close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

Патент РФ 2337694

код для вставки
РОССИЙСКАЯ ФЕДЕРАЦИЯ
(19)
RU
(11)
2 337 694
(13)
C1
(51) МПК
A61K 31/722 (2006.01)
A61P 17/16 (2006.01)
ФЕДЕРАЛЬНАЯ СЛУЖБА
ПО ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ,
ПАТЕНТАМ И ТОВАРНЫМ ЗНАКАМ
(12)
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ
(21), (22) За вка: 2007123409/14, 21.06.2007
(24) Дата начала отсчета срока действи патента:
21.06.2007
(45) Опубликовано: 10.11.2008 Бюл. № 31
2 3 3 7 6 9 4
R U
(54) СПОСОБ ПРОФИЛАКТИКИ ПЛАТИНОЗА КОЖИ
(57) Реферат:
Изобретение относитс к медицине, а именно к
дерматологии, и может быть использовано дл профилактики платиноза кожи. Дл этого в
качестве
защитного
средства
используют
ежедневные аппликации 1-2% водонерастворимого
коллоидного
раствора
хитозана
«Амидан»
молекул рной массы 10-15 kDa и степенью
дезацетилировани свыше
90%.
Способ
обеспечивает создание эффективного барьера в
эпидермальном слое кожи, св зывающего и
преп тствующего проникновению в глубокие слои
дермы
металла-платины,
предупреждение
развити реакции
контактной
гиперчувствительности
замедленного
типа,
признаков воспалени кожи, сенсибилизации кожи
и развити признаков металлодерматоза при
контакте открытых участков кожи с агрессивными
соединени ми металла. 5 табл.
(56) (продолжение):
contraction and healing with a photocrosslinkable chitosan hydrogel." Wound Repair Regen. 2001 Nov-Dec;
9(6): 513-21. SEZER AD et al. "Chitosan film containing fucoldan as a wound dressing for dermal burn
healing: preparation and in vitro/in vivo evaluation. "AAPS PharmSciTech 2007 May 24; 8(2): Article 39.
Страница: 1
RU
C 1
C 1
Адрес дл переписки:
660022, г.Красно рск-22, ул. ПартизанаЖелезн ка, 1, Медицинска академи , патентный
отдел
2 3 3 7 6 9 4
(56) Список документов, цитированных в отчете о
поиске: БАГНОВА М.Д. Профессиональные
дерматозы. - М.: Медицина, 1984, с.304. RU
(73) Патентообладатель(и):
2196587 С1, 20.01.2003. RU 2254145 С1,
ГОУ ВПО "КРАСНОЯРСКАЯ
20.06.2005. СА 2476152, 30.09.2005. РАБИНОВИЧ
ГОСУДАРСТВЕННАЯ МЕДИЦИНСКАЯ
Э.З. Ранозаживл ющие покрыти на основе
АКАДЕМИЯ ФЕДЕРАЛЬНОГО АГЕНТСТВА ПО
хитозан-коллагенового комплекса. Первый
ЗДРАВООХРАНЕНИЮ И СОЦИАЛЬНОМУ
Российский национальный конгресс "Человек и
РАЗВИТИЮ" (RU)
лекарство", 1992, с.229. ISHIHARA М et al.
"Acceleration of wound (см. прод.)
R U
(72) Автор(ы):
Прохоренков Виктор Иванович (RU),
Большаков Игорь Николаевич (RU),
Кухарска Любовь Капитоновна (RU),
Карачева Юли Викторовна (RU),
Борго кова Марина Георгиевна (RU),
Грищенко Аркадий Александрович (RU),
Левкович Алексей Олегович (RU)
RUSSIAN FEDERATION
(19)
RU
(11)
2 337 694
(13)
C1
(51) Int. Cl.
A61K 31/722 (2006.01)
A61P 17/16 (2006.01)
FEDERAL SERVICE
FOR INTELLECTUAL PROPERTY,
PATENTS AND TRADEMARKS
(12)
ABSTRACT OF INVENTION
(21), (22) Application: 2007123409/14, 21.06.2007
(24) Effective date for property rights: 21.06.2007
(45) Date of publication: 10.11.2008 Bull. 31
Mail address:
660022, g.Krasnojarsk-22, ul. PartizanaZheleznjaka, 1, Meditsinskaja akademija,
patentnyj otdel
deep penetration of metal platinum, prevention of
retarded
contact
hypersensitivity
reaction
development, symptoms of skin inflammation, skin
sensitisation and development of metal dermatitis
in contact of open skin with aggressive metal
compounds.
