close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

Патент РФ 2337359

код для вставки
–ќ——»…— јя ‘≈ƒ≈–ј÷»я
(19)
RU
(11)
2 337 359
(13)
C1
(51) ћѕ G01N 33/48 (2006.01)
G01N 21/76 (2006.01)
G01N 1/44 (2006.01)
‘≈ƒ≈–јЋ№Ќјя —Ћ”∆Ѕј
ѕќ »Ќ“≈ЋЋ≈ “”јЋ№Ќќ… —ќЅ—“¬≈ЌЌќ—“»,
ѕј“≈Ќ“јћ » “ќ¬ј–Ќџћ «Ќј јћ
(12)
ќѕ»—јЌ»≈ »«ќЅ–≈“≈Ќ»я ѕј“≈Ќ“”
(21), (22) «а†вка: 2007111399/15, 28.03.2007
(72) јвтор(ы):
»ванова »рина ѕавловна (RU),
ириллов јлексей јлександрович (RU),
«уймач ≈лена јнатольевна (RU)
(24) ƒата начала отсчета срока действи† патента:
28.03.2007
(45) ќпубликовано: 27.10.2008 Ѕюл. є 30
C 1
2 3 3 7 3 5 9
R U
» Ѕ»ќЋќ√»„≈— »’ ∆»ƒ ќ—“≈…
(57) –еферат:
»зобретение относитс† к области медицины и
биологии и может быть использовано, в частности,
при исследовании антиокислительных свойств
лекарственных препаратов, примен†емых дл†
коррекции процессов перекисного окислени†
липидов, и при оценке антиоксидантной активности
биологических жидкостей. —пособ заключаетс† в
том, что производитс† оценка антиокислительной
активности
химических
соединений
и
биологических
жидкостей
путем
индукции
свободнорадикальных реакций в тест-системе на
основе водных растворов в присутствии и
отсутствии
исследуемых
соединений
или
исследуемых
биологических
жидкостей
с
последующим измерением быстрой вспышки
хемилюминесценции
и
определением
антиоксидантной активности по степени тушени†
хемилюминесценции в образцах, содержащих
исследуемые соединени† или исследуемую
биологическую жидкость. —пособ позвол†ет
индуцировать
свободнорадикальные
реакции
путем воздействи† на образец в течение 5-100 с
высокоэнергетическим некогерентным импульсным
излучением длительностью импульса 1-10 мс,
силой тока 1 кј, напр†жение на электродах 10 к¬,
энергией 5 ƒж в 1 импульсе. —пособ позвол†ет
сократить число трудоемких операций, увеличить
продолжительность
свечени†
и
точность
измерени†. 2 табл.
(56) (продолжение):
его здоровьеї, ирилов ј.ј. Ђ¬ли†ние высокоэнергетического некогерентного импульсного излучени† на
интегральный уровень свободнорадикальных реакций костного мозгаї, —анкт-ѕетербург, 2007, найдено в
»нтернет, VRL: http://www.med.pu.ru/archiv/tezis7_3.doc.
—траница: 1
RU
C 1
(54) —–≈ƒ—“¬ќ ќ÷≈Ќ » јЌ“»ќ »—Ћ»“≈Ћ№Ќќ… ј “»¬Ќќ—“» ’»ћ»„≈— »’ —ќ≈ƒ»Ќ≈Ќ»…
2 3 3 7 3 5 9
јдрес дл† переписки:
603005, г.Ќижний Ќовгород, ул. јлексеевска†,
1, Ќиж√ћј, пат. пов. ».Ќ. Ѕалишиной, рег. є651
R U
(56) —писок документов, цитированных в отчете о
поиске: RU 2112982 C1, 10.06.1998. SU 1045127
A1, 30.09.1983. RU 95113538 A, 10.11.1997. RU
2163021 C2, 10.02.2001. SU 1513405 A1,
07.10.1989. SU 1778689 A1, 30.11.1992. SU
1532869 A1, 30.12.1989. RU 2157531 C1,
10.10.2000. ‘ундаментальна† наука и
клиническа† медицина. ƒес†та† ¬сероссийска†
медико-биологическа† конференци† молодых
исследователей Ђ„еловек и (см. прод.)
(73) ѕатентообладатель(и):
√ќ—”ƒј–—“¬≈ЌЌќ≈ ќЅ–ј«ќ¬ј“≈Ћ№Ќќ≈
”„–≈∆ƒ≈Ќ»≈ ¬џ—Ў≈√ќ
ѕ–ќ‘≈——»ќЌјЋ№Ќќ√ќ ќЅ–ј«ќ¬јЌ»я
"Ќ»∆≈√ќ–ќƒ— јя √ќ—”ƒј–—“¬≈ЌЌјя
ћ≈ƒ»÷»Ќ— јя ј јƒ≈ћ»я –ќ—«ƒ–ј¬ј" (√ќ”
¬ѕќ "Ќ»∆√ћј –ќ—«ƒ–ј¬ј") (RU)
RUSSIAN FEDERATION
RU
(19)
(11)
2 337 359
(13)
C1
(51) Int. Cl.
G01N 33/48 (2006.01)
G01N 21/76 (2006.01)
G01N 1/44 (2006.01)
FEDERAL SERVICE
FOR INTELLECTUAL PROPERTY,
PATENTS AND TRADEMARKS
(12)
ABSTRACT OF INVENTION
(21), (22) Application: 2007111399/15, 28.03.2007
(72) Inventor(s):
Ivanova Irina Pavlovna (RU),
Kirillov Aleksej Aleksandrovich (RU),
Zujmach Elena Anatol'evna (RU)
(24) Effective date for property rights: 28.03.2007
(45) Date of publication: 27.10.2008 Bull. 30
2 3 3 7 3 5 9
antioxidatic activity on degree of suppression of
chemoluminescence in the samples containing
investigated
compounds
or
the
investigated
biological liquid. The method allows inducing
free-radical reactions by exposure of the sample
within 5-100 seconds with high-energy incoherent
impulse radiation, with duration of impulse of 110
milliseconds,
current
intensity
of
1
kiloampere, voltage on electrodes of 10 kilovolt,
energy of 5 J in 1 impulse.
EFFECT: reduction of number of labourconsuming operations, augmentation of accuracy of
measurement
of
antioxidising
properties
of
medicinal preparations.
1 ex, 2 tbl
R U
(57) Abstract:
FIELD: medicine, pharmaceutics.
SUBSTANCE: invention concerns medicine and
biology area and can be used at research of
antioxidising
properties
of
the
medicinal
preparations applied to correction of processes
peroxide oxidation of lipids, and at estimation
of
antioxidatic
activity
of
biological
liquids.
The method lies in estimation of antioxidising
activity of chemical compounds and biological
liquids by an induction of free-radical reactions
in a test system on the basis of aqueous
solutions at presence and absence of investigated
compounds or investigated biological liquids with
the subsequent measurement of fast burst of
chemoluminescence
and
determination
of
—траница: 2
EN
C 1
C 1
BIOLOGICAL LIQUIDS
2 3 3 7 3 5 9
(54) AGENT FOR ESTIMATION OF ANTIOXIDISING ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS AND
R U
(73) Proprietor(s):
GOSUDARSTVENNOE OBRAZOVATEL'NOE
UChREZhDENIE VYSShEGO
PROFESSIONAL'NOGO OBRAZOVANIJa
"NIZhEGORODSKAJa GOSUDARSTVENNAJa
MEDITsINSKAJa AKADEMIJa ROSZDRAVA" (GOU
VPO "NIZhGMA ROSZDRAVA") (RU)
Mail address:
603005, g.Nizhnij Novgorod, ul.
Alekseevskaja, 1, NizhGMA, pat. pov. I.N.
Balishinoj, reg. є651
RU 2 337 359 C1
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
ѕредлагаемое изобретение относитс† к медицине и биологии, а именно к биохимии, и
может быть использовано, в частности, при исследовании антиоксидаитных свойств
лекарственных препаратов, примен†емых дл† коррекции процессов перекисного окислени†
липидов, а также дл† определени† антиоксидантной активности биологических жидкостей
организма человека и животных.
»звестно, что свободнорадикальные реакции организма усиливаютс† вследствие
различных патологических процессов [1]. ѕоэтому по†вилась необходимость в новых
методах и способах ингибировать свободнорадикальные реакции и защищать органы и
ткани организма от их повреждающего действи†.
ќб антиокислительной активности исследуемого образца суд†т по интенсивности и
длительности вспышки хемилюминесценции и ее затуханию в тест-системах при
воздействии на них или не воздействии на них исследуемого фактора. Ќаличие
светосуммы хемилюминесценции, превышающей шумовой фон, подтверждает наличие
свободных радикалов в растворе, а по гашению хемилюминесценции можно оценить
способность вводимого в раствор препарата св†зывать свободные радикалы. ¬ качестве
тест-системы в известном способе используют цельную кровь. —вободнорадикальное
окисление индуцируют, пропуска† через образец крови озон в концентрации 0,26-0,35
мг/л в течение 5-7 минут, а перед измерением хемилюминесценции дополнительно
усиливают ее введением в образец ионов двухвалентного железа [2].
ќднако использование в качестве тест-системы плазмы крови, представл†ющей собой
многокомпонентную систему с высокой концентрацией различных ионов и белков,
усложн†ет способ оценки антиокислительной активности химических соединений, так как
дл† инициировани† перекисного окислени† липидов, кроме воздействи† озоном,
необходимо дополнительно вводить в тест-системы ионы двухвалентного железа и
гидроперекись третичного бутила.
¬ св†зи с решением имеющихс† проблем был разработан другой способ, сокративший
число трудоемких операций и увеличивший точность антиокислительной активности. ¬ нем
оценка антиокислительной активности химических и биохимических соединений решалась
путем индукции свободнорадикальных реакций в тест-системе посредством озонировани† в
присутствии и отсутствии исследуемого соединени† с последующим измерением быстрой
вспышки хемилюминесценции и определением антиокислительной активности по степени
тушени† хемилюминесценции в образцах, содержащих исследуемое соединение, в
соответствии с изобретением в качестве тест-системы используют водные растворы солей
неорганического происхождени†, а также би- и дистилированную воду,
свободнорадикальные реакции индуцируют, пропуска† через образец раствора озон в
концентрации 1,2-1,6 мг/л в течение 5-10 минут [3]. Ётот способ выбран в качестве
прототипа.
Ќо и этот метод содержал р†д недостатков. “ест-системы подвергались обработке
озоном, который †вл†етс† сильным окислителем и †довитым газом [4]. ѕомимо этого,
озонирование раствора †вл†етс† довольно трудоемкой операцией. “акже свечение
сохран†етс† на непродолжительное врем† (несколько минут), что позвол†ет провести
малое количество измерений, и не всегда малое количество измерений †вл†етс†
статистически достоверным.
ѕоэтому задачей изобретени† †вл†етс† упрощение способа оценки антиоксидантиой
активности за счет сокращени† числа трудоемких операций, увеличение
продолжительности свечени† исследуемых образцов и повышение точности оценки
антиокислительной активности исследуемого образца.
Ќовый технический результат заключаетс† в следующем
ѕредлагаемое изобретение существенно упрощает способ оценки антиокислительной
активности химических соединений за счет сокращени† числа трудоемких операций (при
озонотерапии к кислородному баллону подключаетс† прибор озонатор, на нем
выставл†етс† определенна† интенсивность озонировани† кислорода, измер†ема† в мг/мл,
и получаема† смесь под давлением подаетс† в исследуемый раствор на прот†жении 5-10
—траница: 3
DE
RU 2 337 359 C1
5
10
15
20
25
минут, в отличие от этого в предлагаемом изобретении необходимо только поднести
источник высокоэнергетического некогерентного импульсного излучени† (¬Ќ»») к
исследуемому образцу, предварительно выставив на приборе врем† обработки, также
продолжительность обработки сокращаетс† до 100 с). ѕовышаетс† точность оценки
антиокислительной активности (так как с увеличением продолжительности свечени†
возможно проведение большего числа измерений, что увеличит статистическую точность)
свечение может сохран†тьс† на прот†жении большего временного промежутка (1,5 ч и
дольше).
ѕоставленна† задача в способе оценки антиокислительной активности химических
соединений и биологических жидкостей путем индукции свободнорадикальных реакций в
тест-системе на основе водных растворов в присутствии и отсутствие исследуемых
соединений или исследуемых биологических жидкостей с последующим измерением
быстрой вспышки хемилюминесценции и определением антиоксидантной активности по
степени тушени† хемилюминесценции в образцах, содержащих исследуемые соединени†,
достигаетс† тем, что свободнорадикальные реакции индуцируют путем воздействи† на
образец в течение 5-100 с ¬Ќ»», длительностью импульса 1-10 мс, силой тока 1 кј,
напр†жение на электродах 10 к¬, энергией 5 ƒж в 1 импульсе.
¬ соответствии с изобретением в качестве тест-системы используют водные растворы
солей неорганического происхождени†, а также би- и дистиллированную воду,
свободнорадикальные реакции индуцируют, облучением образца ¬Ќ»»
продолжительностью от 5 до 100 с.
ѕродолжительность облучени† образцов установлена опытным путем. Ѕыло
установлено, что обработка водных растворов ¬Ќ»» в течение 5 с светосумма
хемилюминесценции сама† низка†, а при обработке более 100 с нецелесообразно, так как
вспышка хемилюминесценции практически не мен†етс† (табл.1).
“аблица є1
”ровень хемилюминесценции растворов после воздействи† высокоэнергетических некогерентных импульсных излучений разной
продолжительности.
30
–астворы
’Ћм¬
5 сек
’Ћ, м¬
25 сек
¬ода дистиллированна†
0,45±0,042
0,75±0,074
–-р ’енкса
0,07±0,007
0,09±0,0086
‘из.р-р
0,09±0,009
0,13±0,01
¬ода дистиллированна†
на уровне шума
0,87±0,09
–-р ’енкса
0,62±0,06
0,52±0,05
‘из.р-р
0,06±0,006
0,12±0,01
’Ћм¬
55 сек
’Ћ, м¬
100 сек
’Ћ, м¬
200 сек
0,91±0,089
0,6 ±0,058
0,62±0,06
0,14±0,01
0,41±0,04
0,43±0,04
0,35±0,03
0,6 ±0,06
0,59±0,06
0,95±0,09
0,55±0,05
0,56±0,055
0,42±0,04
0,52±0,05
0,5±0,05
0,02±0,002
0,53±0,05
0,55±0,055
—разу после воздействи† ¬Ќ»»
„ерез 1,5 часа воздействи† ¬Ќ»»
35
ѕримечани†: ’Ћ - хемилюминесценци†, физ.р-р - физиологический раствор, м¬ - милливольт, ¬Ќ»» - высокоэнергетическое некогерентное
импульсное излучение, р-р ’енкса - раствор ’енкса.
40
45
50
—пособ оценки антиокислительной активности химических соединений в соответствии с
изобретением осуществл†етс† следующим образом.
¬ емкость помещаютс† водные растворы солей неорганического происхождени†, а также
би- и дистиллированна† вода и проводитс† облучение образца ¬Ќ»» (длительность
импульса 1-10 мс, сила тока 1 кј, напр†жение на электродах 10 к¬, энерги† 5 ƒж в 1
импульсе) продолжительностью 5-100 с. ѕосле этого 1 мл облученного раствора внос†т в
кювету и став†т в светонепроницаемую камеру устройства, регистрируют уровень
светового потока спонтанной хемилюминесценции раствора. «атем в эту же кювету, не
вынима† из камеры, внос†т исследуемое вещество, тщательно перемешивают и снова
регистрируют уровень светового потока хемилюминесценции при закрытой створке
прерывател† светового потока темновой камеры. ѕри этом полученные результаты
автоматически вывод†тс† на цифровой регистратор устройства или экран компьютера.
—тепень выраженности антиокислительной активности исследуемого вещества оценивают
по разности светосумм хемилюминесценции между опытным и контрольным образцами
раствора.
—траница: 4
RU 2 337 359 C1
5
10
ѕример. ¬ стекл†нный сосуд помещают дистиллированную воду, где она облучаетс†
¬Ќ»» (длительность импульса 1-10 мл, сила тока 1 кј, напр†жение на электродах 10 к¬,
энерги† 5 ƒж в 1 импульсе) в течение 100 с, один мл раствора после обработки
отбираетс† в измерительную кювету, помещаетс† в светонепроницаемую камеру
устройства (Ѕ’Ћ-6), регистрируетс† светосумма хемилюминесценции (м¬) за 11 секунд.
«атем измерительна† кювета вынимаетс† из измерительного прибора, в нее вноситс†
определенное количество миксидола (в количестве 0,0125 мг/мл), и кювета снова
помещаетс† в светонепроницаемую камеру устройства, замер†етс† светосумма
хемилюминесценции за 11 секунд. ƒалее полученные результаты сравниваютс†. ѕо ним
видно, что миксидол уменьшает светосумму хемилюминесценции, т.е. обладают
антиокислительной активностью. ѕомимо миксидола также были использованы: гутимин,
глутатион и конска† сыворотка крови. ƒанные приведены в таблице є2.
“аблица є2
”ровень хемилюминесценции воды после воздействи† высокоэнергетических некогерентных импульсных излучений продолжительностью 100
секунд до и после добавлени† антиоксидантов или плазмы крови.
15
”ровень ’Ћ,
м¬
¬ода +
¬Ќ»»
¬ода + ¬Ќ»» + миксидол
(0,0125 мг/мл)
¬ода + ¬Ќ»» + гутимин
(10 -6 моль/л)
¬ода + ¬Ќ»» + глутатион
(10 -6 моль/л)
¬ода + ¬Ќ»» + конска†
сыворотка крови (0,05 мл)
0,6±0,06
0,36±0,035
0,26±0,025
0,31±0,03
0,3±0,03
ѕримечани†: ’Ћ - хемилюминесценци†, м¬ - милливольт, ¬Ќ»» - высокоэнергетическое некогерентное импульсное излучение,
моль/л -моль/литр.
20
25
30
35
40
»сточники информации
1. ∆уравлев Ћ.»., ∆уравлева ј.». —верхслабое свечение сыворотки крови и его
значение в комплексной диагностике - ћ., ћедицина, 1979 г., с.128.
2. јвт. свидетельство ———– є1045127, кл. G01N 33/48, 1985 г. онторщикова .Ќ.,
ѕерет†гин —.ѕ., узьмина ≈.». —пособ определени† антиоксидантной активности
химических соединений.
3. ѕат. –‘ є2112982, ћ » G01N 33/48. онторщикова .Ќ., »ванова ».ѕ. —пособ оценки
антиоксидантной активности химических и биохимических соединений.
4. јлехина C.ѕ., ўербатюк “.√. ќзонотерапи†: клинические и экспериментальные
аспекты - Ќ.Ќовгород, Ћитера, 2003, с.240.
‘ормула изобретени†
—пособ оценки антиокислительной активности химических соединений и биологических
жидкостей путем индукции свободнорадикальных реакций в тест-системе на основе водных
растворов в присутствии и отсутствии исследуемых соединений или исследуемых
биологических жидкостей с последующим измерением быстрой вспышки
хемилюминесценции и определением антиоксидантной активности по степени тушени†
хемилюминесценции в образцах, содержащих исследуемые соединени† или исследуемую
биологическую жидкость, отличающийс† тем, что свободнорадикальные реакции
индуцируют путем воздействи† на образец в течение 5-100 с высокоэнергетическим
некогерентным импульсным излучением, длительностью импульса 1-10 мс, силой тока 1 кј,
напр†жение на электродах 10 к¬, энергией 5 ƒж в 1 импульсе.
45
50
—траница: 5
CL
Документ
Категория
Без категории
Просмотров
0
Размер файла
79 Кб
Теги
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа