close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

Вирус опоясывающего герпеса IgG в - Аналитика

код для вставкиСкачать
Anti-VZV (IgG) in cerebrospinal fluid ELISA, EUROIMMUN AG
1
_____________________________________________________________________________________________________
Вирус опоясывающего герпеса IgG в спинномозговой жидкости
(Аnti-VZV in cerebrospinal fluid ELISA (IgG))
Иммуноферментный набор для определения антител класса IgG к вирусу опоясывающего герпеса (VZV) в
спинномозговой жидкости.
Номер по каталогу:
ЕI 2650-9601 LG
Набор рассчитан на 96 определений
НАЗНАЧЕНИЕ
Данный набор предназначен для количественного определения in vitro IgG-антител человека к вирусу
ветряной оспы в спинномозговой жидкости (СМЖ).
ПРИНЦИП МЕТОДА
Анализ аналогичен определению антител к вирусу VZV в сыворотке человека, но с дополнением
калибраторов для диагностики в СМЖ. Тест основан на методе твердофазного иммуноферментного анализа
(ИФА). Данный набор содержит стрипы, каждый из которых состоит из восьми отламываемых лунок,
покрытых антигенами вируса опоясывающего герпеса. На первой стадии реакции разведенные образцы
пациентов инкубируют в лунках. Если образцы положительные, специфические IgG-антитела (а также IgA- и
IgM-антитела) будут связываться с антигенами на твердой фазе. Для определения связанных антител
проводится вторая инкубация с использованием меченных ферментом антител к IgG человека (ферментный
конъюгат), которые затем обеспечивают развитие цветной реакции.
Концентрацию антител к вирусу опоясывающего герпеса в спинномозговой жидкости и в сыворотке
определяют по калибровочной кривой с использованием калибраторов СМЖ (от А до D). Если требуется
измерить концентрацию антител только в сыворотке, следует использовать калибраторы 1-3 (см. состав
набора Anti- VZV ELISA, кат. № ЕI 2650-9601 G).
МАТЕРИАЛЫ И РЕАГЕНТЫ
Состав набора EI 2650-9601-LG
Компонент
Цвет
Количество
Обозначение
–
–
–
1.
Набор Anti-VZV ELISA (IgG)
кат. № ЕI 2650-9601 G
2.
СSF калибратор А
калибратор СМЖ с концентрацией 100 Ед
(IgG, человека), готов к использованию
1 × 2,0 мл
CAL А
3.
СSF калибратор B
калибратор СМЖ с концентрацией 40 Ед
(IgG, человека), готов к использованию
1 × 2,0 мл
CAL B
1 × 2,0 мл
CAL C
1 × 2,0 мл
CAL D
Пурпурный, с
уменьшающейся
интенсивностью
4.
СSF калибратор C
калибратор СМЖ с концентрацией 8 Ед
(IgG, человека), готов к использованию
5.
СSF калибратор D
калибратор СМЖ с концентрацией 1 Ед
(IgG, человека), готов к использованию
6.
Инструкция по применению
–
1 буклет
7.
Протокол с заданными величинами
–
1 протокол
Серия
Температура хранения
Для in vitro диагностики
Невскрытый набор
использовать до
Хранение и стабильность набора
Набор следует хранить при температуре от +2 °С до +8 °С. Не замораживать. Невскрытые компоненты
набора сохраняют стабильность в течение всего указанного срока годности набора.
Удаление отходов
Образцы пациентов, калибраторы, контроли и стрипы после инкубации следует рассматривать, как
инфицированные отходы, и обращаться с ними соответствующим образом. Все реагенты следует удалять в
соответствии с действующими официальными инструкциями.
_____________________________________________________________________________________________________
Перевод на русский язык ЗАО «АНАЛИТИКА», Москва, 2006
тел.: 737-0363, факс: 737-0365, e-mail: info@analytica.ru
Anti-VZV (IgG) in cerebrospinal fluid ELISA, EUROIMMUN AG
2
_____________________________________________________________________________________________________
ПОДГОТОВКА И СТАБИЛЬНОСТЬ РЕАГЕНТОВ
Примечание: Температуру всех реагентов необходимо довести до комнатной (от +18 °С до +25 °С) в
течение 30 минут перед использованием. После первого использования реагенты сохраняют стабильность в
течение указанного срока годности, если они хранятся при температуре от +2 °С до +8 °С и защищены от
микробной контаминации. Прочие сведения о стабильности отдельных реагентов указаны ниже.
- Калибраторы спинномозговой жидкости: Готовы к использованию. Необходимо тщательно перемешать
перед использованием.
Предостережение
Использованные контрольные сыворотки и калибраторы были проверены на антитела к ВИЧ-1 и ВИЧ-2 и
вирусу гепатита С, а также на наличие HBsAg, методами иммуноферментного анализа и непрямой
иммунофлуоресценции и при этом показали отрицательные результаты. Тем не менее, все используемые
материалы следует считать потенциально опасными и обращаться с ними, соблюдая необходимые меры
предосторожности. Некоторые реагенты содержат токсический агент азид натрия. Избегайте его попадания
на кожу.
ПОДГОТОВКА И СТАБИЛЬНОСТЬ ОБРАЗЦОВ ПАЦИЕНТОВ
Материал образцов: Сыворотка крови человека и спинномозговая жидкость (СМЖ).
Стабильность: Образцы пациентов, предназначенные для исследования этим методом, можно хранить до
о
о
14 дней при температуре от +2 С до +8 С. Разведенные образцы необходимо использовать в течение
одного рабочего дня.
Разведение образцов, метод А
При использовании этого метода образцы пациентов разводят по одной из схем разведения,
рекомендуемых фирмой EUROIMMUN, независимо от концентрации IgG, учитываемой затем при расчетах
частного от деления относительного содержания СМЖ в сыворотке (см раздел 3 «Расчет индекса
специфичности антител»).
Образцы сыворотки: Образцы сыворотки разводят для анализа 1:401 буфером для образцов. Например:
вначале тщательно перемешайте сыворотку и затем добавьте 10 мкл сыворотки к 1,0 мл буфера для
образца и тщательно перемешайте (получится разведение 1:101). Перенесите 250 мкл этого
предварительно разведенного образца в 750 мкл буфера для образца и снова тщательно перемешайте
(получится разведение 1:401).
Образцы СМЖ: Образцы спинномозговой жидкости сыворотки разводят для анализа 1:2 буфером для
образцов. Например: вначале тщательно перемешайте образец СМЖ и затем добавьте 100 мкл образца к
100 мкл буфера для образца и тщательно перемешайте (получится разведение 1:2).
Альтернативное разведение образцов, метод В
Образцы СМЖ и образцы сыворотки можно альтернативно разводить таким образом, чтобы они имели
одинаковые концентрации IgG. Необходимо, тем не менее, проверить, действительно ли соотношение
суммарных иммуноглобулинов может быть взято для расчета LSQотносит. И не следует ли включить в
расчет также соотношение суммарной фракции альбумина в СМЖ/сыворотке (см. подраздел 4
«ИНСТРУКЦИЙ ПО РАСЧЕТУ CSQотн.»). При альтернативном способе разведения образцов следует,
используя соотношение концентраций суммарного альбумина в СМЖ/сыворотке, рассчитать верхнюю
дискриминанту CSQлим. (IgG). Расчет LSQотн. при использовании альтернативного разведения образцов
описан в подразделе 6 «ИНСТРУКЦИИ ПО РАСЧЕТУ CSQотн.».
ПРОЦЕДУРА ИССЛЕДОВАНИЯ
Инкубация с образцом (1 стадия)
Внесите по 100 мкл каждого калибратора СМЖ, разведенных образцов сыворотки или спинномозговой
жидкости пациентов в отдельные лунки микропланшета в соответствии со схемой размещения. Инкубируйте
планшет при комнатной температуре в течение 60 минут.
Промывка
Вручную. Удалите содержимое лунок, затем последовательно промойте все лунки 3 раза, каждый раз внося
по 300 мкл приготовленного промывочного буфера в каждую лунку.
Автоматическая: проводите промывку в режиме с переполнением, для чего установите в программе для
соответствующего автоматического вошера, например, TECAN Columbus Washer, параметр “Overflow” с 3мя циклами промывки и внесением в лунки по 400 мкл рабочего промывочного буфера.
Оставляйте промывочный буфер в каждой лунке в течение 30 – 60 секунд во время каждого цикла
промывки, затем удаляйте содержимое лунок. После промывки (вручную или автоматической) тщательно
_____________________________________________________________________________________________________
Перевод на русский язык ЗАО «АНАЛИТИКА», Москва, 2006
тел.: 737-0363, факс: 737-0365, e-mail: info@analytica.ru
Anti-VZV (IgG) in cerebrospinal fluid ELISA, EUROIMMUN AG
3
_____________________________________________________________________________________________________
удаляйте остатки промывочного буфера из лунок, постукивая перевернутым планшетом о фильтровальную
бумагу.
Примечание. Остатки жидкости (>10 мкл), скапливающейся в лунках после промывки, могут повлиять на
субстратную реакцию и привести к получению ложно заниженных значений оптической плотности.
Неправильная промывка (например, менее 3 промывочных циклов, слишком маленькие объемы
промывочного буфера или слишком короткое время реакции) может привести к ложно завышенным
значениям оптической плотности.
Инкубация с конъюгатом (2 стадия)
Внесите в каждую лунку по 100 мкл ферментного конъюгата (меченные пероксидазой антитела к IgG
человека). Инкубируйте в течение 60 минут при комнатной температуре (от +18 °С до + 25 °С).
Промывание
Удалите жидкость из лунок. Промойте, как описано ранее.
Инкубация с субстратом (3 стадия)
Внесите в каждую лунку по 100 мкл раствора хромогена/субстрата. Инкубируйте планшет в течение 15
минут при комнатной температуре (от +18 °С до +25 °С) в защищенном от прямого солнечного света месте.
Остановка реакции
Добавьте в каждую лунку по 100 мкл стоп-реагента (в той же последовательности и с такой же скоростью,
как вносился раствор хромогена/субстрата).
Измерение
Фотометрическое измерение интенсивности окрашивания раствора в лунках проводят при основной длине
волны 450 нм и при референтной длине волны между 620 нм и 650 нм в течение 30 минут после
добавления стоп-реагента. Перед измерением слегка покачайте планшет, чтобы добиться гомогенного
распределения раствора.
СХЕМА РАЗМЕЩЕНИЯ НА ПЛАНШЕТЕ ОБРАЗЦОВ И КОНТРОЛЕЙ
A
1
CА
B
СB
1:2
1:2
1:2
C
CC
S4
S8
S 12
1:401
1:401
1:401
D
CD
C4
C8
C 12
1:2
1:2
1:2
E
S1
S5
S9
1:401
1:401
1:401
C1
C5
C9
1:2
1:2
1:2
S2
S6
S 10
1:401
1:401
1:401
C2
C6
C 10
1:2
1:2
1:2
F
G
H
2
S3
3
S7
4
S 11
1:401
1:401
1:401
C3
C7
C 11
5
6
7
8
9
10
11
12
Представленная выше схема представляет собой пример размещения на планшете 12 образцов сыворотки
пациентов (от S 1 до S 12) и 12 соответствующих им образцов спинномозговой жидкости (от С 1 до С 12).
Согласно схемы, каждый калибратор СМЖ (от С A до С D) и образец пациента вносятся в одну отдельную
лунку и анализ проводится без дубликатов. Достоверность анализа можно увеличить, размещая и измеряя
каждую анализируемую пробу в двух параллельных лунках (дубликатах).
Калибраторы СМЖ следует использовать при каждой постановке анализа и каждый раз получать новую
стандартную кривую. Сыворотки и соответствующие им образцы спинномозговой жидкости необходимо
исследовать в одной постановке анализа.
Лунки можно отламывать от стрипов по одной. Это позволяет привести в соответствие используемое
количество лунок и количество исследуемых образцов и, таким образом, минимизировать расход реагентов.
РАСЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ
С помощью данной тест-системы можно определить соотношение в СМЖ/сыворотке специфических IgGантител, вырабатываемых в ответ на патоген (индекс LSQспец. IgG). Подробности определения этого
индекса см. в разделе «Теоретические основы диагностики в спинномозговой жидкости (СМЖ)».
На графике линейной зависимости откладывают величины ОП, измеренные для 4 калибраторов СМЖ (ось
Y) против концентрации IgG-антител в этих калибраторах, выраженной в единицах Ед/мл (ось X). По
_____________________________________________________________________________________________________
Перевод на русский язык ЗАО «АНАЛИТИКА», Москва, 2006
тел.: 737-0363, факс: 737-0365, e-mail: info@analytica.ru
Anti-VZV (IgG) in cerebrospinal fluid ELISA, EUROIMMUN AG
4
_____________________________________________________________________________________________________
полученным точкам проводят калибровочную кривую, по которой можно определить концентрацию IgGантител в образцах СМЖ и сыворотки пациентов. Ниже приведен пример типичной калибровочной кривой.
Не используйте ее, пожалуйста, для определения концентрации антител в исследуемых образцах
пациентов.
Пример калибровочной кривой
ОП450
1,2 –
♦
1–
0,8 –
0,6 –
♦
0,4 –
0,2 –
0–♦
0
♦
20
40
60
80
100
120
Ед/мл
Если величины, полученные для образцов пациентов, лежат вне рабочего интервала измерений данного
набора, поступайте следующим образом:
1. Если величина, полученная для образца сыворотки и/или образца СМЖ, ниже интервала измерений
(ОП образца < ОП калибратора в лунке C D), значит, в образце не определяются специфические
антитела и нельзя рассчитать соотношение концентрации этих антител в СМЖ/сыворотке.
2. Если величина, полученная для образца сыворотки и/или образца СМЖ, выше интервала измерений
(ОП образца > ОП калибратора в лунке C А), значит, образец следует протестировать при большем
разведении, всегда по одной по схеме. Например, используйте разведение образца сыворотки 1:801,
а образца СМЖ 1:4. При этом в формулу расчета соотношения СМЖ/сыворотка необходимо внести
новые факторы разведения.
Расчет соотношения СМЖ/сыворотка возможен только тогда, когда ОП обоих образцов попадает внутрь
рабочего интервала измерений.
ИНСТРУКЦИИ ПО РАСЧЕТУ СООТНОШЕНИЙ АНТИТЕЛ В СПИННОМОЗГОВОЙ ЖИДКОСТИ И
СЫВОРОТКЕ КРОВИ (CSQотн.)
1. Теоретические основы диагностики в спинномозговой жидкости (СМЖ)
Для обнаружения специфической гуморальной реакции иммунной системы на появление инфекции в
центральной нервной системе (ЦНС), определяют концентрацию антител, специфических к патогенному
микроорганизму, класс иммуноглобулинов, к которому принадлежат эти антитела, и концентрацию
альбумина – в спинномозговой жидкости и в сыворотке крови пациента.
При инфицировании ЦНС вирусом опоясывающего герпеса в СМЖ накапливаются в большом количестве
антитела, вырабатываемые в ответ на патоген. Если локализация инфекции не ограничивается мозгом, и
если нет дисфункции гематоэнцефалического барьера, специфичные для патогена антитела имеют такое
же распределение между СМЖ и сывороткой крови, как и суммарная фракция IgG. В этом случае все
иммуноглобулины в СМЖ попадают из крови. Для обнаружения инфицирования собственно ЦНС
необходимо научиться различать антитела, продуцируемые интратекально, от антител, проникших в СМЖ
из крови.
Величина интратекальной продукции специфичных к патогену антител определяется индексом LSQотносит.
Эта величина равна частному от деления доли антител СМЖ (в суммарной фракции IgG СМЖ) на долю
антител сыворотки крови (в суммарной фракции IgG сыворотки).
IgGспец. СМЖ_____
IgGспец. СМЖ
IgGсум. СМЖ
IgGспец. сыворотки LSQспец. (IgG)
LSQотн. = ________________ = ______________________ = _____________
IgGспец. сыворотки
IgGсум. сыворотки
IgGсум. СМЖ_____
IgGсум. сыворотки
LSQсум. (IgG)
_____________________________________________________________________________________________________
Перевод на русский язык ЗАО «АНАЛИТИКА», Москва, 2006
тел.: 737-0363, факс: 737-0365, e-mail: info@analytica.ru
Anti-VZV (IgG) in cerebrospinal fluid ELISA, EUROIMMUN AG
5
_____________________________________________________________________________________________________
В результате преобразований формулы получаем, что LSQотн. равен частному от деления индекса
LSQспец. (соотношение IgG-антител в СМЖ и сыворотке) на индекс LSQсум. (соотношение суммарной
фракции IgG в СМЖ и сыворотке). Величина LSQотн. >1,3 указывает на то, что в ЦНС, из-за наличия
локальной инфекции, осуществляется продукция антител к патогену.
Продукция антител в ЦНС может иметь место при различных патологических условиях, например, при
множественной миеломе или при остром рассеянном энцефаломиелите (рассеянном склерозе). Если
имеется указание на интратекальную продукцию IgG-антител или на нарушение гематоэнцефалического
барьера, следует воспользоваться диаграммой Рейбера (1991 г., см. диаграмму в подразделе 4, стр. 7
оригинала инструкции по применению на английском языке).
2. Расчет индекса CSQспец. IgG (соотношение специфических IgG-антител в СМЖ/сыворотке)
Специфичные к данному патогену IgG-антитела в СМЖ можно определить с помощью соответствующего
ИФА набора EUROIMMUN. Индекс рассчитывают по следующей формуле:
Конц. специфич. IgG-антител в СМЖ, Ед/мл × фактор разведения СМЖ
СSQспец. (IgG) = _____________________________________________________________________
Конц. специфич. IgG-антител в сыворотке, Ед/мл × фактор разведения сыворотки
Пример расчета
CSF в разведении 1:2
Сыворотка в разведении 1:401
ОП = 0,675
ОП = 0,530
соответствует концентрации 55 Ед/мл
соответствует концентрации 42 Ед/мл
55 Ед/мл (в СМЖ) × 2
-3
СSQспец. (IgG) = _________________________= 6,531 × 10
42 Ед/мл (в сыворотке) × 401
3. Расчет индекса CSQсум. IgG (соотношение суммарных фракций IgG в СМЖ/сыворотке)
Концентрации IgG (в мг/л) в СМЖ и в сыворотке можно определить, используя методы нефелометрии.
Индекс рассчитывают по следующей формуле:
Конц. сум. IgG в СМЖ, мг/л
Сум. IgG в СМЖ
СSQсум. (IgG) = ___________________________ = ___________________
Конц. сум. IgG в сыворотке, г/л
Пример расчета
Концентрация суммарного IgG в СМЖ:
Концентрация суммарного IgG в сыворотке
Сум. IgG в сыворотке
13,3 мг/л
8,53 г/л
13,3 мг/л
-3
СSQсум. (IgG) = ________ = 1,559 × 10
8530 мг/л
4. Расчет верхней дискриминанты CSQлим. (IgG) на основе индекса CSQальб. (соотношение
суммарных концентраций альбумина в СМЖ/сыворотке)
Во время продукции антител в ЦНС (например, при множественной миеломе или рассеянном склерозе)
соотношение СSQсум. (IgG) является чрезвычайно высоким и не может использоваться для определения
продукции IgG-антител в ЦНС. В этом случае используется индекс CSQальб., так как альбумин образуется
исключительно в печени, но не интратекально. На очень большом количестве парных образцов
СМЖ/сыворотка, отобранных по принципу отсутствия симптомов заболевания, были рассчитаны
соотношения концентраций альбумина и соответствующих наиболее высоких нормальных концентраций
иммуноглобулинов, принятых за верхнюю дискриминанту CSQлим. (лимитирующее соотношение для IgG).
Если CSQсум. (IgG) выше, чем CSQлим. (IgG), значит в ЦНС имеет место дополнительная продукция IgA,
IgG или IgM. В этом случае для расчетов продукции в ЦНС IgG-антител (см. подраздел 5) вместо показателя
CSQсум. (IgG) используется показатель CSQлим. (IgG).
Эмпирические данные по парам СМЖ/сыворотка (Q IgG и Q Alb) показаны в виде диаграмм Рейбера и Ланге
(1991). На этих диаграммах соотношение концентраций иммуноглобулинов в СМЖ/сыворотке
откладывается по оси Y против соотношения концентраций альбумина в СМЖ/сыворотке по оси X. Это
_____________________________________________________________________________________________________
Перевод на русский язык ЗАО «АНАЛИТИКА», Москва, 2006
тел.: 737-0363, факс: 737-0365, e-mail: info@analytica.ru
Anti-VZV (IgG) in cerebrospinal fluid ELISA, EUROIMMUN AG
6
_____________________________________________________________________________________________________
позволяет рассчитать наиболее высокое соотношение нормальных IgA, IgG или IgM (верхняя
дискриминанта, Qлим.) для каждого соотношения альбумина.
Диаграмма, показанная на стр. 7 оригинала Инструкции по применению данного набора на английском
языке, представляет пример для иммуноглобулинов класса IgG. Кривые, лежащие выше зон 1 и 2,
представляют линию верхней дискриминации без добавочной продукции иммуноглобулинов в ЦНС.
Результаты измерения можно разделить на 5 категорий:
1. Референтный интервал нормальных значений, интактный гематоэнцефалический барьер
2. Дисфункция гематоэнцефалического барьера, отсутствует продукция иммуноглобулинов в ЦНС
3. Дисфункция гематоэнцефалического барьера, добавочная продукция иммуноглобулинов в ЦНС
4. Интактный гематоэнцефалический барьер, продукция иммуноглобулинов в ЦНС
5. Ошибки во время подготовки к анализу образцов сыворотки или во время выполнения анализа
Можно также рассчитать CSQлим. (для IgA, IgG или IgM). Из-за различия в константах диффузии различных
классов иммуноглобулинов, расчет соотношений для них делается по трем различным формулам (Beuche и
Felgenhauer, 1999).
LSQ ллим (IgA) = 0,77 × (LSQ альб.) 2 + 23 × 10 −6 − 3,1× 10 −3
LSQ ллим (IgG) = 0,93 × (LSQ альб.) 2 + 6 × 10 −6 − 1,7 × 10 −3
LSQ ллим (IgM) = 0,67 × (LSQ альб.) 2 + 120 × 10 −6 − 7,1 × 10 −3
5. Расчет относительного индекса CSQотн. в СМЖ/сыворотке
В зависимости от значений CSQсум. и CSQлим. расчет относительного индекса CSQотн. делается по
следующим различным формулам:
5.1. CSQсум. (IgG) < CSQлим. (IgG)
Если соотношение суммарной фракции иммуноглобулинов класса IgG CSQсум. (IgG) в СМЖ/сыворотке ниже
верхней дискриминанты CSQлим. (для IgA, IgG или IgM), относительный индекс рассчитывают по формуле:
CSQcпец. (IgG)
СSQотн. = ____________
CSQсум. (IgG)
Пример расчета
-3
CSQспец. (IgG) = 6,531 × 10
-3
CSQсум. (IgG) = 1,559 × 10
-3
CSQальб. (IgG) = 6,0 × 10
-3
CSQлим. (IgG) = 3,913 × 10
-3
-3
Результат расчета: CSQсум. (IgG) = 1,559 × 10 < CSQлим. (IgG) = 3,913 × 10
-3
CSQспец. (IgG)
6,531 × 10
СSQотн. = _______________ = ___________ = 4,19
CSQсум. (IgG)
-3
1,559 × 10
5.2. CSQсум. (IgG) > CSQлим. (IgG)
Если соотношение суммарной фракции иммуноглобулинов класса IgG CSQсум. (IgG) в СМЖ/сыворотке
выше верхней дискриминанты CSQлим. (IgG), относительный индекс рассчитывают по формуле:
CSQcпец. (IgG)
СSQотн. = _____________
CSQлим. (IgG)
Пример расчета
-3
CSQспец. (IgG) = 6,531 × 10
_____________________________________________________________________________________________________
Перевод на русский язык ЗАО «АНАЛИТИКА», Москва, 2006
тел.: 737-0363, факс: 737-0365, e-mail: info@analytica.ru
Anti-VZV (IgG) in cerebrospinal fluid ELISA, EUROIMMUN AG
7
_____________________________________________________________________________________________________
-3
CSQсум. (IgG) = 11,6 × 10
-3
CSQальб. (IgG) = 6,0 × 10
CSQлим. (IgG) = 0,93 ×
(6,0 × 10 −3 ) 2 + 6 × 10 −6 - 1,7 × 10-3 = 4,327 × 10-3
-3
Результат расчета: CSQсум. (IgG) = 11,6 × 10
-3
> CSQлим. (IgG) = 4,327 × 10
-3
CSQспец. (IgG)
6,531 × 10
СSQотн. = ____________ = ___________ = 1,51
CSQлим. (IgG)
-3
4,327 × 10
6. Альтернативный метод определения относительного индекса CSQотн. в СМЖ/сыворотке при
использовании альтернативного метода В разведения образцов
Для обеспечения сравнимых условий определения специфических IgG-антител в СМЖ и в сыворотке,
вначале можно определить в образцах СМЖ и сыворотки концентрацию суммарной фракции IgG. Затем
концентрацию IgG в сыворотке можно подогнать путем соответствующего разведения образца до значения,
которое получается при разведении образца СМЖ в два раза. Для того, чтобы рассчитать разведение
индивидуальных сывороток пациентов, используется следующая формула:
суммарный IgG в сыворотке
Фактор разведения сыворотки = _________________________ × 2
суммарный IgG в СМЖ
Пример расчета
Концентрация IgG в CSF:
Концентрация IgG в сыворотке:
Это означает, что:
57 мг/л
11,100 мг/л
11,100 мг/л
Фактор разведения сыворотки = ____________ × 2 = 389
57 мг/л
В этом примере образец сыворотки следует развести 1:389, для того, чтобы концентрация содержащегося в
нем IgG сравнялась с концентрацией IgG в образце СМЖ, разведенном 1:2. В результате этой операции
относительный индекс CSQотн. в СМЖ/сыворотке становится равным соотношению измеряемых
концентраций IgG-антител в СМЖ/сыворотке.
Конц. специфич. IgG-антител в СМЖ, Ед/мл
СSQотн. = ___________________________________________
Конц. специфич. IgG-антител в сыворотке, Ед/мл
Пример расчета
CSF в разведении 1:2
Сыворотка в разведении 1:389
ОП = 0,836
ОП = 0,442
соответствует концентрации 77 Ед/мл
соответствует концентрации 36 Ед/мл
77 Ед/мл (в СМЖ)
СSQотн. = ___________________ = 1,8
36 Ед/мл (в сыворотке)
ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ
Согласно рекомендациям Reiber и Lange (1991) для интерпретации результатов используют шкалу,
приведенную ниже. Верхняя граница интервала нормальных значений для людей без продукции
внутрикапсульных антител, специфичных к патогену, составляет 1,5:
CSQотн. < 1,3
CSQотн. от 1,3 до 1,5
CSQотн. > 1,5
интервал нормальных значений
интервал неопределенных значений
указывает на продукцию в ЦНС антител, специфичных к патогену.
Ÿ Для оценки результатов фирма EUROIMMUN предоставляет программу (требующую MS Excell) для
автоматического расчета CSQотн. по отношению концентраций антител в СМЖ/плазма.
_____________________________________________________________________________________________________
Перевод на русский язык ЗАО «АНАЛИТИКА», Москва, 2006
тел.: 737-0363, факс: 737-0365, e-mail: info@analytica.ru
Anti-VZV (IgG) in cerebrospinal fluid ELISA, EUROIMMUN AG
8
_____________________________________________________________________________________________________
КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ
Герпесвирусы Varicella-Zoster вызывают острую инфекцию (ветрянку, ветряную оспу) и опоясывающий
герпес (или опоясывающий лишай). Ветрянка является чрезвычайно контагиозным заболеванием и
распространяется главным образом среди детей. Она проявляется в виде нескольких эпизодов, для
которых характерно появление кожной сыпи в виде типичных рассеянных папул, превращающихся в
динамике заболевания в везикулы и пустулы, напоминающие таковые при натуральной оспе.
Опоясывающий герпес – это результат реактивации присутствующего латентного вируса или повторного
заражения вирусом при наличии остаточного иммунитета. При опоясывающем герпесе пузырьковая сыпь
появляется на одной стороне тела по ходу одного или нескольких чувствительных нервов в результате
воспаления ганглия и дорсальных нервных корешков.
Антитела к вирусам Varicella-Zoster обнаруживаются в сыворотке почти всех субъектов после их заражения.
В ответ на вирус возникает долговременный иммунитет, и такой стойкий иммунитет возникает также после
успешной защитной вакцинации. Пассивную иммунизацию специфическими иммуноглобулинами часто
проводят людям с иммунокомпромиссным серонегативным статусом, таким как пациенты с опухолями и
реципиенты трансплантатов, или серонегативным беременным женщинам при контакте с вирусом.
СПИСОК ЦИТИРУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ
Список литературы приведен в оригинале инструкции на английском языке.
Внимание! Перевод сделан с английского оригинала инструкции. Перед постановкой исследования
сверьте номер и дату издания вложенного в набор оригинала с указанными в настоящем переводе (см.
внизу справа). При несовпадении номеров или дат обратитесь в «Аналитику» за новым переводом, либо
руководствуйтесь оригиналом инструкции.
Anti-VZV_IgG_cerebr_ELISA_EI_2650-9601-LG_rus.doc 22.08.2006 11:58
Оригинал EI_2650LG_A_UK_C04.doc
Version: 08.11.2005 14:23
_____________________________________________________________________________________________________
Перевод на русский язык ЗАО «АНАЛИТИКА», Москва, 2006
тел.: 737-0363, факс: 737-0365, e-mail: info@analytica.ru
Документ
Категория
Другое
Просмотров
43
Размер файла
253 Кб
Теги
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа