close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

Патент РФ 2335502

код для вставки
РОССИЙСКАЯ ФЕДЕРАЦИЯ
RU
(19)
(11)
2 335 502
(13)
C2
(51) МПК
C07D 403/14 (2006.01)
A61K 31/404 (2006.01)
A61P 35/00 (2006.01)
ФЕДЕРАЛЬНАЯ СЛУЖБА
ПО ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ,
ПАТЕНТАМ И ТОВАРНЫМ ЗНАКАМ
(12)
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ
(21), (22) За вка: 2005129743/04, 23.02.2004
(24) Дата начала отсчета срока действи патента:
23.02.2004
(30) Конвенционный приоритет:
24.02.2003 US 60/448,863
(73) Патентообладатель(и):
ФАРМАЦИЯ ЭНД АПДЖОН КОМПАНИ ЛЛС (US)
(43) Дата публикации за вки: 10.02.2006
R U
(72) Автор(ы):
СУНЬ Чанцюань (US),
ФОСТЕР Тодд П. (US),
ХАН Фьюзен (US),
ХОУЛИ Майкл (US),
ТАМАНН Том (US)
(45) Опубликовано: 10.10.2008 Бюл. № 28
2 3 3 5 5 0 2
(56) Список документов, цитированных в отчете о
поиске: WO 0160814 А2, 23.08.2001. WO
200208466 A, 17.10.2002. RU 2142460 C1,
10.12.1999.
(85) Дата перевода за вки PCT на национальную фазу:
26.09.2005
2 3 3 5 5 0 2
R U
(87) Публикаци PCT:
WO 2004/076410 (10.09.2004)
C 2
C 2
(86) За вка PCT:
US 2004/005281 (23.02.2004)
Адрес дл переписки:
129010, Москва, ул. Б.Спасска , 25, стр.3,
ООО "Юридическа фирма Городисский и
Партнеры", пат.пов. Е.Е.Назиной, рег. № 517
(54) ПОЛИМОРФЫ ПИРРОЛЗАМЕЩЕННЫХ 2-ИНДОЛИНОНОВЫХ ИНГИБИТОРОВ
ПРОТЕИНКИНАЗЫ
(57) Реферат:
Насто щее изобретение относитс к
полиморфам
1-пирролзамещенного
2индолинонового соединени (2-пирролидин-1илэтил)амида 5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3илиденметил)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3карбоновой кислоты, а именно полиморфной
форме соединени формулы I:
в виде полиморфной формы II, по существу
свободной
от
полиморфа
формы
I,
Страница: 1
RU
характеризуемой порошковой рентгенограммой
PXRD,
с
характеристическими
пиками,
выраженными в градусах (±0,1) двойного угла
7.1,13.9,16.0,20.9
и
24.7,
полученными
с
использованием CuK?1 излучени (длина волны =
1.5406 А), и полиморфной форме соединени формулы I в виде полиморфа формы I, по существу
свободной
от
полиморфа
формы
II,
характеризуемой порошковой рентгенограммой
PXRD,
с
характеристическими
пиками,
выраженными в градусах (±0,1) двойного угла
5.0,16.7,18.9,24.8
и
27.3,
полученными
с
использованием CuK?1 излучени (длина волны =
1.5406 А). Изобретение также относитс к
фармацевтической
композиции,
обладающей
способностью
модулировать
каталитическую
активность протеинкиназы, на основе этих форм,
способу модулировани каталитической активности
протеинкиназы и способу лечени расстройств,
св занных с протеинкиназой. 11 н. и 15 з.п. ф-лы,
3 ил., 4 табл.
R U
R U
2 3 3 5 5 0 2
C 2
C 2
2 3 3 5 5 0 2
Страница: 2
RUSSIAN FEDERATION
RU
(19)
(11)
2 335 502
(13)
C2
(51) Int. Cl.
C07D 403/14 (2006.01)
A61K 31/404 (2006.01)
A61P 35/00 (2006.01)
FEDERAL SERVICE
FOR INTELLECTUAL PROPERTY,
PATENTS AND TRADEMARKS
(12)
ABSTRACT OF INVENTION
(21), (22) Application: 2005129743/04, 23.02.2004
(24) Effective date for property rights: 23.02.2004
(30) Priority:
24.02.2003 US 60/448,863
(43) Application published: 10.02.2006
(73) Proprietor(s):
FARMATsIJa EhND APDZhON KOMPANI LLS (US)
(45) Date of publication: 10.10.2008 Bull. 28
2 3 3 5 5 0 2
(85) Commencement of national phase: 26.09.2005
(86) PCT application:
US 2004/005281 (23.02.2004)
(87) PCT publication:
WO 2004/076410 (10.09.2004)
2 3 3 5 5 0 2
R U
(54) POLYMORPHS OF PYRROL-SUBSTITUTED 2-INDOLINONE PROTEINKINASE INHIBITORS
(57) Abstract:
FIELD: chemistry.
SUBSTANCE: invention concerns polymorphs of 1pyrrol-substituted
2-indolinone
compound
(2pyrrolidine-1-ylethyl)amide 5-(5-fluor-2-oxo-1,2dihydroindole-3-ylidenemethyl)-2,4-dimethyl-1Hpyrrol-3-carboxylic acid, namely polymorphic form
of
the
formula
I:
in the form of polymorphic form II mainly free of
polymorph I characterised by PXRD powder
radiogram with characteristic peaks expressed in
degrees (±0.1) of double angle 7.1, 13.9, 16.0,
20.9 and 24.7, obtained with the use of CuK ?1
radiation
(wavelength
=
1.5406
A),
and
polymorphic compound form of the formula I in the
form of polymorphic form I mainly free of
polymorph II characterised by PXRD powder
radiogram with characteristic peaks expressed in
degrees (±0.1) of double angle 5.0, 16.7, 18.9,
24.8 and 27.3 obtained with the use of CuK?1
radiation (wavelength = 1.5406 A). The invention
also concerns pharmaceutical composition capable
of catalytic proteinkynase activity and based on
these forms, method of catalytic proteinkynase
activity modeling and treatment method for
patients with proteinkynase-induced diseases.
EFFECT: improved efficiency of preparations.
26 cl, 3 dwg, 4 tbl
Страница: 3
C 2
C 2
Mail address:
129010, Moskva, ul. B.Spasskaja, 25, str.3,
OOO "Juridicheskaja firma Gorodisskij i
Partnery", pat.pov. E.E.Nazinoj, reg. № 517
EN
R U
(72) Inventor(s):
SUN' Chantsjuan' (US),
FOSTER Todd P. (US),
KhAN F'juzen (US),
KhOULI Majkl (US),
TAMANN Tom (US)
RU 2 335 502 C2
5
10
15
20
25
30
35
40
По данной за вке испрашиваетс приоритет согласно 35 USC, 119(e), временной за вке
на патент США, серийный № 60/448863, поданной 24 феврал 2003 года, описание которой
включено в данное описание в качестве ссылки во всей своей полноте.
Насто щее изобретение относитс к полиморфам 3-пирролзамещенного 2индолинонового соединени (2-пирролидин-1-илэтил)амида 5-(5-фтор-2-оксо-1,2дигидроиндол-3-илиденметил)-2,4-диметил-1H-пиррол-3-карбоновой кислоты.
Описание предшествующего уровн техники
(2-Пирролидин-1-илэтил)амид 5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3-илиденметил)-2,4диметил-1H-пиррол-3-карбоновой кислоты представл ет собой соединение, которое
демонстрирует способность к модулированию протеинкиназы (PK). По этой причине данное
соединение вл етс полезным дл лечени расстройств, св занных с аномальной
активностью PK.
Кратко, PK представл ют собой ферменты, которые катализируют фосфолирирование
гидроксигрупп на тирозиновом, сериновом и треониновом остатках белков. Последстви этой, на первый взгл д, простой активности вл ютс поразительными, поскольку, по
существу, все аспекты жизни клеток (например, рост, дифференциаци и пролифераци клеток) тем или иным образом завис т от активности PK. Кроме того, аномальна активность PK св зана с множеством расстройств, начина от относительно неопасных дл жизни заболеваний, таких как псориаз, до исключительно опасных заболеваний, таких как
глиобластома (рак мозга).
(2-Пирролидин-1-илэтил)амид 5-[5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-(3Z)-илиденметил]-2,4диметил-1H-пиррол-3-карбоновой кислоты вл етс ингибитором рецепторной
тирозинкиназы (RTK); класса PK. RTK и их лиганды, VEGF, PDGF и FGF опосредуют
новообразование сосудов, известное как ангиогенез, в солидных опухол х. Как
следствие, посредством ингибировани RTK может ингибироватьс рост новых
кровеносных сосудов в опухол х. Теоретически, этот новый класс молекул, называемых
антиангиогенетическими агентами, имеет гораздо меньшую токсичность дл организма по
сравнению с обычными противораковыми лекарственными средствами. (2-Пирролидин-1илэтил)амид 5-[5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-(3Z)-илиденметил]-2,4-диметил-1H-пиррол3-карбоновой кислоты в насто щее врем разрабатываетс дл лечени раковых
заболеваний у домашних животных, в основном у собак, и вл ютс также пригодными,
среди прочего, дл лечени рака у людей. Такие раковые заболевани включают, но, не
ограничива сь этим, лейкемию, рак мозга, немелкоклеточный рак легких, плоскоклеточный
рак, астроцитому, саркому Капоши, глиобластому, рак легких, рак мочевого пузыр , рак
головы и шеи, меланому, рак ичников, рак простаты, рак груди, мелкоклеточный рак
легких, глиому, рак тонкой и пр мой кишки, рак мочеполовой системы и стромальный рак
желудочно-кишечной системы. Также, сюда включена сверхэкспресси тучных клеток,
включа , но, не ограничива сь этим, мастоцитоз.
Авторы обнаружили, что соединение (2-пирролидин-1-илэтил)амида 5-(5-фтор-2-оксо1,2-дигидроиндол-3-илиденметил)-2,4-диметил-1H-пиррол-3-карбоновой кислоты
существует в двух полиморфных формах, полиморф I и полиморф II, кажда из которых
имеет четко различающиес физические свойства.
По этой причине в первом варианте осуществлени насто щее изобретение относитс к
соединению формулы I:
45
50
Страница: 4
DE
RU 2 335 502 C2
5
10
15
по существу, свободному от полиморфа формы I.
Во втором варианте осуществлени насто щее изобретение относитс к соединению
формулы
20
25
30
35
по существу, свободному от полиморфа формы II.
В предпочтительном варианте осуществлени соединение первого варианта
осуществлени характеризуетс порошковой рентгенограммой (PXRD), показанной на
фиг.1, форма II, и соединение второго варианта осуществлени характеризуетс порошковой рентгенограммой (PXRD), показанной на фиг.1, форма I.
В третьем варианте осуществлени насто щее изобретение относитс к композиции,
содержащей полиморф I соединени формулы I:
40
45
50
где полиморф I составл ет примерно более чем 85% мас. от массы композиции; или
Страница: 5
RU 2 335 502 C2
примерно более чем 90% мас. от массы композиции; или примерно более чем 95% мас. от
композиции; или примерно более чем 99% мас. от массы композиции.
В четвертом варианте осуществлени насто щее изобретение относитс к композиции,
содержащей полиморф II соединени формулы I:
5
10
15
20
где полиморф II составл ет примерно более чем 85% мас. от массы композиции; или
примерно более чем 90% мас. от массы композиции; или примерно более чем 95% мас. от
массы композиции; или примерно более чем 99% мас. от массы композиции.
В п том варианте осуществлени насто щее изобретение относитс к полиморфу
соединени формулы I:
25
30
35
40
где указанный полиморф получают
(a) растворением указанного соединени в кислом водном растворе;
(b) подщелачиванием указанного водного раствора, тем самым, вызыва осаждение
указанного соединени , по существу свободного от полиморфа формы II; и
(c) выделением осажденного полиморфа формы I из указанного соединени .
В шестом варианте осуществлени насто щее изобретение относитс к полиморфу
соединени формулы I:
45
50
Страница: 6
RU 2 335 502 C2
5
10
15
20
где указанный полиморф получают
(a) растворением указанного соединени в пол рном органическом растворителе,
который не образует водородных св зей;
(b) выпариванием указанного пол рного органического растворител , тем самым
вызыва осаждение указанного соединени , по существу свободного от полиморфа формы
II; и
(c) выделением осажденного полиморфа формы I из указанного соединени .
В седьмом варианте осуществлени насто щее изобретение относитс к полиморфу
соединени формулы I:
25
30
35
40
45
50
где указанный полиморф получают
(a) растворением указанного соединени в пол рном органическом растворителе,
который образует водородные св зи;
(b) выпариванием указанного пол рного органического растворител , тем самым
вызыва осаждение указанного соединени , по существу свободного от полиморфа формы
I; и
(c) выделением осажденного полиморфа формы II из указанного соединени .
В предпочтительном варианте осуществлени насто щего изобретени пол рный
органический растворитель шестого варианта осуществлени , который не образует
водородных св зей, представл ет собой ТГФ. В другом предпочтительном варианте
осуществлени пол рный органический растворитель седьмого варианта осуществлени ,
который образует водородные св зи, представл ет собой метанол.
В восьмом варианте осуществлени насто щее изобретение относитс к
фармацевтической композиции, содержащей соединение первого или второго варианта
осуществлени и фармацевтически приемлемый носитель или эксципиент.
В дев том варианте осуществлени насто щее изобретение относитс к способу
Страница: 7
RU 2 335 502 C2
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
модулировани каталитической активности протеинкиназы, включающему стадию
контактировани указанной протеинкиназы с соединением первого или второго вариантов
осуществлени . В предпочтительном варианте осуществлени протеинкиназу выбирают из
группы, состо щей из рецепторной тирозинкиназы, не-рецепторной тирозинкиназы и серинтреонинкиназы.
В дес том варианте осуществлени насто щее изобретение относитс к способу
лечени или профилактики расстройств, св занных с протеинкиназой, в организме,
включающему введение терапевтически эффективного количества фармацевтической
композиции, содержащей соединение первого или второго варианта осуществлени и
фармацевтически приемлемый носитель или эксципиент, в организм. В предпочтительном
варианте осуществлени расстройства, св занные с протеинкиназой, выбраны из группы,
состо щей из расстройства, св занного с рецепторной тирозинкиназой, расстройства,
св занного с не-рецепторной тирозинкиназой, и расстройства, св занного с серинтреонинкиназой. В другом предпочтительном варианте осуществлени расстройство,
св занное с протеинкиназой, выбрано из группы, состо щей из расстройства, св занного
с EGFR, расстройства, св занного с PDGFR, расстройства, св занного с IGFR,
расстройства, св занного с c-kit, и расстройства, св занного с flk. В еще одном
предпочтительном варианте осуществлени расстройства, св занные с протеинкиназой,
представл ют собой раковое заболевание, выбранное из группы, состо щей из лейкемии,
рака мозга, немелкоклеточного рака легких, плоскоклеточного рака, астроцитомы,
саркомы Капоши, глиобластомы, рака легких, рака мочевого пузыр , рака головы, рака
шеи, меланомы, рака ичников, рака простаты, рака груди, мелкоклеточного рака легких,
глиомы, рака тонкой и пр мой кишки, рака мочеполовой системы и стромального рака
желудочно-кишечной системы. Также, сюда включена сверхэкспресси тучных клеток,
включа , но, не ограничива сь этим, мастоцитоз. Еще в одном предпочтительном варианте
осуществлени расстройства, св занные с протеинкиназой, выбраны из группы, состо щей
из диабета, аутоиммунного расстройства, расстройства гиперпролиферации, рестеноза,
фиброза, псориаза, болезни Гиппел -Линдау, остеоартрита, ревматоидного артрита,
ангиогенеза, воспалительного расстройства, иммунологического расстройства и сердечнососудистого расстройства. Еще в одном предпочтительном варианте осуществлени организмом вл етс человек.
В одиннадцатом варианте осуществлени насто щее изобретение относитс к способу
лечени рака у домашних животных, включающему введение фармацевтической
композиции, содержащей соединение первого или второго варианта осуществлени и
фармацевтически приемлемый носитель или эксципиент. В предпочтительном варианте
осуществлени домашними животными вл ютс кошка или собака.
Фиг.1 представл ет собой порошковую рентгенограмму (PXRD) дл полиморфа I (Форма
I) и полиморфа II (Форма II) (2-пирролидин-1-илэтил)амида 5-(5-фтор-2-оксо-1,2дигидроиндол-3-илиденметил)-2,4-диметил-1H-пиррол-3-карбоновой кислоты.
Фиг.2 представл ет собой инфракрасные спектры (ИК) пропускани , измеренные дл высоко- и среднечастотных областей ИК-спектра, дл полиморфа I (верхние спектры) и
полиморфа II (нижние спектры) (2-пирролидин-1-илэтил)амида 5-(5-фтор-2-оксо-1,2дигидроиндол-3-илиденметил)-2,4-диметил-1H-пиррол-3-карбоновой кислоты.
Фиг.3 представл ет собой рамановские спектры, измеренные в высоко- и
среднечастотных област х рамановского спектра, дл полиморфа I (верхние спектры) и
полиморфа II (нижние спектры) (2-пирролидин-1-илэтил)амида 5-(5-фтор-2-оксо-1,2дигидроиндол-3-илиденметил)-2,4-диметил-1H-пиррол-3-карбоновой кислоты.
Если не утверждаетс иного, следующие далее термины, используемые в описании и
формуле изобретени , имеют значени , обсуждаемые ниже.
"Полиморф" относитс к твердой фазе вещества, котора существует в нескольких
различных формах, из-за различных конфигураций и/или конформаций молекул в
кристаллической решетке.
Полиморф может также определ тьс как различные несольватированные
Страница: 8
RU 2 335 502 C2
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
кристаллические формы соединени .
Полиморфы, как правило, имеют различные химические и физические свойства. Термин
"полиморф" в контексте предпочтительных вариантов осуществлени насто щего
изобретени также включает сольваты (то есть формы, содержащие растворитель или
воду), аморфные формы (то есть некристаллические формы) и десольватированные
сольваты (то есть формы, которые могут быть получены только посредством удалени растворител из сольвата).
В предпочтительные варианты осуществлени насто щего изобретени включаютс чистые, отдельные полиморфы, а также смеси, содержащие два или более различных
полиморфов. Чистый, отдельный полиморф может, по существу, не содержать других
полиморфов. "По существу свободный" означает, что другой полиморф (полиморфы)
присутствуют в количестве, менее чем примерно 15% мас., более предпочтительно, менее
чем примерно 10% мас., еще более предпочтительно, менее чем примерно 5% мас.,
наиболее предпочтительно, менее чем примерно 1% мас. Любому специалисту в данной
области будет пон тна фраза "в количестве, менее чем примерно 15% мас.", как
означающа , что полиморф, представл ющий интерес, присутствует в количестве,
большем, чем примерно 85% мас. Подобным образом, фраза "менее чем примерно 10%
мас." означает, что полиморф, представл ющий интерес, присутствует в количестве,
большем, чем примерно 90% мас., и так далее и тому подобное.
Полиморфы соединений предпочтительных вариантов осуществлени насто щего
изобретени вл ютс желательными, поскольку конкретный полиморф соединени может
иметь лучшие физические и химические свойства, чем другие полиморфные формы такого
же соединени . Например, один из полиморфов может иметь повышенную растворимость в
определенных растворител х. Така дополнительна растворимость может облегчить
получение или введение соединений предпочтительных вариантов осуществлени насто щего изобретени . Различные полиморфы могут также иметь различные
механические свойства (например, различную сжимаемость, совместимость,
таблетируемость), которые могут вли ть на рабочие характеристики таблетировани лекарственного средства и, таким образом, вли ть на изготовление лекарственного
средства. Конкретный полиморф может также демонстрировать отличную скорость
растворени в том же растворителе по отношению к другому полиморфу. Различные
полиморфы могут также иметь различную физическую (твердофазное преобразование
метастабильного полиморфа в более стабильный полиморф) и химическую (реакционна способность) стабильность.
Предпочтительные варианты осуществлени насто щего изобретени включают
фармацевтическую композицию, содержащую полиморф предпочтительных вариантов
осуществлени насто щего изобретени и фармацевтически приемлемый носитель или
эксципиент. Носители и эксципиенты дл изготовлени фармацевтически приемлемых
композиций, содержащих полиморфы предпочтительных вариантов осуществлени насто щего изобретени , хорошо известны в данной области и описаны, например, в
за вке на патент США № 09/783264, поданной 15 феврал 2001 года, котора включена в
данное описание во всей своей полноте. См. WO 01/60814.
Предпочтительные варианты осуществлени насто щего изобретени также включают
способ модул ции каталитической активности протеинкиназы, включающий приведение в
контакт указанной протеинкиназы с полиморфом предпочтительных вариантов
осуществлени насто щего изобретени , в предпочтительном варианте осуществлени насто щего изобретени протеинкиназу выбирают из группы, состо щей из рецепторной
тирозинкиназы, не-рецепторной тирозинкиназы и серин-треонинкиназы.
Предпочтительные варианты осуществлени насто щего изобретени включают способ
лечени или профилактики расстройства, св занного с протеинкиназой, в организме
(например, человека), включающий введение терапевтически эффективного количества
фармацевтической композиции, содержащей полиморф предпочтительных вариантов
осуществлени насто щего изобретени и фармацевтически приемлемый носитель или
Страница: 9
RU 2 335 502 C2
5
10
15
20
25
30
эксципиент, в организм. В предпочтительном варианте осуществлени насто щего
изобретени расстройство, св занное с протеинкиназой, выбирают из группы, состо щей
из расстройства, св занного с тирозинкиназой рецептора, расстройства, св занного с нерецепторной тирозинкиназой, и расстройства, св занного с серин-треонинкиназой. В
другом предпочтительном варианте осуществлени насто щего изобретени расстройство,
св занное с протеинкиназой, выбирают из группы, состо щей из расстройства, св занного
с EGFR, расстройства, св занного с PDGFR, расстройства, св занного с IGFR, и
расстройства, св занного с flk. Еще в одном предпочтительном варианте осуществлени насто щего изобретени расстройство, св занное с протеинкиназой, представл ет собой
раковое заболевание, выбранное из группы, состо щей из плоскоклеточного рака,
астроцитомы, саркомы Капоши, глиобластомы, рака легких, рака мочевого пузыр , рака
головы и шеи, меланомы, рака ичников, рака простаты, рака груди, мелкоклеточного
рака легких, глиомы, рака тонкой и пр мой кишки, рака мочеполовой системы и рака
желудочно-кишечной системы. В предпочтительном варианте осуществлени насто щего
изобретени расстройство, св занное с протеинкиназой, выбирают из группы, состо щей
из диабета, аутоиммунного расстройства, расстройства гиперпролиферации, рестеноза,
фиброза, псориаза, болезни Гиппел -Линдау, остеоартрита, ревматоидного артрита,
ангиогенеза, воспалительных расстройств, иммунологических расстройств и сердечнососудистых расстройств.
Предпочтительные варианты осуществлени насто щего изобретени также включают
способ лечени рака у домашних животных, включающий введение фармацевтической
композиции, содержащей полиморф предпочтительных вариантов осуществлени насто щего изобретени и фармацевтически приемлемый носитель или эксципиент. Как он
здесь используетс в данном описании, термин "домашнее животное" включает, но, не
ограничива сь этим, кошек и собак.
Следующие примеры привод тс дл того, чтобы дать возможность специалисту в
данной области более сно пон ть и осуществить насто щее изобретение. Примеры не
должны рассматриватьс в качестве ограничивающих объем насто щего изобретени , а
только в качестве иллюстративных и презентативных.
Синтез (2-пирролидин-1-илэтил)амида 5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3илиденметил)-2,4-диметил-1H-пиррол-3-карбоновой кислоты
35
40
45
50
5-Фтор-1,3-дигидроиндол-2-он конденсируют с (2-пирролидин-1-илэтил)амидом 5формил-2,4-диметил-1H-пиррол-3-карбоновой кислоты с получением указанного в заглавии
соединени .
MS+ ve APCI 397[M ++1].
Методика масштабировани :
5-Формил-2,4-диметил-1H-пиррол-3-карбоновую кислоту (61 г), 5-фтор-l,3-дигидроиндол2-он (79 г), этанол (300 мл) и пирролидин (32 мл) кип т т с обратным холодильников в
течение 4,5 час. К смеси добавл ют уксусную кислоту (24 мл) и продолжают кип чение с
обратным холодильником в течение 30 минут. Смесь охлаждают до комнатной
температуры и твердые вещества собирают вакуумным фильтрованием и дважды
Страница: 10
RU 2 335 502 C2
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
промывают этанолом. Твердые вещества перемешивают в течение 130 минут в 40%
растворе ацетона в воде (400 мл), содержащем 12 н. хлористоводородной кислоты (6,5
мл). Твердые вещества собирают вакуумным фильтрованием и дважды промывают 40%
раствором ацетона в воде. Твердые вещества сушат в вакууме с получением 5-[5-фтор-2оксо-1,2-дигидроиндол-(3Z)-илиденметил]-2,4-диметил-1H-пиррол-3-карбоновой кислоты
(86 г, 79% выход) в виде оранжевого твердого вещества.
1
H-ЯМР (диметилсульфоксид-d6) ? 1,60 (м, 4H, 2ЧCH2), 2,40, 2,44 (2Чс, 6H, 2ЧCH3), 2,50
(м, 4H, 2ЧCH2), 2,57, 3,35 (2Чм, 4H, 2ЧCH2), 7,53, 7,70, 7,73, 7,76 (4Чм, 4H, ароматика и
винил), 10,88 (с, 1H, CONH), 13,67 (с, 1H, пиррол NH).
МС m/z 299 [M-1].
5-[5-Фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-(3Z)-илиденметил]-2,4-диметил-1H-пиррол-3карбоновую кислоту (100 г) и диметилформамид (500 мл) перемешивают и добавл ют
гексафторфосфат бензотриазол-1-илокситрис(диметиламино)фосфони (221 г), 1-(2аминоэтил)пирролидин (45,6 г) и триэтиламин (93 мл). Смесь перемешивают в течение 2
часов при температуре окружающей среды. Твердое вещество собирают вакуумным
фильтрованием и промывают этанолом. Твердые вещества промывают в суспензии
перемешиванием в этаноле (500 мл) в течение одного часа при 64°C и охлаждают до
комнатной температуры. Твердые вещества собирают вакуумным фильтрованием,
промывают этанолом и сушат в вакууме с получением (2-пирролидин-1-илэтил)амида 5-[5фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-(3Z)-илиденметил]-2,4-диметил-1H-пиррол-3-карбоновой
кислоты (101,5 г, выход 77 %).
1
H-ЯМР (диметилсульфоксид-d6) ? 2,48, 2,50 (2Чс, 6H, 2ЧCH3), 6,80, 6,88, 7,68, 7,72
(4Чм, 4H, ароматика и винил), 10,88 (с, 1H, CONH), 12,12 (с, 1H, COOH), 13,82 (с, 1H,
пиррол NH).
МС m/z 396 [M+1].
ОБЩИЕ АНАЛИТИЧЕСКИЕ СПОСОБЫ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ИДЕНТИЧНОСТИ И
ФИЗИЧЕСКИХ СВОЙСТВ ПОЛИМОРФОВ
Оценка растворимости полиморфа в различных растворител х
Приблизительно 1,5 мг полиморфа перенос т в 10 мл стекл нные флаконы
(тарированные) и взвешивают (с точностью до 0,1 мг). Во флаконы порци ми добавл ют
растворители (по одному растворителю в каждый флакон). После каждого добавлени флакон закрывают крышкой и встр хивают. Растворение твердого вещества наблюдают
визуально. Если очевидного растворени не наблюдаетс , сразу после этого добавл ют
еще растворитель. Если растворение вл етс очевидным, флакон оставл ют на столе, по
меньшей мере, на 30 минут до следующего добавлени растворител . Эту стадию
повтор ют до тех пор, пока кристаллы не будут видны на черном и белом фонах. Затем
оценивают пределы растворимости посредством делени массы на конечный объем и
объем перед последним добавлением. Если твердое вещество остаетс после добавлени 10 мл растворител , растворимость выражаетс как меньша , чем масса, деленна на
конечный объем. Если твердое вещество полностью раствор етс после первого
добавлени растворител , растворимость выражаетс как больша , чем масса, деленна на объем растворител . Значени растворимости выражают в мг/мл. Все эксперименты
осуществл ют при комнатной температуре.
Определение зависимости растворимости полиморфов от pH
Примерно 3 мл водных растворов с различными концентраци ми либо HCl, либо NaOH,
дающими pH 1-13, перенос т в 10 мл стекл нный флакон. Добавл ют достаточное
количество полиморфа. Флаконы обертывают алюминиевой фольгой и встр хивают
вручную. Затем ему дают возможность осесть в выт жном шкафу в течение ночи перед
какой-либо дальнейшей обработкой.
Порошковый рентгеноструктурный анализ (PXRD)
Порошковый рентгеноструктурный анализ осуществл ют, использу Scintag X2 Advanced
Diffraction System, работающую с программным обеспечением Scintag DMS/NT 1.30a и
Microsoft Windows NT 4.0. Система использует медный источник рентгеновского излучени Страница: 11
RU 2 335 502 C2
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
(45 кВ и 40 мА) с получением эмиссии CuKa?1 на 1,5406A и твердофазный охлаждаемый
детектор Пельтье. Апертуру луча контролируют, использу расхождение трубки и
противорассеивательных щелей 2 и 4 мм, и противорассеивательных щелей детектора и
приемных щелей шириной 0,5 и 0,2 мм. Данные собирают при значени х два тэта от 2 до
35, использу шаг сканировани 0,03/шаг, при времени отсчета одна секунда на шаг. Дл экспериментов используют круглые, загружаемые сверху чашки дл образцов из
нержавеющей стали со вставками диаметром 9 мм. Порошки набивают в держатель и
осторожно прижимают стекл нной пластинкой дл обеспечени компланарности между
поверхностью образца и поверхностью держателей.
Дифференциальна сканирующа калориметри (DSC)
Данные дифференциальной сканирующей калориметрии (DSC) получают с
использованием калориметра DSC (TA Instruments 2920). 1-10 мг порошка набивают в
алюминиевую чашку дл DSC. Алюминиевую крышку помещают поверх чашки и
наворачивают на нее. Завернутую чашку помещают в чейку дл образца вместе с пустой
чашкой в качестве эталона. Температуру увеличивают от 30°C до 300°C со скоростью
10°C/мин.
Микроскопи в пол ризованном свете
Микроскопию осуществл ют на микроскопе пол ризованного света Olympus BHSP.
Порошок закрепл ют в силиконовом масле и диспергируют между предметным и
покровным стеклами микроскопа. Перед наблюдением покровное стекло осторожно
притирают по отношению к предметному стеклу дл получени хорошего диспергировани образца порошка. Микроскопию используют дл оценки размеров части, формы и
кристалличности порошковых образцов. Когда на микроскопе закреплен гор чий столик,
тепловые событи , наблюдаемые посредством других методик (например, DSC,
термогравиметрический анализ (TGA)), также могут быть визуализированы.
Инфракрасна Фурье-спектроскопи (FTIR)
Образцы полиморфов приготавливают дл инфракрасного анализа в виде таблеток с
KBr. Данные по инфракрасному пропусканию собирают от 4000 до 400 см -1 на Nicolet 760
FTER, снабженном детектором TGS. Чувствительность, выраженна как усиление
инструмента, равна 4. Данные обрабатывают как преобразование Фурье с использованием
аподизации Хаппа-Генцел . Конечные спектры FTIR представл ют 200 индивидуальных
сканирований.
Рамановска Фурье-спектроскопи Примерно 2 мг полиморфа набивают в 1,7-мм стекл нную капилл рную пробирку и
экспонируют в лазерном свете, 1,00 Вт, 1064 нм. Рамановские спектры получают в
области от 3800 до 100 см -1. Данные собирают с использованием рамановского Фурьеспектрометра Nicolet 960, снабженного детектором INGAS. Чувствительность, выраженна как усиление инструмента, равна 8. Данные оп ть обрабатывают как преобразование
Фурье с использованием аподизации Хаппа-Генцел . Конечные рамановские Фурьеспектры представл ли 200 индивидуальных сканирований.
Определение начальной скорости растворени (IDR) с помощью вращающегос диска
IDR измер ют с использованием оптико-волоконной УФ автоматизированной системы
растворени . Процесс растворени отслеживаетс в некоторых случа х непрерывно, при
426,2 нм, с использованием оптико-волоконного датчика, при этом получают по 10 точек
данных в минуту. Дл получени прессованного диска дл эксперимента порошки прессуют
в матрице из нержавеющей стали (SS) (диаметр 1! дюймаЧ1 дюйм, внутренний диаметр
3/16 дюйма), использу пуансон из инструментальной стали (HSS) (диаметр 3/16 дюйма и
длина 3? дюйма). Пуансон из HSS вставл ют в матрицу на рассто ние примерно 3/4
дюйма, оставл примерно 1/4 дюйма дл размещени примерно 10 мг лекарственного
средства в полости матрицы. Опорна пластина из SS (диаметр 1/4 дюйма) помещаетс дл накрывани полости. Затем весь узел закрепл ют с помощью держател на 2 болтах.
Пресс Carver используют дл прессовани порошка при ~1000 фунтов (~37000
Страница: 12
RU 2 335 502 C2
5
10
15
фунтов/кв.дюйм) в течение 3 минут. Матрицу и держатель удал ют из пресса Carver и
пуансон слегка отт гивают назад, чтобы дать возможность таблетке дл релаксации/расширени . Затем матрицу плотно фиксируют на пуансоне из HSS с помощью
установочного винта. Весь узел из пуансона и матрицы, содержащий таблетку
лекарственного средства, при этом одна лицева сторона таблетки лекарственного
средства открыта, вынимают как целое из держател и присоедин ют к электрическому
приводу. Матрица вращаетс со скоростью 300 об/мин и опускаетс в среду дл растворени через 3 минуты после запуска программы сбора данных. Среда дл растворени дегазируетс и содержитс в 500 мл химическом стакане с кожухом дл протекани воды (Pyrex, No. 1000). Данные, собранные в течение первых 3 минут, дают
фоновое значение дл каждого эксперимента по растворению. Среда дл растворени состоит из раствора с pH 2 (0,01н. HCl и 0,05M KCl). Матрицу располагают таким
образом, чтобы прессованное лекарственное средство находилось примерно в 2,5 дюймах
от дна 500 мл емкости дл растворени и примерно на таком же рассто нии от
поверхности жидкости.
График зависимости начальной скорости растворени стро т с использованием Microsoft
Excel, и начальную скорость растворени вычисл ют автоматически с помощью
программы, в соответствии с уравнением (1)
(1)
20
Объем среды дл растворени равен 300 мл. Площадь поверхности таблетки, открыта 25
30
35
40
45
50
дл среды дл растворени , равна 0,177 см 2. Период времени дл опыта по растворению
обычно составл ет 15 минут, но может измен тьс по необходимости.
Определение физических свойств полиморфов (2-пирролидин-1-илэтил)амида 5-[5фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-(3Z)-илиденметил]-2,4-диметил-1H-пиррол-3-карбоновой
кислоты
Идентифицировали две формы полиморфа (2-пирролидин-1-илэтил)амида 5-[5-фтор-2оксо-1,2-дигидроиндол-(3Z)-илиденметил]-2,4-диметил-1H-пиррол-3-карбоновой кислоты.
Термодинамическое соотношение между двум формами полиморфа соединени , их
поведение при растворении и их свойства в твердом состо нии станов тс непосредственно сны дл выбора твердой формы и соответствующего контрол процесса
во врем производства активного фармацевтического ингредиента (API). По этой причине
делали попытку определить соотношение стабильности между двум формами полиморфа
соединени и охарактеризовать их свойства в твердом состо нии с использованием
разнообразных методик (например, растворимости, IDR, PXRD, ИК/рамановской
спектроскопии, микроскопии пол ризованного света и DSC).
Растворимость
Установленные растворимости (2-пирролидин-1-илэтил)амида 5-[5-фтор-2-оксо-1,2дигидроиндол-(3Z)-илиденметил]-2,4-диметил-1H-пиррол-3-карбоновой кислоты в
различных растворител х представлены в таблице A. Эксперименты осуществл ют с
использованием полиморфа I при комнатной температуре. Растворимости можно
разделить на три группы.
Группа I
Растворимость (2-пирролидин-1-илэтил)амида 5-[5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-(3Z)илиденметил]-2,4-диметил-1H-пиррол-3-карбоновой кислоты в изопропиловом спирте,
CH2Cl2, этилацетате, ацетонитриле, ацетоне, хлороформе, толуоле, гексане и воде, pH >6:
растворимость вл етс очень низкой (<<0,3 мг/мл).
Группа II
Растворимость в метаноле, этаноле, диоксане и ТГФ: растворимость вл етс попрежнему низкой (0,1-0,4 мг/мл), но выгл дит значительно более высокой, чем
растворимости в растворител х группы I.
Группа III
Страница: 13
RU 2 335 502 C2
Растворимости (2-пирролидин-1-илэтил)амида 5-[5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-(3Z)илиденметил]-2,4-диметил-1H-пиррол-3-карбоновой кислоты в диметилсульфоксиде
(ДМСО), диметилформамиде (ДМФ) и воде при pH ?2: растворимость вл етс относительно высокой (>1 мг/мл).
5
Таблица A.
Установленна растворимость полиморфа I (2-пирролидин-1-илэтил)амида 5-[5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-(3Z)-илиденметил]-2,4-диметил1H-пиррол-3-карбоновой кислоты в различных растворител х при 23°C.
Растворитель
1
3,11
Вода (pH 6)
0,005
2
ДМСО
1,5-3,0
3
ДМФ
>1,5
4
Метанол
0,21-0,31
5
Этанол
0,17-0,19
6
Диоксан
0,18-0,20
7
ТГФ
0,32-0,4
8
Изопропанол
<0,14
9
CH2Cl2
<0,12
10
Этилацетат
<<0,28
11
Ацетонитрил
<<0,08
12
Ацетон
<<0,16
13
хлороформ
<0,11
14
толуол
<<0,13
10
15
20
25
30
35
40
45
50
Растворимость (мг/мл)
Вода (pH 2)
15
Гексан
<<<0,13
16
PEG 400
0,30-0,43
pKa (2-пирролидин-1-илэтил)амида 5-[5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-(3Z)илиденметил]-2,4-диметил-1H-пиррол-3-карбоновой кислоты равен 8,50. Как ожидаетс ,
равновесна растворимость этого соединени вл етс более высокой при более низком
pH раствора (таблица A). Однако растворение частиц в среде дл растворени зависит от
pH в диффузионном слое. Значение pH диффузионного сло в тесном контакте с твердым
телом (pHh=0) может быть получено по равновесному pH раствора, измеренному с помощью
pH-метра. Результаты представлены в таблице B. Когда начальное значение pH выше, чем
10, растворимость (2-пирролидин-1-илэтил)амида 5-[5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-(3Z)илиденметил]-2,4-диметил-1H-пиррол-3-карбоновой кислоты вл етс очень низкой. По
этой причине pH раствора в равновесии почти не измен етс . С другой стороны, если
начальный pH<10, в раствор уходит большее количество (2-пирролидин-1-илэтил)амида 5[5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-(3Z)-илиденметил]-2,4-диметил-1H-пиррол-3-карбоновой
кислоты, и pH равновесного раствора выше, чем начальный pH (таблица B). По этой
причине данные указывают на то, что pHh=0 остаетс относительно высоким (>5), даже
когда объем среды дл растворени имеет pH, опускающийс до 1,4.
Таблица B.
Вли ние (2-пирролидин-1-илэтил)амида 5-[5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-(3Z)-илиденметил]-2,4-диметил-1H-пиррол-3-карбоновой кислоты
на значени pH равновесного раствора водной среды, без буфера, при температуре окружающей среды.
Начальный pH
раствора
Количество (2-пирролидин-1-илэтил)амида 5-[5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-(3Z)-илиденметил]2,4-диметил-1H-пиррол-3-карбоновой кислоты, добавленной к 2 мл воды без буфера (мг)
pH равновесного
раствора
1,43
322,5
5,36
2,19
333,2
5,20
3,22
280,7
6,98
5,47
209,7
8,13
6,73
142,0
8,31
7,24
141,5
8,49
7,61
95,4
8,87
10,07
95,1
9,86
11,53
96,2
11,61
12,50
88,0
12,52
13,20
98
13,18
Попытка измерени зависимости растворимости (2-пирролидин-1-илэтил)амида 5-[5фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-(3Z)-илиденметил]-2,4-диметил-1H-пиррол-3-карбоновой
Страница: 14
RU 2 335 502 C2
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
кислоты от pH не была успешной. При растворении исходного лекарственного средства при
pH<2,2 образуютс очень мелкодисперсные частицы. Эти мелкодисперсные частицы
уход т через 0,45 мкм мембрану фильтра и дают мутный фильтрат. Попыток использовать
мембрану фильтра с более мелкими порами (0,1 мкм) не предпринималось, поскольку нет
очевидного непосредственного использовани таких данных.
IDR
Начальную скорость растворени (IDR) полиморфа II сравнивают со скоростью
полиморфа I. Обнаружено, что DDR полиморфа II примерно в три раза превышает видимое
значение IDR полиморфа I в буфере с pH 2, при 23°C (таблица C). Этот результат
противоречит более раннему наблюдению, что полиморф II вл етс менее стабильным и,
согласно ожидани м, должен иметь более низкую растворимость и по этой причине более
низкую IDR, при той же температуре и в том же растворителе. Хот и не жела св зыватьс с теорией, одним из объ снений этого противоречи вл етс то, что
лекарственное средство подвергаетс твердофазному преобразованию в услови х
эксперимента. Как следствие, IDR не может быть сравнено с термодинамическим
соотношением исходных двух полиморфов. Микроскопическое наблюдение таблетки
лекарственного средства из полиморфа I демонстрирует положительное доказательство
дл гипотезы о твердофазном преобразовании. Цвет таблетки на стороне, открытой дл среды дл растворени , вл етс оранжево-красным по сравнению с желтым цветом
исходной таблетки. Возможно, что полиморф I преобразуетс в соль HCl сразу после
того, как таблетка вступает в контакт со средой дл растворени (буфер 0,05M KCl, pH
2). Благодар воздействию общего иона растворимость и по этой причине IDR
свежеприготовленной соли HCl вл ютс гораздо более низкой, чем можно было ожидать
дл полиморфа II. После экспонировани таблетки полиморфа II в той же среде дл растворени видимого изменени цвета не наблюдаетс .
Дл дополнительного исследовани гипотезы образовани соли HCl как полиморф I, так
и II, суспендируют в указанной выше среде дл растворени . Однако никаких изменений
цвета частиц не наблюдают, по меньшей мере, в течение 15 минут после приготовлени суспензии. Этот результат согласуетс с наблюдаемой стабильностью полиморфа II в
твердом состо нии в ходе эксперимента по растворению, но не подтверждает быстрого
преобразовани таблетки полиморфа I в соль HCl. Через день после приготовлени суспензии оранжево-красные иглообразные кристаллы, предположительно кристаллы соли
HCl, по вл ютс в обоих флаконах. Этот результат подтверждает, что растворимость соли
HCl ниже, чем растворимости как полиморфа I, так и II в среде, используемой дл исследований по растворению. Возможно также, что прессование перед экспериментом с
IDR модифицирует кристаллы полиморфа I и делает их способными к быстрому
преобразованию. Картины XRD таблеток полиморфа I, спрессованных при различных
давлени х, демонстрируют некоторую степень содержание аморфной формы, котора может быть св зана с быстрым образованием соли во врем эксперимента по IDR.
Порошковый рентгеноструктурный анализ (PXRD)
Наблюдаютс четко различаемые картины дифракции рентгеновского излучени на
порошках (PXRD) двух загрузок (2-пирролидин-1-илэтил)амида 5-[5-фтор-2-оксо-1,2дигидроиндол-(3Z)-илиденметил]-2,4-диметил-1H-пиррол-3-карбоновой кислоты (Фиг.1).
Такое наблюдение говорит о существовании полиморфизма этого лекарственного
средства. По этой причине FTIR и Рамановска спектроскопи используютс дл подтверждени полиморфизма (2-пирролидин-1-илэтил)амида 5-[5-фтор-2-оксо-1,2дигидроиндол-(3Z)-илиденметил]-2,4-диметил-1H-пиррол-3-карбоновой кислоты.
ИК и рамановска спектроскопи ИК и рамановские спектры представлены на фиг.2 и 3 соответственно. Спектральные
различи четко наблюдаютс дл двух форм (2-пирролидин-1-илэтил)амида 5-[5-фтор-2оксо-1,2-дигидроиндол-(3Z)-илиденметил]-2,4-диметил-1H-пиррол-3-карбоновой кислоты.
Как правило, эти отличи включают изменени в колебательных модах, св занных с
функциональными группами молекул N-H и C=O. Имеютс также некоторые изменени ,
Страница: 15
RU 2 335 502 C2
5
10
15
20
25
30
35
40
45
наблюдаемые в валентных модах C-H двух форм. Данные ЯМР в растворе (в ДМСО)
полиморфов I и II (2-пирролидин-1-илэтил)амида 5-[5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-(3Z)илиденметил]-2,4-диметил-1H-пиррол-3-карбоновой кислоты вл ютс идентичными,
подтвержда то, что обе формы полиморфа (2-пирролидин-1-илэтил)амида 5-[5-фтор-2оксо-l,2-дигидроиндол-(3Z)-илиденметил]-2,4-диметил-1H-пиррол-3-карбоновой кислоты
вл ютс химически эквивалентными. По этой причине любые различи в колебательных
спектрах между двум образцами, веро тно, св заны с кристаллической упаковкой двух
форм полиморфа (2-пирролидин-1-илэтил)амида 5-[5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-(3Z)илиденметил]-2,4-диметил-1H-пиррол-3-карбоновой кислоты.
Изучение данных ИК дл полиморфа II показывает по вление широкой колебательной
полосы при 3198 см -1, котора не присутствует в спектрах полиморфа I. Широкие
колебательные полосы на этой частоте могут быть св заны с валентными колебани ми OH. В данных ИК дл полиморфа II также отсутствуют валентные колебани C=O
карбонильной св зи амида, которые обнаруживаютс в спектрах полиморфа I на 1631
см -1. Наоборот, ИК данные дл полиморфа II демонстрируют сильный пик при 1589 см -1,
который не присутствует в данных дл полиморфа I. Колебание на этой частоте
представл ет собой типичное валентное колебание C=N. Присутствие мод валентных
колебаний C=N и O-H в сочетании с отсутствием колебаний C=O в данных ИК дл полиморфа II по сравнению с аналогичными данными дл полиморфа I говорит о кетоэнольных таутомерных различи х между двум формами. Положение этого изменени среди трех карбонильных групп амидов неизвестно. Однако расщепление колебани CH2
в данных ИК дл полиморфа I при 2798 см -1 на две колебательные полосы при 2798 и 2776
см -1 в данных дл полиморфа II говорит о том, что может иметь место энолизаци в
амидном остатке р дом с метиленовой группой, возможно, облегчаема вращением вокруг
амидной св зи C-N. Спектры FTIR обоих полиморфов показаны на фиг.2. Рамановские
спектры (Фиг.3) также демонстрируют сходные различи между порошками двух
полиморфов.
Микроскопи в пол ризованном свете
Оба полиморфа демонстрируют двойное лучепреломление под микроскопом в
пол ризованном свете. Следовательно, оба полиморфа вл ютс кристаллическими, что
согласуетс с сильными пиками дифракции в диаграммах PXRD. Частицы полиморфа I
меньше, чем частицы полиморфа II.
Термодинамическа стабильность
Дифференциальна сканирующа калориметри (DSC)
Сканировани DSC обоих полиморфов демонстрируют различные температуры
плавлени и различные энтальпии плавлени (таблица C). Температура плавлени полиморфа II примерно на 3°C выше, чем у полиморфа I. Следовательно, вблизи
температуры плавлени полиморф II вл етс термодинамически более стабильным
полиморфом. Полиморф II с более высокой температурой плавлени имеет также более
высокую энтальпию плавлени . По этой причине правило "теплоты плавлени "
предсказывает, что две твердых формы вл ютс монотропно св занными. Температуры
плавлени , наблюдаемые с помощью микроскопии с гор чим столиком, демонстрирует
подобную же разницу (примерно 3°C). Как по DSC, так и с помощью микроскопии с
гор чим столиком, не наблюдаетс тепловых событий при температуре ниже температуры
плавлени каждого полиморфа.
Таблица C.
Температуры плавлени (Tm), энтальпи плавлени (Hf) и начальные скорости растворени (IDR) двух полиморфов.
50
Физические свойства
Полиморф I
Полиморф II
Tm(°C) a
256,3
259,4
Hf(Дж/г) a
55,78
85,44
IDR (n=3) b
(мг/мин/см 2)
1,08±0,09 c
3,54±0,15
Страница: 16
RU 2 335 502 C2
a Температура плавлени и энтальпи сли ни измер етс с помощью DSC. Температура плавлени беретс как температура начала
плавлени .
b Буфер pH 2 (0,01н. HCl и 0,05M KCl) при 23°C.
c Полиморф I подвергаетс фазовому преобразованию, опосредованному раствором. Измеренное значение IDR не представл ет истинную
IDR полиморфа I.
5
10
PXRD
Дл определени соотношени относительной термодинамической стабильности между
двум полиморфами также изучают эксперимент по преобразованию в суспензии при
комнатной температуре, с использованием PXRD. Результаты представлены в таблице D.
Специалист в данной области заметит, что термодинамическа стабильность
рассматриваемого полиморфа будет зависеть от р да факторов, включа , но, не
ограничива сь этим, размер образца, скорость перемешивани (если образец
перемешивают), используетс ли затравочный кристалл, относительное отношение между
присутствующими полиморфами, используемый растворитель и температура.
Таблица D.
Услови кристаллизации суспензии и полиморфна природа получаемых твердых продуктов, идентификаци с помощью PXRD.
15
Растворитель
20
Исходное твердое вещество a
Получаемый твердое вещество согласно PXRD
Метанол
I+затравки II
II
Этанол
I+затравки II
ND b
Ацетонитрил
I+затравки II
ND b
Ацетон
I+затравки II
II
ТГФ
I+затравки II
ДМСО+H2O (1:1, объем:объем)
Метанол
I+затравки II
ND b
I+II (2:1, мас./мас.)
II
a Используемый полиморф I представл ет собой лот 2008. Используемый полиморф II представл ет собой 35282-CS-11.
b Больша часть твердого вещества уходит сквозь фильтровальную бумагу. Собрано достаточное количество материала дл анализа с
25
30
35
40
45
50
помощью PXRD.
Полиморф I, 20 мг, суспендируют в различных растворител х, сам по себе, с
микроколичеством затравочных кристаллов полиморфа II, в 10 мл стекл нных флаконах.
Суспензии перемешивают с помощью магнитных брусковых мешалок в течение 2 недель,
затем твердые вещества отфильтровывают и анализируют с помощью PXRD. Результаты
показывают, что метанольна и ацетонова суспензии дают чистый полиморф II, то есть
полиморф I преобразуетс в полиморф II посредством этих двух растворителей.
Следовательно, данные указывают на то, что полиморф II вл етс термодинамически
более стабильным, чем полиморф I, при комнатной температуре. Поскольку полиморф II
вл етс также более стабильным вблизи от температуры плавлени , эти два полиморфа
св заны монотропно, то есть полиморф II вл етс более стабильным, от комнатной
температуры до температуры плавлени . Однако полиморф I выгл дит стабильным в
тетрагидрофурановой (ТГФ) суспензии. Поскольку растворимость в ТГФ выше, чем в
ацетоне (таблица A), низка растворимость не вл етс причиной медленной кинетики
преобразовани .
Хот и не жела св зыватьс с теорией, возможно, что молекулы ТГФ взаимодействуют
только с молекулами (2-пирролидин-1-илэтил)амида 5-[5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол(3Z)-илиденметил]-2,4-диметил-1H-пиррол-3-карбоновой кислоты в растворе и ингибируют
зародышеобразование и рост кристаллов полиморфа II и, как следствие, делают полиморф
I кинетически стабильным в ТГФ.
Далее описано получение полиморфов I и II.
Получение полиморфа I; Способ 1
24,8 мг (2-пирролидин-1-илэтил)амида 5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3илиденметил)-2,4-диметил-1H-пиррол-3-карбоновой кислоты полностью раствор ют в
соответствующем количестве (по меньшей мере, 6 мл) буфера (0,01н. HCl и 0,04M KCl),
pH 2, при нагревании на гор чем столике. Раствор охлаждают в выт жном шкафу в течение
5 минут. Раствор 1н. NaOH добавл ют дл индуцировани преципитации из раствора.
Твердое вещество не содержит полиморфа II и состоит в основном из полиморфа I с
некоторыми аморфными характеристиками.
Страница: 17
RU 2 335 502 C2
5
10
15
20
25
Получение полиморфа I: Способ 2
41,3 мг (2-пирролидин-1-илэтил)амида 5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3илиденметил)-2,4-диметил-1H-пиррол-3-карбоновой кислоты смешивают с 25 мл
тетрагидрофурана (ТГФ) и 5 мл воды. Смесь слегка нагревают дл растворени твердого
вещества. Полученный прозрачный раствор собирают в открытый стекл нный флакон,
чтобы дать возможность дл испарени растворител . Когда испар етс соответствующее
количество растворител , происходит осаждение. Как показывает наблюдение под
микроскопом, осадок состоит из игольчатых кристаллов. Осадок отфильтровывают и
осторожно измельчают перед анализом посредством XRD. Измельчение уменьшает
размер частиц полученного твердого вещества и уменьшает вли ние предпочтительной
ориентации кристаллов на картины PXRD. Результаты PXRD показывают, что твердое
вещество представл ет собой чистый полиморф I.
Получение полиморфа II
Примерно 6 мг (2-пирролидин-1-илэтил)амида 5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3илиденметил)-2,4-диметил-1H-пиррол-3-карбоновой кислоты раствор ет, по меньшей мере,
в 20 мл метанола с получением прозрачного раствора. Небольшой нагрев может
понадобитьс дл облегчени растворени твердого вещества. Этот метанольный раствор
охлаждают и медленно выпаривают досуха в окружающей среде. Затем дл растворени части твердого вещества добавл ют небольшое количество метанола (-2 мл). Оставшиес кристаллы представл ют собой полиморф II.
Из приведенного выше описани специалист в данной области легко получит основные
характеристики насто щего изобретени и сможет без отклонени от его сущности и
объема произвести различные изменени и модификации насто щего изобретени , чтобы
адаптировать его к различным применени м и услови м без излишнего
экспериментировани .
Формула изобретени 1. Полиморфна форма соединени формулы I
30
35
40
45
в виде полиморфной формы II, по существу, свободна от полиморфа формы I,
характеризуема порошковой рентгенограммой PXRD с характеристическими пиками,
выраженными в градусах (±0,1) двойного угла 7.1,13.9,16.0,20.9 и 24.7, полученными с
использованием CuK?1 излучени (длина волны = 1.5406 Е).
2. Полиморфна форма соединени формулы I
50
Страница: 18
CL
RU 2 335 502 C2
5
10
15
20
в виде полиморфа формы I, по существу, свободна от полиморфа формы II,
характеризуема порошковой рентгенограммой PXRD с характеристическими пиками,
выраженными в градусах (±0,1) двойного угла 5.0,16.7,18.9,24.8 и 27.3 полученными с
использованием CuK?1 излучени (длина волны = 1.5406 Е).
3. Композици , обладающа способностью модулировать каталитическую активность
протеинкиназы, содержаща полиморф I соединени формулы I
25
30
35
40
где полиморф I составл ет примерно более 85% от массы композиции.
4. Композици по п.3, где полиморф I составл ет примерно более 90% от массы
композиции.
5. Композици по п.3, где полиморф I составл ет примерно более 95% от массы
композиции.
6. Композици по п.3, где полиморф I составл ет примерно более 99% от массы
композиции.
7. Композици , обладающа способностью модулировать каталитическую активность
протеинкиназы, содержаща полиморф II соединени формулы I
45
50
Страница: 19
RU 2 335 502 C2
5
10
15
20
где полиморф II составл ет примерно более чем 85% от массы композиции.
8. Композици по п.7, где полиморф II составл ет примерно более чем 90% от массы
композиции.
9. Композици по п.7, где полиморф II составл ет примерно более чем 95% от массы
композиции.
10. Композици по п.7, где полиморф II составл ет примерно более чем 99% от массы
композиции.
11. Полиморф соединени формулы I
25
30
35
40
где указанный полиморф получают способом, включающим
(a) растворение (2-пирролидин-1-ил-этил)-амида 5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3илиденметил)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-карбоновой кислоты в кислом водном растворе;
(b) подщелачивание указанного водного раствора, тем самым вызыва осаждение
полиморфной формы, по существу, свободной от полиморфа формы II; и
(c) выделение осажденного полиморфа формы I из указанного соединени .
12. Полиморф соединени формулы I
45
50
Страница: 20
RU 2 335 502 C2
5
10
15
20
где указанный полиморф получают способом, включающим
(a) растворение (2-пирролидин-1-ил-этил)-амида 5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3илиденметил)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-карбоновой кислоты в пол рном органическом
растворителе, который не образует водородных св зей;
(b) выпаривание указанного пол рного органического растворител , тем самым вызыва осаждение указанной полиморфной формы I, по существу свободной от полиморфа формы
II; и
(c) выделение осажденного полиморфа формы I указанного соединени .
13. Полиморф по п.12, где указанным пол рным органическим растворителем, который
не образует водородных св зей, вл етс ТГФ.
14. Полиморф соединени формулы I
25
30
35
40
45
50
где указанный полиморф получен способом, включающим
(a) растворение (2-пирролидин-1-ил-этил)-амида 5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3илиденметил)-2,4-диметил-1Н-пиррол-3-карбоновой кислоты в пол рном органическом
растворителе, который образует водородные св зи;
(b) выпаривание указанного пол рного органического растворител , тем самым вызыва осаждение указанной полиморфной формы II, по существу свободной от полиморфа
формы I;и
(c) выделение осажденного полиморфа формы II указанного соединени .
15. Полиморф по п.14, где указанным пол рным органическим растворителем, который
образует водородные св зи, вл етс метанол.
16. Фармацевтическа композици , обладающа способностью модулировать
каталитическую активность протеинкиназы, содержаща соединение по п.1 или 2 и
фармацевтически приемлемый носитель или эксципиент.
17. Способ модул ции каталитической активности протеинкиназы, включающий
контактирование указанной протеинкиназы с полиморфной формой по п.1 или 2.
18. Способ по п.17, в котором указанную протеинкиназу выбирают из группы, состо щей
Страница: 21
RU 2 335 502 C2
5
10
15
20
25
30
из рецепторной тирозинкиназы, нерецепторной тирозинкиназы и серинтреонинкиназы.
19. Способ лечени или профилактики расстройств, св занных с протеинкиназой, в
организме, включающий введение терапевтически эффективного количества
фармацевтической композиции по п.16 в указанный организм.
20. Способ по п.19, в котором указанное расстройство, св занное с протеинкиназой,
выбирают из группы, состо щей из расстройства, св занного с рецепторной
тирозинкиназой, расстройства, св занного с нерецепторной тирозинкиназой, и
расстройства, св занного с серинтреонинкиназой.
21. Способ по п.19, в котором указанное расстройство, св занное с протеинкиназой,
выбирают из группы, состо щей из расстройства, св занного с EGFR, расстройства,
св занного с PDGFR, расстройства, св занного с IGFR, расстройства, св занного с c-kit
и расстройства, св занного с flk.
22. Способ по п.19, в котором указанное расстройство, св занное с протеинкиназой
представл ет собой раковое заболевание, выбранное из группы, состо щей из лейкемии,
рака мозга, немелкоклеточного рака легких, плоскоклеточного рака, астроцитомы,
саркомы Капоши, глиобластомы, рака легких, рака мочевого пузыр , рака головы, рака
шеи, меланомы, рака ичников, рака простаты, рака груди, мелкоклеточного рака легких,
глиомы, мастоцитомы, опухоли тучной клетки, рака тонкой и пр мой кишки, рака
мочеполовой системы и стромального рака желудочно-кишечной системы.
23. Способ по п.19, в котором указанное расстройство, св занное с протеинкиназой,
выбирают из группы, состо щей из диабета, аутоиммунного расстройства, расстройства
гиперпролиферации, рестеноза, фиброза, псориаза, болезни Гиппел -Линдау,
остеоартрита, ревматоидного артрита, ангиогенеза, воспалительного расстройства,
иммунологического расстройства и сердечно-сосудистого расстройства.
24. Способ по п.19, в котором указанным организмом вл етс человека.
25. Способ лечени рака у домашних животных, включающий введение
фармацевтической композиции, содержащей соединение по п.1 или 2 и фармацевтически
приемлемый носитель или эксципиент.
26. Способ по п.25, в котором указанными домашними животными вл ютс кошка или
собака.
35
40
45
50
Страница: 22
RU 2 335 502 C2
Страница: 23
DR
RU 2 335 502 C2
Страница: 24
RU 2 335 502 C2
Страница: 25
?й приведение в
контакт указанной протеинкиназы с полиморфом предпочтительных вариантов
осуществлени насто щего изобретени , в предпочтительном варианте осуществлени насто щего изобретени протеинкиназу выбирают из группы, состо щей из рецепторной
тирозинкиназы, не-рецепторной тирозинкиназы и серин-треонинкиназы.
Предпочтительные варианты осуществлени насто щего изобретени включают способ
лечени или профилактики расстройства, св занного с протеинкиназой, в организме
(например, человека), включающий введение терапевтически эффективного количества
фармацевтической композиции, содержащей полиморф предпочтительных вариантов
осуществлени насто щего изобретени и фармацевтически приемлемый носитель или
Страница: 9
RU 2 335 502 C2
5
10
15
20
25
30
эксципиент, в организм. В предпочтительном варианте осуществлени насто щего
изобретени расстройство, св занное с протеинкиназой, выбирают из группы, состо щей
из расстройства, св занного с тирозинкиназой рецептора, расстройства, св занного с нерецепторной тирозинкиназой, и расстройства, св занного с серин-треонинкиназой. В
другом предпочтительном варианте осуществлени насто щего изобретени расстройство,
св занное с протеинкиназой, выбирают из группы, состо щей из расстройства, св занного
с EGFR, расстройства, св занного с PDGFR, расстройства, св занного с IGFR, и
расстройства, св занного с flk. Еще в одном предпочтительном варианте осуществлени насто щего изобретени расстройство, св занное с протеинкиназой, представл ет собой
раковое заболевание, выбранное из группы, состо щей из плоскоклеточного рака,
астроцитомы, саркомы Капоши, глиобластомы, рака легких, рака мочевого пузыр , рака
головы и шеи, меланомы, рака ичников, рака простаты, рака груди, мелкоклеточного
рака легких, глиомы, рака тонкой и пр мой кишки, рака мочеполовой системы и рака
желудочно-кишечной системы. В предпочтительном варианте осуществлени насто щего
изобретени расстройство, св занное с протеинкиназой, выбирают из группы, состо щей
из диабета, аутоиммунного расстройства, расстройства гиперпролиферации, рестеноза,
фиброза, псориаза, болезни Гиппел -Линдау, остеоартрита, ревматоидного артрита,
ангиогенеза, воспалительных расстройств, иммунологических расстройств и сердечнососудистых расстройств.
Предпочтительные варианты осуществлени насто щего изобретени также включают
способ лечени рака у домашних животных, включающий введение фармацевтической
композиции, содержащей полиморф предпочтительных вариантов осуществлени насто щего изобретени и фармацевтически приемлемый носитель или эксципиент. Как он
здесь используетс в данном описании, термин "домашнее животное" включает, но, не
ограничива сь этим, кошек и собак.
Следующие примеры привод тс дл того, чтобы дать возможность специалисту в
данной области более сно пон ть и осуществить насто щее изобретение. Примеры не
должны рассматриватьс в качестве ограничивающих объем насто щего изобретени , а
только в качестве иллюстративных и презентативных.
Синтез (2-пирролидин-1-илэтил)амида 5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-3илиденметил)-2,4-диметил-1H-пиррол-3-карбоновой кислоты
35
40
45
50
5-Фтор-1,3-дигидроиндол-2-он конденсируют с (2-пирролидин-1-илэтил)амидом 5формил-2,4-диметил-1H-пиррол-3-карбоновой кислоты с получением указанного в заглавии
соединени .
MS+ ve APCI 397[M ++1].
Методика масштабировани :
5-Формил-2,4-диметил-1H-пиррол-3-карбоновую кислоту (61 г), 5-фтор-l,3-дигидроиндол2-он (79 г), этанол (300 мл) и пирролидин (32 мл) кип т т с обратным холодильников в
течение 4,5 час. К смеси добавл ют уксусную кислоту (24 мл) и продолжают кип чение с
обратным холодильником в течение 30 минут. Смесь охлаждают до комнатной
температуры и твердые вещества собирают вакуумным фильтрованием и дважды
Страница: 10
RU 2 335 502 C2
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
промывают этанолом. Твердые вещества перемешивают в течение 130 минут в 40%
растворе ацетона в воде (400 мл), содержащем 12 н. хлористоводородной кислоты (6,5
мл). Твердые вещества собирают вакуумным фильтрованием и дважды промывают 40%
раствором ацетона в воде. Твердые вещества сушат в вакууме с получением 5-[5-фтор-2оксо-1,2-дигидроиндол-(3Z)-илиденметил]-2,4-диметил-1H-пиррол-3-карбоновой кислоты
(86 г, 79% выход) в виде оранжевого твердого вещества.
1
H-ЯМР (диметилсульфоксид-d6) ? 1,60 (м, 4H, 2ЧCH2), 2,40, 2,44 (2Чс, 6H, 2ЧCH3), 2,50
(м, 4H, 2ЧCH2), 2,57, 3,35 (2Чм, 4H, 2ЧCH2), 7,53, 7,70, 7,73, 7,76 (4Чм, 4H, ароматика и
винил), 10,88 (с, 1H, CONH), 13,67 (с, 1H, пиррол NH).
МС m/z 299 [M-1].
5-[5-Фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-(3Z)-илиденметил]-2,4-диметил-1H-пиррол-3карбоновую кислоту (100 г) и диметилформамид (500 мл) перемешивают и добавл ют
гексафторфосфат бензотриазол-1-илокситрис(диметиламино)фосфони (221 г), 1-(2аминоэтил)пирролидин (45,6 г) и триэтиламин (93 мл). Смесь перемешивают в течение 2
часов при температуре окружающей среды. Твердое вещество собирают вакуумным
фильтрованием и промывают этанолом. Твердые вещества промывают в суспензии
перемешиванием в этаноле (500 мл) в течение одного часа при 64°C и охлаждают до
комнатной температуры. Твердые вещества собирают вакуумным фильтрованием,
промывают этанолом и сушат в вакууме с получением (2-пирролидин-1-илэтил)амида 5-[5фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-(3Z)-илиденметил]-2,4-диметил-1H-пиррол-3-карбоновой
кислоты (101,5 г, выход 77 %).
1
H-ЯМР (диметилсульфоксид-d6) ? 2,48, 2,50 (2Чс, 6H, 2ЧCH3), 6,80, 6,88, 7,68, 7,72
(4Чм, 4H, ароматика и винил), 10,88 (с, 1H, CONH), 12,12 (с, 1H, COOH), 13,82 (с, 1H,
пиррол NH).
МС m/z 396 [M+1].
ОБЩИЕ АНАЛИТИЧЕСКИЕ СПОСОБЫ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ИДЕНТИЧНОСТИ И
ФИЗИЧЕСКИХ СВОЙСТВ ПОЛИМОРФОВ
Оценка растворимости полиморфа в различных растворител х
Приблизительно 1,5 мг полиморфа перенос т в 10 мл стекл нные флаконы
(тарированные) и взвешивают (с точностью до 0,1 мг). Во флаконы порци ми добавл ют
растворители (по одному растворителю в каждый флакон). После каждого добавлени флакон закрывают крышкой и встр хивают. Растворение твердого вещества наблюдают
визуально. Если очевидного растворени не наблюдаетс , сразу после этого добавл ют
еще растворитель. Если растворение вл етс очевидным, флакон оставл ют на столе, по
меньшей мере, на 30 минут до следующего добавлени растворител . Эту стадию
повтор ют до тех пор, пока кристаллы не будут видны на черном и белом фонах. Затем
оценивают пределы растворимости посредством делени массы на конечный объем и
объем перед последним добавлением. Если твердое вещество остаетс после добавлени 10 мл растворител , растворимость выражаетс как меньша , чем масса, деленна на
конечный объем. Если твердое вещество полностью раствор етс после первого
добавлени растворител , растворимость выражаетс как больша , чем масса, деленна на объем растворител . Значени растворимости выражают в мг/мл. Все эксперименты
осуществл ют при комнатной температуре.
Определение зависимости растворимости полиморфов от pH
Примерно 3 мл водных растворов с различными концентраци ми либо HCl, либо NaOH,
дающими pH 1-13, перенос т в 10 мл стекл нный флакон. Добавл ют достаточное
количество полиморфа. Флаконы обертывают алюминиевой фольгой и встр хивают
вручную. Затем ему дают возможность осесть в выт жном шкафу в течение ночи перед
какой-либо дальнейшей обработкой.
Порошковый рентгеноструктурный анализ (PXRD)
Порошковый рентгеноструктурный анализ осуществл ют, использу Scintag X2 Advanced
Diffraction System, работающую с программным обеспечением Scintag DMS/NT 1.30a и
Microsoft Windows NT 4.0. Система использует медный источник рентгеновского излучени Страница: 11
RU 2 335 502 C2
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
(45 кВ и 40 мА) с получением эмиссии CuKa?1 на 1,5406A и твердофазный охлаждаемый
детектор Пельтье. Апертуру луча контролируют, использу расхождение трубки и
противорассеивательных щелей 2 и 4 мм, и противорассеивательных щелей детектора и
приемных щелей шириной 0,5 и 0,2 мм. Данные собирают при значени х два тэта от 2 до
35, использу шаг сканировани 0,03/шаг, при времени отсчета одна секунда на шаг. Дл экспериментов используют круглые, загружаемые сверху чашки дл образцов из
нержавеющей стали со вставками диаметром 9 мм. Порошки набивают в держатель и
осторожно прижимают стекл нной пластинкой дл обеспечени компланарности между
поверхностью образца и поверхностью держателей.
Дифференциальна сканирующа калориметри (DSC)
Данные дифференциальной сканирующей калориметрии (DSC) получают с
использованием калориметра DSC (TA Instruments 2920). 1-10 мг порошка набивают в
алюминиевую чашку дл DSC. Алюминиевую крышку помещают поверх чашки и
наворачивают на нее. Завернутую чашку помещают в чейку дл образца вместе с пустой
чашкой в качестве эталона. Температуру увеличивают от 30°C до 300°C со скоростью
10°C/мин.
Микроскопи в пол ризованном свете
Микроскопию осуществл ют на микроскопе пол ризованного света Olympus BHSP.
Порошок закрепл ют в силиконовом масле и диспергируют между предметным и
покровным стеклами микроскопа. Перед наблюдением покровное стекло осторожно
притирают по отношению к предметному стеклу дл получени хорошего диспергировани образца порошка. Микроскопию используют дл оценки размеров части, формы и
кристалличности порошковых образцов. Когда на микроскопе закреплен гор чий столик,
тепловые событи , наблюдаемые посредством других методик (например, DSC,
термогравиметрический анализ (TGA)), также могут быть визуализированы.
Инфракрасна Фурье-спектроскопи (FTIR)
Образцы полиморфов приготавливают дл инфракрасного анализа в виде таблеток с
KBr. Данные по инфракрасному пропусканию собирают от 4000 до 400 см -1 на Nicolet 760
FTER, снабженном детектором TGS. Чувствительность, выраженна как усиление
инструмента, равна 4. Данные обрабатывают как преобразование Фурье с использованием
аподизации Хаппа-Генцел . Конечные спектры FTIR представл ют 200 индивидуальных
сканирований.
Рамановска Фурье-спектроскопи Примерно 2 мг полиморфа набивают в 1,7-мм стекл нную капилл рную пробирку и
экспонируют в лазерном свете, 1,00 Вт, 1064 нм. Рамановские спектры получают в
области от 3800 до 100 см -1. Данные собирают с использованием рамановского Фурьеспектрометра Nicolet 960, снабженного детектором INGAS. Чувствительность, выраженна как усиление инструмента, равна 8. Данные оп ть обрабатывают как преобразование
Фурье с использованием аподизации Хаппа-Генцел . Конечные рамановские Фурьеспектры представл ли 200 индивидуальных сканирований.
Определение начальной скорости растворени (IDR) с помощью вращающегос диска
IDR измер ют с использованием оптико-волоконной УФ автоматизированной системы
растворени . Процесс растворени отслеживаетс в некоторых случа х непрерывно, при
426,2 нм, с использованием оптико-волоконного датчика, при этом получают по 10 точек
данных в минуту. Дл получени прессованного диска дл эксперимента порошки прессуют
в матрице из нержавеющей стали (SS) (диаметр 1! дюймаЧ1 дюйм, внутренний диаметр
3/16 дюйма), использу пуансон из инструментальной стали (HSS) (диаметр 3/16 дюйма и
длина 3? дюйма). Пуансон из HSS вставл ют в матрицу на рассто ние примерно 3/4
дюйма, оставл примерно 1/4 дюйма дл размещени примерно 10 мг лекарственного
средства в полости матрицы. Опорна пластина из SS (диаметр 1/4 дюйма) помещаетс дл накрывани полости. Затем весь узел закрепл ют с помощью держател на 2 болтах.
Пресс Carver используют дл прессовани порошка при ~1000 фунтов (~37000
Страница: 12
RU 2 335 502 C2
5
10
15
фунтов/кв.дюйм) в течение 3 минут. Матрицу и держатель удал ют из пресса Carver и
пуансон слегка отт гивают назад, чтобы дать возможность таблетке дл релаксации/расширени . Затем матрицу плотно фиксируют на пуансоне из HSS с помощью
установочного винта. Весь узел из пуансона и матрицы, содержащий таблетку
лекарственного средства, при этом одна лицева сторона таблетки лекарственного
средства открыта, вынимают как целое из держател и присоедин ют к электрическому
приводу. Матрица вращаетс со скоростью 300 об/мин и опускаетс в среду дл растворени через 3 минуты после запуска программы сбора данных. Среда дл растворени дегазируетс и содержитс в 500 мл химическом стакане с кожухом дл протекани воды (Pyrex, No. 1000). Данные, собранные в течение первых 3 минут, дают
фоновое значение дл каждого эксперимента по растворению. Среда дл растворени состоит из раствора с pH 2 (0,01н. HCl и 0,05M KCl). Матрицу располагают таким
образом, чтобы прессованное лекарственное средство находилось примерно в 2,5 дюймах
от дна 500 мл емкости дл растворени и примерно на таком же рассто нии от
поверхности жидкости.
График зависимости начальной скорости растворени стро т с использованием Microsoft
Excel, и начальную скорость растворени вычисл ют автоматически с помощью
программы, в соответствии с уравнением (1)
(1)
20
Объем среды дл растворени равен 300 мл. Площадь поверхности таблетки, открыта 25
30
35
40
45
50
дл среды дл растворени , равна 0,177 см 2. Период времени дл опыта по растворению
обычно составл ет 15 минут, но может измен тьс по необходимости.
Определение физических свойств полиморфов (2-пирролидин-1-илэтил)амида 5-[5фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-(3Z)-илиденметил]-2,4-диметил-1H-пиррол-3-карбоновой
кислоты
Идентифицировали две формы полиморфа (2-пирролидин-1-илэтил)амида 5-[5-фтор-2оксо-1,2-дигидроиндол-(3Z)-илиденметил]-2,4-диметил-1H-пиррол-3-карбоновой кислоты.
Термодинамическое соотношение между двум формами полиморфа соединени , их
поведение при растворении и их свойства в твердом состо нии станов тс непосредственно сны дл выбора твердой формы и соответствующего контрол процесса
во врем производства активного фармацевтического ингредиента (API). По этой причине
делали попытку определить соотношение стабильности между двум формами полиморфа
соединени и охарактеризовать их свойства в твердом состо нии с использованием
разнообразных методик (например, растворимости, IDR, PXRD, ИК/рамановской
спектроскопии, микроскопии пол ризованного света и DSC).
Растворимость
Установленные растворимости (2-пирролидин-1-илэтил)амида 5-[5-фтор-2-оксо-1,2дигидроиндол-(3Z)-илиденметил]-2,4-диметил-1H-пиррол-3-карбоновой кислоты в
различных растворител х представлены в таблице A. Эксперименты осуществл ют с
использованием полиморфа I при комнатной температуре. Растворимости можно
разделить на три группы.
Группа I
Растворимость (2-пирролидин-1-илэтил)амида 5-[5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-(3Z)илиденметил]-2,4-диметил-1H-пиррол-3-карбоновой кислоты в изопропиловом спирте,
CH2Cl2, этилацетате, ацетонитриле, ацетоне, хлороформе, толуоле, гексане и воде, pH >6:
растворимость вл етс очень низкой (<<0,3 мг/мл).
Группа II
Растворимость в метаноле, этаноле, диоксане и ТГФ: растворимость вл етс попрежнему низкой (0,1-0,4 мг/мл), но выгл дит значительно более высокой, чем
растворимости в растворител х группы I.
Группа III
Страница: 13
RU 2 335 502 C2
Растворимости (2-пирролидин-1-илэтил)амида 5-[5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-(3Z)илиденметил]-2,4-диметил-1H-пиррол-3-карбоновой кислоты в диметилсульфоксиде
(ДМСО), диметилформамиде (ДМФ) и воде при pH ?2: растворимость вл етс относительно высокой (>1 мг/мл).
5
Таблица A.
Установленна растворимость полиморфа I (2-пирролидин-1-илэтил)амида 5-[5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-(3Z)-илиденметил]-2,4-диметил1H-пиррол-3-карбоновой кислоты в различных растворител х при 23°C.
Растворитель
1
3,11
Вода (pH 6)
0,005
2
ДМСО
1,5-3,0
3
ДМФ
>1,5
4
Метанол
0,21-0,31
5
Этанол
0,17-0,19
6
Диоксан
0,18-0,20
7
ТГФ
0,32-0,4
8
Изопропанол
<0,14
9
CH2Cl2
<0,12
10
Этилацетат
<<0,28
11
Ацетонитрил
<<0,08
12
Ацетон
<<0,16
13
хлороформ
<0,11
14
толуол
<<0,13
10
15
20
25
30
35
40
45
50
Растворимость (мг/мл)
Вода (pH 2)
15
Гексан
<<<0,13
16
PEG 400
0,30-0,43
pKa (2-пирролидин-1-илэтил)амида 5-[5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-(3Z)илиденметил]-2,4-диметил-1H-пиррол-3-карбоновой кислоты равен 8,50. Как ожидаетс ,
равновесна растворимость этого соединени вл етс более высокой при более низком
pH раствора (таблица A). Однако растворение частиц в среде дл растворени зависит от
pH в диффузионном слое. Значение pH диффузионного сло в тесном контакте с твердым
телом (pHh=0) может быть получено по равновесному pH раствора, измеренному с помощью
pH-метра. Результаты представлены в таблице B. Когда начальное значение pH выше, чем
10, растворимость (2-пирролидин-1-илэтил)амида 5-[5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-(3Z)илиденметил]-2,4-диметил-1H-пиррол-3-карбоновой кислоты вл етс очень низкой. По
этой причине pH раствора в равновесии почти не измен етс . С другой стороны, если
начальный pH<10, в раствор уходит большее количество (2-пирролидин-1-илэтил)амида 5[5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-(3Z)-илиденметил]-2,4-диметил-1H-пиррол-3-карбоновой
кислоты, и pH равновесного раствора выше, чем начальный pH (таблица B). По этой
причине данные указывают на то, что pHh=0 остаетс относительно высоким (>5), даже
когда объем среды дл растворени имеет pH, опускающийс до 1,4.
Таблица B.
Вли ние (2-пирролидин-1-илэтил)амида 5-[5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-(3Z)-илиденметил]-2,4-диметил-1H-пиррол-3-карбоновой кислоты
на значени pH равновесного раствора водной среды, без буфера, при температуре окружающей среды.
Начальный pH
раствора
Количество (2-пирролидин-1-илэтил)амида 5-[5-фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-(3Z)-илиденметил]2,4-диметил-1H-пиррол-3-карбоновой кислоты, добавленной к 2 мл воды без буфера (мг)
pH равновесного
раствора
1,43
322,5
5,36
2,19
333,2
5,20
3,22
280,7
6,98
5,47
209,7
8,13
6,73
142,0
8,31
7,24
141,5
8,49
7,61
95,4
8,87
10,07
95,1
9,86
11,53
96,2
11,61
12,50
88,0
12,52
13,20
98
13,18
Попытка измерени зависимости растворимости (2-пирролидин-1-илэтил)амида 5-[5фтор-2-оксо-1,2-дигидроиндол-(3Z)-илиденметил]-2,4-диметил-1H-пиррол-3-карбоновой
Страница: 14
RU 2 335 502 C2
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
кислоты от pH не была успешной. При растворении исходного лекарственного средства при
pH<2,2 образуютс очень мелкодисперсные частицы. Эти мелкодисперсные частицы
уход т через 0,45 мкм мембрану фильтра и дают мутный фильтрат. Попыток использовать
мембрану фильтра с более мелкими порами (0,1 мкм) не предпринималось, поскольку нет
очевидного непосредственного использовани таких данных.
IDR
Начальную скорость растворени (IDR) полиморфа II сравнивают со скоростью
полиморфа I. Обнаружено, что DDR полиморфа II примерно в три раза превышает видимое
значение IDR полиморфа I в буфере с pH 2, при 23°C (таблица C). Этот результат
противоречит более раннему наблюдению, что полиморф II вл етс менее стабильным и,
согласно ожидани м, должен иметь более низкую растворимость и по этой причине более
низкую IDR, при той же температуре и в том же растворителе. Хот и не жела св зыватьс с теорией, одним из объ снений этого противоречи вл етс то, что
лекарственное средство подвергаетс твердофазному преобразованию в услови х
эксперимента. Как следствие, IDR не может быть сравнено с термодинамическим
соотношением исходных двух полиморфов. Микроскопическое наблюдение таблетки
лекарственного средства из полиморфа I демонстрирует положительное доказательство
дл гипотезы о твердофазном преобразовании. Цвет таблетки на стороне, открытой дл среды дл растворени , вл етс оранжево-красным по сравнению с желтым цветом
исходной таблетки. Возможно, что полиморф I преобразуетс в соль HCl сразу после
того, как таблетка вступает в контакт со средой
Документ
Категория
Без категории
Просмотров
0
Размер файла
762 Кб
Теги
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа