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[5][_]
Molecule
(14/ 68)
[6][_]
LACTOSE
(23)
[7][_]
ASPARTIC ACID
(10)
[8][_]
GLUTAMIC ACID
(10)
[9][_]
SUCROSE
(9)
[10][_]
acetone
(5)
[11][_]
sodium aspartate
(2)
[12][_]
sodium glutamate
(2)
[13][_]
potassium aspartate
(1)
[14][_]
calcium aspartate
(1)
[15][_]
potassium glutamate
(1)
[16][_]
calcium glutamate
(1)
[17][_]
water
(1)
[18][_]
Isopropanol
(1)
[19][_]
magnesium Stearate
(1)
[20][_]
Gene Or Protein
(5/ 61)
[21][_]
SERRAPEPTASE
(51)
[22][_]
Etre
(6)
[23][_]
GELATIN
(2)
[24][_]
Perd
(1)
[25][_]
Protease
(1)
[26][_]
Physical
(28/ 58)
[27][_]
100 g
(22)
[28][_]
10 percent
(4)
[29][_]
40 percent de
(3)
[30][_]
15 percent
(2)
[31][_]
50 g
(2)
[32][_]
150 g
(2)
[33][_]
10 mbar
(2)
[34][_]
50-200 mg
(1)
[35][_]
pH 6.5-7.5
(1)
[36][_]
200 mg/ml
(1)
[37][_]
150 mg/ml
(1)
[38][_]
1 mbar
(1)
[39][_]
30 g
(1)
[40][_]
99,5 percent
(1)
[41][_]
96,2 percent
(1)
[42][_]
94,9 percent
(1)
[43][_]
de 7 mm
(1)
[44][_]
de 1,3tonne/cm2
(1)
[45][_]
130 mg
(1)
[46][_]
5 mg
(1)
[47][_]
7,5 percent
(1)
[48][_]
5 percent
(1)
[49][_]
de 1,33 x 10 3 mbar
(1)
[50][_]
96,0 percent
(1)
[51][_]
95,2 percent
(1)
[52][_]
74,2 percent
(1)
[53][_]
65,4 percent
(1)
[54][_]
73,8 percent
(1)
[55][_]
Generic
(2/ 22)
[56][_]
salts
(13)
[57][_]
alcohol
(9)
[58][_]
Organism
(2/ 5)
[59][_]
Serratia sp.
(4)
[60][_]
Serratia
(1)
[61][_]
Substituent
(2/ 2)
[62][_]
methyl-ethyl-isopropyl
(1)
[63][_]
methyl-ethyl
(1)
[64][_]
Polymer
(1/ 1)
[65][_]
Starch
(1)
[66][_]
Chemical Role
(1/ 1)
[67][_]
anti-inflammatory
(1)
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Publication
_________________________________________________________________
Number FR2519021A1
Family ID 4446908
Probable Assignee Takeda Chemical Industries Ltd
Publication Year 1983
Title
_________________________________________________________________
FR Title PROCEDE DE STABILISATION DE LA SERRAPEPTASE, COMPOSITION
CONTENANT CETTE SERRAPEPTASE STABILISEE ET PREPARATION DE CETTE
COMPOSITION
EN Title STABILISED LYOPHILISED POWDERS - CONTG. SERRAPEPTASE AND
LACTOSE, SUCROSE, GELATIN, OR ASPARTIC ACID OR GLUTAMIC ACID
Abstract
_________________________________________________________________
PROCEDE DE STABILISATION DE LA SERRAPEPTASE, COMPOSITION CONTENANT
CETTE SERRAPEPTASE STABILISEE ET PREPARATION DE CETTE COMPOSITION.
L'ACTIVITE ENZYMATIQUE DE LA SERRAPEPTASE EST STABILISEE EN AJOUTANT
UN OU PLUSIEURS ELEMENTS DU GROUPE CONSTITUE PAR LE LACTOSE, LE
sucrose, LA GELATINE, L'ASPARTic acid OU UN DE SES salts ET L'GLUTAMic
acid OU UN DE SES salts, A UNE SOLUTION OU A UNE SUSPENSION CONTENANT
LA SERRAPEPTASE ET EN LYOPHILISANT LA SOLUTION OU LA SUSPENSION
RESULTANTE.
Powders containing serrapeptase (I) stabilised by incorporation of any
of the following; lactose, sucrose, gelatin, aspartic acid and its
salt, glutamic acid and its salt, into which a solution or suspension
of (I) and lyophilising the resultant solution or suspension, are new.
(I) is pref. obtd. by cultivation of Serratia sp E15 (ATCC 21074)
according to the method of US 3691014. The resultant solution is
aqueous, optionally containing acetone or a lower alcohol and contains
50-200 mg (I) per ml., at pH 6.5-7.5. The stabiliser is then added in
aqueous solution of suspension, optionally with acetone or an alcohol
usually 0.5-1.5 parts of stabiliser being added per part of (I). (I)
is a known anti-inflammatory.
Description
_________________________________________________________________
Procede de stabilisation de la serrapeptase, composition contenant
cette serrapeptase stabilisee et preparation de cette composition.
La presente invention concerne un procede de preparation d'une
composition en poudre contenant une serrapeptase stabilisee.
La serrapeptase est une enzyme pouvant etre obtenue en cultivant par
exemple le Serratia sp. E15 dans un milieu de culture et elle a une
activite anti-inflammatoire.
La serrapeptase est relativement sensible a la chaleur et perd son
activite enzymatique d'une facon desavantageuse dans le stade de la
lyophilisation pendant sa fabrication,sous forme de poudre l'echelle
industrielle.
Etant donne ce qui est dit ci-dessus, les auteurs de la presente
invention ont cherche a preparer la serrapeptase stabilisee d'une
facon enzymatique sous forme de poudre. Comme resultat, ils ont trouve
que l'activite enzymatique de la serrapeptase peut etre stabilisee
quand un ou plusieurs elements du groupe constitue par le lactose, le
sac6x-irose, la gelatine, l'aspartic acid ou un sel de celui-csalt et
l'glutamic acid ou un sel de celui-csalt sont ajoutesjen phase
liquide, a une solution contenant la serrapeptase puis que le melange
resultant est lyophilise. Des recherches ulterieures basees sur cette
decouverte ont abouties a la presente invention.
Dans la specification presente, un ou plusieurs elements du groupe
constitue par le lactose, le sucrose, la gelatine, l'aspartic acid ou
un de ses salts et l'glutamic acid ou un de ses salts, est ou sont
quelquefois designe(s) parle present additif.
La presente invention concerne un procede de preparation d'une
composition en poudre contenant une serrapeptase stabilisee qui
consiste a ajouter un ou plusieurs elements du groupe constitue par le
lactose, le sucrose, la gelatine, l'aspartic acid ou un de ses salts
et l'glutamic acid ou un de ses salts, a une solution ou a une
suspension contenant la serrapeptase et a lyophiliser la solution ou
la suspension resultante.
En outre, la presente invention concerne une composition contenant une
serrapeptase stabilisee qui est preparee en ajoutant le present
additif a une solution ou a une suspens ion contenant la serrapeptase
et a lyophiliser la solution ou la suspension resultantejet un procede
de stabilisation de. la serrapeptase qui oonsiste a ajouter le present
additif a une solution ou a une suspension contenant la serrapeptase
et a lyophiliser la solution ou la suspension resultante.
La serrapeptase peut etre obtenue par exemple en cultivant le Serratia
sp. E15 dans un milieu de culture (brevet US nO 3 691 014). Ledit
Serratia sp. E15 a ete depose le 15 mai 1967 a l'American Type Culture
Collection sous le numero de depot ATCC 21074 et est inscrit a
l'American Type Culture
Collection Catalogue of Strains I, 14eme edition, 1980 et 15eme
edition, 1982.
La solution contenant la serrapeptase est par exemple une solution
aqueuse ou une solution aqueuse contenant un solvant organique tel que
l'acetone ou un alcoholinferieur methyl-ethyl-isopropylpar exemple
alcohol, alcohol, alcohol).
Pour preparer ladite solution, on peut utiliser,soit la solution
contenant une protease avant la lyophilisation telle qu'obtenue en
cultivant le Serratia sp. E15 par le procede revele dans le brevet US
nO 3 691 014,soit un produit une fois la lyophilisation obtenu par
ledit procede.
La concentration en serrapeptase dans ladite solution est de
preference d'environ 50 a 200 mg/ml en supposant que l'activite de
l'enzyme est d'environ 5000 PU/mg (pour "PU", voir brevet US nO 3 691
014).
Le pH de ladite solution est de preference d'environ 6,5 a 7,5.
Le sel de l'aspartic acid est,par exemple,l'potassium aspartate,
l'sodium aspartate ou l'calcium aspartate.
Le sel de l'glutamic acid est par exemple le potassium glutamate, le
sodium glutamate ou le calcium glutamate.
Dans le present additif, le lactose est prefere bien davantage.
Dans l'addition du present additif a une solution contenant la
serrapeptase, le present additif est dissous ou mis en suspension dans
l'water d'une solution aqueuse contenant de l'acetone ou un
alcoholmethyl-ethylpar exemple alcohol, alcohol), par exemple, et la
solution ou la suspension est ajoutee a la suspension contenant la
serrapeptase mentionnee ci-dessus. Apres l'addition, le melange
resultant peut etre soit une solution, soit une suspension. Le present
additif est utilise convenablement a raison d'environ 0,5 a 1,5 partie
en poids par partie en poids de serrapeptase. La concentration en
serrapeptase dans la solution ou la suspension juste avant la
lyophilisation, est d'une facon appropriee d'environ 70 a 150 mg/ml en
supposant que l'activite de l'enzyme est d'environ 5000 PU/mg.
La lyophilisation dans la pratique de l'invention peut etre effectuee
dans des conditions classiques sans aucune-limite particuliere. Ainsi,
par exemple, la temperature de lyophilisation peut etre d'une facon
adequate choisie dans la gamme d'environ -600C A +600C, la pression
dans la gamme d'environ 1,33 x 10 3 A 1,33 x lo 1 mbar, et la duree
dans la gamme d'environ 24 a 36 heures.
La composition en poudre ainsi obtenue contient la serrapeptase qui a
une activite enzymatique bien mieux stabilisee.
Ladite composition est sous la forme d'une poudre ou sous une forme
amorphe et conserve l'activite enzymatique sans aucune perte
importante et,quand'elle est utilisee pour preparer des comprimes,
elle donne des comprimes avec son activite enzymatique fortement
conservee. Ainsi, le present procede est applicable a la preparation
de compositions d'enzyme stabilise de serrapeptase.a l'echelle
industrielle.
La presente invention est illustree par les exemples descriptifs et
non limitatifs ci-apres. L'enzyme utilise a une activite d'environ 5
000 PU/mg.
Exemple 1
On ajoute une solution aqueuse de lactose a 15 percent p/v a une
solution aqueuse de serrapeptase a 10 percent p/v selon les
formulations decrites ci-dessous, et chaque melange est lyophilise
dans les conditions de temperature initiale de-550C, de pression
initiale de 1,33 x 10 - mbar, d'une temperature finale apres 27 heures
de + 600C et d'une pression finale de 1,33 x 10- mbar.
Formulation
Matiere
Serrapeptase 100 g 100 g 100 g 100 g 100 g
Lactose O g 30 g 50 g 100 g 150 g
Pour chaque produit lyophilise, on dose son activite enzymatique. Les
resultats sont indiques dans le tableau suivant.
Resultats
RubriqL A B C D E percent d 'activite residuelle du produit
lyoilise(l) 74,5 92,8 97,5 99,3 99,5 percent d'activite residuelle
apyres 4 heures a 1050C(2) 70,5 91,4 95,3 96,8 96,2 percent d'activite
residuelle apres 30 jours a 400C et
A 40 percent de HR (3) 78,1 91,5 94,8 95,8 94,9 percent d'activite
residuelle apres transformation en ccacarimes (4) 84,7 92,1 96,9 97,7
97,8
1) percent d'activite residuelle du produit lyophilise activite totale
du produit lyophilise x loo activite totale de la solution aqueuse a
10 percent p/v 2) percent d'activite residuelle apres traitement a la
chaleur activite apres traitement a la chaleur x 100 (activite avant
traitement a. la chaleur 3) percent d'activite residuelle apres
stockage dans des conditions humides activite apres stockage dans des
conditions humides x 100 (percent) activite du produit lyophilise
HR = humidite relative 4) percent d'activite residuelle apres la mise
en comprimes activite apres mise en comprimes
= x 100 (percent) activite de la matiere chargee pour la mise en
ocoorimes
I1 est clair que les produits enzymatiques lyophilises selon la
presente invention sont stables.
Formulation pour comprime
La composition de serrapeptase obtenue selon la presente invention est
transformee en comprimes par melange selon la formulation indiquee
ci-dessous, broyage, sechage, reglage de la taille des granules et
compression en utilisant un piston 5R de 7 mm de diametre,sous une
pression de 1,3tonne/cm2, chaque comprime pesant 130 mg.
Matiere brute Quantite (mg)
Composition de serrapeptase obtenue selon la presente invention 5 mg
Lactose 87
starch de mais 37,5
Isopropanol 0,015
magnesium Stearate 0,5
Exemple 2
On melange une solution aqueuse de lactose a 10 percent p/v avec une
solution aqueuse contenant 7,5 percent p/v de serrapeptase et 5
percent p/v d'acetone selon la formule indiquee ci-dessous,et on
lyophilise le melange dans des conditions de temperature initiale de
-550C, de pression initiale de 1,33 x 10 3 mbar, de temperature finale
apres 27 heures de +600C et de pression finale de 1,33 x 10- mbar.
Formulation
Matire brut Lot B a
Serrapeptase 100 g 100 g 100 g 100 g
Lactose O g 50 g 100 g 150 g
Pour les produits lyophilises, on dose leur activite enzymatique. Les
resultats sont indiques ci-dessous.
Resultats
Rubrique less than t A B C D percent d'activite residuelle du produit
lycphilise(l) 73,1 97,7 98,5 98,2
8 d'activite residuelle apres 4 heures a 1050C(2) 68,4 94,5 96,1 96,0
percent d'activite residuelle apres 30 jours a 400C et
A 40 percent de HR (3) 75,0 94,6 95,6 95,2 percent d'activite
residuelle apres trnnsformation en comprimes (4) 85,5 97,2 96,8 97,5
Les percent d'activite residuelle(l)a(4) sont tels que definis dans
l'exemple 1.
I1 est clair que les produits enzymatiques lyophilises selon la
presente invention sont stables.
Exemple 3
On melange une solution aqueuse a 15 percent p/v de lactose, ou d'une
substance indiquee ci-dessous dans le tableau,avec une solution
aqueuse de serrapeptase a 10 percent p/y,selon la formule indiquee
ci-dessous et on lyophilise le melange dans des condi tions de
temperature initiale de -550C, de pression initiale de 1,33 x 10 mbar,
de temperature finale apres 27 heures de -l + 600C et de pression
finale de 1,33 x 10 mbar.
Formulation
Lot Serrapeptase Additifs
A 100 g Lactose 100 g
B 100 g sucrose 100 g
C 100 g Gelatine 100 g
D 100 g sodium Aspartate 100 g
E 100 g sodium Glutamate 100 g
F 100 g
Pour les produits lyophilises, on dose leur activite enzymatique. Les
resultats obtenus sont indiques ci-dessous.
Resultats
Lot
RubriqueIr- A B C D E F siduelle percent d'activite residuelle du
produit lysphilise(l) 97,2 lyophilise 97,2 96,0 100,1 100,2 101,0 74,2
percent d'activite residuelle apres 4 heures a 1050C(2) 96,5 95,1 98,3
98,5 100,5 65,4 percent d'activite residuelle apres 30 jours a 400C et
A 40 percent de HR (3) 96,7 94,2 97,5 99,2 99,6 73,8 percent
d'activite residuelle apres transformation en comprimes (4) 97,4 96,6
96,8 97,9 98,1 82,5
Les percent d'activite residuelle (1) a (4) sont tels que definis dans
l'exemple 1
Il est clair que les produits enzymatiques lyophilises selon la
presente invention sont stables.
Claims
_________________________________________________________________
REVENDICATIONS
1. Procede de preparation d'une composition pulverulente contenant une
serrapeptase stabilisee, qui consiste a ajouter un ou plusieurs
elements du groupe constitue par le lactose, le sucrose, la gelatine,
l'aspartic acid ou un de ses salts et l'glutamic acid ou un de ses
sels1 a une solution ou a une suspension contenant la serrapeptase et
a lyophiliser la solution ou la suspension resultante.
2. Procede selon la revendication 1, caracterise par le fait que le
lactose est ajoute a la solution ou a la suspension contenant la
serrapeptase.
3. Procede selon la revendication 2, caracterise par le fait que le
lactose est ajoutee a raison d'environ 0,5 a 1,5 fois le poids de
serrapeptase.
4. Composition contenant une serrapeptase stabiliseefqui est obtenue
en ajoutant un ou plusieurs elements du groupe constitue par le
lactose, le sucrose, la gelatine, l'aspartic acid ou un de ses salts
et l'glutamic acid ou un de ses sels,a une solution ou a une
suspension contenant la serrapeptase et en lyophilisant la solution ou
la suspension resultante.
5. Composition selon la revendication 4, caracterisee par le fait que
le lactose est ajoute a la solution ou a la suspension contenant la
serrapeptase.
6. Composition selon la revendication 5, caracterisee par le fait que
le lactose est ajoute a raison d'environ 0,5 a 1,5 fois le poids de
serrapeptase.
7. Procede de stabilisation de la serrapeptase,qui consiste a ajouter
un ou plusieurs elements du groupe constitue par le lactose, le
sucrose, la gelatine, l'aspartic acid ou un de ses salts et l'glutamic
acid ou un de ses sels,a une solution ou a une suspension contenant la
serrapeptase et a lyophiliser la solution ou la suspension resultante.
8. Procede selon la revendication 7, caracterise par le fait que le
lactose est ajoute a la solution ou a la suspension contenant la
serrapeptase.
9. Procede selon la revendication 8,caracterise par le fait que le
lactose est ajoute a raison d'environ 0,5 a 1,5 fois le poids de
serrapeptase.
? ?
Display vertical position markers.<br/><br/>This option will display
the relative positions of currently selected key terms within the full
document length.<br/><br/>You can then click the markers to jump to
general locations within the document, or to specific discoveries if
you know whereabouts in the document they occur. [70][_]
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any discovery (or vertical marker) when you mouse over
it.<br/><br/>The preview window is draggable so you may place it
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9. The publication has been analysed and we have identified items
within it that fit into these categories.
The specific items found are listed within the category headings.
Click the section header to open that section and view all the
identitfied items in that section.
If you click the checkbox all items in that section will be
highlighted in the publication (to the right).
The best thing to do is to experiment by opening the sections and
selecting and unselecting checkboxes.
10. The main output window contains the publication full text (or part
thereof if selected).
11. The Tools section contains tools to help you navigate the
"discovered" (highlighted) items of interest.
The arrows and counter let you move through the highlighted items
in order.
12. Other tools include a "Preview" option [ [preview.png] ] and the
ability to mark the relative locations of highlighted items by
using the "Marker" option [ [marker.png] ].
Try these out to best understand how they work, and to discover if
they are of use to you.
13. Items selected from the menu on the left will be highlighted in
the main publication section (here in the middle of the screen).
Click them for further information and insights (including
chemical structure diagrams where available).
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