EFFECT: higher efficiency of agent.
1 ex, 5 tbl
R U
2 3 3 7 6 9 4
(57) Abstract:
FIELD: medicine; dermatology.
SUBSTANCE:
as
protective
agent,
daily
applications of 1-2%
water-insoluble colloidal
chitosan solution Amidan of molecular weight 1015 kDa and deacetylation degree over 90% are
used.
Method
provides
effective
barrier
in
epidermal skin layer, bounding and preventing
Страница: 2
EN
C 1
C 1
(54) METHOD OF SKIN PLATINOSIS PREVENTION
2 3 3 7 6 9 4
(73) Proprietor(s):
GOU VPO "KRASNOJaRSKAJa
GOSUDARSTVENNAJa MEDITsINSKAJa
AKADEMIJa FEDERAL'NOGO AGENTSTVA PO
ZDRAVOOKhRANENIJu I SOTsIAL'NOMU
RAZVITIJu" (RU)
R U
(72) Inventor(s):
Prokhorenkov Viktor Ivanovich (RU),
Bol'shakov Igor' Nikolaevich (RU),
Kukharskaja Ljubov' Kapitonovna (RU),
Karacheva Julija Viktorovna (RU),
Borgojakova Marina Georgievna (RU),
Grishchenko Arkadij Aleksandrovich (RU),
Levkovich Aleksej Olegovich (RU)
RU 2 337 694 C1
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
Изобретение относитс к области медицины, а именно к дерматологии, и предназначено
дл предупреждени развити дерматита при контакте открытых участков кожи с
агрессивными соединени ми металлов платиновой группы, реакции гиперчувствительности
замедленного типа на разрешающие дозы металла.
Известны способы профилактики платиноза кожи, включающие нар ду с
предложенными на производстве мерами индивидуальной защиты кожи в виде
спецодежды, очков и перчаток использование мазей, паст и кремов. Используемые
химические соединени преп тствуют попаданию металлов в глубокие слои эпидермиса в
силу создани герметичного сло и закрыти выводных протоков сальных и потовых желез.
Такие защитные продукты сохран ютс на коже в течение нескольких часов, не нарушают
технологический процесс производства, легко удал ютс после произведенной работы.
Гидрофильные защитные кремы легко смываютс водой, механически преп тствуют
внедрению в кожу соединений металлов, присутствующих в технических маслах, жирах,
нефтепродуктах, лаках, растворител х, смолах (паста «ХИОТ-6, мазь Селисского, мазь
«Исчезающий крем») [1], образуют защитные пленки (пасты «Невидимые перчатки»,
«Биологические перчатки») [2]. Гидрофобные мази и пасты не удал ютс водными
растворами, осуществл ют защиту от воздействи слабых кислот и щелочей, водных
растворов солей, смазочно-охлаждающих жидкостей (паста «ИЭР-2» в комбинации с
поверхностно-активными моющими средствами), образуют защитные накожные пленки с
включением в них воска, нитроцеллюлозы, шеллака, силикона [3]. В современные
накожные защитные пленки включаютс комплексообразователи, привод щие к
инактивации соединений металлов с образованием устойчивых трилоновых св зей
(кальций-динатриева соль этилендиаминтетрауксусной кислоты, лимонна , аскорбинова ,
виннокаменна кислоты, гидрохинон, цистеин, 2,3-димеркаптопропанол, ионообменные
смолы). Эффективным защитным кремом вл етс крем «ПМС-400» на основе
полиметилсилоксана, натри бисульфата, натри сульфата, натри цитрата, пиросульфата
натри [4].
Профилактика попадани соединений металлов в кожу заключаетс и в применении
эффективных моющих ингредиентов на основе поверхностно-активных веществ,
преп тствующих выпадению в осадок на кожные покровы солей кальци и магни , резко не
мен ющих кислотно-щелочное равновесие кожи (ДНС-АК и средства на его основе) [5].
Например, добавление к ДНС-АК комплексообразователей приводит к восстановлению
элемента металла Cr +6 в Cr +3 и образованию прочных св зей с комплексообразовател ми.
Известны защитные мази, обладающие амфифильными свойствами, способные
универсально инактивировать соединени металлов в водных и масл ных средах (ГКЖ-94)
[6]. Фотозащитными свойствами на коже обладают ацетилсалицилова и салицилова ,
аскорбинова кислоты, танин, хинин, салол, парааминобензойна кислота, окись цинка,
двуокись титана (пасты Бушуры, Сало, Шелюженко, кремы Сто нова, Ленсиной,
парфюмерные кремы «Щит», «Луч», «Антилюкс», «Ахромин») [7]. Соединени металлов
группы платины, меди, кобальта, цинка могут быть инактивированы включением в мазевые
основы унитиола, триэтаноламина, цитрата натри , этилендиаминтетраацетата [8].
Дл эффективного удалени с кожных покровов производственных загр знений
используют анионоактивные, катионоактивные, неионогенные вещества. Группа
анионоактивных соединений включает первичные и вторичные алкилсульфонаты:
алкилсульфаты, сульфанолы, алкилбензосульфаниты, динатриевые соли моноэфиров
сульфо нтарной кислоты [9]. Группа катионоактивных веществ включает
алкилтриметилбензиламмонийхлорид, алкилдиметилбензиламонийхлоридстеариновую
кислоту, октадециламинопропионитрил, кислоты кашалотового жира, третичный
алкилдиметиламин.
Однако как анионные, так и катионные инактивирующие соединени в определенных
дозах вызывают раздражение и воспалительную реакцию кожи.
Неионогенные поверхностно-активные вещества представл ют собой
оксиэтилированные алкилфенолы, моноэтаноламиды, первичные спирты - синтанолы.
Страница: 3
DE
RU 2 337 694 C1
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
Превышение пороговых концентраций этих соединений в моющих средствах приводит к
раздражающему действию на коже и развитию ее сенсибилизации, по влению входных
ворот дл микробной инвазии.
Важное место в профилактике внедрени соединений металлов в эпидермальный слой
занимают активные добавки к основным ионитам (полифосфаты,
карбоксиметилцеллюлоза, кислородсодержащие отбеливатели, щелочные электролиты карбонаты, силикаты).
Из группы комплексообразующих веществ наиболее часто примен ют органические
комплексообразователи аминополикарбоновых кислот (трилон А, трилон Б) [10].
Активность этих соединений св зана с многоосновностью органических кислот, наличием
активных аминосоединений.
Однако методы специфической десенсибилизации кожи на основе селективного
св зывани и эвакуации внедренных в эпидермальный слой кожи металлов не
разработаны. Указанные профилактические химические вещества, инактивиру агрессивные соединени металлов, снимают острые воспалительные реакции в коже, но не
решают проблему проникновени металла в глубокие слои дермы, развити контактной
гиперчувствительности замедленного типа. Указанные средства профилактики вл ютс в
разной степени агрессивными по отношению к коже и вызывают признаки ее воспалени ,
реакцию гиперчувствительности замедленного типа, усугубл ют течение
металлодерматоза, непосредственно слабо св зывают саму платину.
За вл емое изобретение направлено на решение задачи создани эффективного
барьера в эпидермальном слое кожи, св зывающего и преп тствующего проникновению в
глубокие слои дермы металла-платины, предупреждени развити реакции контактной
гиперчувствительности замедленного типа, признаков воспалени кожи.
Задачу достигают за счет того, что в качестве защитного средства используют
ежедневные аппликации 1-2% водонерастворимого коллоидного раствора хитозана
«Амидан» молекул рной массы 10-15 kDa и степенью дезацетилировани свыше 90%.
Способ выполн ют следующим образом.
На участок кожи предплечь площадью 9 см 2 нанос т 1% коллоидный раствор хитозана
«Амидан» в объеме 50 мкл и после высыхани раствора с интервалом в 10 минут нанос т
раствор соли платины в количестве 50 мкл с содержанием металла 0,05 мг. На
контрольную поверхность кожи противоположного предплечь нанос т в той же дозе только
раствор соли платины. Кожные поверхности закрывают марлевыми компрессными
салфетками, плотно фиксируют. Аппликации сохран ют в течение 8 часов. После
истечени данного срока аппликации удал ют, участки кожи обрабатывают механическим
путем с мылом и микроскопируют. Контактную люминесцентную микроскопию провод т
прибором «ЛЮМАМ - И3» с использованием: ФС-1 (фильтр возбуждающий), ЖС-18
(фильтр запирающий), «зеленой» светоделительной пластинки (область пропускани длины волны 480-700 нм), объектива ЛК 10Ч0,40.
Результаты. При контактной люминесцентной микроскопии кожной поверхности, где
были поочередно нанесены растворы хитозана и соли платины, наблюдали слабое
свечение кристаллов платины, их количество на поверхности кожи составл ло 0,9±0,02 в
поле зрени , что, в среднем, в 10 раз меньше по сравнению с контролем, где при тех же
равных услови х на кожу наносили только раствор соли платины.
Способ профилактики платиноза кожи с помощью коллоидного раствора хитозана
демонстрируют в эксперименте in vitro и in vivo на морских свинках и привод т
доказательства по следующим задачам:
1) эффективность св зывани соединени платины с 1% водонерастворимым
коллоидным раствором хитозана молекул рной массы 10-15 kDa и степенью
дезацетилировани свыше 90%;
2) степень проникновени коллоидного раствора хитозана в слои кожи;
3) степень проникновени металла платины в слои кожи при предварительной
аппликации кожи 1% коллоидным раствором хитозана «Амидан»;
Страница: 4
RU 2 337 694 C1
5
10
15
20
4) формирование контактной гиперчувствительности замедленного типа от воздействи раствора соли платины при предварительном нанесении на кожу коллоидного раствора
хитозана.
Дл решени первой задачи в систему in vitro включали коллоидный раствор хитозана и
различные концентрации платины в растворе аммони гексахлорплатината в соотношении
1:1 по объему. Смеси соли платины и биополимера инкубировали при 37°С в течение 5,
15, 30 минут, 1, 2, 3, 4, 8, 12 и 24 часов при посто нном перемешивании. Пробы в виде
надосадка согласно временным интервалам извлекали из термостата, центрифугировали
при скорости 1500 об/мин в течение 10 мин, отдел ли надосадок, помещали его в
контейнер, маркировали, герметизировали и помещали в накопитель дл проведени массспектрометрии на аппарате ELAN 9000. Результаты выражали в абсолютных цифрах
содержани платины на 10 -3 мг/мл пробы.
Результаты исследований.
Как показывает таблица 1, при контакте такого хитозана в услови х in vitro с солью
платины в течение 24 часов происходит активна сорбци линейного характера независимо
от первоначальной массы металла, начина с первых минут контакта. Полнота извлечени металла близка к 100%, несмотр на то, что изначальные массы металла искусственно
существенно завышены по сравнению с дозами, которые имеют место при контакте
открытых участков кожи у работающего контингента на производстве. Максимальное
извлечение металла из раствора относитс на период первых 4-х часов сорбции и
составл ет 86,9-91,6% (таблица 1).
Таблица 1
Сорбци in vitro 1% водонерастворимым хитозаном в соотношении хитозан:раствор аммони гексахлорплатината 1:1 (по объему)
Массова дол платины (Pt) Ч 10 -3 мг/мл (метод ИСПМС масс-спектрометри ELAN 9000)
Исходна расчетна масса платины
25
Врем сорбции Исходна фактическа масса платины
30
35
40
45
50
10,50
21,00
52,50
105,00
210,00
10,48
23,39
55,29
117,05
244,57
5 мин
7,956 (24,1%) 16,704 (28,6%) 40,057 (27,6%) 72,549 (38,0%) 117,996 (51,8%)
15 мин
8,307 (20,7%) 14,789 (36,8%) 35,319 (36,1%) 57,774 (42,1%) 194,622 (20,4%)
30 мин
6,259 (40,3%) 12,260 (47,6%) 30,010 (45,7%) 43,236 (63,1%) 140,291 (42,6%)
1 час
7,488 (28,6%) 29,134 (-24,6%) 13,324 (75,9%) 38,281 (67,3%) 15,957 (93,5%)
2 часа
4,200 (59,9%) 6,384 (72,7%) 17,739 (67,9%) 28,134 (75,9%) 194,372 (20,4%)
3 часа
1,903 (81,8%) 5,577 (76,2,%) 12,749 (76,9%) 14,566 (87,6%) 175,052 (28,4%)
4 часа
1,157 (88,9%) 2,742 (88,3%)
8 часов
0,217 (97,9%) 0,023 (99,9%)
0,460 (99,2%) 3,776 (96,8%) 150,001 (38,7%)
12 часов
0,012 (99,9%) 0,036 (99,9%)
0,250 (99,6%) 3,304 (97,2%) 170,219 (30,4%)
24 часа
1,447 (86,2%) 0,069 (99,7%)
0,239 (99,6%) 12,330 (89,5%) 75,521 (69,1%)
7,224 (86,9%) 9,787 (91,6%) 190,146 (22,3%)
При решении второй задачи дл исследовани кинетики водонерастворимого хитозана в
коже использовали биополимер молекул рной массы 10-15 kDa и степени
дезацетилировани 94%, каждое дес тое звено которого мечено флюоресцеин
изотиоцианатом (ФИТЦ). Сол нокислый раствор хитозана-ФИТЦ наносили на поверхность
кожи морских свинок и через 1, 2, 4, 8 и 12 часов забирали образцы кожи,
изготавливали тонкие срезы на замораживающем микротоме дл гистологического
флюоресцентного анализа.
Результаты исследований. Исследовани кинетики водонерастворимого хитозана,
меченного ФИТЦ (молекул рна масса хитозана 10 kDa), показали, что коллоидный
хитозановый полимер при нанесении на кожу в течение 2-24 часов стабильно удерживаетс в наружном слое эпидермиса, слабо проника в выводные протоки потовых и сальных
желез. В контроле свободный ФИТЦ, нанесенный на кожу, быстро проникает во все слои
дермы, практически полностью покидает зону кожи после ее аппликации через 24 часа.
Дл определени защитных свойств коллоидного раствора хитозана от соединени платины использовали метод контактной биомикроскопии кожи, а также способность соли
платины образовывать с тиомочевинной в присутствии сульфат-иона комплексные
соединени , обладающие люминесценцией в ультрафиолетовых лучах.
Страница: 5
RU 2 337 694 C1
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
Соль платины (аммони гексахлорплатинат) в количестве 50 мкл или 0,05 мг однократно
наносили на переднюю поверхность кожи предплечь здорового человека площадью 3Ч3
см. На аналогичный участок здоровой кожи противоположного предплечь поочередно
наносили 1% коллоидный раствор хитозана «Амидан» в объеме 50 мкл и с интервалом в 10
минут соль платины в количестве 50 мкл или 0,05 мг. Кожные поверхности закрывали
марлевыми компрессными салфетками, плотно фиксировали. Аппликации сохран ли в
течение 8 часов. После истечени данного срока аппликации удал ли, участки кожи
обрабатывали механическим путем с мылом и микроскопировали. Контактную
люминесцентную микроскопию проводили прибором «ЛЮМАМ - И3» с использованием:
ФС-1 (фильтр возбуждающий), ЖС-18 (фильтр запирающий), «зеленой» светоделительной
пластинки (область пропускани длины волны 480-700 нм), объектива ЛК 10Ч0,40.
Результаты исследовани . В результате контактной люминесцентной микроскопии
кожной поверхности, где была нанесена платина, наблюдали интенсивное свечение
кристаллов соли платины розовым цветом. Количество кристаллов соли платины в поле
зрени составило 11,5±0,9. При микроскопии кожной поверхности, где был нанесен
коллоидный раствор хитозана «Амидан» и платина, количество кристаллов платины на
поверхности кожи составило 0,9±0,02 (р<0,001) в поле зрени . Таким образом, применение
1% коллоидного раствора хитозана «Амидан» в качестве защитного средства от
соединений платины приводило к почти полному предотвращению попадани металла в
кожу, а это, в свою очередь, вл етс гарантией к исключению развити контактного
аллергодерматоза платиновой этиологии.
Дл решени четвертой задачи с целью определени характера гистологических
изменений в коже при применении коллоидного хитозана «Амидан», а также его роли в
качестве барьера при профилактике развити гиперчувствительности замедленного типа
исследовали действие полимера на модели контактного металлодерматоза у
лабораторных животных. В эксперимент были вз ты 4 группы морских свинок массой 400 г
по 6 животных в каждой. В межлопаточной области каждого животного удал ли волос ной
покров площадью 3Ч4 см. Животные I группы (контроль) - интактные морские свинки. У
животных II-IV групп обнаженную от волос ного покрова кожу условно раздел ли на две
половины (правую и левую).
Во II группе животных на правую половину участка кожного пол наносили
водорастворимую соль платины - 0,1% раствор гексахлорплатината аммони в количестве
0,1 мл (содержание платины 1 мг/мл). Препарат наносили на указанную половину кожного
участка через каждые 24 часа в течение 10 дней. В III группе животных - на правый
участок кожи наносили 2% коллоидный раствор хитозана «Амидан» с молекул рной массой
10-15 kDa, степенью дезацетилировани 94%, рН 7,0 в объеме 0,1 мл через каждые 24
часа в течение 10 дней. Через каждые 12 часов после нанесени хитозана на правый
участок кожи наносили препарат платины также в течение 10 дней. В IV группе морских
свинок на правую половину участка кожи наносили только 2% коллоидный раствор
хитозана «Амидан» с молекул рной массой 10-15 kDa, степенью дезацетилировани 94%,
рН 7,0 в объеме 0,1 мл через каждые 24 часа в течение 10 дней.
Дл определени степени сенсибилизации кожи сол ми платины на 12-е сутки
эксперимента животным II, III групп на левую половину участка кожи однократно
наносили разрешающую дозу препарата платины (0,1% раствора гексахлорплатината
аммони в количестве 0,1 мл).
В IV группе на 12-е сутки с целью определени сенсибилизирующих свойств хитозана на
аналогичные участки кожи наносили разрешающую дозу 2% коллоидного раствора
хитозана в количестве 0,1 мл.
На 15-е сутки путем искусственного пневмоторакса под внутрибрюшинной
нейролептаналгезией все животные выведены из эксперимента.
Дл гистологического анализа забирали участки кожи, подвергшиес воздействию
препаратов, осуществл ли фиксацию тканей кожи в растворе Боуэна, стандартную ксилолспиртовую проводку, получение парафиновых блоков и их секцию. В качественный и
Страница: 6
RU 2 337 694 C1
5
10
15
20
25
количественный морфологический анализ включены правые и левые участки кожи.
Гистологические срезы окрашивали гематоксилин-эозином, микроскопировали. Дл подсчета клеточного состава тканей использовали окул р со встроенной сеткой
Автандилова дл цитогистостереометрических исследований (объектив Ч40). Подсчет
клеточного состава каждого препарата производили визуально в 5 пол х зрени в расчете
на 1 мм 2 кожи.
Результаты исследований. Проведенный гистологический анализ (окраска гематоксилинэозином, увеличение 400) правых участков кожи показал, что во II группе животных
(платина) на 15 сутки определ ли отек эпидермиса, дермы, разрыхление коллагеновых
волокон, выраженную диффузную макрофагально-лимфоцитарную инфильтрацию дермы,
в сосочковом слое инфильтрат более плотный, чем в подлежащих сло х дермы.
Макрофаги крупные, с обильными включени ми темного цвета в цитоплазме (состо ние
активного фагоцитоза). Сосуды дермы расширены, эндотелий набухший, стенки отечные. В
левых участках кожи - выраженна реакци на разрешающую дозу препарата платины,
характеризующа с также массивной лимфоцитарно-макрофагальной инфильтрацией и
отеком. Доминирующим клеточным элементом инфильтрата вл лс лимфоцит. В III
опытной группе животных (хитозан + платина) в правых участках кожи в сосочковом слое
дермы - скудные периваскул рные инфильтраты из лимфоцитов, фибробластов и
единичных макрофагов, отсутствовали влени отека эндотели сосудов дермы. В
сетчатом слое дермы определ лись единичные фибробласты и лимфоциты,
располагающиес среди коллагеновых волокон. Разрешающа доза платины на левый
участок кожи в III группе практически не измен ет гистологическую картину. В IV
группе животных (хитозан) в правых и левых участках кожи отсутствует клеточный
инфильтрат в дерме, а также влени отека. Таким образом, достоверных различий между
гистологической картиной I, III и IV групп вы влено не было (таблица 2 и 3).
Таблица 2
Формирование платиновой гиперчувствительности замедленного типа в правых участках кожи морских свинок в течение 10 дней
Клетки кожи
Вещества, наносимые на кожу
Соль платины n=20 Коллоидный хитозан + соль платины n=20 Коллоидный хитозан n=20 Интактна кожа n=20
30
Лимфоциты
5,2±0,42*
1,35±0,32
1,25±0,28
1,2±0,2
Макрофаги
2,4±0,17*
1,15±0,13
1,01±0,16
0,9±0,18
Примечание: * - достоверность различий (р<0,001) между результатами групп «соль платины» и «интактна кожа».
Таблица 3
Реакци сенсибилизации в левых участках кожи морских свинок при нанесении разрешающей дозы препарата
35
Клетки кожи
Вещества, наносимые на кожу
Соль платины n=20 Коллоидный хитозан + соль платины n=20 Коллоидный хитозан n=20 Интактна кожа n=20
Лимфоциты
3,65±0,33*
1,5 ±0,15
1,22±0,26
1,2±0,2
Макрофаги
3,95±0,35*
1,2 ±0,18
1,0±0,17
0,9±0,18
Примечание: * - достоверность различий (р<0,001) между группами «соль платины» и «интактна кожа».
40
45
50
Таким образом, качественные и количественные гистологические исследовани с
высокой степенью достоверности показали, что при моделировании контактного
аллергического дерматита платиновой этиологии в эксперименте на лабораторных
животных коллоидный раствор хитозана значительно уменьшает патологическое
воздействие солей платины на кожу, а также способен предотвращать развитие реакции
контактной гиперчувствительности замедленного типа.
Пример. Дл демонстрации профилактики сенсибилизации кожи в исследование вз ты
две группы морских свинок массой 350 г по 5 животных в каждой группе. У первой группы
животных на обнаженные участки кожи площадью 4 см 2 в межлопаточной области (правую
половину) ежедневно через каждые 24 часа в течение 10 дней наносили по 0,1 мл 0,1%
раствора аммони гексахлорплатината с концентрацией металла платины 1 мг/мл. У
второй группы животных на обнаженные участки кожи (правую половину) ежедневно через
каждые 24 часа в течение 10 дней наносили 1% коллоидный раствор хитозана «Амидан» с
молекул рной массой 15 kDa, степенью дезацетилировани 94%, рН 7,0 в объеме 0,1 мл.
Страница: 7
RU 2 337 694 C1
5
10
15
20
25
30
Через каждые 12 часов после нанесени хитозана в течение 10 дней повторно на правую
половину участков кожи наносили по 0,1 мл 0,1% раствора аммони гексахлорплатината с
концентрацией металла платины 1 мг/мл.
Дл определени степени сенсибилизации кожи сол ми платины на 12-е сутки
эксперимента животным обеих групп на левую половину участков кожи однократно
наносили разрешающую дозу 0,1% раствора гексахлорплатината аммони в количестве 0,1
мл.
На 15-е сутки под внутрибрюшинной нейролептаналгезией все животные выведены из
эксперимента. Дл гистологического анализа забирали участки кожи, подвергшиес воздействию препаратов, осуществл ли фиксацию тканей кожи в растворе Боуэна,
стандартную ксилол-спиртовую проводку, получение парафиновых блоков и их секцию. В
качественный и количественный морфологический анализ включены правые и левые
участки кожи. Гистологические срезы окрашивали гематоксилин-эозином,
микроскопировали. Подсчет клеточного состава каждого препарата производили визуально
в 5 пол х зрени в расчете на 1 мм 2 кожи.
Результаты исследований. В I группе животных (аппликации солью металла платины)
определ ли отек эпидермального сло , глубоких слоев дермы с диффузной и плотной
макрофагально-лимфоцитарной инфильтрацией сетчатого и сосочкового слоев,
разрыхление коллагеновых волокон. Макрофаги крупных размеров с обильными
включени ми темного цвета в цитоплазме в состо нии активного фагоцитоза. Сосудистый
эндотелий в дерме набухший, просвет сосудов резко расширен, мышечный и
адвентициальный слои капилл ров в состо нии отека. В левых участках кожи - выраженна реакци сенсибилизации на разрешающую дозу препарата платины, характеризующа с массивной лимфоцитарно-макрофагальной инфильтрацией, отеком коллагеновых волокон
и стенок капилл ров. Во II группе животных (смен ющиес аппликации раствора хитозана
и раствора соли платины) в сосочковом слое дермы правых и левых участков кожи
фиксируютс единичные периваскул рные инфильтраты мононуклеарного клеточного
р да, отсутствуют влени отека эндотели сосудов. В сетчатом слое дермы определ ютс единичные фибробласты и лимфоциты, расположенные между коллагеновыми волокнами.
Клеточный состав дермального сло кожи приведен в таблицах 4 и 5.
Таблица 4
Количественна характеристика мононуклеарных клеток кожи морских свинок при ежедневных аппликаци х раствора аммони гексахлорплатината. Правые участки кожи
Клетки дермального сло 35
Группы животных
Группа I n=20
Группа II n=20
Лимфоциты
6,0±0,27*
1,26±0,26
Макрофаги
3,2±0,12*
1,09±0,08
Примечание: * - достоверность различий (р<0,001) между результатами I и II групп
Таблица 5
40
Количественна характеристика мононуклеарных клеток кожи морских свинок при ежедневных аппликаци х раствора аммони гексахлорплатината. Левые участки кожи
Клетки дермального сло Группы животных
Группа I n=20
Группа II n=20
Лимфоциты
3,81±0,25*
1,29±0,11
Макрофаги
3,85±0,15*
0,9 ±0,14
Примечание: * - достоверность различий (р<0,001) между результатами I и II групп
45
50
Таким образом, применение в качестве ежедневных аппликаций 1-2%
водонерастворимого коллоидного раствора хитозана «Амидан» эффективно
предупреждает развитие контактной гиперчувствительности замедленного типа,
сенсибилизацию кожи и развитие признаков платиноза кожи.
Литература
1. Багнова М.Д. Профессиональные дерматозы./ М.Д.Багнова. - М.: Медицина, 1984. 304 с.
2. Защитные средства дл кожи. / Г.С.Башура, Б.А.Задорожный, Д.П. Сало и др. Страница: 8
RU 2 337 694 C1
5
10
15
20
25
Киев, 1975. - 95 с.
3. К вопросу о защитных дерматологических средствах универсального действи ./
Л.В.Алчанг н, Г.Д.Селисский, А.А Неменко и др. // Вестн. дерматологии и
венерологии. - 1989. - №5. - С.27-29.
4. Колпаков Ф.И. Профессиональные дерматозы химической этиологии./ Ф.И.Колпаков. Красно рск, 1974. - 178 с.
5. Метод химической инактивации и его роль в профилактике профессиональных
аллергических дерматозов./ Г.Д.Селисский, Б.А.Сомов, Ю.К.Скрипкин и др. - Вестн.
дерматологии и венерологии. - 1976. - №8. - С.81-84.
6. Мисенко Д.Н. Особенности патогенеза и иммунокорригирующей терапии больных
аллергическими дерматозами рабочих платинового производства: дис.... канд. мед. наук
/ Д.Н.Мисенко. - М., 1994. - 157 с.
7. Опыт комплексного изучени защитно-профилактических свойств крема ПМС-400 с
универсальными свойствами./ Вестн. дерматологии и венерологии. - 1975. - №12. С.42-46.
8. Профессиональные болезни кожи. Руководство дл врачей. Т.1-2. / А.А.Антоньев,
Б.А.Сомов, Л.П.Цыркунов и др. - Красно рск, 1996.
9. Рабен А.С. Профессиональна дерматологи ./ А.С.Рабен, Антоньев А.А. - М.:
Медицина, 1975. - 318 с.
10.Селисский Г.Д. Профилактика профессиональных дерматозов./ Г.Д.Селисский,
Б.Г.Сто нов. - М.: Медицина, 1981. - 272 с.
Формула изобретени Способ профилактики платиноза кожи путем нанесени на нее защитных средств дл св зывани и инактивации агрессивных соединений металлов, отличающийс тем, что в
качестве защитного средства используют ежедневные аппликации 1-2%
водонерастворимого коллоидного раствора хитозана "Амидан" молекул рной массы 10-15
kDa и степенью дезацетилировани свыше 90%.
30
35
40
45
50
Страница: 9
CL
Документ
Категория
Без категории
Просмотров
0
Размер файла
110 Кб
Теги
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа