close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

Клинико-микробиологическое обоснование применения фотодинамической терапии и шинирования зубов в комплексном лечении заболеваний пародонта

код для вставкиСкачать
На правах рукописи
МАЛАЗОНИЯ Тамар Тайгеровна
Клинико-микробиологическое обоснование применения
фотодинамической терапии и шинирования зубов
в комплексном лечении заболеваний пародонта
14.01.14. – стоматология (медицинские науки)
03.02.03. – микробиология (медицинские науки)
АВТОРЕФЕРАТ
диссертации на соискание ученой степени
кандидата медицинских наук
Москва - 2018
Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном
образовательном
учреждении
высшего
образования
«Московский
государственный медико-стоматологический университет имени А.И.
Евдокимова» Министерства Здравоохранения Российской Федерации
(ФБГОУ ВО «МГМСУ им. А.И. Евдокимова» Минздрава России).
Научные руководители:
заслуженный
врач
РФ,
доктор
медицинских
наук,
профессор Арутюнов Сергей Дарчоевич
заслуженный работник высшей школы РФ, доктор медицинских наук,
профессор Царев Виктор Николаевич
Официальные оппоненты:
Рабинович Илья Михайлович – заслуженный врач РФ, доктор
медицинских наук, профессор, Федеральное государственное бюджетное
учреждение
«Центральный
научно-исследовательский
институт
стоматологии
и
челюстно-лицевой
хирургии»
Министерства
здравоохранения
Российской
федерации,
отдел
терапевтической
стоматологии, заведующий отделом.
Ильин Вячеслав Константинович – доктор медицинских наук, профессор,
Федеральное
государственное
бюджетное
учреждение
науки
Государственный научный центр Российской Федерации «Институт медикобиологических проблем» Российской академии наук, отдел санитарногигиенической безопасности человека в искусственной среде обитания,
лаборатория микробной экологии человека, заведующий отделом.
Ведущая организация: Федеральное государственное бюджетное
образовательное
учреждение
дополнительного
профессионального
образования «Институт повышения квалификации Федерального медикобиологического агентства» Министерства здравоохранения Российской
Федерации (ФГБОУ ДПО «ИПК ФМБА» Минздрава России).
Защита состоится «________» _________________ 2018 г. в «____» ч. на
заседании диссертационного совета 208.041.07 при ФГБОУ ВО «МГМСУ им.
А.И. Евдокимова» Минздрава России по адресу: 127006 Москва ул.
Долгоруковская д. 4. Лекционный зал им. Н.А. Семашко.
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГБОУ ВО «МГМСУ
имени А.И. Евдокимова» Минздрава России (127206 Москва ул. Вучетича
д.10а) и на сайте http://dissov.msmsu.ru.
Автореферат разослан «___» _________2018 г.
Ученый секретарь диссертационного совета
кандидат медицинских наук, доцент
Дашкова Ольга Павловна
2
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность исследования
Пародонтит и в ХХI веке является одной из самых частых причин
потери зубов у взрослого населения. На поздних стадиях данная патология
становится все более медико-социальной, т.к. формируется психологическая
подавленность, возникают затруднения в общении, снижается уровень
социальной и профессиональной адаптации, качества жизни [Янушевич О.О.,
Кузьмина
Э.М.,
2009;
Арутюнов
С.Д.,
2010].
Этиологические
и
патогенетические факторы заболеваний пародонта связаны с отношением
человека к своему здоровью, с особенностями соматического статуса,
местным и общим иммунитетом, воздействием окружающей среды,
формированием устойчивых ассоциаций микробных патогенов, создающих
условия для развитием хронического пародонтита [Арутюнов С.Д. и др.,
2005, 2016; Царев В.Н. и др., 2009; Мартиросян В.Г., 2011], что в конечном
итоге наряду с потерей зубов отягощает течение коморбидных заболеваний
[Плескановская Н.В. и др., 2013; Пименова М.П., 2015].
Комплексное лечение хронического пародонтита в настоящее время
базируется
на
проведении
профессиональной
гигиены,
эрадикации
пародонтопатогенной флоры и нейтрализации ее токсического действия с
помощью антимикробных, противовоспалительных и детоксицирующих
препаратов [Дмитриева Л.А., 2003; Орехова Л.Ю., 2004; Щербакова Д.С.,
2012].
Несмотря на определенные успехи необходимо отметить паллиативный
характер проводимого лечения с неизбежными прогнозируемыми периодами
обострения. Общеизвестно развитие резистентности микроорганизмов к
лекарственным средствам. Появление новых поколений антибиотиков
сопровождается быстрым развитием устойчивых штаммов, в том числе среди
пародонтопатогенных видов микробов [Николаева Е.Н. и др., 2011; Царёв
В.Н., 2013; Ипполитов Е.В., 2016]. Антибиотикотерапия не оправдывает
возлагаемых
аллергических
на
нее
надежд
реакций,
из-за
развития
различных
побочных
дисбактериоза,
эффектов,
гиповитаминоза,
гепатотоксичности, иммуносупрессивного действия и т.д. [Пономарёва А.Г.,
2015]. Поэтому продолжается разработка эффективных профилактических
мероприятий и комплексной пародонтологической терапии [Бачимова К.К.,
3
2004; Грудянов А.И., Овчинникова В.В., 2007; Иорданишвили А.К., 2010;
Upton M., 2012].
Особый интерес представляет метод фотодинамической терапии (ФДТ),
который широко применяется в последнее десятилетие [Рисованная О.Н.,
2005; Попова А.Е., 2014; Бриль Е.А., Смирнова Я.В. и др., 2015; Konopka К.,
Goslinski Т., 2007; Garcez A.S., Nunez S.C. et al., 2008; Lulic M., Leiggener
Gorog I. et al., 2009], что связано с ее высокой антимикробной
эффективностью [Орехова Л.Ю., 2013; Ефремова Н.В., 2014]. Основу ФДТ
составляет
способность
некоторых
химических
препаратов
—
фотосенситайзеров (ФС) в результате светового излучения определенной
длины волны (узкополосного инфракрасного или лазерного) вызывать
фотохимическую реакцию с высвобождением отрицательно заряженных
радикалов, обладающих выраженной бактерицидностью. В стоматологии для
ФДТ используют ФС различных групп, преимущественно в виде гелей для
аппликаций, чаще всего производные хлорина Е6 [Гадзацева З.М., 2010;
Лукавенко А.А., 2011; Крихели Н.И., Попова А.Е., 2013; Кречина Е.К.,
Ефремова Н.В. и др., 2015; Marotti J., Aranha A.C. et al., 2009]. Комплекс
метаболических процессов уменьшает альтерацию и экссудацию вследствие
воспаления,
стимулирует
пролиферацию
и
регенерацию
тканей.
Светодиодный аппарат уменьшает воспаление и увеличивает время ремиссии
[Губин М.А., 2006; Грудянов А.И., Овчинникова В.В., 2007; Попова А.Е.,
2014; Tribble G.D., 2010]. Поэтому этот метод рассматривается как
возможная альтернатива использованию антибиотиков и антисептиков
[Соколова Е.Ю., 2017], однако его изучение находится в начальной фазе:
поиск оптимальных доз, путей введения, кратности применения, частоты
повторных курсов комплекса антиоксидантной и лазерной терапии, что
обусловливает необходимость дальнейших исследований.
Степень разработанности темы исследования
Лечению заболеваний пародонта посвящено множество работ ввиду
распространенности этой патологии и ее социальной значимости. Однако
существующие методы не всегда эффективны, поскольку в основном
способствуют устранению какого-либо одного этио-патогенетического
фактора.
4
Одним из оптимальных методов является ФДТ воспалительных
заболеваний пародонта [Джанчатова А.Р., 2013; Лукавенко А.А., 2011;
Ефремова Н.В., 2005; Попова А.Е., 2014]. В данной работе исследовалось
воздействие ФДТ на ткани пародонта при различных лазерах и ФС, однако в
них не изучено влияние ФС толуидинового синего различных концентраций
на микробные ассоциации патогенов.
Наряду с антибактериальной терапией важно устранение подвижности
зубов, которое неизбежно возникает (в той или иной степени) при
заболеваниях пародонта [Белоусов Н.Н., 2000; Ряховский А.Н., 2000; Котенко
С.А., 2008]. Авторы совершенствовали иммобилизацию подвижных зубов и
изучали ее влияние на ткани пародонта. К недостаткам практически всех шин
относятся
необходимость
препарирования
твердых
тканей
зубов,
формирование микробной биопленки на композите из-за механических
свойств
конструкционного
материала
и
плохой
гигиены,
неудовлетворительная эстетика и дискомфорт для пациента вследствие
значительной толщины конструкции. А.Н. Никурадзе (2015) предложил
принципиально
новые
стоматологических
шины,
фрезерованные
CAD/CAM—технологий,
с
использованием
которые
не
требуют
препарирования твердых тканей зубов, не препятствуют врачебным
манипуляциям в тканях пародонта, не вызывают у пациента дискомфорта в
связи с минимальной толщиной (0,5 мм) и достаточно эстетичны.
В данной работе изучалось комплексное патогенетическое лечение
заболеваний пародонта с применением антибактериального воздействия ФДТ
ФС толуидинового синего и иммобилизации подвижных зубов путем
двухэтапного шинирования для достижения эффективной долгосрочной
положительной динамики.
Цель исследования
Повышение
хроническим
эффективности
пародонтитом
комплексного
средней
степени
лечения
тяжести
пациентов
с
с
учетом
микробиологической и биомеханической составляющих патогенеза, с
использованием фотодинамической терапии и иммобилизации подвижных
зубов с помощью индивидуальных фрезерованных шин.
5
Задачи исследования
1. Изучить в эксперименте применение фотодинамической терапии с
использованием
современных
методов
автоматизированного
культивирования и мониторинга микробных популяций в поддерживаемых
культурах пародонтопатогенной (Porphyromonas gingivalis, Fusobacterium
spp., Prevotella spp., грибы Candida) и условно-патогенной микробиоты
полости рта (Streptococcus mutans, S. sanguinis, Actinomyces spp.).
2. Экспериментально
обосновать
целесообразность
проведения
фотодинамической терапии с фотосенсибилизатором толуидиновый синий
для комплексного лечения пациентов с хроническим пародонтитом средней
степени тяжести и установить оптимальное время воздействия (экспозицию)
с учётом полимикробного состава возбудителей.
3. Сравнить
антимикробное
действие
клинического
применения
фотодинамической терапии с фотосенсибилизатором толуидиновый синий на
микробную обсеменённость биоплёнки десны и пародонтального кармана
при хроническом пародонтите средней степени тяжести с группами
сравнения (без использования фотодинамических технологий).
4. Разработать конструкцию индивидуальной фрезерованной шины для
иммобилизации зубов в комплексном лечении пациентов с пародонтитом
средней степени тяжести.
5. Оценить эффективность предложенного протокола комплексного
лечения
больных
разработанной
хроническим
конструкции
пародонтитом
индивидуальной
с
использованием
фрезерованной
шины
и
фотодинамической терапии с фотосенсибилизатором толуидиновый синий по
данным мониторинга клинико-микробиологического статуса.
Научная новизна исследования
В
представленной
работе
впервые
с
помощью
методов
автоматизированного культивирования бактериальных популяций доказан
бактерицидный и фунгицидный эффект фотохимической реакции с ФС
толуидиновым синим при воздействии светодиодного источника FotoSan.
Уточнены механизмы фотохимического воздействия на представителей
пародонтопатогенной группы (A. actinomycetemcomitans, P. gingivalis, P.
intermedia, T. forsythia) и
условно-патогенные микроорганизмы
рта,
6
установлена степень их эрадикации в разных режимах и при различной
экспозиции.
Определено ингибирующее действие ФД с ФС толуидиновым синим на
микробную обсеменённость биоплёнки десны и пародонтального кармана
при хроническом пародонтите в сравнении с традиционным лечением.
Впервые
применены
усовершенствованные
фрезерованные
индивидуальные конструкции шины, которые могут быть эффективны в
комплексном лечении хронического пародонтита с использованием ФДТ.
Впервые в комплексном патогенетическом лечении пациентов с
хроническим
пародонтитом
целесообразность
сочетания
средней
ФДТ
степени
с
ФС
тяжести
подтверждена
толуидиновым
синим
и
фрезерованными шинами.
Теоретическая и практическая значимость
Усовершенствована
помощь
пациентам
с
хроническими
воспалительными заболеваниями пародонта.
Определены
видовой
состав
основных
пародонтопатогенов,
чувствительных к фотохимической реакции с ФСм толуидиновым синим.
Установлены различия в чувствительности бактериальной и грибковой
микробной флоры к фотодинамическому воздействию с ФС.
Обосновано практическое применение разных режимов и экспозиции
светодиодного воздействия с ФС при хроническом пародонтите средней
степени тяжести.
Разработаны модификации шины и обосновано их применение в
структуре
комплексного
генерализованного
патогенетического
пародонтита
средней
лечения
степени
хронического
тяжести
для
иммобилизации подвижных зубов, что позволяет повысить эффективность
терапии и пролонгировать сроки ремиссии заболевания.
Научные положения, выносимые на защиту
1. Моделирование
фотодинамического
воздействия
с
помощью
светодиодного аппарата FotoSan в эксперименте in vitro со штаммамиклиническими изолятами свидетельствует о бактерицидном действии
фотохимической реакции на возбудителей пародонтита и сопутствующую
условно-патогенную флору, что позволяет обосновать использование
предложенных режимов и экспозиции для фотодинамической терапии с
7
фотосенсибилизатором толуидиновым синим при комплексном лечении
пародонтита.
2. Максимум и минимум антимикробного эффекта фотодинамического
воздействия
различается
у
прокариотических
(бактериальных)
и
эукариотических (грибы) клеток, что требует коррекции режима воздействия
и экспозиции при наличии в пародонтальном кармане грибов рода кандида в
значительном количестве (или при кандида-ассоциированном пародонтите).
3. Комплексное патогенетическое лечение пациентов с хроническим
пародонтитом средней степени тяжести с использованием фотодинамической
терапии с фотосенсибилизатором толуидиновым синим в сочетании с
предложенными конструкциями шин-протезов повышает эффективность
лечения по сравнению с группами сравнения.
Личный вклад автора
Личный вклад автора заключается в самостоятельном осмотре 348
пациентов,
организации
процесса
обследования
и
дополнительных
консультаций всех пациентов. Автор участвовала в инструментальнолабораторных исследованиях, лично проводила определение гигиенического
и пародонтологического статуса, взятие материала для микробиологических
исследований, принимала активное участие в проведении микро— и
молекулярно-биологических
исследований,
экспериментальной
части
исследования, лечении пациентов, включая традиционные методы, ФДТ и
шинирование подвижных зубов. Автор анализировала материал, готовила
патентно-информационную документацию и осуществляла статистическую
обработку полученных данных.
Внедрение результатов исследования
Основные положения диссертационной работы внедрены в учебный
процесс
на
кафедрах
пропедевтики
стоматологических
заболеваний,
микробиологии, вирусологии, иммунологии, лаборатории молекулярнобиологических исследований НИМСИ ГБОУ ВПО МГМСУ им. А.И.
Евдокимова,
а
также
в
практику
клинической
работы
Клинико-
диагностического центра ФГБОУ ВО МГМСУ им. А.И. Евдокимова.
Материалы диссертации используются в процессе обучения студентов,
интернов, клинических ординаторов и аспирантов.
8
Работа выполнена по плану НИР МГМСУ, государственная регистрация
№01200411435.
Апробация работы
Основные положения диссертации доложены на совместном заседании
кафедр пропедевтики стоматологических заболеваний, пародонтологии,
микробиологии, вирусологии, иммунологии, лаборатории молекулярнобиологических исследований НИМСИ МГМСУ (протокол №? от 20.11.2017),
на Всероссийской научно-практической конференция с международным
участием, посвященной 70-летию образования в МГМСУ им. А.И.
Евдокимова кафедры общей гигиены «Инновационные здоровьесберегающие
технологии в медицине и в образовании» (Москва, 2016), XXXVIII итоговой
научной конференции молодых ученых МГМСУ имени А.И. Евдокимова
(Москва, 2016), научной сессии молодых ученых и студентов «Медицинские
этюды»
(Нижний
стоматологии
и
Всероссийском
Новгород,
2016),
Международном
челюстно-лицевой
хирургии
стоматологическом
форуме
«Стоматологическое
образование.
Наука.
конгрессе
(Ереван,
2016),
Дентал-Ревю
Практика»
по
XIV
2017
(Москва,
2017),
Всероссийской итоговой 76-й научной конференции студентов и молодых
ученых им. Н.И. Пирогова (Томск, 2017).
Публикации
По материалам диссертации опубликовано 8 печатных работ, в том
числе 2 - в журналах из перечня ВАК РФ. Получены 2 патента РФ на
изобретения.
Объем и структура работы
Диссертация состоит из введения, глав «Обзор литературы», «Материал
и методы исследования», 2 глав собственных исследований, обсуждения
результатов и заключения, выводов, практических рекомендаций и списка
литературы.
Материалы
диссертации
изложены
на
181
странице
машинописного текста. Работа иллюстрирована 89 рисунками и содержит 18
таблиц. Список литературы включает 151 отечественных и 276 иностранных
источников.
9
СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ
Материалы и методы исследования
Всего обследовано 348 пациентов в возрасте 18—75 лет (217 женщин и
131 мужчина) с диагнозом хронический генерализованный пародонтит
(ХГП), из них на основании критериев включения, не включения и исключения
принято на лечение 120 чел в возрасте 25—60 лет (73 женщины и 47 мужчин)
с диагнозом ХГП средней степени тяжести. Из них сформированы 4 группы
однородные по полу, возрасту, клинической картине и общесоматическому
статусу.
В
работе
использовали
экспериментальные
микробиологические,
клинико-лабораторные и клинические методы исследования.
Экспериментальное микробиологическое исследование проводили для
решения одной из основных задач диссертационной работы – оценки
эффективности
фотодинамического
воздействия
на
микроорганизмы
микробиоты рта. Использовали ФС толуидиновый синий в количестве 100
мкл
(в
стандартном
разведении
для
лечебной
процедуры)
стоматологического набора для аппарата FotoSan. Мониторинг исследуемых
культур проводили на аппаратном комплексе спаренных биореакторов
«Реверс-Спиннер RTS-1» (BioSan, Латвия) с фотодинамической обработкой
до начала культивирования и в логарифмической фазе роста [Царёв В.Н. и
др.,
2016].
Для
культивирования
микроорганизмов
в
биореакторе
использовали жидкие питательные среды производства HiMedia Laboratories
Pvt. Limited (Индия): Wilkins Chalgren Anaerobic Broth (М863) – для
анаэробных бактерий и микроаэрофильных стрептококков; Brain Heart
Infusion Broth (М210) – для дрожжевых грибов кандида.
Полученные пробы инкубировали в термостате при t=37оС в течение
60 мин. Далее пробы помещали в штатив и обрабатывали лучами красного
спектра в течение 30 и 60 сек, используя специальный эндодонтический
наконечник светодиодного аппарата FotoSan, путём погружения последнего в
среду реакции. Контрольную пробу не обрабатывали.
Для
определения
чувствительности
выделенных
штаммов
к
фотодинамическому воздействию (ФДВ) применяли модификацию метода
серийных
разведений,
разработанную
на
кафедре
микробиологии,
10
вирусологии, иммунологии МГМСУ им. А.И. Евдокимова [Царёв В.Н. и др.,
2016].
После сеанса ФДВ пробы помещали в анаэростат при t=37оС и
культивировали в течение 48 ч. (анаэробные культуры — 7 суток), после чего
из них делали количественные посевы на 5% кровяной гемин-агар, повторно
инкубировали при тех же условиях. Далее учитывали количество колоний на
аппарате для автоматизированного подсчёта колоний Scan 500 (Франция) и
определяли эффективность ФДВ для каждой пробы по сравнению с
контролем. Для последнего использовали также стандартные способы
оценки: диско-диффузионный метод на плотной питательной среде (5%
кровяной гемин-агар) и кассетный микрометод (разведения).
Для эксперимента использовали 9 клинических изолятов представителей
пародонтопатогенных бактерий и нормальной микробиоты полости рта,
выделенных у пациентов с ХП и здоровых детей, в том числе:
грамотрицательные анаэробные – Aggregatibacter actinomycetemcomitans,
Porphyromonas
gingivalis,
Fusobacterium
nucleatum
/
periodonticum,
грамположительные микроаэрофильные – Streptococcus sanguis, S. mutans,
Actinomyces naeslundii, дрожжевые грибы рода кандида – Candida albicans, C.
krusei, C. glabrata.
Клинико-лабораторные исследования включали бактериологический
метод и молекулярный (ПЦР-диагностику) при изучении образцов материала
субгингивальной бляшки.
Бактериологическое
исследование
патогенного
содержимого
пародонтальных карманов (субгингивальной бляшки) проводили согласно
алгоритму, разработанному на кафедре микробиологии, вирусологии,
иммунологии МГМСУ им. А.И. Евдокимова [Царёв В.Н. и др., 2013]. Взятие
материала осуществляли утром натощак до процедуры чистки зубов из
пародонтального кармана экссудат зоны десневой борозды или содержимое
кармана) и пришеечной части биоплёнки зубов 1.6, 2.6 (до применения
химиотерапевтических
препаратов
или
специальной
гигиенической
обработки) с помощью стерильного бумажного эндодонтического штифтов
стандартного размера (№30). При выделении и идентификации дрожжевых
грибов
пользовались
традиционными
методическими
рекомендациями
[Лабинская А.С., Курбатова И.В. и др., 2013]. При микроскопической оценке
11
результатов
применяли
стереомикроскоп
и
многофункциональный
бинокулярный микроскоп с цифровым дисплеем и цифровой фотокамерой
Nikon (Япония). После получения чистой культуры использовали наборы для
идентификации Biochemical Identification Test Kits (Himedia Labs Pvt. Limited,
Индия).
Молекулярно-биологическое изучение патологического содержимого
пародонтальных карманов (субгингивальной бляшки) осуществляли с
помощью мультиплексной полимеразной цепной реакции с диагностическим
набором «МультиДент-5» НПФ «ГенЛаб» (Россия). Исследования проводили
на базе лаборатории молекулярно-биологических исследований НИМСИ
ГБОУ ВПО МГМСУ им. А.И. Евдокимова Минздрава РФ.
Клинические
методы
включали:
анкетирование
пациентов
(анамнестические данные и сведения о сопутствующей соматической
патологии,
аллергических
стоматологическое
и
обследование
иммунодефицитных
принятых
на
лечение
состояниях),
пациентов
с
диагнозом ХГП средней степени тяжести, составивших четыре группы по 30
человек в каждой, мониторинг пародонтологического статуса на протяжении
двух лет, лучевую (рентгенологическую) диагностику по показаниям.
Однородность групп обеспечили критерии включения, не включения и
исключения. Всем пациентам была проведена комплексная патогенетическая
терапия с учетом этиологических факторов, включающая обучение правилам
индивидуальной гигиены полости рта с последующим контролем, удаление
над- и поддесневых зубных отложений и полировку корня, устранение
местных травматических факторов (пломбирование придесневых кариозных
полостей, восстановление межзубных контактов, устранение дефектов
коронок зубов путем прямых реставраций и с помощью современных видов
зубных протезов), местную фармакотерапию, общее фармакотерапевтическое
и укрепляющее лечение. Пациентам в группе 1 осуществляли только
традиционную клинико-фармакологическую терапию, в группе 2 наряду с
этим — временную иммобилизацию подвижных зубов посредством
конструкций фрезерованных шин с обязательным включением устойчивых
зубов, избирательно пришлифовывая преждевременные окклюзионные
контакты. В группе 3, наряду с традиционным лечением проводили ФДТ с
ФС толуидиновым синим, а в группе 4 — комплексное лечение, включавшее
12
традиционную терапию, иммобилизацию подвижных зубов фрезерованными
полимерными шинами и ФДТ с ФС толуидиновым синим.
Для проведения ФДТ использовали фотодиодный аппарат FotoSan 360
(Великобритания). При этом ФС толуидиновый синий в рабочей дозе
наносили на обрабатываемую область (в пародонтальный карман) и
поражённую ткань облучали светодиодным источником в течение 30 с в
соответствии с инструкцией фирмы-производителя.
Повторное обследование пациентов из групп исследования проводили
через 1, 6 и 12 месяцев после лечения.
Полученные
результаты
обрабатывали
с
помощью
методов
параметрической и непараметрической статистики, использовав критерии
Стьюдента и хи-квадрата (достоверные различия считали при р < 0,05).
Основные результаты исследования и их обсуждение
Экспериментальное исследование. Для ответа на вопрос –
какой
механизм (бактерицидный или бактериостатический) реализуется в процессе
ФДВ на микробные популяции мы впервые изучили кривые роста популяций
пародонтопатогенного вида Porphyromonas gingivalis, а также дрожжевых
грибов
Candida
автоматического
glabrata
с
использованием
культиватора-биореактора
программируемого
Revers-Spiner
(Латвия),
позволяющего мониторировать рост культуры в режиме реального времени.
В соответствии с инструкцией о применении аппарата фирмы FotoSan
инкубацию культур с ФС толуидиновым синим проводили 40 с, а облучение
аппаратом 30 с. Продолжительность культивирования составляла 3-е суток
(рис. 1).
Обращает на себя внимание, что при параллельном культивировании
двух проб: №1 – без ФДВ (контроль) и №2 с ФДВ (экспозиция 30 с) первые 2
фазы кривых в параллелях практически не отличались. В течение двух часов
шла адаптация бактерий к питательной среде, и кривые располагали почти
параллельно оси Х (абсцисс). Затем, со 2-го по 6-й час культивирования
началось постепенное увеличение численности популяций в обеих пробах, а
далее
наблюдался
резкий
скачок
кривой,
соответствующий
фазе
логарифмического роста. Оптическая плотность взвеси культур достигала
максимума на 14-й час культивирования: 5,43 и 5,28 OD для проб №1 и №2
соответственно. Далее, во время стационарной фазы роста, наблюдалось
13
главное различие: кривая в пробе №1 оставалась на высоком уровне 6,04—
7,77 OD, в то время как в пробе №2 она начала неуклонно снижаться, и c 30го часа культивирования оптическая плотность не превышала 5,2 OD.
Porphyromonasgingivalis
10
OD
8
6
4,39
3,82
4
7,8 7,77 7,77
7,3 7,53 7,71
6,69 6,8 7,07
6,37
6,23
5,78 6,04
5,43
5,28 5,62 5,61 5,37 5,2 5,13 5,12 5,19 5,18 5,17 5,12 5,11 5,16 5,16
2
0
0,8
0,05 0,12
0,04
0,03 0,46
0,3 2
6 10
14
18
22
26
30
34
38
42
46
50
54
58
62
66
ВРЕМЯ,H
K
FDT
Рис. 1. Кривые культивирования штамма Porphyromonas gingivalis (K - контроль,
FDT – фотодинамическое терапевтическое воздействие)
Кривые роста штамма клинического изолята Candida glabrata
отличались более длинной лаг-фазой, чем в предыдущем бактериальном
образце, и переход в фазу логарифмического роста наблюдали после 12 ч
культивирования (рис. 2).
9
K
Candidaglabrata
FDT
8
7
6,6 6,596,61
6,3 6,4 6,54
OD
6
5
4
3
2
1
4
8,168,15 8,1 8,098,088,13
7,647,717,78
7,347,39 7,5
6,9 7,04
5,775,755,745,765,745,77
5,385,45
5,1 5,2 5,355,37
5
4,78
4,5 4,6 4,7 4,7
3,05
2,54
1,23
0,15
0,060,02
,050,02
,050,09
0 0,05
0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 40 44 48 52 56 60 64 68 72 76 80 84 88 92 96
ВРЕМЯ(Ч)
Рис. 2. Кривые культивирования штамма Candida glabrata (K - контроль, FDT –
фотодинамическое терапевтическое воздействие)
14
Окончание экспоненциальной фазы роста в контрольной пробирке
отмечалось на 20-й час, с четким переходом в стационарную фазу.
Максимальная концентрация была достигнута на 76-й час культивирования –
8,16 McF. При ФДТ с аппаратом FotoSan экспоненциальная фаза закончилась
на 28-й час с показанием оптической плотности 4,5 McF, максимальная
концентрация в стационарной фазе была отмечена также на 76-й час, однако
была существенно меньше, чем в контрольной кривой (5,77 McF).
Таким образом, экспериментальные данные подтверждают, что ФДТ
дает не только бактериостатический, но и выраженный фунгистатическим
эффект.
Клиническую эффективность применения фрезерованных шин и ФДТ
у пациентов группы 4 оценивали на основании жалоб и показателей
гигиенических и пародонтологических индексов, а также данных клиниколабораторного исследования, включавших результаты бактериологического
и молекулярно-биологического методов исследования.
Во всех группах достоверно снизились показатели указанных индексов,
отсутствовали жалобы на кровоточивость и болезненность непосредственно
после проведенного лечения, что говорит о ликвидации воспаления. Однако в
отдаленные сроки (6 мес), эти показатели возрастали в группе 1 и 3. В группе
2 такая клиническая картина наблюдалась через 12 мес.
По нашему мнению, в группах 1 и 3 сказывалось неблагоприятное
влияние травматической окклюзии и неравномерного перераспределения
нагрузки на ослабленный пародонт, что вело к дальнейшему обострению
заболевания и ухудшению его течения. Сравнивая гигиенические индексы в
группе 2, необходимо отметить, что непосредственно после шинирования их
значения остались примерно на одном уровне с таковыми в группах 1 и 3
(табл. 1).
Таким образом, результаты проведенных исследований свидетельствуют
об улучшении пародонтологического статуса и стабилизации процесса во
всех группах принятых на лечение пациентов. Наиболее значимые
показатели в группе 4, где наряду с традиционным методом лечения
проводили шинирование подвижных зубов в комплексе с ФДТ с
использованием ФС толуидиновый синий. На основании полученных данных
клинически подтвержден тот факт, что при ХГП средней степени тяжести
15
предпочтителен комплексный метод лечения, который может снизить риск
осложнений и увеличить сроки ремиссии.
Таблица 1.
Среднестатистические показатели гигиенического и пародонтологического статусов
пациентов в исследуемых группах
Индексы
OHI-S
PHP
PMA
PBI
SBI
Глубина
пародонт
ального
кармана
Пациенты,
группа
1
2
3
4
До
лечения
2,0+0,3 [0,1; 6,0]
2,6+0,2 [0,2; 5,6]
2,3+0,2 [0,1; 5,8]
2,8+0,3 [0,2; 6,0]
p МU
1
2
3
4
p МU
1
2
3
4
p МU
1
2
3
4
p МU
1
2
3
4
p МU
1
2
3
4
p МU
p>0,05
0,7+0,1 [0; 1,0]
0,6+0,1 [0; 1,0]
0,8+0,2 [0; 1,0]
0,7+0,2 [0; 1,0]
p>0,05
42,6+5,8 [3; 43,0]
47,5+4,9 [5; 45,0]
35,7+6,2 [4; 41,0]
49,1+6,7 [6; 42,0]
p>0,05
2,6+0,1 [0; 10,0]
2,4+0,1 [0; 9,0]
2,3+0,1 [0; 11,0]
2,6+0,1 [0; 10,0]
p>0,05
2,5+0,4 [0; 14,0]
2,5+0,5 [0; 15,0]
2,2+0,3 [0; 12,0]
2,4+0,6 [0; 13,0]
p>0,05
3,6+0,2 [0,4; 6,0]
3,8+0,2 [0,4; 6,5]
4,3+0,2 [0,4; 8,0]
4,1+0,2 [0,4; 7,5]
p>0,05
Сроки мониторинга после лечения (месяц)
1
6
12
0,3+0,1
0,8+0,2
1,2+0,2
0,5+0,2
0,9+0,2
1,2+0,1
0,4+0,1
0,6+0,1
1,1+0,1
0,3+0,1
0,3+0,1*
0,4+0,1*
p>0,05
0,2+0,1
0,3+0,1
0,3+0,1
0,1+0,1
p>0,05
29,3+4,7
21,6+3,8
15,4+5,2
10,3+3,4
p>0,05
0,6+0,1
0,1+0,1*
0,2+0,1*
0,2+0,1*
p>0,05
0,4+0,1
0,2+0,05
0,3+0,1
0,1+0,05*
p>0,05
3,5+0,2
3,8+0,2
4,2+0,2
4,1+0,2
p>0,05
p>0,05 *P<0,05
0,5+0,1
0,3+0,1
0,4+0,1
0,1+0,1*
p>0,05 *P<0,05
24,7+5,2
15,0+3,5
10,1+2,8*
9,2+3,2*
p>0,05 *P<0,05
0,9+0,1
0,3+0,1*
0,4+0,1*
0,2+0,1*
p>0,05 *P<0,05
0,8+0,2
0,4+0,2
0,3+0,05*
0,1+0,05*
p>0,05 *P<0,05
3,6+0,2
3,8+0,2
4,2+0,2
4,1+0,2
p>0,05
p>0,05 *P<0,05
0,8+0,1
0,6+0,1
0,7+0,1
0,3+0,1*
p>0,05 *P<0,05
32,4+5,3
26,5+4,8
24,5+4,3
11,3+4,1*
p>0,05 *P<0,05
1,5+0,1
0,9+0,1*
1,3+0,1*
0,3+0,1*
p>0,05 *P<0,05
1,6+0,2
0,8+0,1
0,9+0,2
0,2+0,1*
p>0,05 *P<0,05
3,8+0,2
3,8+0,2
4,5+0,2
4,1+0,2
p>0,05
Примечание: * различия достоверны по критерию Манна-Уитни
Клинико-лабораторное исследование. Учтя, что низкую эффективность
различных методов комплексного лечения хронического пародонтита
современные авторы связывают с активностью пародонтопатогенных
бактерий и дрожжевых грибов, мы изучили частоту выявления генетических
маркеров бактерий пародонтопатогенных видов 1-го и 2-го порядка с
помощью ПЦР (через 1 и 12 мес), а также выделили дрожжевые грибы рода
Candida с помощью культурального микологического метода исследования.
16
ПЦР-диагностика, культуральное бактериологическое и микологическое
исследования (качественное и количественное) были проведены у 116
пациентов в фиксированные сроки: до начала комплексного лечения, а затем
повторно через 1 и 12 мес от начала исследования.
Частота выявления маркеров пародонтопатогенных видов 1-го порядка
была довольно высокой. Исходные данные для A. actinomycetemcomitans
составляли 10,7—16,6 %. При повторных исследованиях через 1 и 12 мес в
группах 1 и 2 статистически достоверных изменений не обнаружено. В
группах 3 и 4 через 1 мес маркеры A. actinomycetemcomitans не выявлены
вообще, а через 12 мес определены только у 1 пациента группы 3 (3,3 %).
Разница с показателем частоты до начала лечения была статистически
достоверна.
Наиболее высокая исходная частота выделения отмечена у Tannerella
forsythia 75—83 %. Через 1 мес в группах 1 и 2 наблюдалась тенденция к
некоторому снижению показателя, а через 12 – он достигал уровня 60,7 и
64,3 % соответственно, то есть разница была статистически недостоверной. В
группах 3 и 4 через 1 мес показатель снижался до 13,3 и 10 %, а через 6—12
мес составлял 20 и 10 % соответственно. Разница с показателем частоты до
начала лечения в группах 3 и 4 была статистически достоверна.
Также
довольно
высокой
была
исходная
частота
выделения
генетических маркеров Porphyromonas gingivalis (50—57 %). Через 1 мес в
группах 1 и 2 показатели практически не менялись, через 12 мес картина
была аналогичной. В группе 3 через 1 мес отмечали снижение показателя до
23 %, а затем вновь его повышение до 42,9 %. Разница была статистически
недостоверна. Только в группе 4 через 1 мес показатель достоверно снижался
до 6,6 %, через 12 мес несколько увеличивался и составлял 20 %, но при этом
всё-таки статистически достоверно отличался от исходных данных до
лечения.
Частота выявления маркеров пародонтопатогенных видов 2-го порядка
была существенно ниже. Так, исходная частота выделения генетических
маркеров Prevotella intermedia составляла 25—32 %. В группе 1 наблюдалась
некоторая тенденция к снижению показателя через 1 мес с последующим
повышением до 17 %. В остальных группах наблюдали благоприятную
динамику. Так, через 12 мес частота выявления в группе 2 снижалась в 3 раза
17
и составляла 10,7 %, в группах 3 и 4 – почти в 4 раза до 6,6 %. Разница в
группах 2, 3 и 4 по сравнению с показателем частоты до начала
соответствующего лечения была статистически достоверной.
Частота
выявления
генетических
маркеров
другого
пародонтопатогенного вида 2-го порядка Treponema denticola была меньше и
не
превышала
16
%.
Через
1
мес
после
начала
комплексного
патогенетического лечения в группах 1 и 2 она уменьшалась до 3–7 %, а
через 12 мес вновь увеличивалась до 10,7 %. Разница была статистически
недостоверна. В группах 3 и 4, напротив, через 1 мес данный возбудитель не
был выявлен, а через 12 мес генетические маркеры определили у 1 чел в
каждой группе, что составило 3,3 %. Разница была статистически
достоверной. Представители таких пародонтопатогенных видов 2-го порядка,
как Fusobacterium nucleatum/periodonticum и Parvimonas micra выявлялись
бактериологическим методом и учитывались при оценке количественного
показателя микробной обсеменённости.
Таким
образом,
представленные
данные
ПЦР-диагностики
подтверждают влияние разных вариантов комплексного лечения на частоту
обнаружения всех основных пародонтопатогенных бактерий 1-го и 2-го
порядка. Наиболее выраженные благоприятные и стойкие (до 12 мес
наблюдения)
статистически
достоверные
различия
отмечали
преимущественно в группах 3 и 4, то есть при использовании ФДТ, а также
ФДТ совместно с шинированием соответственно.
Что касается дрожжевых грибов рода Candida, то наиболее стойкие (до
12 мес наблюдения) статистически достоверные различия также наблюдали в
группах 3 и 4 в результате ФДТ или ФДТ совместно с шинированием зубов.
Установлено, что более устойчивыми к разным вариантам терапии оказались
виды C. krusei и C. glabrata.
Результаты
количественной
оценки
микробиоты
в
материале
пародонтальных карманов у пациентов различных групп представлены в
табл. 2. Видно, что грамположительная микробиота, которая, как известно,
представлена преимущественно резидентными видами бактерий (альфазеленящими
микроаэрофильными
стрептококками,
коринебактериями,
лактобациллами, пептострептококками), определялась на уровне 105–6 КОЕ
во всех группах и оставалась стабильной через 1 и 12 мес после
18
комплексного патогенетического лечения независимо от его варианта. Это
указывает на то, что лечение не оказывало отрицательного влияния на
стабилизирующий компонент микробиоты (нормофлору).
Статистически значимые изменения наблюдались среди представителей
грамотрицательной микробиоты, преимущественно пародонтопатогенные
бактерии 1-го и 2-го порядка. Так, исходный уровень микробной
обсеменённости был существенно выше и составлял 108-9 КОЕ. После
комплексного лечения, включавшего шинирование зубного ряда (группы 1 и
2 соответственно), микробная обсеменённость через 1 мес составила 105–6
КОЕ, то есть была достоверно ниже по сравнению с исходными данными.
Однако через 12 мес она вновь увеличилась до 107–8 КОЕ и достоверно не
отличалась от исходной. У пациентов, получавших в составе комплексного
лечение ФДТ, а также шинирование с ФДТ (группы 3 и 4 соответственно),
обсеменённость грамотрицательными микробами через 1 мес составляла 104
КОЕ, а через 12 мес – 106 КОЕ и, следовательно, во все сроки статистически
достоверно была ниже, чем до начала лечения (табл. 2).
При оценке обсеменённости грибами Candida исходный уровень был
достаточно высоким — 105 КОЕ. В группе 1 при контрольном исследовании
через 1 мес и 12 мес статистически значимого уменьшения колонизации
грибами не выявлено. В группе 2, где использовалось шинирование зубного
ряда, отмечена достоверная тенденция к снижению через 1 мес, однако через
12 мес грибов вновь становилось больше. В группах 3 и 4 через месяц грибы
не обнаруживались, а через 12 мес их количество составляло 103 и 104 КОЕ,
то есть было статистически меньше, чем до начала лечения.
Таким образом, результаты количественного исследования динамики
микробной обсеменённости в целом подтвердили данные качественного
изучения микробиоты в группах сравнения. Это позволяет заключить, что
ФДТ в сочетании с иммобилизацией зубов прецизионными фрезерованными
шинами, улучшающими биомеханические характеристики подвижных зубов,
благоприятно
воздействуют
на
процесс
реабилитации
пациентов
с
хроническим пародонтитом средней степени тяжести и приводят к
существенному уменьшению частоты выявления пародонтопатогенных
бактерий и дрожжевых грибов Candida по сравнению с традиционным
комплексным лечением.
19
Таблица 2.
Оценка влияния варианта комплексного лечения на уровень микробной
обсеменённости у пациентов групп сравнения (КОЕ)
P гр. к исходным
Сроки (месяц)
Уровень микробной обсеменённости
(микробное число)
ГРУППЫ
1
Исходные
Через 1 мес
Через 12 мес
данные
Грамположительные, преимущественно резидентные бактерии
105 (+102)
106 (+102)
105 (+102)
105 (+102)
1
2
3
4
106 (+102)
107 (+102)
105 (+102)
105 (+102)
106 (+102)
107 (+102)
104 (+102)
105 (+102)
12
>0,05
>0,05
>0,05
>0,05
>0,05
>0,05
>0,05
>0,05
Грамотрицательные, включая пародонтопатогенные бактерии
109 (+102)
108 (+102)
108 (+102)
109 (+102)
1
2
3
4
106 (+102)
105 (+102)
104 (+102)
104 (+102)
108 (+102)
107 (+102)
106 (+102)
106 (+102)
<0,05*
<0,05*
<0,05*
<0,05*
>0,05
>0,05
<0,05*
<0,05*
>0,05
>0,05
Грибы рода Candida
5
1
2
103 (+102)
10 (+10 )
104 (+102)
2
105 (+102)
103 (+102)
105 (+102)
<0,05*
>0,05
5
2
3
2
<0,05*
<0,05*
3
10 (+10 )
0
10 (+10 )
<0,05*
<0,05*
5
2
4
10 (+10 )
0
102 (+102)
Примечание: p – вероятность различий по критерию Стьюдента при распределении
значений: исходных и после проведения лечения по группам p2 – гр. 2 с шинированием, p3
– гр. 3 с ФДТ, p4– гр. 4 с сочетанием шинирования и ФДТ (достоверность различий при p
< 0,05* выделена серым цветом)
ВЫВОДЫ
1. Экспериментальное исследование фотодинамического воздействия на
микробные
популяции
использованием
in
vitro
в
современных
поддерживаемых
методов
культурах
с
автоматизированного
культивирования микроорганизмов и мониторинга в реальном времени
свидетельствует об умеренно выраженном антимикробном действии на
бактерии пародонтопатогенных видов и на грибы рода Candida. При
использовании фотодинамического воздействия в эксперименте in vitro с
автоматизированным
контролем
роста
бактериальной
популяции
наблюдалась регрессия кривой роста P. gingivalis с 6,04-7,77 единиц
оптической плотности (OD) до 5,2 в стационарной фазе, что является
доказательством
бактериостатического
характера
фотодинамического
воздействия с фотосенсибилизатором толуидиновый синий. Проведённая
оценка
фотодинамического
воздействия
с
фотосенсибилизатором
20
толуидиновый синий на представителей анаэробной пародонтопатогенной
(Porphyromonas
gingivalis,
Aggregatibacter
actinomicetemcomitans,
Fusobacterium nucleatum) и условно-патогенной микробиоты полости рта
(стрептококки групп «Sanguinis», «Mutans» и актиномицеты Actinomices
naeslundii), свидетельствует о высокой чувствительности данных видов к
индуцируемой in vitro фотохимической реакции.
2. Сравнительная оценка количественных параметров обсеменённости
экспериментальных проб для штаммов пародонтопатогенных, кариесогенных
бактерий и грибов рода Candida при разной экспозиции выявила зависимость
выраженности антибактериального эффекта от времени облучения с
максимумом экспозиции от 30 до 60 секунд в зависимости от типа строения
клеточной
стенки
Полученные
и
таксономического
результаты
позволяют
положения
микроорганизма.
экспериментально
обосновать
целесообразность применения данного вида воздействия и установить время
воздействия
(экспозицию)
для
комплексного
лечения
пациентов
с
хроническим пародонтитом средней степени тяжести.
3. Прецизионная диагностика заболеваний пародонта должна включать
обязательное
исследование
микробиоценоза
рта
для
обоснованного
врачебного выбора профилактических и комплекса лечебных мероприятий
при лечении пациентов с воспалительными заболеваниями пародонта.
Сравнительный анализ антимикробного действия фотодинамической терапии
с
фотосенсибилизатором
толуидиновый
синий
на
микробную
обсеменённость субгингивальной биоплёнки (пародонтального кармана) в
клинической практике при хроническом пародонтите средней степени
тяжести в стадии обострения свидетельствует о высокой клинической и
микробиологической
эффективности
данной
методики
проведения
фотодинамической терапии. Наиболее высокая исходная частота выделения
пародонтопатогенных бактерий по данным ПЦР-диагностики отмечена у
пациентов для двух пародонтопатогенных видов 1 порядка – Tannerella
forsythia – от 75 до 83 % и Porphyromonas gingivalis – от 50 до 57 %, которая
снижалась в основном при использовании фотодинамической терапии
(группа 3) или при её сочетании с шинированием (группа 4). В группах 3 и 4
через 1 месяц комплексного лечения частота выявления генетических
маркеров Tannerella forsythia снижалась до 13,3 и 10 %, а через 6-12 месяцев
21
составляла 20 и 10 % соответственно (статистически достоверное снижение в
4 и 8 раз соответственно). Наиболее устойчивым к фотодинамической
терапии оказался вид Porphyromonas gingivalis – только в группе 4 при
сочетании фотодинамической терапии и шинирования зубов отмечен
стойкий
статистически
достоверный
положительный
результат
на
протяжении 12 месяцев (снижение частоты выявления до 20%, то есть в 2,5
раза).
4. Разработаны специальные конструкции шин для иммобилизации
подвижных зубов (временные полимерные и завершающие из диоксида
циркония), обоснована последовательность этапов их применения в
структуре комплексного лечения пациентов с пародонтитом средней степени
тяжести, включающей использование фотодинамической терапии.
5. Клинико-микробиологическая оценка эффективности предложенного
протокола
применения
фотодинамической
терапии
и
шинирующих
конструкций в комплексном лечении пациентов с пародонтитом средней
степени тяжести по данным мониторинга клинико-микробиологического
статуса показала существенное, статистически достоверное улучшение
объективных клинических параметров состояния больных (индексной оценки
тканей пародонта, выраженности воспаления, рентгенологической картины и
пр.), а также стойкое снижение частоты выявления генетических маркеров
пародонтопатогенных бактерий и грибов рода Candida.
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
1. Для
прецизионной
последующего
контроля
диагностики
за
заболеваний
эффективностью
лечения
пародонта
и
рекомендуются
молекулярно-биологические методы микробиологического исследования
содержимого пародонтальных карманов для последующего составления
комплексного
протокола
лечения
и
профилактики
воспалительных
заболеваний пародонта.
2. Фотодинамическая терапия с фотосенсибилизатором толуидиновым
синим всегда должна проводиться с учетом возрастных особенностей
пациентов, наличия и стадии коморбидных заболеваний и тщательного
анализа противопоказаний.
22
3. Перед проведением и во время процедуры фотодинамической терапии
обязательно соблюдение тщательной изоляции обрабатываемой области от
ротовой жидкости. После введения фотосенсибилизатора для лучшего
распределения и фиксации требуется 1—1,5 мин, после чего пародонтальные
карманы обрабатываются излучением красного спектра (длина волны 635 нм,
мощность 100 мВт) в течение 1,0—1,5 мин вокруг каждого зуба.
4. В комплексном лечении пациентов с пародонтитом средней степени
тяжести фотодинамическая терапия должна сочетаться с иммобилизацией
неподвижных зубов, разработанной нами конструкцией индивидуальной
полимерной фрезерованной шины.
5. Иммобилизацию подвижных зубов рекомендуем осуществлять в 2
этапа: полимерными шинами во время комплексной пародонтологической
терапии, а после лечения с заменой на диоксид циркониевую шину.
6. Для
достижения
комплексном
лечении
максимального
указанных
антимикробного
пациентов
эффекта
возможно
при
применение
антибактериальных и фунгицидных средств в сочетании с фотодинамической
терапией и иммобилизацией подвижных зубов.
Список печатных работ, опубликованных по теме диссертации
1. Царев В.Н., Арутюнов С.Д., Малазония Т.Т., Царева Е.В.,
Подпорин
М.С.,
Ипполитов
Е.В.,
Самусенков
В.О.
Оценка
антимикробного действия фотодинамической терапии на возбудителей
неклостридиальной
анаэробной
инфекции
пародонта
в
экспериментальных и клинических исследованиях // Клиническая
стоматология. – М., – 2015. – №4 (76), – С. 14-19.
2. Царев В.Н., Митронин А.В., Ипполитов Е.В., Малазония Т.Т.,
Подпорин М.С., Манучарян Л.А. Оценка антимикробного действия
фотодинамической
терапии
на
возбудителей
неклостридиальной
анаэробной инфекции пародонта в экспериментальных и клинических
исследованиях. // Эндодонтия today. – М., – 2015. – №3 – С.15-20.
3. Малазония Т.Т. Перспективы применения фотодинамической терапии
для эрадикации пародонтопатогенных видов бактерий в комплексном
лечении пародонтита. // Материалы Всерос. научн.-практ. конф. с
23
международным участием, посвященной 70-летию образования в МГМСУ
им.
А.И.
Евдокимова
кафедры
общей
гигиены.
«Инновационные
здоровьесберегающие технологии в медицине и в образовании». – РИО
МГМСУ – М., – 2016. – С. 176-178.
4. Самусенко В.О., Подпорин М.С., Малазония Т.Т. Антимикробное
действие фотодинамической терапии на возбудителей неклостридиальной
анаэробной инфекции в тканях пародонта. // Материалы Всерос. научн.практ.
конф.
с
международным
участием,
посвященной
70-летию
образования в МГМСУ им. А.И. Евдокимова кафедры общей гигиены.
«Инновационные здоровьесберегающие технологии в медицине и в
образовании». – РИО МГМСУ – М., – 2016. – С. 188-190.
5. Малазония
Т.Т.,
Подпорин
М.С.
Клинико-микробиологическое
обоснование применения фотодинамической терапии и шинирования зубов в
комплексном лечении заболеваний пародонта. // Сб. материалов XXXVIII
Итоговой науч. конф. молодых ученых МГМСУ имени А.И. Евдокимова под
общей ред. Вольской Е.А., Малявина А.Г. –МГМСУ – М., – 2016. – С. 27-29.
6. Подпорин М.С., Малазония Т.Т., Кузнецов К.В. Клинико-лабораторное
обоснование антимикробной эффективности фотодинамической терапии с
разными фотосенсибилизаторами при лечении воспалительных заболеваний
полости рта. // Сб. материалов Всерос. итоговой 76-ой научной конф. им.
Н.И. Пирогова под редакцией проф. Г.Э. Черногорюка – СибГМУ –
СибГМУ, Томск, – 2017. – С. 217-218.
7. Арутюнов С.Д., Янушевич О.О., Ипполитов Е.В., Степанов А.Г.,
Царева Т.В., Богатырева Р.М., Малазония Т.Т. Фрезерованная зубная
шина // Патент РФ на изобретение №2632755. 2017.
8. Ипполитов Е.В., Царев В.Н., Арутюнов С.Д., Степанов А.Г.,
Подпорин М.С., Шишова В.Г., Малазония Т.Т. Способ формирования
смешанной биопленки пародонтопатогенных анаэробных бактерий в
условиях текучих сред in vitro // Патент РФ на изобретение №2619169.
2017.
24
Подписано в печать: 07.02.2018
Тираж: 100 экз. Заказ № 1146
Отпечатано в DMA MEDIA
119261, Москва, Ленинский проспект, дом 72/2
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа