close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

жидкая питательная среда для культивирования патогенных штаммов микобактерий туберкулеза

код для вставки
РОССИЙСКАЯ ФЕДЕРАЦИЯ
RU
(19)
(11)
2 300 559
(13)
C2
(51) МПК
C12N 1/20
C12Q 1/04
(2006.01)
(2006.01)
ФЕДЕРАЛЬНАЯ СЛУЖБА
ПО ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ,
ПАТЕНТАМ И ТОВАРНЫМ ЗНАКАМ
(12)
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ
(21), (22) За вка: 2005120834/13, 04.07.2005
(72) Автор(ы):
Донченко Александр Семенович (RU),
Донченко Валери Николаевна (RU),
Донченко Николай Александрович (RU),
Ионина Светлана Владимировна (RU)
(24) Дата начала отсчета срока действи патента:
04.07.2005
(45) Опубликовано: 10.06.2007 Бюл. № 16
МИКОБАКТЕРИЙ ТУБЕРКУЛЕЗА
(57) Реферат:
Изобретение относитс к биотехнологии и
может быть использовано дл культивировани патогенных штаммов микобактерий туберкулеза.
Питательна среда содержит в качестве
минерально-солевой основы 1,5%-ную выт жку
древесной золы, глицерин, аспарагин, криалл,
сыворотку крови лошадей. Изобретение позвол ет
повысить ростовые свойства питательной среды и
сократить сроки выращивани патогенных
микобактерий туберкулеза. 4 табл.
R U
2 3 0 0 5 5 9
(54) ЖИДКАЯ ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ ПАТОГЕННЫХ ШТАММОВ
Страница: 1
RU
C 2
C 2
Адрес дл переписки:
630501, Новосибирска обл., Новосибирский рн, пос. Краснообск, ГНУ ИЭВСиДВ, а/ 708,
директору
2 3 0 0 5 5 9
(73) Патентообладатель(и):
Государственное научное учреждение Институт
экспериментальной ветеринарии Сибири и
Дальнего Востока Сибирского отделени Россельхозакадемии (ГНУ ИЭВСиДВ СО РАСХН)
(RU)
R U
(56) Список документов, цитированных в отчете о
поиске: КОЗЛОВ Ю.А. Питательные среды в
медицинской микробиологии. - М.: МЕДГИЗ,
1950, с.199-202, 291. СИДОРОВ М.А.,
СКОРОДУМОВ Д.И., ФЕДОТОВ В.Б.
Определитель зоопатогенных микроорганизмов. М.: КОЛОС, 1995, с.153-157. RU 2192472 С2,
10.11.2002. RU 2226398 С2, 10.04.2004. RU
2193061 С1, 20.11.2002.
RUSSIAN FEDERATION
(19)
RU
(11)
2 300 559
(13)
C2
(51) Int. Cl.
C12N 1/20
C12Q 1/04
(2006.01)
(2006.01)
FEDERAL SERVICE
FOR INTELLECTUAL PROPERTY,
PATENTS AND TRADEMARKS
(12)
ABSTRACT OF INVENTION
(21), (22) Application: 2005120834/13, 04.07.2005
(72) Inventor(s):
Donchenko Aleksandr Semenovich (RU),
Donchenko Valerija Nikolaevna (RU),
Donchenko Nikolaj Aleksandrovich (RU),
Ionina Svetlana Vladimirovna (RU)
(24) Effective date for property rights: 04.07.2005
(45) Date of publication: 10.06.2007 Bull. 16
(54) LIQUID NUTRIENT MEDIUM FOR CULTURING TUBERCULOSIS MYCOBACTERIA
properties of nutrient medium and reducing time
for
culturing
pathogenic
tuberculosis
mycobacteria. Invention can be used in culturing
pathogenic strains of tuberculosis mycobacteria.
EFFECT: improved and valuable properties of
nutrient medium.
4 tbl, 12 ex
R U
2 3 0 0 5 5 9
(57) Abstract:
FIELD: biotechnology, microbiology.
SUBSTANCE: invention proposes a nutrient
medium that contains 1.5% extract of wood ash as
mineral-salt
base,
glycerol,
asparagines,
fertilizer-kriall
and
horse
blood
serum.
Invention
provides
enhancing
the
growth
Страница: 2
EN
C 2
C 2
PATHOGENIC STRAINS
2 3 0 0 5 5 9
(73) Proprietor(s):
Gosudarstvennoe nauchnoe uchrezhdenie
Institut ehksperimental'noj veterinarii
Sibiri i Dal'nego Vostoka Sibirskogo
otdelenija Rossel'khozakademii (GNU IEhVSiDV
SO RASKhN) (RU)
R U
Mail address:
630501, Novosibirskaja obl., Novosibirskij rn, pos. Krasnoobsk, GNU IEhVSiDV, a/ja 708,
direktoru
RU 2 300 559 C2
5
10
15
20
25
Изобретение относитс к ветеринарной микробиологии, в частности к культивированию
патогенных штаммов микобактерий туберкулеза.
Известна жидка питательна среда Модел (Практикум по ветеринарной
микробиологии. Москва, 1980, с.92) дл выращивани микобактерий туберкулеза,
содержаща калий фосфорнокислый двуосновной 0,5 г; аммоний лимоннокислый 1 г;
магний сернокислый 0,05 г; железо сернокислое 0,005 г; глицерин 5 мл;
дистиллированную воду 100 мл.
Однако при использовании этой среды рост первичных культур микобактерий и процесс
накоплени бактериальной массы замедленны, среда содержит много компонентов, что
усложн ет ее приготовление.
Наиболее близкой по сущности за вл емому решению вл етс жидка среда Сотона
(Лабораторна диагностика туберкулеза. Рекомендации, Омск, 1988, с.59), котора примен етс дл культивировани микобактерий туберкулеза, состо ща из следующих
компонентов: аспарагин, глицерин, а минерально-солевую основу данной среды
составл ют такие компоненты, как лимонна кислота, калий фосфорнокислый двуосновной,
магний сернокислый, цитрат аммиачного железа.
Однако данна среда требует большого количества компонентов, и сроки роста
микобактерий на ней не вл ютс оптимальными.
Технической задачей за вл емого изобретени вл етс введение в среду веществ,
позвол ющих улучшить ростовые свойства среды и сократить сроки выращивани патогенных микобактерий туберкулеза при посевах эталонных штаммов культур
микобактерий.
Поставленна техническа задача решаетс тем, что известна жидка питательна среда дл культивировани патогенных штаммов микобактерий туберкулеза, включающа аспарагин, глицерин и минерально-солевую основу, согласно изобретению дополнительно
содержит криалл и сыворотку крови лошадей, а в качестве минерально-солевой основы выт жку древесной золы при следующем соотношении компонентов:
1,5%-на выт жка древесной золы, мл
100
Глицерин
30
35
40
6,0 г
Аспарагин
0,4 г
Криалл
1,0-1,2 г
Сыворотка крови лошади
1,0-1,2 г
Приготовление среды производ т следующим образом.
В качестве минерально-солевой основы предлагаемой среды используют выт жку
древесной золы, при проведении спектрального анализа которой было обнаружено
содержание в ней необходимых дл питани микобактерий туберкулеза микроэлементов:
серы, магни , железа, цинка, кали и фосфора. Приготовление выт жки древесной золы и
определение ее оптимальной концентрации производ т следующим образом: берут 0,5 г
(пример 1); 1,5 г (пример 2) и 3 г (пример 3) древесной золы, просе нной через сито,
и доливают до 100 мл дистиллированной водой, выдерживают 3 суток, фильтруют через
ватно-марлевый фильтр, затем - через бумажный, автоклавируют при 1,5 атм 30 мин.
Сроки роста патогенных штаммов микобактерий туберкулеза на среде Сотона и средах с
введением выт жки древесной золы в различных концентраци х представлены в таблице
1.
Таблица 1
45
Среды
Патогенные штаммы микобактерий
М.bovis(шт.8,ВИЭВ)
M.tuberculosis (шт.H37Rv)
Рост, (сутки)
по вление интенсивный по вление интенсивный
50
Сотона
14
22
11
22
Пример 1 (0, 5% выт жка древесной золы)
14
22
12
22
Пример 2 (1, 5% выт жка древесной золы)
10
20
8
18
Пример 3 (3% выт жка древесной золы)
13
22
11
20
Проведенные испытани показывают, что наиболее оптимальной дл получени Страница: 3
DE
RU 2 300 559 C2
5
10
15
20
25
ускоренного роста патогенных штаммов микобактерий туберкулеза вл етс выт жка
древесной золы 1,5%-ной концентрации, которую в дальнейшем используют в качестве
минерально-солевой основы предлагаемой среды.
Далее предлагаемую среду готов т следующим образом. Раствор ют каждый
ингредиент среды в растворе 1,5%-ной выт жки золы, причем последующий ингредиент
добавл ют после полного растворени предыдущего. Пропускают через бумажный фильтр
и разливают по колбам. Устанавливают рН в пределах 7,0-7,2 при помощи 10%-ной
ортофосфорной кислоты. Стерилизуют в автоклаве текучим паром при 120°С в течение 30
минут. В качестве биологически активных добавок в предлагаемую среду дополнительно
ввод т криалл (за вка на патент №94011513/15 «Способ получени торфогуминового
удобрени », авторы Алексеев А.С., Кривопуцкий B.C., Кривопуцка Л.М) и сыворотку
крови лошадей.
Дл контрол во всех примерах используют среду Сотона.
Дл подтверждени оптимальной концентрации криалла в составе предлагаемой среды
провод т следующие исследовани .
Пример 4. В среду, состо щую из аспарагина 0,4 г, глицерина 6,0 г, 1,5% выт жки
древесной золы, добавл ют криалл в количестве 0,5-0,7 г.
Пример 5. Дл культивировани микобактерий туберкулеза готов т среду, состо щую из
аспарагина, глицерина в известных количествах, выт жки древесной золы в оптимальной
концентрации 1,5% и криалла в количестве 1,0-1,2 г.
Пример 6. Дл культивировани микобактерий туберкулеза готов т среду, состо щую из
аспарагина, глицерина в известных количествах, выт жки древесной золы в оптимальной
концентрации 1,5% и криалла в количестве 1,5-1,7 г.
Результаты испытани питательных сред, приготовленных в примерах 4, 5 и 6,
представлены в таблице 2.
Таблица 2
Среды
Патогенные штаммы микобактерий
M.bovis (шт.8, ВИЭВ)
M.tuberculosis (шт. H37Rv)
Рост, (сутки)
по вление интенсивный по вление интенсивный
30
35
40
45
Сотона
14
22
11
20
Пример 4 (1,5% выт жка древесной золы, криалл 0,5-0,7 г)
14
24
15
22
Пример 5 (1,5% выт жка древесной золы, криалл 1,0-1,2 г)
14
20
11
20
Пример 6 (1, 5% выт жка древесной золы, криалл 1,5-1,7 г)
16
24
16
22
Дл подтверждени оптимальной концентрации сыворотки крови лошадей в составе
предлагаемой среды провод т следующие исследовани .
Пример 7. Дл культивировани микобактерий туберкулеза готов т среду, состо щую из
аспарагина 0,4 г, глицерина 6,0 г, выт жки древесной золы в оптимальной
концентрации - 1,5% и сыворотки крови лошадей в количестве 0,5-0,7 г.
Пример 8. Дл культивировани микобактерий туберкулеза готов т среду, состо щую из
аспарагина, глицерина в известных количествах, выт жки древесной золы в оптимальной
концентрации - 1,5% и сыворотки крови лошадей в количестве 1,0-1,2 г.
Пример 9. Дл культивировани микобактерий туберкулеза готов т среду, состо щую из
аспарагина, глицерина в известных количествах, выт жки древесной золы в оптимальной
концентрации - 1,5% и сыворотки крови лошадей в количестве 1,5-1,7 г.
Результаты испытани питательных сред, приготовленных в примерах 7,8 и 9,
представлены в таблице 3.
Таблица 3
Среды
Патогенные штаммы микобактерий
M.bovis (шт. 8, ВИЭВ)
M.tuberculosis (шт. H37Rv)
Рост, (сутки)
50
по вление интенсивный по вление интенсивный
1
2
3
4
5
Сотона
14
22
11
20
Пример 4 (1,5% выт жка древесной золы, сыворотка крови лошадей 0,5-0,7 г)
14
22
12
20
Страница: 4
RU 2 300 559 C2
5
10
15
Пример 5 (1,5% выт жка древесной золы, сыворотка крови лошадей 1,0-1,2 г)
12
19
9
15
Пример 6 (1,5% выт жка древесной золы, сыворотка крови лошадей 1,5-1,7 г)
12
21
11
20
Дл подтверждени оптимального соотношений за вленных ингредиентов в испытуемой
среде провод т следующие исследовани .
Пример 10. В среду, состо щую из аспарагина 0,4, глицерина 6,0, 1,5% выт жки
древесной золы, добавл ют криалл в количестве 0,5-0,7 г и сыворотку крови лошадей в
количестве 0,5-0,7 г.
Пример 11. Дл культивировани микобактерий туберкулеза готов т среду, состо щую
из аспарагина, глицерина в известных количествах, выт жки древесной золы в
оптимальной концентрации 1,5%, криалла в количестве 1,0 - 1,2 г и сыворотки крови
лошадей в количестве 1,0 - 1,2 г.
Пример 12. Дл культивировани микобактерий туберкулеза готов т среду, состо щую
из аспарагина, глицерина в известных количествах, выт жки древесной золы в
оптимальной концентрации 1,5%, криалла в количестве 1,5-1,7 г и сыворотки крови
лошадей в количестве 1,5 - 1,7 г.
Результаты испытани питательных сред, приготовленных в примерах 10, 11 и 12,
представлены в таблице 4.
Таблица 4
Среды
Патогенные штаммы микобактерий
20
M.bovis (шт.8, ВИЭВ)
M.tuberculosis (шт.
H37Rv)
Рост, (сутки)
по вление интенсивный по вление Интенсивный
25
30
35
40
Сотона
14
22
11
20
Пример 4 (1,5% выт жка древесной золы, криалл 0,5-0,7 г, сыворотка крови лошадей 0,50,7 г)
12
19
11
19
Пример 5 (1,5% выт жка древесной золы, криалл 1,0-1,2 г, сыворотка крови лошадей 1,01,2 г)
8
14
6
12
Пример 6 (1,5% выт жка древесной золы, криалл 1,5-1,7 г, сыворотка крови лошадей 1,51,7 г)
14
22
12
21
Из полученных данных следует, что сокращение сроков по влени первичного и
интенсивного роста микобактерий туберкулеза происходит при использовании в составе
опытных сред выт жки древесной золы 1,5%-ной концентрации, 1,0-1,2 г криалла и 1,01,2 г сыворотки крови лошадей.
На основании проведенных исследований установлено, что предлагаема жидка питательна среда, в состав которой входит минеральный комплекс и биологические
добавки, позвол ет стимулировать рост патогенных штаммов микобактерий туберкулеза.
Формула изобретени Жидка питательна среда дл культивировани патогенных штаммов микобактерий
туберкулеза, включающа аспарагин, глицерин и минерально-солевую основу,
отличающа с тем, что она дополнительно содержит криалл и сыворотку крови лошадей, а
в качестве минерально-солевой основы - выт жку древесной золы при следующем
соотношении компонентов:
Выт жка древесной золы 1,5% 100 мл
Глицерин
45
6,0 г
Аспарагин
0,4 г
Криалл
1,0-1,2 г
Сыворотка крови лошадей
1,0-1,2 г
50
Страница: 5
CL
Документ
Категория
Без категории
Просмотров
0
Размер файла
77 Кб
Теги
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа