close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

Морфология печени гусей белой венгерской породы на фоне применения препарата Диронакс

код для вставкиСкачать
На правах рукописи
Губайдуллин Айнур Салаватович
МОРФОЛОГИЯ ПЕЧЕНИ ГУСЕЙ БЕЛОЙ ВЕНГЕРСКОЙ ПОРОДЫ НА
ФОНЕ ПРИМЕНЕНИЯ ПРЕПАРАТА ДИРОНАКС
06.02.01 – диагностика болезней и терапия животных, патология, онкология и
морфология животных
АВТОРЕФЕРАТ
диссертации на соискание ученой степени
кандидата ветеринарных наук
Уфа 2018
Работа выполнена в федеральном государственном бюджетном
образовательном
учреждении
высшего
образования
«Башкирский
государственный аграрный университет»
доктор
ветеринарных
наук,
профессор
Сковородин Евгений Николаевич
Официальные оппоненты: Домницкий Иван Юрьевич,
доктор ветеринарных наук, доцент
ФГБОУ ВО «Саратовский государственный
аграрный университет», профессор кафедры
морфологии, патологии животных и биологии
Научный руководитель
Ведущая организация
Андреева Светлана Дмитриевна,
кандидат ветеринарных наук, доцент,
ФГБОУ ВО «Вятская сельскохозяйственная
академия», доцент кафедры диагностики,
терапии, морфологии и фармакологии
ФГБОУ ВО «Оренбургский государственный
аграрный университет»
Защита состоится 7 декабря 2018 г. в 13 часов 00 минут на заседании
диссертационного совета Д 220.003.02 при ФГБОУ ВО «Башкирский
государственный аграрный университет» по адресу: 450001, г. Уфа, ул. 50летия Октября, 34.
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГБОУ ВО
«Башкирский государственный аграрный университет» и на официальном сайте
организации www.bsau.ru
Автореферат разослан «___» ___________ 2018 г.
Ученый секретарь
диссертационного совета
Каримов Фоат Ахметович
1 ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность темы исследования. Птицеводство одна из наиболее
эффективных отраслей животноводства. В России данная отрасль характеризуется
высокими темпами развития, благодаря чему наша страна занимает одну из ведущих
позиций в мировом рейтинге по производству мяса птицы и яиц (Кочиш И.И. и др.,
2005; Доктрина продовольственной безопасности Российской Федерации, 2010;
Мулдер Р., 2012; Кудрявцева Л.Н., 2015; Суханова С.Ф., Азаубаева Г.С., 2015;
Фисинин В.И. и др., 2015; Кочиш И.И., Супрунов Д.А., 2017; Фисинин В.И.,
2018). Особенное место в мясном птицеводстве занимает гусеводство, благодаря
высокой сохранности поголовья, скорости роста и другим хозяйственно-полезным
качествам (Егоров Н.П., 1989; Фисинин В.И. и др., 2005; Гоноцкий В.А., 2006;
Махалов А.Г., 2011; Мулдер Р., 2012; Галина Ч.Р., 2013; Гадиев Р. Р. и др.,
2016; Суханова С.Ф., Азаубаева Г.С., 2017; Фаррахов А.Р. и др., 2017; Buckland
R. et al., 2002).
В технологии выращивания любой птицы важную роль играет
полноценное и сбалансированное кормление. Особое внимание при этом
необходимо обращать на наличие в рационе биологически активных веществ,
витаминов, минералов, антиоксидантов, пробиотиков (Имангулов Ш.А. и др.,
2000; Кузнецов С.Г. и др., 2001; Фисинин В.И. и др., 2003; Барабой В.А.,
2004; Суханова С.Ф., 2005; Лукьянов А.Ф., 2006; Лукьянов А.Ф. и др., 2006;
Егоров И.А., 2006; Деблик А.Г. и др., 2006; Каблучеева Т.И., 2007; Бессарабов
Б.Ф., 2007; Махалов А.Г., 2008; Хохлов Р.Ю., 2009; Суханова С.Ф., Азаубаева
Г.С., 2015; Маслов М.Г., 2011; Кожевников С.В., 2014; Азаубаева Г.С.,
Суханова С.Ф., 2016; Кузнецова А.В., 2016; Ульянов Р.В., Домницкий И.Ю. и
др., 2016; Ермаков С.Е., 2017; Терентьева, Е.Ю., 2018; Diplock A.T. et al. 1973;
Noguchi T. et al. 1973; Hoekstra W.G. 1975). Коррекция рациона путем введения
кормовых добавок с целью обогащения кормов основной способ увеличения
мясной продукции, с наименьшими затратами, повышения питательных и
потребительских свойств производимой продукции что, снижает или
незначительно повышает себестоимость продукции (Суханова С.Ф., Азаубаева
Г.С., 2015).
При промышленном разведении птиц необходимо глубокое изучение
морфофункциональных особенностей функционирования органов и систем
организма птиц, что позволит усовершенствовать и создать новые
технологические приемы выращивания птицы, обеспечив максимальную
продуктивность (Кацнельсон З.С., 1959; Техвер Ю.Т., 1965; Дашиева Ц.О.,
1982; Белецкая Т.В., 1983; Бобылев А.К., 1990; Селезнев С.Б., Ветошкина Г.А.,
Овсищер Л.Л., 2001; Кирдяев В.М., 2006; Косенкова Д.А., 2006; Хохлов И.В.,
2007; Гришина Д.Ю., 2009; Жилина О.В., 2010; Курилкин В.В., 2011; Пронин
В.В. и др., 2013; Фролова Л.В., 2013; Гуральская С.В., Горальский Л.П., 2014;
Хамитова Л.Е., 2015; Степанов Л.В. и др., 2017; Шумилов И.А., 2018; Hani, M.
Hamodi. et al., 2013).
Печень играет исключительную роль в организме, участвуя в
пищеварительных и обменных процессах. Ряд работ посвящены изучению
функциональной морфологии печени домашней птицы (Донкова Н.В., 2004;
Косенкова Д.А., 2006; Ткачев Д.А., 2007; Гришина Д.Ю., 2009; Бородулина
И.В., 2009; Жилина О.В. и др., 2009; Жилина О.В., 2010; Курилкин В.В.,
2011; Давлетова В.Д., 2013; Хаматнуров А.С., Авзалов Р.Х., Ганиев С.Б.,
2013; Хамитова Л.Е., 2015). Данных, касающихся морфологии этого органа у
гусей недостаточно.
Патология печени, в том числе дистрофического характера, остаѐтся
важной проблемой ветеринарной медицины. Гепатозы широко распространены
у птиц, что связано с неполноценным кормлением, патологией обмена веществ
и поступлением токсинов (Ларичева Е.А., 1983; Айткен И.Д., 1985; Котович
И.В., 2004; Чернявская Т.С., 2005; Бакулин В.А., 2006; Байматов В.Н., 2009;
Дроздова Л.И., Кундрюкова Л.И., 2010; Бессарабов, Б.Ф. и др., 2011; Андреева
С.Д., 2012; Абрамов С.В. и др., 2018; Enders F., 1995; Groschl M., 1998;
Hochleithner, M., 2005; Vasile Macari et al., 2017; Asok Kumar, 2018; Rania A. et
al., 2018). Поэтому профилактика и лечение, изыскание способов ранней
диагностики, коррекции нарушений метаболизма является одной из актуальных
проблем (Козинец Г.И., 1998; Маркова И.В., Михайлов И.Б., Неженцев М.В.,
2001; Ивашкин В.Т. и др., 2003; Ушкалова Е.А., 2003; Аляутдин Р.Н., 2004;
Кондрахин И.П, 2004; Уша Б.В. и др., 2011; Козлов С.В., 2018).
В настоящее время имеется много препаратов и кормовых добавок,
способствующих интенсификации роста и развития животных, нормализации
обмена веществ, восстановлению печени при гепатопатиях различной
этиологии (Хорошилова И.Н., 1997; Арестов И.Г., 2001; Зайцев С.Ю, 2004;
Подымова С.Д, 2005; Бакхард К, 2005; Денисенко В.Н., Кесарева Е.А., 2006;
Гайсина, Д.А., 2007; Ивашкина В.Т., Лапина Т.И., 2008; Просекина О.В., 2009;
Бородулина И.В., 2009; Копылов А.С., 2011; Хамитова З.И., 2011; Газеев А.Р.,
2012; Еременко С.В., 2012; Давлетова В.Д., 2013; Колкунова Л.Е., 2013;
Кожевников С.В., 2014; Лощинина Е.В., 2015; Невская А.А., 2016;
Колесниченко С.П. и др., 2017; Кулаченко И.В. и др., 2017; Шамова М.М. и др.,
2017; Соколов М.Н., 2018; Сулайманова Г.В. и др., 2018; Buten M., 1989;
Carruthers S.G. et al., 2012; Byoung-Ki An, 2018). Они довольно дорогие,
некоторые из них токсичны или не приспособлены для группового
скармливания, что не дает возможность использовать их в качестве кормовых
добавок. Исходя из изложенного выше, для нашего исследования мы выбрали
печень и кровь, как индикаторы состояния обмена веществ у гусей венгерской
белой породы при применении нового синтетического отечественного
препарата Диронакс. Выполненная научно-квалификационная работа является
разделом комплексной научно-инновационной деятельности кафедры
морфологии, патологии, фармации и незаразных болезней Башкирского
государственного аграрного университета (государственный регистрационный
номер НИОКТР АААА-А17-117011210024-6).
Степень разработанности темы исследования. Сравнительную и
возрастную морфологию печени гусей, структуру этого органа при
использовании нетрадиционных рационов, а также влияние на печень
селеносодержащих добавок изучали М.С. Дюмин (2012), Л.В. Красникова
(2015), И.Н. Власова (2017), Д.А. Шишкина (2016), D. Trefny et al. (1984), E.
Lukaszewicz et al. (2016). Информация о морфологии печени гусей белой
венгерской породы в доступной литературе не обнаружена. В тоже время
данная порода, благодаря высокой выносливости и неприхотливости к
условиям содержания и кормления, интенсивному росту широко
распространена на территории Российской Федерации, особенно в фермерских
и личных подсобных хозяйствах, в том числе и в Республике Башкортостан.
Известно,
что
диизопропиламмоний
дихлорацетат
повышает
устойчивость организма к действию токсинов экзо- и эндогенного
происхождения, кислородной недостаточности, принимает участие в
окислительно-восстановительных процессах, улучшает кровообращение,
предупреждает и ограничивает развитие жировой инфильтрации печени,
профилактирует расстройства и нормализует функциональное состояние
печени, стимулирует рост животных (Шах-Меликян Т.А., 2012). Но препарат
используемый в медицине (Дипромоний) довольно дорогой, что не позволяет
применять его в животноводстве.
В Республике Башкортостан (ООО «Базис») разработан способ получения
диизопропиламмония дихлорацетат (патент РФ RU 2 480 212 C1) позволяющий
получить достаточно дешевый диизопропиламмоний дихлорацетат (препарат
Диронакс) с качеством медицинского уровня, что позволяет использовать его в
животноводстве не только как гепатопротектор, но и в качестве кормовой
добавки. Действие этого препарата изучалось на крысах, кроликах и собаках
(Дударев А.А., 2014). Установлено положительное влияние препарата
«Диронакс» на показатели роста перепелов (Усманова Д.М. и др., 2017;
Бронникова Г.З., 2018). В доступной литературе отсутствуют данные об
использовании этого препарата при выращивании гусей.
Цель и задачи. Целью нашего исследования являлось изучение влияния
препарата Диронакс на рост массы тела и внутренних органов,
морфологические и биохимические показатели крови, морфофункциональное
состояние печени гусей белой венгерской породы. В связи с этим были
определены следующие задачи:
1. Изучить интенсивность роста массы тела гусей в возрасте от одного до
шести месяцев под влиянием препарата Диронакс.
2. Определить органометрические показатели и закономерности роста
внутренних органов гусей белой венгерской породы в возрасте от одного до
шести месяцев под влиянием кормовой добавки Диронакс.
3. Установить влияние кормовой добавки Диронакс на морфологические
и биохимические показатели крови гусей в возрасте от одного до шести
месяцев.
4.
Изучить
макроскопические
показатели,
гистологические,
гистохимические и ультраструктурные изменения печени одно-, трех- и
шестимесячных гусей белой венгерской породы в норме и под влиянием
кормовой добавки Диронакс.
5. Определить экономическую эффективность применения препарата при
откорме гусей.
Научная новизна полученных результатов настоящей работы
заключается в том, что впервые проведено комплексное исследование
функциональной морфологии печени гусей венгерской белой породы в
посэмбриональном онтогенезе в норме и под влиянием препарата Диронакс.
При этом учитывался рост массы тела и, на этом фоне, изучалось развитие
сердца, органов иммунной системы птицы в период интенсивного
формирования. Подробно изучены гематологические показатели гусей от
одного- до шестимесячного возраста под влиянием препарата Диронакс, а
также анатомические, гистологические, гистохимические и ультраструктурные
изменения печени одно-, трех- и шестимесячных гусей белой венгерской
породы в норме и под влиянием кормовой добавки Диронакс.
Теоретическая и практическая значимость работы. Результаты
исследования убедительно доказывают тот факт, что препарат Диронакс,
используемый в качестве кормовой добавки, способствует ускорению роста и
развития гусей за счет оптимизации морфофункционального состояния
печени и профилактики развития сначала паренхиматозной, а в последствии
и стромальной дистрофии органа. Полученные результаты могут быть
использованы в учебном процессе на ветеринарных и зооинженерных
факультетах, а также при выполнении научно-исследовательских работ, при
написании учебников, учебных пособий и монографий. Морфометрические
эквиваленты функционирования паренхиматозных органов могут служить
основой для научных рекомендаций использования нового отечественного
синтетического препарата Диронакс в качестве кормовой добавки, а также
для дальнейших исследований в этой области. Знание установленных
морфологических изменений будет способствовать разработке способов
оптимизации обмена веществ при откорме и способствовать интенсивному
росту и развитию птицы, внедрению этих способов в производство.
Методология и методы исследования. Основой методологии
исследования явилась научно обоснованная постановка проблемы и
комплексный функционально-морфологический подход к изучению влияния
препарата Диронакс на организм гусей. Работа выполнена на кафедре
морфологии, патологии, фармации и незаразных болезней ФГБОУ ВО
«Башкирский государственный аграрный университет», в ООО «Башкирская
птица» Благоварского района Республики Башкортостан.
В работе использовали современные объективные методы исследования:
анатомические (масса тела, препарирование и описание анатомических
особенностей органов гусей венгерской белой породы), органометрические
(масса и размеры органов), гематологический анализ, гистологические,
гистохимические и электронномикроскопические методы морфологического
анализа. Количественные показатели обрабатывали биометрически с
использованием параметрических и непараметрических методов биологической
статистики.
Положения, выводимые на защиту.
1. Динамика массы тела гусей, в возрасте от одного до шести месяцев,
под влиянием кормовой добавки Диронакс.
2. Закономерности органометрических изменений внутренних органов
гусей белой венгерской породы в возрасте от одного до шести месяцев под
влиянием кормовой добавки Диронакс.
3. Влияние кормовой добавки Диронакс на морфологические и
биохимические показатели крови гусей в возрасте от одного до шести месяцев.
4. Влияние кормовой добавки Диронакс на функциональную морфологию
печени гусей белой венгерской породы.
Степень достоверности и апробация результатов. Исследования
выполнены методически правильно с использованием современных
объективных методик исследования, в том числе комплексом
морфологических методов, позволяющих определять материальную основу и
дифференцировать патологические, компенсаторно-приспособительные и
иммунноморфологические процессы, развивающиеся в тканях и органах
гусей. Достоверность полученных результатов подтверждена статистической
обработкой.
Основные положения диссертации доложены и обсуждены на:
всероссийской научно-практической конференции с международным участием,
посвященной памяти доктора ветеринарных наук, профессора Х.Х. Абдюшева
(Уфа, 2015); международной научно-практической конференции, посвященной
70-летию Краснодарского научно-исследовательского ветеринарного института
(Краснодар, 2016); всероссийской научно-практической конференции с
международным участием «Современные направления инновационного
развития ветеринарной медицины, зоотехнии и биологии (Уфа, 2016);
всероссийской научно-практической конференции с международным участием,
посвящѐнная 100-летию профессора К.А. Васильева (Улан-Удэ, 2018); XIV
Конгрессе Международной Ассоциации Морфологов (Астрахань, 2018).
Материалы и некоторые результаты исследований используются в
учебном
процессе
и
научно-инновационной
деятельности
кафедр
морфологического профиля аграрных вузов Российской Федерации.
Полученные результаты внедрены в производственную деятельность ООО
«Башкирская птица» Благоварского района Республики Башкортостан при
выращивании гусей белой венгерской породы, а также выпущены научнопрактические рекомендации «Применение Диронакса для повышения
продуктивности в гусеводстве», утвержденные Управлением ветеринарии
Республики Башкортостан.
Личный вклад соискателя. Организация эксперимента, взятие крови,
организация и проведение убоя экспериментальных животных, отбор, фиксация
материала, заливка, микротомирование, окраска срезов и морфологический
анализ, морфометрия, а также статистическая обработка результатов
выполнялись в условиях кафедры морфологии, патологии, фармации и
незаразных болезней Башкирского ГАУ лично автором. Научнопроизводственный опыт был организован и проведен в ООО «Башкирская
птица» Благоварского района Республики Башкортостан лично соискателем.
Исследования проведены под научным руководством доктора
ветеринарных наук, профессора, заведующего кафедрой морфологии,
патологии, фармации и незаразных болезней Башкирского ГАУ Сковородина
Е.Н., который оказывал научно-методическую помощь в проведении
исследований и анализе полученных результатов.
Публикации результатов исследований. Положения диссертационной
работы достаточно полно отражены в 7 научных статьях, в том числе 3 статьи
были опубликованы в рецензированных научных журнала входящих в список
ВАК РФ. Выпущены научно-практические рекомендации.
Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 173
страницах машинописного текста и включает в себя введение, обзор
литературы, собственные исследования, включающие разделы: материал и
методы исследований, результаты собственных исследований, обсуждения
результатов
исследований,
заключение,
предложения
производству,
перспективы дальнейшего использования, список литературы и приложения.
Список литературы включает 306 источников, в том числе 44 иностранных.
Диссертация иллюстрирована 70 рисунками и содержит 12 таблиц.
2 ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ
2.1 Материалы и методы исследований
Работа выполнена на кафедре морфологии, патологии, фармации и
незаразных болезней ФГБОУ ВО «Башкирский государственный аграрный
университет» в период с 2013 по 2018 годы и является разделом комплексной
НИР кафедры (регистр. номер НИОКТР АААА-А17-117011210024-6).
В опыте были использованы гуси белой венгерской породы в возрасте от
одного до шести месяцев. Были сформированы две группы: опытная и
контрольная. Гусята в возрасте 1 месяц, подобранные по принципу аналогов,
были разделены на 2 группы, по 30 птиц в каждой группе. Птице опытной
группы в ходе эксперимента ежедневно с кормом давали кормовую добавку
Диронакс в дозе 5 мг/кг живой массы. Отечественный препарат Диронакс
синтезирован в ООО «Базис» (г. Уфа) под руководством доктора технических
наук Б.П. Струнина (патент РФ RU 2 480 212 C1). По химической природе и
биологической активности он имеет элементы сходства с пангамовой кислотой,
оказывает липотропное действие, улучшает детоксикационную функцию
печени и стимулирует окислительные процессы.
В ходе эксперимента производилось ежемесячное взвешивание гусей
контрольной и опытной групп. После убоя птицы исследовались тушки и
внутренние органы, особенно подробно изучали строение печени. После
препарирования
проводили
взятие
внутренних
органов
для
органометрического, гистологического и электронно-микроскопического
исследований. Массу органов определяли с использованием электронных весов
PW-250x0,05g (погрешность измерений 0,05 грамма). Длину органов измеряли
с помощью нитки с последующим определением длины отрезка. Подсчитывали
абсолютный прирост установленных показателей, среднесуточный прирост,
относительный прирост по формуле Броди.
Для установления влияния Диронакса на обменные процессы в организме
гусей было проведено морфологическое и биохимическое исследование крови.
Для изучения микроскопических изменений в печени опытных и
контрольных гусят у месячных, трехмесячных и шестимесячных гусей после
убоя, вырезали кусочки и фиксировали их в 10%-ном водном растворе
нейтрального
формалина,
жидкости
Карнуа.
Гистологическую
и
гистохимическую обработку материала проводили по общепринятым методам.
Кусочки обезвоживали и заливали в парафин. Срезы толщиной 5-6 мкм после
депарафинации окрашивали гематоксилином и эозином. Гликоген и
нейтральные гликозаминогликаны в срезах, полученных из кусочков,
зафиксированных в жидкости Карнуа, выявляли по Мак-Манусу. Срезы,
полученные на замораживающем микротоме окрашивали суданом черным В и
суданом III. При микроскопии, для определения объемов гепатоцитов и их
ядер, с элонгацией от 1,2 до 2, применяли формулу К. Ташкэ (1980), для чего с
помощью окуляр-микрометра измеряли большой (L) и малый (B) диаметры
клеток и их ядер. Относительные объемы паренхимы и стромы печени
измеряли в срезах методом точечного счета с помощью программы Nets2.
Микрофотографирование проводили с помощью микроскопа и цифровой
фотокамеры NiconCoolPix 4500. Электронную микроскопию печени проводили
по общепринятой методике. Полученные количественные показатели
подвергали статистической обработке в соответствии с ГОСТ 11.004-74.
Достоверность различий показателей определяли по критерию Стьюдента.
Производственные испытания кормовой добавки Диронакс проведены в
ООО «Башкирская птица» Благоварского района Республики Башкортостан. В
производственном опыте были использованы гуси венгерской белой породы. У
гусей был свободный доступ к проточной воде и корму. Зоогигиенические и
технологические параметры выращивания соответствовали технологическим
нормам. Гусята в возрасте один месяц, подобранные по принципу аналогов,
были разделены на две группы, по сто птиц в каждой. Опытная и контрольная
группы птиц находились в одинаковых условиях ухода, кормления и
содержания. Птице опытной группы в ходе эксперимента ежедневно с кормом
давали кормовую добавку Диронакс в дозе 5 мг/кг живой массы. Определяли
прирост живой массы, а также затраты на выращивание гусей. Рассчитывали
прибыль и экономическую эффективность применения препарата.
2.2 Результаты исследований
Влияние препарата Диронакс на рост массы тела гусей. В период
наблюдения динамика роста живой массы контрольных и опытных гусей
увеличивалась синхронно, но вместе с тем, на протяжении всех стадий
исследования, гуси, получавшие препарат, превосходили своих аналогов из
контрольной группы по массе. За время исследований средняя живая масса
птицы увеличилась в 2,5 раза в контроле и в 2,8 раз в опыте. Рост массы тела к
60 суткам постнатального онтогенеза был выше в опытной группе. Прирост за
этот период составил 1602 г в опытной группе и 1402 г в контроле. В
дальнейшем рост массы тела гусей опытной группы по абсолютным
показателям и относительному приросту достоверно превышал аналогичные
изменения массы тела гусей контрольной группы. К шестимесячному возрасту,
средняя масса тела опытных гусей достоверно превышала контрольную группу
на 498 г и достигала 4112±1,24 г.
Относительный прирост массы тела гусят в опытной группе уже за
первый месяц опыта на 6% превзошел аналогичный показатель в контрольной
группе и составил 71,2%. К шестому месяцу скорость роста постепенно
снижалась и достигала 4,4% и 4,9% в контрольной и опытной группах
соответственно. Препарат Диронакс способствует достоверному увеличению
прироста живой массы молодняка птицы.
Препарат положительно действует на рост и развитие организма птицы,
что наиболее чѐтко прослеживается при изучении формирования внутренних
органов. В связи с этим дальнейшей задачей наших исследований было
изучение особенностей роста и развития внутренних органов гусей.
Влияние препарат Диронакс на рост и развитие органов гусей. У
гусей венгерской белой породы печень бурого или темно-коричневого цвета,
она располагается в грудобрюшной полости. С верхушкой сердца печень
граничит в дорсо-краниальном направлении. В дорсо-каудальном направлении
печень контактирует с краниальным краем мышечного желудка. Передняя
поверхность печени гладкая, выпуклая. В вентро-краниальном направлении она
обращена к брюшной стенке. Сложно разделенная висцеральная поверхность в
дорсо-каудальном направлении направлена к внутренним органам.
В норме передний край печени тупой, а задний и боковые края острые.
Неглубокой краниальной и глубокой каудальной вырезками, орган разделен на
две основные доли, которые соединены между собой на висцеральной
поверхности. У месячных гусят обе доли печени имеют треугольную форму. В
дальнейшем правая доля приобретает вытянутую ромбовидную форму, левая не
изменяется.
На висцеральной поверхности медиальной части левой доли печени
выявляется промежуточный отросток овальной формы. На правой доле
имеются небольшие сосцевидный и промежуточный отростки, которые
располагаются выше и ниже ворот печени соответственно. Желчный пузырь у
гусей довольно крупный и имеет вытянутую форму, расположен на правой доле
печени. От правой доли печени к пузырю подходит желчный проток, по
которому поступает желчь.
Форма печени неправильная. Это обусловлено давлением со стороны
внутренних органов. Так сердце в области тупого края формирует углубление
треугольной формы. Острый край правой доли накрывает часть
двенадцатиперстной кишки и треть поджелудочной железы, острый край левой
доли печени покрывает переднюю часть мышечного желудка. Железистый
желудок располагается под левой долей печени, под правой лежит желчный
пузырь, имеющий вытянутую овальную форму, но не выходящий за пределы
доли. С этим связано то, что на поверхностях обеих долей обращенных к этим
органам имеются участки вдавления.
Извлекали печень из грудобрюшной полости и немедленно подвергали еѐ
процедуре взвешивания. Корреляционный анализ полученных в ходе этого
процесса данных показал, что рост массы органа протекает параллельно с
ростом живой массы гусей. Так же, как и живая масса, увеличение массы
печени гусей контрольной и опытной групп идет неравномерно в разные
периоды постнатального онтогенеза. По показателям массы печени
подопытные гуси превосходят аналоги из контрольной группы. При этом
печень не имела макроскопических признаков дистрофических изменений
(закругленные края, более светлую окраску и тусклую поверхность разреза), в
отличии от контрольной группы. В более поздние сроки макроскопически мы
отмечали признаки жировой дистрофии, что проявлялось увеличением
размеров органа с охряно-желтой окраской. Это не сопровождалось появлением
фиброзных изменений стромы органа. Они проявлялись наличием
макроскопически различимых соединительнотканных структур, бугристой
поверхностью органа. Для окончательной диагностики наших наблюдений
провели гистологическое и гистохимическое исследование кусочков органа.
Более интенсивный рост печени отмечали у гусят опытной группы. Уже
через месяц использования кормовой добавки увеличение массы печени было
достоверно выше (в контроле 54,1 г, в опыте 66,11 г), о чем свидетельствует и
высокий относительный прирост массы органа. В дальнейшем увеличение
массы органа гусят опытной группы стабилизировалось, абсолютный и
относительный приросты к четырем-, пяти- и шестимесячному возрасту был
даже ниже по сравнению с контролем. Это объясняется более ранним
формированием дефинитивной структуры органа и развитием на этом этапе
дистрофических изменений, сопровождающихся увеличением роста массы
органа в конце откорма гусей. Тем не менее, у шестимесячных гусей опытной
группы масса печени превышала аналогичный показатель контрольной группы
на 15,1 г. К тридцати суткам постэмбрионального онтогенеза масса печени по
отношению к массе тела составляет 4,8% в опытной группе. В дальнейшем этот
показатель уменьшается в обеих группах. Это свидетельствует о интенсивном
росте гусей опытной группы под влиянием кормовой добавки.
У гусей белой венгерской породы сердце расположено несколько правее,
чем у большинства млекопитающих, и частично прикрыто воздухоносными
мешками. Верхушка сердца расположена между долями печени и мышечным
отделом желудка. В целом, увеличение массы и относительного прироста
сердца на всем протяжении эксперимента соответствует аналогичным данным
печени. Уже на второй месяц у гусей опытной группы отмечается более
значительное увеличение массы органа, по сравнению с контрольной группой.
Такое изменение массы сердца регистрируется до шестимесячного возраста
гусей и здесь масса сердца гусей, получавших Диронакс, превышала
аналогичный показатель контрольной группы на 4,2 г.
Для полноценного развития организма птиц очень важна устойчивость к
инфекционным заболеваниям. В этой связи мы исследовали структуру
центральных органов иммунитета гусей. Установили, что под влиянием
кормовой добавки Диронакс отмечалось снижение явлений акцидентальной
инволюции тимуса, что отражалось интенсивным увеличением массы органа.
Наибольшее увеличение массы тимуса отмечалось ко второму месяцу, так
среднемесячный прирост массы органа составил в контрольной группе 4,3 г, а в
опытной 4,9 г. В дальнейшем интенсивность роста тимуса снижается и
достигает в шестимесячном возрасте 0,9 г в контрольной группе гусей и 0,6 г –
в опытной, что свидетельствует о более выраженных процессах возрастной
инволюции тимуса на фоне интенсивного роста организма.
Относительный прирост массы тимуса достигал максимального значения
в возрасте два месяца в опытной группе (в контрольной группе - 141%, а в
опытной – 146%). К шестимесячному возрасту этот показатель резко снижается
и достигает значений 6,7% и 4,3 % (в опытной и контрольной группах
соответственно). Относительная масс тимуса к массе тела с возрастом
увеличивается, но особенно интенсивно к двухмесячному возрасту. В опытной
группе этот показатель в первые два месяца выше контрольной группы, а в
дальнейшем он стабилизируется и становится меньше по сравнению с
контролем.
Масса бурсы гусей увеличивается равномерно до шестого месяца.
Наибольшее увеличение массы бурсы отмечалось ко второму месяцу, так
среднемесячный прирост массы органа составил в контрольной группе 0,5 г, а в
опытной 0,7 г. В дальнейшем интенсивность роста бурсы снижается и
достигает в пятимесячном возрасте 0,1 г (в опытной группе) и в шестимесячном
возрасте до 0,1 г (в контрольной группе), что свидетельствует о более
выраженных процессах возрастной инволюции органа на фоне интенсивного
роста организма. Отношение массы бурсы к массе тела максимально в
месячном возрасте, снизившись к двухмесячному возрасту это показатель
остается стабильным, что соответствует закономерностям формирования
гуморального иммунитета у птиц и отражает более поздние сроки инволюции
этого органа по отношению к тимусу.
Наибольшее увеличение массы селезенки отмечалось ко второму месяцу,
так среднемесячный прирост массы органа составил в контрольной группе 1,4
г, а в опытной 1,8 г. В дальнейшем интенсивность роста селезенки снижается и
стабилизируется в последующие возрастные периоды. В опытной группе
среднемесячный прирост органа выше чем в контроле.
Отношение массы селезенки к массе тела минимально в месячном
возрасте. Затем этот показатель повышается и остается относительно
стабильным на протяжении всего эксперимента, что отражает важную
гемопоэтическую роль органа. В опытной группе этот показатель выше, что
свидетельствует о положительном влиянии препарата на гемопоэз.
Относительный прирост массы тела и органов по Броди характеризует
скорость увеличения разновеликих показателей за равные промежутки
времени. Установили, что на протяжении изученного периода скорость роста
снижается, но разными темпами. Интенсивнее всего растет тимус. Это
объясняется интенсивной функцией этого органа после вылупления. Ниже
всего скорость роста печени, которая приближается к скорости роста массы
тела. Аналогичные закономерности отмечаются и в опытной группе. Скорость
роста по месяцам максимальна с первого по второй месяцы постнатального
онтогенеза, особенно у тимуса. Минимальна скорость роста к шестому месяцу,
особенно у печени. Что касается сравнения контрольной и опытной групп, то
очевидны следующие закономерности: масса гусей опытной группы и их
органов растет быстрее, но снижается на месяц раньше, что свидетельствует о
более быстром созревании органов и систем организма гусей опытной группы,
а также дистрофическими процессами у гусей контрольной группы,
сопровождающихся инфильтрацией и фиброзными изменениями.
Влияние препарат Диронакс на морфологические и биохимические
показатели крови гусей. После использования кормовой добавки Диронакс,
морфологические показатели крови были в пределах физиологической нормы.
Так, количество эритроцитов у месячных гусей было равно 2,03±0,48 х 1012/л в
контрольной группе и 2,11±0,37х 1012/л в опытной. В течение опыта данный
показатель практически не изменялся у подопытных птиц и к 6-ти месяцам
составлял 2,33±0,43 х 1012/л (контроль) и 2,47±0,28 х 1012/л (опыт).
Концентрация гемоглобина у гусей опытной группы была выше по сравнению с
контролем в среднем на 3,75 %. Причем максимальный достоверный (при
P<0,5) показатель был отмечен в возрасте 120 и 180 дней, в группах,
получавших Диронакс. Он составил 116,03±1,29 г/л и 114,21±1,33 г/л, что было
больше контроля на 6,3% и 3,7 %, соответственно. На протяжении всего опыта
количество тромбоцитов не выходило за пределы физиологической нормы, а
также не имело достоверной разницы с исходными показателями. Так, в начале
эксперимента количество тромбоцитов в контрольной группе составило
36,12±0,96 х109/л, а в опытной - 36,23±0,84 х109/л. К концу опыта уровень
тромбоцитов составлял 37,48±0,82 х109/л (контроль) и 37,88±0,93 х109/л (опыт).
Количество лейкоцитов во все сроки исследования оставалось в пределах
нормы и составляло 21,08±0,79 х109/л 24,95±0,83 х109/л (контроль 1 и 6
месяцев, соответственно) и 22,12±0,91х109/л и 24,86±0,92х109/л (опыт – 1 и 6
месяцев, соответственно).
Изучение биохимических показателей сыворотки крови гусей указывало
на положительное влияние кормовой добавки Диронакса на процессы обмена
веществ в организме птиц. Количество общего белка в сыворотке крови гусей в
опытных группах, получавших кормовую добавку Диронакс, было выше
контроля во все сроки опыта в среднем на 5,7%. С возрастом, содержание белка
в сыворотке крови в опытной группе повышалось по сравнению с контрольной.
К концу эксперимента этот показатель составлял 51,88±0,42 г/л (5 месяцев) и
51,69± 0,37 г/л (6 месяцев), что оказалось выше контроля на 10,0% и 8,7%
соответственно, оставаясь при этом в пределах физиологической нормы.
Комбинация в сыворотке крови фракций альбуминов и глобулинов (белковый
индекс – А/Г коэффициент) в сумме характеризует собой интенсивность
белкового обмена в организме. Так, добавка в рацион Диронакс (опытная
группа) повышала белковый индекс по сравнению с контролем в среднем на
18,1% (6 месяцев). Содержание альбуминов и глобулинов, оставаясь в пределах
физиологической нормы, после ввода в рацион Диронакс, повысилось. Так,
количество альбуминов в сыворотке крови гусей в возрасте один месяц
составило 17,07±0,18 г/л в контрольной группе и 18,34±0,21 г/л в опытной
группе, а к концу опыта 19,01±0,28 г/л и 22,63±0,14г/л, соответственно.
Содержание глобулинов к концу эксперимента составляло 29,06±0,33г/л в
опытной группе (P<0,05), тогда как в контрольной группе данный показатель
составлял 28,51±0,37 г/л.
При вводе в рацион препарата Диронакс повышается уровень
минеральных веществ. Так, количество фосфора в крови гусей в возрасте один
месяц составляло в контрольной группе 1,91±0,13 мМ/л и 2,03±0,11 мМ/л, в
опытной группе. К концу опыта данный показатель составлял 2,29± 0,14 мМ/л и
2,31±0,21 мМ/л, соответственно. Содержание кальция в начале эксперимента
составляло 2,43±0,28 мМ/л (контроль) и 2,65±0,31 мМ/л (опыт), а к 6 месяцам 2,88±0,29 мМ/л и 2,97±0,33 мМ/л в контрольной и опытной группе,
соответственно (данные достоверны по отношению к контролю). Следует
отметить, что соотношение кальция и фосфора во всех группах опытной и
контрольной было в пределах физиологической нормы.
Таким образом, по результатам морфологического, биохимического
исследований можно сделать вывод, что ввод в рацион кормовой добавки
Диронакс улучшаются метаболические процессы в организме гусей.
Гистологические, гистохимические и ультраструктурные изменения
печени гусей на фоне применения препарата Диронакс. Печень гусей
состоит из стромы и паренхимы. Образованная тонковолокнистой
соединительной тканью строма развита сравнительно слабо. При малом
увеличении без использования специальной окраски она определяется только
по периферии органа, где формирует тонкую капсулу. В области триад
соединительнотканная строма окружает кровеносные сосуды и образует
небольшие перегородки. Вследствие этого в печени гусей отсутствует
выраженное дольчатое строение.
Паренхима печени гусей представлена прежде всего гепатоцитами. Они
имеют многоугольную форму и содержат одно-два овальных ядра, которые
расположены несколько в стороне от центра. Каждое ядро содержит от одного
до четырех ядрышек. Гепатоциты, расположенные наиболее близко друг к
другу, формируют радиально направленные структуры – трабекулы, которые на
срезе имеют клубочковый вид. Следует отметить, что микроструктура печени
гусей имеет свои особенности в разные возрастные периоды. Гистологические,
гистохимические и электронномикроскопические методы исследования
позволили определить эти изменения, а также доказать высокую зависимость
структуры исследуемого органа от кормления.
В начале исследования провели взятие материала для исследования
микроскопической анатомии печени у гусят в возрасте один месяц. В
изучаемый срок в контрольной группе печень характеризуется выраженным
клубочково-трабекулярным строением и наличием с суженным просветом
синусоидных капилляров. Гепатоциты к месячному возрасту гусей
приобретают выраженную многоугольную форму с отчетливо выраженными
границами.
Вместе с тем, гепатоциты представляются достаточно увеличенными, с
признаками зернистой и жировой дистрофии. Это проявляется слабой
зернистостью цитоплазмы и наличием небольших вакуолей, которые при
окраске суданом окрашиваются как нейтральные жиры. Следует отметить, что
под капсулой органа вакуолизация цитоплазмы гепатоцитов развита в большей
степени.
В этом возрасте у гусят относительный объем паренхимы составляет
90,7%. На срезах отмечается наличие небольшого просвета в кровеносных
сосудах, которые умерено заполнены клетками крови, что свидетельствует об
интенсивном кровообращении. Пластинки имеют извитой ход и представлены в
виде выраженных клубочков, а не прямых пучков, как у млекопитающих.
Скопления лимфоидных клеток формируют небольшие лимфоидные узелки в
области триад. Это периферические структуры иммунной системы, которые у
птиц выполняют функцию не оформленных в отдельный орган лимфоузлов.
Гепатоциты в основном содержат одно ядро. Клетки, содержащие два
ядра встречаются крайне редко. Средний объем гепатоцитов у гусят составляет
1094,5+78,9 мкм3. Средний объем ядер гепатоцитов равен 52,4+2,7 мкм3.
Среднее ядерно-плазматическое отношение в гепатоцитах составляет 0,0499.
В крупных светлых ядрах гепатоцитов гетерохроматин расположен по
периферии. Он четкий, виден в виде тонкой полоски по внутреннему краю
оболочки ядра. Ядрышко небольшое и расположено в центре ядра. Ядрышко со
слабо выраженной ретикулярной структурой.
В электронном микроскопе четко видны эксцентрично расположенные
ядра гепатоцитов. Они округлой или овальной формы, с небольшим
коэффициентом элонгации. Ядерная мембрана имеет хорошо различимое
типичное трехслойное строение. Перинуклеарное пространство разделяется
внешней и внутренней мембраной. Оно неодинаково, имеет выраженные
расширения и сужения, что особенно хорошо выражено ближе к ядерным
порам. Оболочка ядра со стороны цитоплазмы контактирует с
многочисленными рибосомами.
В нуклеоплазме различается мелкодисперсный низкой электронной
плотности диффузный и темный гетерохроматин. Относительно больше
эухроматина, поэтому ядра светлые. Хроматин в виде утолщений располагается
по краю внутренней поверхности оболочки ядра. В нуклеоплазме определяются
хроматиновые гранулы со светлым ободком. Это информационная РНК.
Ядрышки у тридцатисуточных гусят гипертрофированы, с преобладанием в них
гранулярного компонента и с небольшими участками плотного фибриллярного
компонента, что свидетельствует об усиленном синтезе белка в печеночных
клетках.
В гепатоцитах месячных гусят цитоплазматическая сеть умеренно развита
и выявляется в виде ограниченных мембранных канальцев и везикул. Часть
мембран покрыта рибосомами (гранулярная эндоплазматическая сеть); часть
представлена мембранами, лишенными рибосом (гладкая эндоплазматическая
сеть). Пластинчатый комплекс гепатоцитов гусят состоит из небольшого числа
везикул и плоских цистерн. Последние располагаются параллельно друг к другу
на небольшом расстоянии. В гепатоцитах тридцатисуточных гусят можно
обнаружить все основные классы лизосом: первичные и вторичные,
мультивезикулярные и остаточные тельца.
В гепатоцитах тридцатисуточных гусят митохондрии диаметром до 1 µм,
имеют округлую форму. Чаще они располагаются ближе к ядру, и только
иногда ближе к синусоидальному или билиарному полюсу гепатоцита.
Митохондрии гепатоцитов гусей типичные, с небольшим числом узких,
параллельно расположенных небольших крист, которые отходят от внутренней
мембраны и простирающиеся в сторону матрикса. Они не полностью
перегораживают полость митохондрий, и не нарушают непрерывность
заполняющего его матрикса. Матрикс митохондрий гранулированный
электронно-плотный. Количество крист в митохондриях гепатоцитов
тридцатисуточных гусят
небольшое,
матрикс митохондрий
имеет
тонкозернистое гомогенное строение, в нем выявляются тонкие нити и
гранулы. Это свидетельствует о недостаточной активизации аэробного
дыхания, которое не в полной мере стало еще преобладающим компонентом
энергетической системы клетки.
Гликоген располагается в отдельных участках цитоплазмы. В этом
возрасте характерно появление в цитоплазме капель средней величины и
наличие митохондрий с разрушенными кристами. Это ультраструктурные
признаки декомпозиции мембран клетки, липофанероза и в конечном счете
развития зернистой дистрофии гепатоцитов.
Таким образом, ультраструктура печеночных клеток тридцатисуточных
гусят характеризуется признаками высокой синтетической активности. Их
дифференциация незакончена. В тоже время отмечали наличие пока еще не
выраженных и обратимых альтеративных изменений. Морфогенетический
механизм которых вероятно заключается в липофанерозе и декомпозиции
клеточных мембран. Это можно объяснить несбалансированностью рациона, а
также с поступлением токсических веществ (например, микотоксинов) с
кормом. Это в свою очередь еще раз доказывает, что необходимо применять
кормовые добавки на ранних стадиях развития с гепатопротекторными
эффектами, а также веществ препятствующих интенсивному перекисному
окислению липидов.
К трехмесячному возрасту у гусей контрольной группы относительный
объем паренхимы составляет 84,6%. В паренхиме органа обнаруживается
значительное число центральных сосудов и триад печени. В срезе
увеличивается доля стромы. Соединительнотканные компоненты хорошо
выражены, даже при малом увеличении. Фиброзные изменения выражены
слабо. В строме печени нередко можно видеть мелкие кровоизлияния, которые
напоминают очаги экстрамедуллярного кроветворения.
Вследствие извилистых ходов гепатоцитов печеночные пластинки видны
как клубочки. Средний объем гепатоцитов гусей в возрасте три месяца равен
1231,5±12,29 мкм3, их ядер – 56,65±0,55 мкм3.
Снижается ядерноцитоплазматическое отношение, которое составляет 0,0476. В ядрах
расположены один-два ядрышка довольно крупной величины, имеющих
ретикулярную структуру.
Цитоплазма гепатоцитов имеет выраженную зернистость. Границы
клеток видны неотчетливо. Гепатоциты набухшие, заметно увеличены в
объеме. Больше этот процесс выражен по периферии дольки, подальше от
центральной вены. Видны мелкие вакуоли, в которых при окраске суданом
выявляются нейтральные липиды. Значительное количество гепатоцитов
располагающихся по периферии дольки, содержат капли липидов
преимущественно средней величины.
При электронно-микроскопическом исследовании в непосредственной
близости от ядра гепатоцита отчетливо видны сильно расширенные ячейки
зернистой цитоплазматической сети. Митохондрии набухшие, лишены крист,
наиболее сильно этот процесс выражен на периферии клетки ближе к
цитоплазматической мембране. Матрикс цитоплазмы представляет собой узкие
полоски между расширенными ячейками. Здесь же разбросаны сравнительно
мелкие
ячейки
зернистой
цитоплазматической
сети.
Ближе
к
цитоплазматической мембране находятся небольшие лизосомы, имеющие
овальную форму черного цвета.
Гранул гликогена заметно мало. Располагаются они в отдельных участках
цитоплазмы клеток. А вот липиды в цитоплазме гепатоцитов лежат в виде
округлых капель средней величины с характерной полосчатой электронной
плотностью, что свидетельствует о преобладании в них триглицеридов и
нейтральных жиров.
Капилляры в дольках располагаются внутри клубочков. Очень тесно
переплетаются балки и капилляры. Все они видны на срезе как отдельные
отрезки. Стенки внутридольковых капилляров очень тонкие. Хорошо
выражены темные удлиненные ядра эндотелиоцитов, формирующих стенку
капилляров. Ядра имеют вытянутою форму, несколько выступают в просвет
капилляра. Иногда обнаруживаются открывающиеся в центральную вену устья
капилляров.
Морфометрические показатели печени гусят, получавших препарат
Диронакс (опытная группа гусей), отличались от контрольной группы. До
87,8% достоверно снижается относительный объем паренхимы, но оставаясь
тем не менее выше показателя контрольной группой на 3,2 %. Архитектоника
печени четко выражена. Тканевые структуры не имеют признаков атрофии,
хорошо выражены и развиты. Дистрофических и других альтеративных
изменений не выявляли. Нет признаков нарушений крово- и лимфообращения.
При окраске гематоксилином-эозином, или паноптическим методом
Паппенгейма, цитоплазма имеет мелкозернистую структуру, не содержит
нейтральных жиров, но хорошо выявляются вещества окрашивающиеся
суданом черным В. Это в основном фосфолипиды, являющиеся необходимы
структурами для синтеза цитоплазматических мембран.
Средний объем гепатоцитов гусят опытной группы составляет
1431,4+342,3 мкм3. Средний объем ядер гепатоцитов равен 69,2+2,4 мкм3, а
ядерно-цитоплазматическое отношение составляет 0,0506.
Объем гепатоцитов и их ядер, а также ядерно-плазматическое отношение
достоверно увеличились по сравнению с гусятами контрольной группы. В
гепатоцитах практически отсутствуют капли нейтральных липидов и
зернистость цитоплазмы.
В электронном микроскопе хорошо определяется, что эухроматин
мелкодисперсный, с низкой электронной плотностью, диффузный. А
гетерохроматин, имеющий высокую электронную плотность, четко различается
в нуклеоплазме. В нуклеоплазме преобладает эухроматин. Но увеличивается
количество примембранного гетерохроматина. Электронноплотные глыбки
становятся крупнее. Хорошо развита гладкая эндоплазматическая сеть в виде
узких мембранных канальцев и пузырьков. Это также свидетельствует об
увеличении синтеза экспортируемых в межклеточное пространство веществ.
Хорошо выражена гранулярная цитоплазматическая сеть, которая относительно
равномерно располагается по всей цитоплазме. Еѐ цистерны как бы разделены,
фрагментированы.
Эти
фрагменты
располагаются
близко
между
митохондриями или на небольшом расстоянии от них, в виде единичных
трубочек с относительно широким просветом. Они не образуют пакеты
параллельно расположенных мембран. Количество рибосом на этих мембранах
довольно значительное. А вот профили гладкой цитоплазматической сети
становятся в этом возрасте более мелкими и располагаются ближе к периферии
клетки.
В гепатоцитах трехмесячных гусят опытной группы явно больше
митохондрий. Они овальной или несколько неправильной формы со
своеобразными ответвлениями. Они имеют характерное строение. Содержат
большее число узких, радиально расположенных коротких крист, а вот матрикс
их
более
электронно-плотный
гранулированный.
Число
интрамитохондриальных крист увеличивается.
«Темных» гепатоцитов, отвечающих за синтетическую активность, в
печени трехмесячных гусят заметно больше. По сравнению со «светлыми»
клетками они содержат относительно более развитую зернистую
эндоплазматическую сеть и мало элементов гладкого эндоплазматического
ретикулума. В них больше свободных рибосом и полисом, лучше развит
пластинчатый комплекс, а в цитоплазме больше гликогена. У них лучше
развита система митохондрий. Они более крупные, и их число в 2-3 раза
превышает таковое в «светлых» гепатоцитах.
Таким образом, по сравнению с контролем объем клеток у трехмесячных
гусят опытной группы достоверно больше, что косвенно свидетельствует о
повышении морфофункциональной активности гепатоцитов. Это происходит не
за счет гиперплазии слабо дифференцированных гепатоцитов, а вследствие их
гипертрофии.
В контрольной группе гусей к шестимесячному возрасту печень
характеризуется дифференцированной структурой. В строме происходит
утолщение ретикулиновых волокон. Много тонких коллагеновых волокон
выявляются при окраске по Ван Гизону. Сеть коллагеновых волокон густая, и
волокна имеют тесную взаимосвязь друг с другом и межклеточными
компонентами органа. Это доказывает, что в органе развиваются фиброзные
изменения стромально-сосудистого компонента органа.
Гистоархитектоника печеночных пластинок нарушена, причем особенно
ярко выражена дискомплексация клеточных элементов паренхимы. Просвет
сосудов заметно сужен, за счет набухания гепатоцитов. Последние увеличены.
Выражена сетчатость и зернистость цитоплазмы. Ячейки сети имеют
различную величину. Но преобладают мелкие, которые располагаются
относительно равномерно вокруг ядра. При окраске суданом III и суданом
черным В, мы определили, что ячейки соответствуют местам расположения в
цитоплазме капель жира, который растворяется при гистологической
обработке. Перемычки между ячейками представляют собой остатки
цитоплазмы, содержащие ультраструктуры, что можно увидеть под большим
увеличением в электронном микроскопе. Ядра таких печеночных клеток, как
правило, находятся в центре, но они изменены: чаще – несколько уменьшены в
объеме, реже – даже сморщены, неправильно угловатой формы (кариопикноз).
Относительный объем паренхимы 75,3%. Фиброзно изменена строма
органа. Заметно стенки сосудов утолщены. Они с признаками мукоидного и
даже фибриноидного набухания соединительной ткани. Вероятно, это
объясняется застойными явлениями в кровеносной системе.
По ходу
кровеносных сосудов обнаруживаются скопления лимфоидных элементов в
виде лимфатических фолликулов. В то же время лимфатические узелки мелкие,
и не имеют четко выраженных соединительнотканных оболочек, отделяющих
их от гепатоцитов.
Средний объем гепатоцитов гусей в возрасте шесть месяцев у
контрольных гусят равен 1374,13±14,29 мкм3, их ядер – 59,65±0,55 мкм3.
Ядерно-цитоплазматическое отношение достоверно снижается и достигает
0,046. Это свидетельствует о низкой синтетической активности гепатоцитов.
Таким образом, к шестимесячному возрасту развивается белково-жировая
дистрофия паренхиматозных элементов печени и фибринозное набухание
стромально-сосудистого компонента с исходом в фиброз соединительной
ткани, или даже начало развития цирроза, что проявляется не только
структурными микроскопическими изменениями в органе, но и низкими
показателями роста и развития всего организма в целом у птиц контрольной
группы.
К шестимесячному возрасту у птиц, получавших кормовую добавку
Диронакс, микроскопическая структура органа выражена за счет четкой
балочно-клубочковой организация. Архитектоника сохранена и отмечается
оптимальное соотношение структурных компонентов органа. Крупные
структурированные лимфоидные узелки хорошо видны, особенно при малом
увеличении. Это показатель оптимального формирования локальной иммунной
системы печени. Значительно снижается объем паренхимы, и он составляет
84,3%. Хорошо выражена строма органа. Признаки фиброзных изменений и
стромально-сосудистой дистрофии не констатируются.
Средний объем гепатоцитов гусей опытной группы в возрасте шесть
месяцев достигает 1582,03±14,29 мкм3, а ядер 75,65±0,55 мкм3.
Ядерноплазматическое отношение снижается и достигая 0,0497. Ядра
гепатоцитов крупные светлые, с гетерохроматином, расположенным по
периферии ядра. Ядрышки небольшие, ретикулярные и расположены
преимущественно в центре нуклеоплазмы.
Форма гепатоцитов многогранная. Цитоплазма слабо зернистая без
вакуолей. Ядра расположены преимущественно по периферии клеток.
Внутридольковые синусоидные капилляры четко выражены с единичными
эритроцитами в просвете.
В электронном микроскопе особенно четко видны ультраструктурные
отличия в гепатоцитах гусей, получавших препарат Диронакс, по сравнению с
контрольной группой. Больше митохондрий содержалось в цитоплазме. Много
светлых пузырьков и цистерн с расширенными полостями цитоплазматической
сети. Митохондрии с короткими кристами и просветленным матриксом,
округлой формы. Некоторые умеренно набухшие, что свидетельствует об
активизации в них энергозависимых функций. Канальцы гранулярной
эндоплазматической сети располагались вокруг митохондрий. Заметно меньше
содержание гранул гликогена по сравнению с контролем, и они были более
дисперсными. Лизосомоподобные образования появлялись в цитоплазме. Ядра
гепатоцитов более светлые, с одним или двумя хорошо структурированными
ядрышками. Объемная доля мелкодисперсного эухроматина существенно
возрастала. Уменьшалась доля гетерохроматина. Вероятно, это связано с более
высокой степенью дифференциации и синтетической активностью.
При этом, для гусей опытной группы характерно увеличение в
цитоплазме гепатоцитов количества гранул гликогена. Уменьшается
количество капель, содержащих нейтральные жиры. Такое перераспределение
энергетического субстрата свидетельствует о дезактивации процессов
перекисного окисления липидов, трансформации энергетического обмена на
использование глюкозы. Последняя поступает не только из кровяного русла в
паренхиматозные клетки печени, а прежде всего за счет глюконеогенеза в
гепатоцитах. Следовательно, в активно функционирующих гепатоцитах,
прежде всего в «темных» возрастает потребление глюкозы в качестве субстрата
для обеспечения энергетических, синтетических и пластических процессов.
Таким образом, использование препарата Диронакс в качестве подкормки
оптимизирует функции печени, что можно видеть на световом и
ультраструктурном уровнях. Диронакс предотвращает развитие в органе
нарушений внутриклеточных механизмов метаболизма, поломок транспортных
систем, и возможно оптимизирует нейрогуморальную регуляцию обмена
веществ на уровне АРУД системы. Именно дискомплексация (липофанероз), а
не инфильтрация и трансформация, играет преобладающую роль среди
морфогенетических механизмов, способствующих развитию характерных для
дистрофий изменений.
В последующем по типу «порочного круга»
усиливается перекисное окисление липидов клеточных мембран. Вторым,
видимым проявлением метаболических нарушений, является аккумуляция
липидов и недостаточная их утилизация на фоне снижения глюконеогенеза.
Накопление липидов, выраженное в слабой степени, не влияет на функцию
клеток. А вот выраженная аккумуляция нейтральных жиров к шестимесячному
возрасту нарушает функцию гепатоцитов, что необратимо повреждает
ультраструктуры
и
внутриклеточные
окислительно-восстановительные
процессы.
Экономическая эффективность применения препарата Диронакс.
Заключительным этапом исследований была производственная проверка
эффективности применения препарата Диронакс в условиях птицефабрики. В
начале производственного опыта живая масса гусей всех групп была
одинаковой и составляла в среднем 1462±0,31 кг. Результаты контрольных
взвешиваний показали достоверную разницу между показателями живой массы
контрольной и опытной групп к шестимесячному возрасту. Превышение по
живой массе гусей в опыте за этот период составило от 9,0% до 14%. Расчѐт
экономической эффективности показал, что использование кормовой добавки
Диронакс при кормлении гусей является рентабельным. За период наблюдения,
за счѐт увеличения валового прироста живой массы птиц опытной группы,
снизилась себестоимость 1 кг прироста на 4%, прибыль от условной реализации
повысилась на 24%. В результате применения препарата Диронакс в качестве
кормовой добавки в дозе 5 мг/кг массы тела птицы в течение 150 дней было
получено 10995,6 рублей дополнительной прибыли, что соответствует
примерно 109,96 рублей на одного гуся. Таким образом, экономическая
эффективность применения препарата Диронакс, в качестве кормовой добавки
групповым методом, на один рубль затрат (стоимость препарата), по сравнению
с контрольной группой, равнялась 7,9 рублей на рубль затрат. Такая
эффективность, при массовом применении препарата на большом поголовье
гусей может принести значительную прибыль. Кроме того, устойчивость к
болезням, уровень обмена веществ и, следовательно, сохранность, по нашим
данным увеличивается, будет повышаться качество мясной продукции и
снизится ущерб от заболеваемости и падежа.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Таким образом, проведенные исследования позволили изучить влияние
нового отечественного препарата Диронакс, используемого в качестве
кормовой добавки, на рост и развитие гусей белой венгерской породы, а также
морфофункциональное состояние печени птицы, что позволило сделать
следующие выводы:
1. Изучены морфофункциональные и гематологические изменения в
организме гусей венгерской породы с месячного до шестимесячного возраста
при добавлении в рацион кормовой добавки Диронакс с целью оптимизации
обмена веществ и профилактики патологии печени. Подтверждена высокая
биологическая и профилактическая активность препарата уже в первые месяцы
применения.
2. Применение кормовой добавки Диронакс способствует интенсивному
росту массы тела гусят по сравнению с птицей контрольной группы. За время
исследований средняя живая масса птицы обеих групп увеличилась в 2,5
(контроль) и 2,8 (опыт) раза. Абсолютный прирост за этот период составил
1602 г (опыт) и 1402 г (контроль). В дальнейшем рост массы тела гусей
опытной группы по абсолютным показателям и относительному приросту
достоверно превышал аналогичные изменения массы тела гусей контрольной
группы. К шестимесячному возрасту, средняя масса тела опытных гусей
достоверно превышала контрольную группу на 498 г. Применение препарата
экономически эффективно.
3. Рост массы внутренних органов гусят протекает асинхронно по
отношению к росту массы тела. Через месяц после применения кормовой
добавки (в 2 месячном возрасте) относительный прирост массы печени, сердца,
тимуса, селезенки, бурсы имеет наибольшее значение и превосходит
показатели у гусят, в рацион которых препарат Диронакс не вводили. В период
с трех до четырех месяцев этот показатель у гусят опытной и контрольной
групп был приблизительно одинаков. А к шестимесячному возрасту
относительный прирост массы органов контрольной группы уступает уровню
опытной группы на 15-25 %.
4. Клинико-гематологические показатели гусей контрольной группы
находятся на нижнем уровне физиологической нормы. Пероральное
применение препарата Диронакс в качестве кормовой добавки стабилизирует
биохимический и иммунный статус организма птицы, что выражается в
нормализации морфологического состава крови в виде увеличения количества
эритроцитов, уровня гемоглобина и усиления лимфопоэза, а также
биохимических показатели крови в виде интенсификации белкового и
минерального обменов.
5. Микроскопическая анатомия и ультраструктура печени гусей уже в
первые месяцы постэмбрионального онтогенеза характеризуется признаками
незавершенной дифференциации гепатоцитов и в тоже время высокой
синтетической активности, осуществляемой за счет эндогенных запасов
фосфолипидов и липопротеидов, а также экзогенных веществ, нарушение
обмена которых ведет к обратимым дистрофическим изменениям паренхимы
органа. В дальнейшем, на фоне прогрессирования декомпозиции
ультраструктур и развития липофанероза, развиваются нарушения
гемодинамики и фиброзные изменения стромы органа. Применение кормовой
добавки оптимизирует структурную организацию печени и предотвращает
жировую дистрофию гепатоцитов и фиброзную дегенерацию стромы органа.
Наши наблюдения являются морфологическим обоснованием необходимости
применения кормовой добавки в рацион гусей.
6. В результате применения препарата Диронакс в качестве кормовой
добавки в дозе 5 мг/кг массы тела птицы в течение 150 дней было получено
10995,6 рублей дополнительной прибыли. Экономическая эффективность
применения препарата Диронакс в качестве кормовой добавки групповым
методом на один рубль затрат, по сравнению с контрольной группой, достигает
7,9.
ПРЕДЛОЖЕНИЯ ПРОИЗВОДСТВУ
Для ускорения роста и развития гусей, профилактики нарушения обмена
веществ и патологии печени целесообразно применять кормовую добавку
Диронакс в дозе 5 мг на килограмм живого веса в течение всего периода
откорма. Препарат задавать птице с кормом или небольшим количеством воды.
Использование препарата регламентируется временной инструкцией по
применению Диронакса в птицеводстве в порядке широких производственных
испытаний, утвержденной Управлением ветеринарии по Республики
Башкортостан.
2. Полученные результаты внедрены в производственную деятельность
ООО «Башкирская птица» Благоварского района Республики Башкортостан
Республики Башкортостан при выращивании гусей белой венгерской породы, а
также в учебный процесс и научно-инновационную деятельность
морфологических кафедр аграрных ВУЗов.
3. Научно-практические рекомендации «Применение Диронакса для
повышения продуктивности в гусеводстве», утвержденные Управлением
ветеринарии Республики Башкортостан, содержат конкретные предложения для
внедрения препарата Диронакс в производство в качестве кормовой добавки.
ПЕРСПЕКТИВЫ ДАЛЬНЕЙШЕГО ИСПОЛЬЗОВАНИЯ
При определении влияния биологически активных веществ и
фармакологических препаратов на организм птицы целесообразно определять
не только массу тела, но и проводить исследование внутренних органов на
макро- и микроскопическом уровнях с определением основных
морфометрических показателей. Результаты проведенного исследования могут
быть использованы как «морфологический статус» органов в возрастном
аспекте и под влиянием биологически активных препаратов.
2. Материал диссертации рекомендуем использовать при чтении лекций,
проведении лабораторно-практических занятий со студентами специальностей
Ветеринария и Зоотехния и в научно-исследовательской деятельности Вузов и
лабораторий, а также при написании разделов справочных руководств по
патоморфологии, физиологии питания и внутренним незаразным болезням
птицы.
3. Тема требует дальнейшей разработки в плане использования препарата
Диронакс при выращивании других видов птиц, особенно видов с высокой
скоростью роста и интенсивным обменом веществ, который не компенсируется
применяемыми рационами.
СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ
Статьи в рецензируемых научных журналах и изданиях
1. Губайдуллин, А.С. Влияние гепатопротектора Диронакс на рост и
развитие гусей / А.С. Губайдуллин, Е.Н. Сковородин, Б.П. Струнин, И.Р.
Кильметова // Ветеринария Кубани. 2015. 5. С.20-21.
2. Губайдуллин, А.С. Микроморфология печени гусей при использовании
гепатопротектора Диронакс / А.С. Губайдуллин, Н.В. Гребенькова, Е.Н.
Сковородин // Известия Оренбургского государственного аграрного
университета. 2016. 2 (58). С.84-85.
3. Гребенькова, Н.В. Влияние кормовой добавки Диронакс на
морфологические и биохимические показатели крови гусей / Н.В.
Гребенькова, Е.Н. Сковородин, А.С. Губайдуллин, И.Р. Кильметова //
Известия Оренбургского государственного аграрного университета. 2017.
6 (68). С.191-193.
Статьи в других научных изданиях
4. Губайдуллин, А.С. Влияние гепатопротектора на рост и развитие
внутренних органов гусей / А.С. Губайдуллин, Е.Н. Сковородин //
Современные направления инновационного развития ветеринарной
медицины, зоотехнии и биологии: материалы всероссийской научнопрактической конференции с международным участием, посвященной
памяти доктора ветеринарных наук, профессора Х.Х. Абдюшева (октябрь
2015 г.). Уфа, 2015. С.84-87.
5. Губайдуллин, А.С. Ультраструктурная характеристика печени гусей при
использовании гепатопротектора «Диронакс» / А.С. Губайдуллин, Е.Н.
Сковородин, И.Р. Кильметова // Актуальные проблемы современной
ветеринарной науки и практики: материалы международной научнопрактической конференции, посвященной 70-летию Краснодарского
научно-исследовательского ветеринарного института (июнь 2016 г.).
Краснодар, 2016. С.19-21.
6. Губайдуллин, А.С. Микроморфологические показатели печени гусей при
использовании гепатопротектора «Диронакс» / А.С. Губайдуллин, Н.В.
Гребенькова, Е.Н. Сковородин, И.Р. Кильметова // Актуальные проблемы
современной ветеринарной науки и практики: материалы международной
научно-практической
конференции,
посвященной
70-летию
Краснодарского научно-исследовательского ветеринарного института
(июнь 2016 г.). Краснодар, 2016. С.22-24.
7. Губайдуллин, А.С. Эффективность применения кормовой добавки
Диронакс при откорме гусей белой венгерской породы / А.С.
Губайдуллин, Н.В. Гребенькова, И.Р. Кильметова // Проблемы видовой и
возрастной морфологии животных: материалы Всероссийской научнопрактической конференции с международным участием, посвящѐнная
100-летию профессора К.А. Васильева (июнь 2018 г.), Улан-Удэ. С. 67-69.
Научно-практические рекомендации
8. Применение Диронакса для повышения продуктивности в гусеводстве:
научно-практические рекомендации / Е.Н. Сковородин, Н.В. Гребенькова,
И.Р. Кильметова, Б.П. Струнин, А.С. Губайдуллин. Уфа: Управление
ветеринарии Республики Башкортостан, 2017. 22 с.
Лицензия РБ на издательскую деятельность № 0261 от 10 апреля 1998. Подписано в печать __.__.2018 года. Формат 60×84
1/16. Бумага типографская. Гарнитура Таймс. Усл. печ. л. ____ Усл. изд. л. ____Тираж 100 экз. Заказ № ___ Издательство
Башкирского государственного аграрного университета. Типография Башкирского государственного аграрного
университета. Адрес издательства и типографии: 450001, г. Уфа, ул. 50 лет Октября, 34
Документ
Категория
Без категории
Просмотров
3
Размер файла
350 Кб
Теги
белое, породы, печени, гусев, препарата, венгерский, морфология, диронакс, применению, фонет
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа