 2 R 3 R 4
25
R6
R7
11
Н Н
Н Н С(O)СН3 (СН2)5 св зь
12
Н Н
Н Н С(O)СН3 (СН2)7 св зь
43
75
30
R5
Н ОН Н Н Н
(СН2)7 св зь
Н Н
(СН2)4 св зь
Н Н F
и их фармацевтически приемлемые соли.
3. Композици , предназначенна дл доставки активных веществ к ткан м организма
нуждающегос в этом животного, отличающа с тем, что содержит
(A) активное вещество и
(B) по меньшей мере одно соединение, предназначенное дл доставки активного
вещества к ткан м животного, формулы
35
40
которое выбрано из группы
Соед. № R 1
45
50
R2
R3
R4
R5
R6
R7
1
Н Н
Н
Н
С(O)СН3
СН2
пара-Ph
2
Н Н
Н
Н
ОН
СН2
пара-Ph
3
Н Н
Н
Н
ОН
СН2
св зь
4
Н Н
Н
Н
ОН
(СН2)3
св зь
5
Н Н
Н
Н
ОН
(СН2)5
св зь
6
Н Н
Н
Н
ОН
(СН2)6
св зь
7
Н Н
Н
Н
ОН
(СН2)7
св зь
8
Н Н
Н
Н
ОН
(СН2)9
св зь
9
Н Н
Н
Н
С(O)СН3
(CH2)3
св зь
10
Н Н
Н
Н
С(O)СН3
(СН2)4
св зь
Страница: 52
RU 2 300 516 C2
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
11
Н Н
Н
Н
С(O)СН3
(СН2)5
св зь
12
Н Н
Н
Н
С(O)СН3
(СН2)7
св зь
13
Н Н
Н
Н
Н
СН2
св зь
14
Н Н
Н
Н
Н
(СН2)3
св зь
15
Н Н
Н
Н
Н
(СН2)5
св зь
16
Н Н
Н
Н
Н
(CH2)9
св зь
17
Н Н
Н
Н
Н
(СН2)10
св зь
18
Н Н
Н
Н
СН=СНСН3
(СН2)7
св зь
19
Н Н
Н
Н
NH2
(CH2)7
св зь
20
Н Н
Н
Н
NO2
(СН2)7
св зь
21
Н Н
Н
Н
NH2
(CH2)4
св зь
22
Н Н
Cl
Н
NH2
(СН2)7
св зь
23
Н Н
Cl
Н
NH2
(СН2)4
св зь
24
Н Н
Н
Н
NHC(O)СН3
(СН2)7
св зь
25
Н Н
Н
Н
СН=CHCO2Н
(СН2)7
св зь
26
Н Н
Н
Н
С(O)СН2СН3
(СН2)3
св зь
27
Н Н
Н
Н
С(O)СН2СН3
(СН2)5
св зь
28
Н Н
Н
Н
С(O)СН2СН3
(СН2)7
св зь
29
Н Н
Н
Н
С(O)СН2СН3
(СН2)9
св зь
30
Н Н
Н
Н
C(O)NH2
(СН2)7
св зь
31
Н Н
Н
Н
С(O)NHCH3
(СН2)7
св зь
св зь
32
Н Н
Н
Н
СООН
(СН2)7
33
Н Н
Н
Н
С(O)NHCH2СН3
(СН2)7
св зь
34
Н Н
Н
Н
С(O)NHCH2(СН3)2 (СН2)7
св зь
35
Н Н
Н
Н
ОСН3
(CH2)7
св зь
36
Н Н
Н
Н
СН(ОН)СН3
(CH2)7
св зь
37
Н Н
Н
Н
С(СН3)2OH
СН2
пара-Ph
38
Н Н
Н
ОН
С(O)СН3
(СН2)7
св зь
39
Н Н
Н
ОСН3
С(O)СН3
(СН2)7
св зь
43
Н ОН
Н
Н
Н
(СН2)7
св зь
44
Н ОН
Н
Н
Н
(CH2)9
св зь
45
Н ОН
Н
Н
Н
(СН2)5
св зь
46
Н ОН
Н
Н
Н
(СН2)3
св зь
47
Н Н
ОН
Н
Н
(CH2)7
св зь
48
Н Н
ОН
Н
Н
(СН2)9
св зь
49
Н Н
ОН
Н
Н
(СН2)5
св зь
50
Н Н
ОН
Н
Н
(СН2)3
св зь
51
Н Н
Н
Н
C(O)NHCH3
(СН2)9
св зь
52
Н Н
Н
Н
C(O)NH2
СН2
пара-Ph
54
Н Н
Н
Н
С(O)СН3
(CH2)7
св зь
55
Н Н
ОСН3
Н
С(O)СН3
(СН2)7
св зь
56
Н ОСН3
Н
Н
С(O)СН3
(СН2)7
св зь
57
Н Н
ОН
Н
С(O)СН3
(СН2)7
св зь
58
Н Н
СН3
Н
С(O)СН3
(СН2)5
св зь
59
Н Н
Н
Н
С(O)Н
СН2
пара-Ph
60
Н Н
Н
Н
С(O)Н
(СН2)5
св зь
61
Н Н
Н
Н
С(O)Н
(СН2)7
св зь
62
Н Н
С(O)СН3
Н
Н
(СН2)7
св зь
63
Н Н
С(O)СН2СН3 Н
Н
(СН2)7
св зь
64
Н С(O)СН3 Н
Н
Н
(СН2)7
св зь
65
Н Н
Н
Н
Н
(СН2)7
св зь
66
Н Н
Н
Н
Н
СН2
пара-Ph
67
Н Н
ОН
Н
Н
СН2
пара-Ph
68
Н Cl
Н
Н
Н
(СН2)7
св зь
69
Н ОСН3
Н
Н
Н
(СН2)7
св зь
71
Н Н
F
Н
F
(СН2)7
св зь
72
Н Н
Н
Н
ОН
(СН2)10
св зь
Страница: 53
RU 2 300 516 C2
5
10
73
Н Н
Н
Н
CL
(СН2)7
св зь
74
Н NO2
Н
Н
ОН
(СН2)7
св зь
75
Н Н
Н
Н
F
(СН2)4
св зь
76
Н Н
Н
Н
CF3
(СН2)4
св зь
77
F
Н
Н
Н
F
(СН2)7
св зь
78
Н Н
Н
Н
Cl
СН2
пара-Ph
79
Н Н
Н
Н
ОН
СН2СН(ОН)
пара-Ph
80
Н Н
ОСН3
Н
Н
(СН2)6-СН(СН3)
св зь
81
Н Н
ОН
Н
Н
(СН2)6-СН(СН3)
св зь
82
Н Н
ОН
Н
Н
(СН2)6-СН(СН2СН2СН3) св зь
88
Н Н
Н
Н
-C(O)NH-(CH2)9-ОН СН2
св зь
92
Н Н
Н
Н
-O(CH2)5COOH
(СН2)5
св зь
93
Н СН3
Н
Н
СН3
(СН2)7
св зь
94
Н СН3
Н
Н
СН3
(СН2)5
св зь
98
Н Н
Н
С(O)-NH2 O-(СН2)7-СООН
-(СН2)7-
св зь
15
20
и их фармацевтически приемлемые соли.
4. Композици , предназначенна дл доставки активных веществ к ткан м организма
нуждающегос в этом животного, отличающа с тем, что содержит
(A) активное вещество и
(B) по меньшей мере одно соединение, предназначенное дл доставки активного
вещества к ткан м животного, формулы
25
Соед. № R 1 R 2 R 3 R 4 R 5
30
35
47
R6
R7
Н Н ОН Н Н (CH 2)7 св зь
и его фармацевтически приемлемые соли.
5. Композици , предназначенна дл доставки активных веществ к ткан м организма
нуждающегос в этом животного, отличающа с тем, что содержит
(A) активное вещество и
(B) по меньшей мере одно соединение, предназначенное дл доставки активного
вещества к ткан м животного, формулы
40
45
которое выбрано из группы, включающей
Соед. № R 1 R 2 R 3 R 4
50
R5
R6
R7
11
Н Н
Н Н С(O)СН3 (СН2)5 св зь
12
Н Н
Н Н С(O)СН3 (CH2)7 св зь
43
Н ОН Н Н Н
(CH2)7 св зь
75
Н Н
(СН2)4 св зь
Н Н F
и их фармацевтически приемлемые соли.
6. Композици по любому из пп.3-5, в которой активное вещество выбрано из группы,
Страница: 54
RU 2 300 516 C2
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
включающей биологически активное вещество, химически активное вещество и их
комбинацию.
7. Композици по п.6, в которой биологически активное вещество включает по меньшей
мере один белок, полипептид, пептид, гормон, полисахарид, мукополисахарид, углевод,
небольшие пол рные органические молекулы или липид.
8. Композици по п.6, в которой указанное биологически активное вещество
предназначено дл перорального, интраназального сублингвального интрадуоденального,
подкожного, буккального, ректального, вагинального, пульмонального, трансдермального,
парентерального, внутривенного, внутримышечного, внутриглазного введени , введени в
толстую кишку или через слизистую оболочку.
9. Композици по п.8, в которой указанное биологически активное вещество
предназначено дл перорального введени .
10. Композици по п.8, в которой указанное биологически активное вещество
предназначено дл пульмонального введени .
11. Композици по п.6, в которой биологически активное вещество выбрано из группы,
включающей гормоны роста, гормоны роста человека (hGH), рекомбинантные гормоны
роста человека (rhGH), бычьи гормоны роста, гормоны роста свиней, гормоны,
стимулирующие выделение гормонов роста,
интерфероны, ?-интерферон, ? -интерферон, ?-интерферон, интерлейкин-1, интерлейкин-2,
инсулин, инсулин свиней, бычий инсулин, инсулин человека, рекомбинантный инсулин
человека, инсулиноподобный фактор роста (IGF), IGF-1, гепарин, нефракционированный
гепарин, гепариноподобные вещества, дерматаны, хондроитины, низкомолекул рный
гепарин, очень низкомолекул рный гепарин, ультранизкомолекул рный гепарин,
кальцитонин, кальцитонин лосос , кальцитонин угр , кальцитонин человека, эритропоэтин
(ЕРО), естественный фактор предсерди , антигены, моноклональные антитела,
соматостатин, ингибиторы протеазы, адренокортикотропин, гормон, стимулирующий
выделение гонадотропина, окситоцин, гормон, стимулирующий выделение
лютеинизирующего гормона, фолликулостимулирующий гормон, глюкоцереброзидазу,
тромбопоэтин, филграстим, простагландины, циклоспорин, вазопрессин, кромолиннатрий,
натрийхромогликат, динатрийхромогликат, ванкомицин, десферриоксамин, бисфосфонаты,
алендронат, тилудронат, этидронат, клодронат, памидронат, олпадронат, инкадронат,
паращитовидный гормон, фрагменты паращитовидного гормона, противомикробные
средства, даптомицин, противогрибковые средства, витамины; аналоги, фрагменты,
миметики или модифицированные полиэтиленгликолем производные указанных
соединений или любую их комбинацию.
12. Композици по п.11, в которой биологически активное вещество включает инсулин,
нефракционированный гепарин, низкомолекул рный гепарин, очень низкомолекул рный
гепарин, ультранизкомолекул рный гепарин, кальцитонин, паращитовидный гормон,
эритропоэтин, даптомицин, гормоны роста человека, аналоги, фрагменты, миметики или
модифицированные полиэтиленгликолем производные указанных соединений или любую
их комбинацию.
13. Композици по п.12, в которой биологически активное вещество вл етс кальцитонином.
14. Стандартна лекарственна форма, предназначенна дл доставки активных
веществ к ткан м организма нуждающегос в этом животного, содержаща (A) композицию по пп.3-5 и
(B) (а) наполнитель,
(b) разбавитель,
(c) дезинтегратор,
(d) смазывающее вещество,
(e) пластификатор,
(f) краситель,
(g) носитель или
Страница: 55
RU 2 300 516 C2
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
(h) любую их комбинацию.
15. Стандартна лекарственна форма по п.14, в которой активное вещество выбрано из
группы, включающей биологически активное вещество, химически активное вещество и их
комбинацию.
16. Стандартна лекарственна форма по п.15, в которой биологически активное
вещество включает по меньшей мере один белок, полипептид, пептид, гормон,
полисахарид, мукополисахарид, небольшие пол рные органические молекулы, углевод или
липид.
17. Стандартна лекарственна форма по п.15, в которой биологически активное
вещество выбрано из группы, включающей гормоны роста, гормоны роста человека (hGH),
рекомбинантные гормоны роста человека (rhGH), бычьи гормоны роста, гормоны роста
свиней, гормоны, стимулирующие выделение гормона роста,
интерфероны, ?-интерферон, ? -интерферон, ?-интерферон, интерлейкин-1, интерлейкин-2,
инсулин, инсулин свиней, бычий инсулин, инсулин человека, рекомбинантный инсулин
человека, инсулиноподобный фактор роста (IGF), IGF-1, гепарин, нефракционированный
гепарин, гепариноподобные вещества, дерматаны, хондроитины, низкомолекул рный
гепарин, очень низкомолекул рный гепарин, ультранизкомолекул рный гепарин,
кальцитонин, кальцитонин лосос , кальцитонин угр , кальцитонин человека, эритропоэтин
(ЕРО), естественный фактор предсерди , антигены, моноклональные антитела,
соматостатин, ингибиторы протеазы, адренокортикотропин, гормон, стимулирующий
выделение гонадотропина, окситоцин, гормон, стимулирующий выделение
лютеинизирующего гормона, фолликулостимулирующий гормон, глюкоцереброзидазу,
тромбопоэтин, филграстим, простагландины, циклоспорин, вазопрессин, кромолиннатрий,
натрийхромогликат, динатрийхромогликат, ванкомицин, десферриоксамин, бисфосфонаты,
алендроиат, тилудронат, этидронат, клодронат, памидронат, олпадронат, инкадронат,
паращитовидный гормон, фрагменты паращитовидного гормона, противомикробные
средства, даптомицин, противогрибковые средства, витамины, аналоги, фрагменты,
миметики или модифицированные полиэтиленгликолем производные указанных
соединений или любую их комбинацию.
18. Стандартна лекарственна форма по п.17, в которой биологически активное
вещество включает инсулин, нефракционированный гепарин, низкомолекул рный гепарин,
очень низкомолекул рный гепарин, ультранизкомолекул рный гепарин, кальцитонин,
паращитовидный гормон, эритропоэтин, гормоны роста человека, аналоги, фрагменты,
миметики или модифицированные полиэтиленгликолем производные указанных
соединений, или любую их комбинацию.
19. Стандартна лекарственна форма по п.18, в которой активное вещество вл етс кальцитонином.
20. Стандартна лекарственна форма по п.15, котора вл етс таблеткой, капсулой,
порошком или жидкостью.
21. Способ введени активных веществ дл их доставки к ткан м организма
нуждающемус в этом животного, который включает пероральное введение указанному
животному композиции по п.4.
22. Способ получени композиции, предназначенной дл доставки активных веществ к
ткан м организма нуждающегос в этом животного, который заключаетс в том, что
смешивают
(A) по меньшей мере одно активное вещество;
(B) по меньшей мере одно соединение по п.1 и,
(C) необ зательно, носитель, приемлемый дл введени .
23. Применение соединени дл доставки активных веществ к ткан м организма
нуждающегос в этом животного, где указанное соединение имеет следующую формулу:
Страница: 56
RU 2 300 516 C2
5
и выбрано из группы, включающей
10
15
20
25
30
35
Соед. № R 1
R2
R3 R4
R5
R6
R7
3
Н Н
Н
Н ОН
CH2
4
Н Н
Н
Н ОН
(CH2)3
13
Н Н
Н
Н Н
СН2
св зь
14
Н Н
Н
Н Н
(СН2)3
св зь
15
Н Н
Н
Н Н
(СН2)5
св зь
16
Н Н
Н
Н Н
(СН2)9
св зь
17
Н Н
Н
Н Н
(СН2)10
св зь
21
Н Н
Н
Н NH2
(СН2)4
св зь
46
Н ОН
Н
Н Н
(СН2)3
св зь
47
Н Н
ОН Н Н
(СН2)7
св зь
48
Н Н
ОН Н Н
(СН2)9
св зь
49
Н Н
ОН Н Н
(СН2)5
св зь
50
Н Н
ОН Н Н
(CH2)3
св зь
59
Н Н
Н
Н С(O)Н
СН2
пара-Ph
60
Н Н
Н
Н С(O)Н
(СН2)5
св зь
61
Н Н
Н
Н С(O)Н
(CH2)7
св зь
65
Н Н
Н
Н Н
(СН2)7
св зь
66
Н Н
Н
Н Н
СН2
пара-Ph
67
Н Н
ОН Н Н
СН2
пара-Ph
69
Н ОСН3 Н
Н Н
(СН2)7
св зь
78
Н Н
Н
Н Cl
СН2
пара-Ph
81
Н Н
ОН Н Н
(СН2)6-СН(СН 3)
св зь
82
Н Н
ОН Н Н
(СН2)6-CH(СН 2СН2) св зь
88
Н Н
Н
Н -C(O)NH-(CH2)9-OH СН2
св зь
св зь
св зь
95
Н Н
NO2 Н Н
пара-Ph
св зь
96
Н Н
NH2 Н Н
пара-Ph
св зь
97
Н СН3
Н
(СН2)3-(С(СН3)2)
св зь
Н СН3
и их фармацевтически приемлемые соли.
Приоритет по пп.1-23 формулы установлен от 06.11.2000.
40
45
50
Страница: 57
етамин (44 мг/кг) и хлорпромазин (1,5 мг/кг) за 15 минут
до введени лекарственного средства и при необходимости производ т повторное
введение анестезирующих средств дл обеспечени необходимой степени наркоза.
Экспериментальной группе из п ти животных ввод т один из лекарственных растворов.
Дл перорального введени через желудочный зонд (РО) используют французский катетер
Rusch 8 длиной 11 см, соответствующий 1 мл шприцу с концом в виде пипетки. Шприц
заполн ют лекарственным раствором, пропуска раствор через катетер, который затем
вытирают досуха. Катетер ввод т в пищевод, оставл перед резцами конец трубки длиной
1 см. Подачу раствора осуществл ют нажатием на поршень шприца. Дл внутрикишечного
введени (IC) используют французский катетер Rusch 8 или 6 длиной 7,5 см,
соответствующий шприцу с концом в виде пипетки Эппендорфа. Шприц заполн ют
лекарственным раствором, подава раствор через трубку катетера. Катетер вытирают
досуха. На конец трубки нанос т гель K-J, избега соприкосновени с отверстием
трубки, после чего трубку ввод т в ободочную кишку через анальное отверстие так,
чтобы трубка была совершенно не видна. Лекарственный раствор медленно подают в
ободочную кишку, нажима на поршень шприца, после чего катетер удал ют.
Пробы крови отбирают из хвостовой артерии через промежутки времени, равные обычно
Страница: 41
RU 2 300 516 C2
5
0, 15, 30, 45, 60 и 90 минутам при пероральном введении и 0, 10, 20, 30, 60 и 90
минутам при внутрикишечном введении. Количественное определение концентрации РТН в
сыворотке производ т при помощи набора дл радиоиммуноанализа РТН (набор № RIK
6101 фирмы Peninsula Laboratories, Inc., San Carlos, CA). Базовые значени ,
полученные в предшествующих исследовани х, практически равны нулю. Результаты,
полученные у животных в каждой группе, усредн ют дл каждого промежутка времени.
Максимальные значени средних концентраций (то есть усредненные максимальные
концентрации РТН в сыворотке) приведены в нижеследующей таблице 6.
Таблица 6
Пероральное (РО) введение РТН
10
Соединение доставл ющего Доза соединени доставл ющего Доза РТН Объем дозы Усредненный максимум РТН в сыворотке
агента №
агента (мг/кг)
(мкг/кг)
(мл/кг)
(пг/мл) ± стандартное отклонение
15
100
200
1
100
200
1
78±71
31
100
200
1
460±194
33
100
200
1
837±347
34
100
200
Г
538±328
51
100
200
1
420±305
51
100
200
1
287±120
51
100
200
1
478±230
51
100
200
1
798±518
20
25
30
35
40
45
50
276±252
12
30
Пример 7. Интерферон - пероральное введение
Лекарственные растворы, содержащие соединение доставл ющего агента и интерферон
человека (IFN), получают в деионизированной воде. Свободную кислоту соединени доставл ющего агента превращают в натриевую соль, добавл один эквивалент
гидроксида натри . Раствор соединени доставл ющего агента обычно получают в воде,
дл чего при получении натриевой соли к перемешиваемому раствору добавл ют один
эквивалент гидроксида натри (1,0 н. раствор). Затем смесь подвергают вихревому
перемешиванию и помещают в устройство дл ультразвуковой обработки (около 37°С).
Показатель рН довод т примерно до 7,0-8,5 водным раствором NaOH. Смесь подвергают
вихревому перемешиванию, получа однородную суспензию или раствор, при
необходимости обрабатывают ультразвуком и нагревают. В случае необходимости
добавл ют дополнительное количество NaOH дл достижени однородной растворимости
и рН вновь довод т примерно до 7,0-8,5. Раствор соединени доставл ющего агента
смешивают с исходным раствором IFN (в концентрации примерно от 22,0 до 27,5 мг/мл в
физиологическом растворе с фосфатным буфером) и развод т до требуемого объема
(обычно 3,0 мл). Конечные дозы соединени доставл ющего агента, IFN и объемы доз
приведены в нижеследующей таблице 7.
Обычно используют описанные ниже методики определени требуемой дозы и отбора
проб. Самцов крыс Sprague-Dawley с массой тела 200-250 г не корм т в течение 24
часов, после чего им ввод т кетамин (44 мг/кг) и хлорпромазин (1,5 мг/кг) за 15 минут
до введени лекарственного средства и при необходимости производ т повторное
введение анестезирующих средств дл обеспечени необходимой степени наркоза.
Экспериментальной группе из п ти животных ввод т один из лекарственных растворов.
Дл этой цели используют французский катетер Rusch 8 длиной 11 см, соответствующий 1
мл шприцу с концом в виде пипетки. Шприц заполн ют лекарственным раствором,
пропуска раствор через катетер, который затем вытирают досуха. Катетер ввод т в
пищевод, оставл перед резцами конец трубки длиной 1 см. Подачу раствора
осуществл ют нажатием на поршень шприца.
Пробы крови отбирают из хвостовой артерии через промежутки времени, равные обычно
0, 15, 30, 45, 60 и 90 минутам. Количественное определение концентрации IFN в
сыворотке производ т при помощи набора дл иммуноанализа альфа-IFN человека
Cytoscreen (№ в каталоге КНС4012 фирмы Biosource International, Camarilio, CA).
Базовые значени , полученные в предшествующих исследовани х, практически равны
Страница: 42
RU 2 300 516 C2
нулю. Результаты, полученные у животных в каждой группе, усредн ют дл каждого
промежутка времени. Максимальные значени средних концентраций (то есть усредненные
максимальные концентрации IFN в сыворотке) приведены в нижеследующей таблице 7.
Таблица 7
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
Интерферон - пероральное введение
Соединение
Доза соединени доставл ющего Доза IFN Объем дозы Усредненный максимум IFN в сыворотке (нг/мл) ±
доставл ющего агента агента (мг/кг)
(мг/кг)
(мл/кг)
стандартное отклонение
1
200
1
1
17,357±38
5
200
1
1
5,1042±3,4
5
50
0,5
1
1,54±0,26
5
200
1
1
1,1838±1,42
5
50
0,5
1
2,1±0,95
5
200
1
1
1,51±1,9
5
200
1
1
4,11±2
5
200
1
1
7,5769 ±5
6
200
1
1
0,5696±0,8
7
400
1
1
0,223
7
200
1
1
3,9308±3,2
12
200
1
1
1,6362±1,68
15
200
1
1
6,0324±2,8
28
200
1
1
2,185±2,68
28
200
1
1
0,8±1,7
32
200
1
1
0
43
200
1
1
1±2,1
43
200
1
1
1,206
47
200
1
1
1,1±0,85
59
200
1
1
0,56±1
59
200
1
1
0
67
200
1
1
3,4451±4,5
73
200
1
1
0,76±0,7
73
200
1
1
0,22±0,5
Пример 8. Инсулин - пероральное введение
Композиции дл перорального введени (РО), содержащие соединение доставл ющего
агента и инсулин человека с противоионами цинка (минимум 26 ед./мг, фирмы
Calbiochem - Novabiochem Corp., La Jolla, CA), получают в деионизированной воде.
Обычно, 500 мг соединени доставл ющего агента добавл ют к 1,5 мл воды. Свободную
кислоту соединени доставл ющего агента превращают в натриевую соль, дл чего к
полученному раствору при перемешивании добавл ют один эквивалент гидроксида натри .
Раствор подвергают вихревому перемешиванию, затем нагревают (около 37°С) и
обрабатывают ультразвуком. Показатель рН довод т примерно до 7-8,5, добавл NaOH
или HCl. При необходимости добавл ют дополнительное количество NaOH дл достижени однородной растворимости и показатель рН повторно довод т примерно до 7-8,5. Затем
добавл ют воду до общего объема около 2,4 мл и подвергают раствор вихревому
перемешиванию. К полученному раствору добавл ют примерно 1,25 мг инсулина из
исходного раствора инсулина (раствор с концентрацией 15 мг/мл получают из 0,5409 г
инсулина и 18 мл деионизированной воды, довод рН до 8,15 при помощи HCl и NaOH,
причем дл получени прозрачного раствора используют 40 мл концентрированной HCl, 25
мл 10 н. раствора NaOH и 50 мл 1 н. раствора NaOH) и подвергают вихревому
перемешиванию. Конечные дозы соединени доставл ющего агента, инсулина и объемы
доз приведены в нижеследующей таблице 8.
Обычно используют описанные ниже методики определени требуемой дозы и отбора
проб. Самцов крыс Sprague-Dawley с массой тела 200-250 г не корм т в течение 24
часов, после чего им ввод т кетамин (44 мг/кг) и хлорпромазин (1,5 мг/кг) за 15 минут
до введени лекарственного средства и при необходимости производ т повторное
введение анестезирующих средств дл обеспечени необходимой степени наркоза.
Страница: 43
RU 2 300 516 C2
5
10
15
Экспериментальной группе из п ти животных ввод т один из лекарственных растворов.
Дл перорального введени лекарственного средства используют французский катетер
Rusch 8 длиной 11 см, соответствующий 1 мл шприцу с концом в виде пипетки. Шприц
заполн ют лекарственным раствором, пропуска раствор через катетер, который затем
вытирают досуха. Катетер ввод т в пищевод, оставл перед резцами конец трубки длиной
1 см. Подачу раствора осуществл ют нажатием на поршень шприца.
Пробы крови отбирают из хвостовой артерии через промежутки времени, равные обычно
15, 30, 60, 120 и 180 минутам. Уровни инсулина в сыворотке определ ют при помощи тестнабора дл анализа инсулина методом ELISA (набор № DSL-10-1600 фирмы Diagnostic
Systems Laboratories, Inc., Webster, TX), причем в стандартную процедуру анализа
внос т изменени дл оптимизации чувствительности и линейного диапазона стандартной
кривой, отображающей объемы и концентрации проб, используемых в данном анализе.
Концентрации инсулина человека в сыворотке (мкед./мл) измер ют дл каждого
промежутка времени у каждого из п ти животных в каждой экспериментальной группе. П ть
значений дл каждого промежутка времени усредн ют и стро т график концентрации
инсулина в сыворотке в зависимости от времени. (В предшествующих экспериментах не
были обнаружены измер емые концентрации инсулина человека после перорального
введени одного инсулина человека). Максимальные значени (пики) и величины площади
под кривой (AUC) приведены в нижеследующей таблице 8.
Таблица 8
20
Инсулин - пероральное введение
Соединение
Доза соединени доставл ющего Доза инсулина Объем дозы Усредненный максимум инсулина в сыворотке ±
доставл ющего агента агента (мг/кг)
(мг/кг)
(мл/кг)
стандартное отклонение
25
30
35
40
45
50
74,237±1144,49
1
100
3
1
3
200
0,5
1
29,95±46,13
6
200
0,5
1
129,5±131,5
7
100
3
1
130,9724±83,7
7
200
0,5
1
88,06±33,72
7
200
0,5
1
320,1±520,4
7
200
0,5
1
200,2±118,7
7
200
0,5
1
164,2±134,7
7
200
0,5
1
214,7±100,86
7
200
0,5
1
56,71±47,04
7
200
0,5
1
17,4±21,8
8
200
0,5
1
13,14±6,81
10
100
3
1
63,5884±129,23
12
100
3
0,5
205,4±333,4
15
100
3
1
1332,2 ±1906,4
15
200
0,5
1
540,7±580,12
15
200
0,5
1
18,62±12,54
15
200
0,5
1
155,6±125,2
169,3±140,78
15
200
0,5
1
19
200
0,5
1
4,32±1,39
20
200
0,5
1
27,68±12,5
21
200
0,5
1
14,46±21,61
22
200
0,5
1
24,16±28,11
25
100
3
1
47,2162±31,43
26
100
3
0,5
240,5±528,29
30
200
0,5
1
21,88±13,4
31
100
3
0,5
21,26±6,22
32
200
3
1
6,38±4,42
32
200
0,5
1
3,12±2,26
58,13±52,86
33
100
3
0,5
33
200
0,5
1
110±128
33
200
0,5
1
14,88±11,53
35
200
0,5
1
132,3±154,5
38
100
3
1
74,6542±57,28
Страница: 44
RU 2 300 516 C2
5
10
15
20
43
200
0,5
1
82,81±46,8
43
200
0,5
1
38,68±35,09
44
100
3
0,5
97,49±134,1
Соединение
Доза соединени доставл ющего Доза инсулина Объем дозы Усредненный максимум инсулина в сыворотке ±
доставл ющего агента агента (мг/кг)
(мг/кг)
(мл/кг)
стандартное отклонение
44
200
0,5
1
17,41±10,47
44
200
0/5
1
46,76±41,19
45
200
0,5
1
70,32±149,1
49
100
3
0,5
335,7±227,05
57
200
3
1
3322±2721
315,53 ±154,56
59
200
0,5
1
61
200
0,5
1
58,99±27,15
63
100
3
1
7,843±8,527
68
200
3
1
76,23±76,88
72
200
3
1
4702,5 ±4700,4
108,33±55,98
72
200
0,5
1
72
200
0,5
1
9,81±13,72
72
200
0,5
1
18,56±19,89
147,66 ±176,71
73
100
3
0,5
73
200
0,5
1
51,26±9,44
73
200
0,5
1
16,01±12,21
74
100
3
0,5
70,69±127,89
75
200
0,5
1
33,88±38,49
75
200
0,5
1
32,54±19,78
76
200
0,5
1
24,72±25,53
76
200
0,5
1
38,74±74,4
25
30
35
40
45
50
Пример 9. Инсулин - легочное введение
Лекарственные композиции, содержащие соединение доставл ющего агента и инсулин
человека, получают в воде. В частности, к 1,5 мг соединени доставл ющего агента
добавл ют деионизированную воду, довод объем до 1,0 мл, и подвергают раствор
вихревому перемешиванию. Используют натриевую соль соединени доставл ющего
агента, либо свободную кислоту превращают в натриевую соль, дл чего к полученному
раствору при перемешивании добавл ют один эквивалент гидроксида натри (10 н.
раствор) и разбавл ют водой. Раствор подвергают вихревому перемешиванию, затем
нагревают (около 37°С) и обрабатывают ультразвуком. Показатель рН довод т примерно
до 7,0-8,5, добавл NaOH или HCl. К полученному раствору добавл ют 75 мкл исходного
раствора инсулина человека (2 мг/мл). (Исходный раствор получают следующим образом. К
0,02 г инсулина добавл ют 3 мл раствора HCl с рН 3,0 в деионизированной воде.
Показатель рН полученного раствора понижают до 3,0 (примерно 2,6), добавл HCl и
NaOH, пока раствор не становитс прозрачным. Затем показатель рН повышают до 7,6,
использу NaOH и HCl. Конечный объем довод т до 10 мл деионизированной водой с рН
7,5. Конечный рН равен 7,59). Затем добавл ют воду до достижени общего объема,
равного 2,0 мл, после чего сосуд с раствором несколько раз осторожно переворачивают.
Конечные дозы соединени доставл ющего агента, инсулина и объемы дозы приведены в
нижеследующей таблице 9.
Обычно используют описанные ниже методики определени требуемой дозы и отбора
проб. Самцов крыс Sprague-Dawley с массой тела 200-250 г не корм т в течение 24
часов, после чего им ввод т кетамин (44 мг/кг) и хлорпромазин (3,0 мг/кг) за 15 минут
до введени лекарственного средства и при необходимости производ т повторное
введение анестезирующих средств дл обеспечени необходимой степени наркоза
(используют такое же количество кетамина и 1,5 мг/кг хлорпромазина).
Экспериментальной группе из п ти животных ввод т один из лекарственных растворов.
Контрольной группе из п ти животных ввод т только инсулин. Трахеальный инстилл тор
дл грызунов, оснащенный лампой (фирмы Perm Century, Inc., Pittsburgh, PA), заполн ют
Страница: 45
RU 2 300 516 C2
5
10
15
лекарственным раствором и ввод т в горло так, чтобы игла вошла в трахею (с визуальной
проверкой). Подачу лекарственного раствора осуществл ют нажатием на поршень.
Пробы крови отбирают у всех животных из хвостовой артерии через промежутки
времени, равные обычно 5, 15, 30, 60 и 120 минутам. Уровни инсулина в сыворотке
определ ют при помощи тест-набора дл анализа инсулина методом ELISA (набор № DSL10-1600 фирмы Diagnostic Systems Laboratories, Inc., Webster, TX), причем в
стандартную процедуру анализа внос т изменени дл оптимизации чувствительности и
линейного диапазона стандартной кривой, отображающей объемы и концентрации проб,
используемых в данном анализе. Концентрации инсулина в сыворотке (мкед./мл) измер ют
дл каждого промежутка времени у каждого из п ти животных в каждой экспериментальной
группе. П ть значений дл каждого промежутка времени усредн ют и стро т график
концентрации инсулина в сыворотке в зависимости от времени. Ниже приведены
соотношени площадей под кривой (AUC) дл экспериментальной группы и контрольной
группы. В нижеследующей таблице приведены также соотношени максимальных
концентраций инсулина в сыворотке (Cmax) дл экспериментальной группы и контрольной
группы.
20
25
30
35
40
45
50
Страница: 46
RU 2 300 516 C2
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
Страница: 47
RU 2 300 516 C2
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
Пример 10. Кромолин - пероральное введение
Лекарственные растворы, содержащие соединение доставл ющего агента (полученного
по примеру 1) и динатриевую соль кромолина (кромолин) (фирмы Sigma Chemical Co., St.
Louis, МО), получают в деионизированной воде. Свободную кислоту соединени доставл ющего агента превращают в натриевую соль, добавл один эквивалент
гидроксида натри . Полученную смесь подвергают вихревому перемешиванию и помещают
в устройство дл ультразвуковой обработки (около 37°С). Показатель рН довод т примерно
до 7-7,5 водным раствором NaOH. При необходимости добавл ют дополнительное
количество NaOH дл достижени однородной растворимости и повторно регулируют
показатель рН. Смесь подвергают вихревому перемешиванию дл получени однородного
раствора, при необходимости производ обработку ультразвуком и нагревание. Раствор
соединени доставл ющего агента смешивают с кромолином из исходного раствора (175
мг кромолина/мл в деионизированной воде, показатель рН при необходимости довод т
примерно до 7,0, добавл NaOH или HCl, после чего исходный раствор хран т в
замороженном виде завернутым в фольгу, перед использованием размораживают и
нагревают примерно до 30°С). Смесь подвергают вихревому перемешиванию дл получени однородного раствора, при необходимости производ обработку ультразвуком и
нагревание. Показатель рН довод т примерно до 7-8 водным раствором NaOH. Затем
раствор разбавл ют водой до требуемого объема (обычно 2,0 мл) и концентрации и до
использовани хран т завернутым в фольгу. Конечные дозы соединени доставл ющего
агента и кромолина и объемы доз приведены в нижеследующей таблице 10.
Обычно используют описанные ниже методики определени требуемой дозы и отбора
проб. Самцов крыс Sprague-Dawley с массой тела 200-250 г не корм т в течение 24
часов, после чего их анестезируют кетамином (44 мг/кг) и хлорпромазином (1,5 мг/кг)
за 15 минут до введени лекарственного средства и при необходимости производ т
повторное введение анестезирующих средств дл обеспечени необходимой степени
наркоза. Экспериментальной группе из п ти животных ввод т один из лекарственных
растворов. Дл этой цели используют французский катетер Rusch 8 длиной 11 см,
соответствующий 1 мл шприцу с концом в виде пипетки. Шприц заполн ют лекарственным
раствором, пропуска раствор через катетер, который затем вытирают досуха. Катетер
ввод т в пищевод, оставл перед резцами конец трубки длиной 1 см. Подачу раствора
осуществл ют нажатием на поршень шприца.
Пробы крови отбирают из хвостовой артерии через промежутки времени, равные обычно
0,25, 0,5, 1,0 и 1,5 часам. Концентрации кромолина в сыворотке измер ют при помощи
ВЭЖХ. Образцы получают следующим образом: 100 мкл сыворотки помещают вместе с 100
мкл 3 н. раствора HCl и 300 мкл этилацетата в пробирку Эппендорфа. Содержимое
пробирки подвергают вихревому перемешиванию в течение 10 минут и затем
Страница: 48
RU 2 300 516 C2
5
10
15
центрифугируют в течение 10 минут со скоростью 10000 оборотов/мин. 200 мкл
этилацетатного сло перенос т в пробирку Эппендорфа, содержащую 67 мкл 0,1 М
раствора фосфатного буфера. Содержимое пробирки подвергают вихревому
перемешиванию в течение 10 минут и затем центрифугируют в течение 10 минут со
скоростью 10000 оборотов/мин. Слой фосфатного буфера перенос т в пробирку дл ВЭЖХ
и ввод т в колонку дл ВЭЖХ (колонка длиной 150 мм и внутренним диаметром 2 мм
Keystone Exsil Amino, 5 мкм, 100 ; подвижна фаза = 35% буфера (68 мМ KH2PO4.
доведенного до рН 3,0 при помощи 85% Н3PO4)/65% ацетонитрила; инъецируемый объем =
10 мкл; скорость потока= 0,30 мл/мин; врем удерживани кромолина = 5,5 мин;
оптическую плотность определ ют при 240 нм). Базовые значени , полученные в
предшествующих исследовани х, практически равны нулю.
Результаты, полученные дл животных в каждой группе, усредн ют дл каждого
промежутка времени, при этом наибольшие средние значени (т.е. усредненный максимум
концентрации кромолина в сыворотке) приведены в нижеследующей таблице 10.
Таблица 10. Кромолин - пероральное введение
Соединение
Доза соединени Доза кромолина Объем дозы Усредненный максимум кромолина в сыворотке ±
доставл ющего агента доставл ющего агента (мг/кг) (мг/кг)
(мл/кг)
стандартное отклонение (стандартна ошибка)
20
25
5
200
25
1
0,63±0,47
7
200
25
1
0,81±0,85
7
200
25
1
0,68±0,34
7
200
25
1
0,56±0,39
15
200
25
1
0,38±0,15
47
200
25
2
0,55±0,12
47
200
25
1
0,56±0,39
60
200
25
1
1,57±0,38
60
200
25
1
0,82±0,24
60
200
25
1
0,76±0,34
61
200
25
1
0,54±0,39
61
200
25
1
0,57±0,36
61
200
25
2
0,39±0,21
30
35
40
45
50
Пример 11. Даптомицин - пероральное введение
Лекарственные растворы, содержащие соединение доставл ющего агента и даптомицин
(Cubist Pharmaceuticals, Cambridge, МА.), получают в 0,9% изотоническом растворе. Дл получени раствора соединени доставл ющего агента или используют натриевую соль
указанного соединени , или свободную кислоту превращают в его натриевую соль.
Свободную кислоту соединени доставл ющего агента превращают в натриевую соль,
добавл один эквивалент гидроксида натри . Полученную смесь подвергают вихревому
перемешиванию и помещают в устройство дл ультразвуковой обработки (около 37°С).
Показатель рН довод т примерно до 7,0-7,5 водным раствором HCl или NaOH. При
необходимости добавл ют дополнительное количество NaOH дл достижени однородной
растворимости и повторно регулируют показатель рН. Смесь подвергают вихревому
перемешиванию дл получени однородного раствора, при необходимости производ обработку ультразвуком. Раствор соединени доставл ющего агента смешивают с
даптомицином из исходного раствора (200 мг даптомицина/мл в 0,9% изотоническом
растворе, и при необходимости показатель рН довод т до 6,0-7,0 с помощью NaOH или
HCl). Исходный раствор хран т в замороженном виде (-20°С) завернутым в фольгу, перед
использованием размораживают и постепенно нагревают примерно до 25°С. Смесь
доставл ющего агента и даптомицина подвергают вихревому перемешиванию при низкой
скорости, получа однородный раствор. Показатель рН довод т примерно до 7,0-7,5
водным раствором NaOH. Раствор развод т 0,9% изотоническим раствором до требуемого
объема (обычно 2,0 мл) и концентрации и до использовани хран т завернутым в фольгу.
Конечные дозы соединени доставл ющего агента, даптомицина и объемы доз приведены
в нижеследующей таблице 11.
Страница: 49
RU 2 300 516 C2
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
Обычно используют описанные ниже методики определени требуемой дозы и отбора
проб. Самцов крыс Sprague-Dawley с массой тела 200-250 г не корм т в течение 24
часов, после чего их анестезируют кетамином (44 мг/кг) и хлорпромазином (1,5 мг/кг)
за 15 минут до введени лекарственного средства и при необходимости производ т
повторное введение анестезирующих средств дл обеспечени необходимой степени
наркоза. Экспериментальной группе из п ти животных ввод т один из лекарственных
растворов. Дл этой цели используют французский катетер Rusch 8 длиной 11 см,
соответствующий 1 мл шприцу с концом в виде пипетки. Шприц заполн ют лекарственным
раствором, пропуска раствор через катетер, который затем вытирают досуха. Катетер
ввод т в пищевод, оставл перед резцами конец трубки длиной 1 см. Подачу раствора
осуществл ют нажатием на поршень шприца.
Пробы гепаринизированной крови крыс отбирают из вентральной хвостовой артерии
через промежутки времени, равные обычно 0,25, 0,5, 0,75, 1,0, 2,0 и 4,0 часам, после
введени лекарственного раствора и хран т на льду. Пробы крови центрифугируют со
скоростью 11500 оборотов/мин в течение 4 минут при 4°С, получа плазму (супернатант),
которую хран т при -70°С. Концентрации даптомицина в плазме измер ют при помощи
изократической ВЭЖХ с обращенной фазой, выдержива образцы во врем анализа при
температуре 4°С. Базовые значени , полученные при исследовании чистой плазмы, равны
нулю.
Значени концентрации даптомицина в крови, полученные у животных в каждой
экспериментальной группе, усредн ют дл каждого промежутка времени. Усредненные
максимальные значени концентрации даптомицина (Сmax) и площади, соответствующие
уровню даптомицина, под кривой (AUC) приведены в нижеследующей таблице 11.
Таблица 11. Даптомицин - пероральное введение
Соединение
Доза соединени Доза
Объем дозы Усредненный максимум даптомицина в
AUC мкгдоставл ющего агента доставл ющего агента даптомицина (мл/кг)
плазме (Cmax) ± стандартное отклонение, мин/мл
(мг/кг)
(мг/кг)
мкг/мп
2
200
50
1
5,07±0,61
-
5
200
50
1
7,082±3,86
-
7
200
50
1
10,45±2,87
-
7
100
50
1
13,05±4,62
-
7
100
50
0,5
7,09±5,35
-
7
50
50
0,5
5,77±1,49
-
7
50
50
0,5
59,14±3,11
-
7
200
50
1
6,06±1,73
-
7
200
50
1
8,04±6,03
-
11
200
50
1
13,27±13,43
-
12
200
50
1
16,11±17,58
-
14
200
50
1
14,2±24,84
-
15
200
50
1
9,5±5,49
-
30
200
50
1
3,06±0,78
-
43
200
50
1
21,44±6
4555*
43
200
50
1
10,56±3,37
2895*
43
200
50
1
12,94±6,6
2820*
57
200
50
1
8,59±4,21
-
* AUC = Обща AUC (0 ? ?)
Приведенные выше патенты, за вки на патент, методы испытани и публикации
полностью включены в данное описание изобретени в качестве ссылки.
Из приведенного выше подробного описани изобретени специалистам в данной
области должны быть очевидны многие модификации насто щего изобретени . Все
подобные модификации вход т в объем прилагаемой формулы изобретени .
Формула изобретени 1. Соединение, которое имеет следующую формулу:
Страница: 50
CL
RU 2 300 516 C2
5
и выбрано из группы, включающей
10
15
20
25
30
35
40
45
50
Соед. № R 1
R2
R3
R4
R5
R6
R7
1
Н
Н
Н
Н
С(O)СН3
СН2
пара-Ph
2
Н
Н
Н
Н
ОН
СН2
пара-Ph
5
Н
Н
Н
Н
ОН
(СН2)5
св зь
6
Н
Н
Н
Н
ОН
(CH2)6
св зь
7
Н
Н
Н
Н
ОН
(CH2)7
св зь
8
Н
Н
Н
Н
ОН
(СН2)9
св зь
9
Н
Н
Н
Н
С(O)СН3
(СН2)3
св зь
10
Н
Н
Н
Н
С(O)СН3
(CH2)4
св зь
11
Н Н
Н
Н
С(O)СН3
(CH2)5
св зь
12
Н Н
Н
Н
С(O)СН3
(СН2)7
св зь
18
Н Н
Н
Н
СН=СНСН3
(СН2)7
св зь
19
Н Н
Н
Н
NH2
(CH2)7
св зь
20
Н Н
Н
Н
NO2
(СН2)7
св зь
22
Н Н
Cl
Н
NH2
(CH2)7
св зь
23
Н Н
Cl
Н
NH2
(СН2)4
св зь
24
Н Н
Н
Н
NHC(O)СН3
(СН2)7
св зь
25
Н Н
Н
Н
СН=CHCO2Н
(СН2)7
св зь
26
Н Н
Н
Н
С(O)СН2СН3
(СН2)3
св зь
27
Н Н
Н
Н
С(O)СН2СН3
(СН2)5
св зь
28
Н Н
Н
Н
С(O)СН2СН3
(CH2)7
св зь
29
Н Н
Н
Н
С(O)СН2СН3
(СН2)9
св зь
30
Н Н
Н
Н
C(O)NH2
(CH2)7
св зь
31
Н Н
Н
Н
С(O)NHCH3
(СН2)7
св зь
32
Н Н
Н
Н
СООН
(СН2)7
св зь
33
Н Н
Н
Н
C(O)NHCH2CH3
(СН2)7
св зь
34
Н Н
Н
Н
C(O)NHCH(CH3)2
(СН2)7
св зь
35
Н Н
Н
Н
ОСН3
(СН2)7
св зь
36
Н Н
Н
Н
СН(ОН)СН3
(СН2)7
св зь
37
Н Н
Н
Н
С(СН3)2OH
СН2
пара-Ph
38
Н Н
Н
ОН
С(O)СН3
(СН2)7
св зь
39
Н Н
Н
ОСН3
С(O)СН3
(СН2)7
св зь
43
Н ОН
Н
Н
Н
(CH2)7
св зь
44
Н ОН
Н
Н
Н
(СН2)9
св зь
45
Н ОН
Н
Н
Н
(СН2)5
св зь
51
Н Н
Н
Н
С(O)NHCH3
(СН2)7
св зь
52
Н Н
Н
Н
C(O)NH2
СН2
пара-Ph
54
Н Н
Н
Н
С(O)СН3
(СН2)9
св зь
55
Н Н
ОСН3
Н
С(O)СН3
(СН2)7
св зь
56
Н ОСН3
Н
Н
С(O)СН3
(СН2)7
св зь
57
Н Н
ОН
Н
С(O)СН3
(СН2)7
св зь
58
Н Н
СН3
Н
С(O)СН3
(СН2)5
св зь
62
Н Н
С(O)СН3
Н
Н
(СН2)7
св зь
63
Н Н
С(O)СН2СН3 Н
Н
(СН2)7
св зь
64
Н С(O)СН3 Н
Н
Н
(CH2)7
св зь
68
Н CL
Н
Н
Н
(СН2)7
св зь
71
Н Н
F
Н
F
(СН2)7
св зь
72
Н Н
Н
Н
OH
(CH2)10
св зь
Страница: 51
RU 2 300 516 C2
5
10
73
Н Н
Н
Н
CL
(СН2)7
св зь
74
Н NO2
Н
Н
ОН
(СН2)7
св зь
75
Н Н
Н
Н
F
(СН2)4
св зь
76
Н Н
Н
Н
CF3
(СН2)4
св зь
77
F
Н
Н
Н
F
(CH2)7
св зь
79
Н Н
Н
Н
ОН
СН2СН(ОН)
пара-Ph
80
Н Н
ОСН3
Н
Н
(СН2)6-СН(СН3) св зь
88
Н Н
Н
Н
-C(O)NH-(CH2)9-OH СН2
св зь
92
Н Н
Н
Н
-O(СН2)5СООН
(СН2)5
св зь
93
Н СН3
Н
Н
СН3
(СН2)7
св зь
94
Н СН3
Н
Н
СН3
(СН2)5
св зь
98
Н Н
Н
С(O)-NH2 O-(СН3)7-СООН
-(СН2)7-
св зь
и их фармацевтически приемлемые соли.
2. Соединение, которое имеет следующую формулу:
15
20
и выбрано из группы, включающей
Соед. № R 1 R 2 R 3 R 4
25
R6
R7
11
Н Н
Н Н С(O)СН3 (СН2)5 св зь
12
Н Н
Н Н С(O)СН3 (СН2)7 св зь
43
75
30
R5
Н ОН Н Н Н
(СН2)7 св зь
Н Н
(СН2)4 св зь
Н Н F
и их фармацевтически приемлемые соли.
3. Композици , предназначенна дл доставки активных веществ к ткан м организма
нуждающегос в этом животного, отличающа с тем, что содержит
(A) активное вещество и
(B) по меньшей мере одно соединение, предназначенное дл доставки активного
вещества к ткан м животного, формулы
35
40
которое выбрано из группы
Соед. № R 1
45
50
R2
R3
R4
R5
R6
R7
1
Н Н
Н
Н
С(O)СН3
СН2
пара-Ph
2
Н Н
Н
Н
ОН
СН2
пара-Ph
3
Н Н
Н
Н
ОН
СН2
св зь
4
Н Н
Н
Н
ОН
(СН2)3
св зь
5
Н Н
Н
Н
ОН
(СН2)5
св зь
6
Н Н
Н
Н
ОН
(СН2)6
св зь
7
Н Н
Н
Н
ОН
(СН2)7
св зь
8
Н Н
Н
Н
ОН
(СН2)9
св зь
9
Н Н
Н
Н
С(O)СН3
(CH2)3
св зь
10
Н Н
Н
Н
С(O)СН3
(СН2)4
св зь
Страница: 52
RU 2 300 516 C2
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
11
Н Н
Н
Н
С(O)СН3
(СН2)5
св зь
12
Н Н
Н
Н
С(O)СН3
(СН2)7
св зь
13
Н Н
Н
Н
Н
СН2
св зь
14
Н Н
Н
Н
Н
(СН2)3
св зь
15
Н Н
Н
Н
Н
(СН2)5
св зь
16
Н Н
Н
Н
Н
(CH2)9
св зь
17
Н Н
Н
Н
Н
(СН2)10
св зь
18
Н Н
Н
Н
СН=СНСН3
(СН2)7
св зь
19
Н Н
Н
Н
NH2
(CH2)7
св зь
20
Н Н
Н
Н
NO2
(СН2)7
св зь
21
Н Н
Н
Н
NH2
(CH2)4
св зь
22
Н Н
Cl
Н
NH2
(СН2)7
св зь
23
Н Н
Cl
Н
NH2
(СН2)4
св зь
24
Н Н
Н
Н
NHC(O)СН3
(СН2)7
св зь
25
Н Н
Н
Н
СН=CHCO2Н
(СН2)7
св зь
26
Н Н
Н
Н
С(O)СН2СН3
(СН2)3
св зь
27
Н Н
Н
Н
С(O)СН2СН3
(СН2)5
св зь
28
Н Н
Н
Н
С(O)СН2СН3
(СН2)7
св зь
29
Н Н
Н
Н
С(O)СН2СН3
(СН2)9
св зь
30
Н Н
Н
Н
C(O)NH2
(СН2)7
св зь
31
Н Н
Н
Н
С(O)NHCH3
(СН2)7
св зь
св зь
32
Н Н
Н
Н
СООН
(СН2)7
33
Н Н
Н
Н
С(O)NHCH2СН3
(СН2)7
св зь
34
Н Н
Н
Н
С(O)NHCH2(СН3)2 (СН2)7
св зь
35
Н Н
Н
Н
ОСН3
(CH2)7
св зь
36
Н Н
Н
Н
СН(ОН)СН3
(CH2)7
св зь
37
Н Н
Н
Н
С(СН3)2OH
СН2
пара-Ph
38
Н Н
Н
ОН
С(O)СН3
(СН2)7
св зь
39
Н Н
Н
ОСН3
С(O)СН3
(СН2)7
св зь
43
Н ОН
Н
Н
Н
(СН2)7
св зь
44
Н ОН
Н
Н
Н
(CH2)9
св зь
45
Н ОН
Н
Н
Н
(СН2)5
св зь
46
Н ОН
Н
Н
Н
(СН2)3
св зь
47
Н Н
ОН
Н
Н
(CH2)7
св зь
48
Н Н
ОН
Н
Н
(СН2)9
св зь
49
Н Н
ОН
Н
Н
(СН2)5
св зь
50
Н Н
ОН
Н
Н
(СН2)3
св зь
51
Н Н
Н
Н
C(O)NHCH3
(СН2)9
св зь
52
Н Н
Н
Н
C(O)NH2
СН2
пара-Ph
54
Н Н
Н
Н
С(O)СН3
(CH2)7
св зь
55
Н Н
ОСН3
Н
С(O)СН3
(СН2)7
св зь
56
Н ОСН3
Н
Н
С(O)СН3
(СН2)7
св зь
57
Н Н
ОН
Н
С(O)СН3
(СН2)7
св зь
58
Н Н
СН3
Н
С(O)СН3
(СН2)5
св зь
59
Н Н
Н
Н
С(O)Н
СН2
пара-Ph
60
Н Н
Н
Н
С(O)Н
(СН2)5
св зь
61
Н Н
Н
Н
С(O)Н
(СН2)7
св зь
62
Н Н
С(O)СН3
Н
Н
(СН2)7
св зь
63
Н Н
С(O)СН2СН3 Н
Н
(СН2)7
св зь
64
Н С(O)СН3 Н
Н
Н
(СН2)7
св зь
65
Н Н
Н
Н
Н
(СН2)7
св зь
66
Н Н
Н
Н
Н
СН2
пара-Ph
67
Н Н
ОН
Н
Н
СН2
пара-Ph
Документ
Категория
Без категории
Просмотров
2
Размер файла
766 Кб
Теги
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа