close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

Патогенетическое обоснование применения микроволокнистых материалов с иммобилизованными наночастицами меди и серебра в начальную фазу раневого процесса (экспериментальное исследование)

код для вставкиСкачать
На правах рукописи
ВАСЯГИН
Сергей Николаевич
ПАТОГЕНЕТИЧЕСКОЕ ОБОСНОВАНИЕ ПРИМЕНЕНИЯ
МИКРОВОЛОКНИСТЫХ МАТЕРИАЛОВ С ИММОБИЛИЗОВАННЫМИ
НАНОЧАСТИЦАМИ МЕДИ И СЕРЕБРА В НАЧАЛЬНУЮ ФАЗУ
РАНЕВОГО ПРОЦЕССА
(экспериментальное исследование)
14.03.03 – патологическая физиология
АВТОРЕФЕРАТ
диссертации на соискание ученой степени
кандидата медицинских наук
Санкт-Петербург – 2018
2
Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном учреждении
«Государственный научно-исследовательский испытательный институт военной
медицины» Министерства обороны Российской Федерации
Научный руководитель:
Шперлинг Наталья Владимировна – доктор медицинских наук
Официальные оппоненты:
Кубышкин Анатолий Владимирович – доктор медицинских наук,
профессор, проректор по научной деятельности, заведующий кафедрой общей и
клинической патофизиологии медицинской академии им. С.И. Георгиевского
федерального государственного автономного образовательного учреждения
высшего
образования
«Крымский
федеральный
университет
имени В.И. Вернадского»
Мовчан Константин Николаевич – доктор медицинских наук, профессор,
заведующий сектором организации экспертизы качества медицинской помощи СПБ
ГБУЗ «Медицинский информационно-аналитический центр» Комитета по
здравоохранению Правительства Санкт-Петербурга
Ведущая организация – Федеральное государственное бюджетное
образовательное учреждение высшего образования «Первый Санкт-Петербургский
государственный медицинский университет имени академика И.П. Павлова»
Министерства здравоохранения Российской Федерации
Защита состоится «__» _________ 2018 г. в ___ часов на заседании
диссертационного совета Д 215.002.03. при Федеральном государственном
бюджетном военном образовательном учреждении высшего образования «Военномедицинская академия имени С.М. Кирова» Министерства обороны Российской
Федерации по адресу: 194044, г. Санкт-Петербург, ул. Лебедева, д. 6
С диссертацией можно ознакомиться в фундаментальной библиотеке и на
официальном сайте Федерального государственного бюджетного военного
образовательного учреждения высшего образования «Военно-медицинская
академия имени С.М. Кирова» Министерства обороны Российской Федерации
Автореферат разослан «__» _________ 2018 г.
Учёный секретарь диссертационного совета
доктор медицинских наук профессор
Дергунов Анатолий Владимирович
3
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность темы исследования. Вопрос лечения огнестрельных ранений
остается актуальным как в военное, так и в мирное время. В структуре санитарных
потерь в вооруженных конфликтах последних десятилетий доля пострадавших с
огнестрельными ранениями составляет от 57 до 62% [Брюсов П.Г. и соавт., 1996;
Толстых М.П. и соавт., 2007]. В 28% случаев огнестрельные ранения осложняются
гнойно-инфекционными процессами [Ерюхин И.А., 2003; Nessen S.C. et al., 2008].
Огнестрельные ранения сопровождаются длительными сроками заживления,
частыми случаями генерализации патологического процесса, ограничением
трудоспособности и инвалидизацией [Блатун Л.А., 2005; Гуманенко Е.К., 2008].
Проблемы лечения огнестрельных ранений обусловлены различными
причинами, в том числе особенностями образования, формирования и течением
раневого процесса [Быков И.Ю. и соавт., 2009]. Обращает на себя внимание
увеличение количества гнойных осложнений и отмечающийся рост устойчивости
микроорганизмов к антибиотикам [Шляпников С.А., 2003; Липатов В.А., 2005;
Попов В.А., 2013].
Заживление огнестрельного ранения происходит по механизмам, присущим
для всех ран, с тремя обязательными компонентами: повреждения, воспаления и
восстановления. Знание этой закономерности обуславливает патогенетическую
направленность лечебных мероприятий. Сокращение продолжительности одного из
этапов раневого процесса ведет к ускорению наступления последующего и
сокращению длительности процесса заживления в целом, что обосновывает
создание
перевязочных
материалов,
обеспечивающих
возможность
патогенетически оправданного влияния на процессы воспаления и регенерации как
можно в более ранние сроки [Гостищев В.К., 2003; Parker P. et al., 2005;
Симоненков А.П. и соавт., 2008].
В последние годы для лечения ран предлагается достаточное количество
методов и средств (мeдицинские лaзеры, абaктериaльная cрeда, вакyумирoвaние и
т.д.), при этом местное лечение в медицине чрезвычайных ситуаций остается
доминирующим. Применение ранeвых повязoк с биолoгически aктивными
компoнентами и вoздействие с помощью физических способов на облaсть ранeния
видимо способствуют улучшению результатов оказания хирургичecкого пocoбия
раненым [Назаренко Г.И. и соавт., 2002; Цыбуляк Г.Н., 2005].
Новые возможности в улучшении результатов лечения ран открываются в
связи с разработкой технологии электроформования волокнообразующих
полимеров (ЭФВ-процесс). Метод электроформования волoкнистых нoсителей
выгoдно отличaется aппaратурной прocтoтой, высокой энeргeтической
эффективностью, разнообразием продукции с заранее заданными физикомеханическими
показателями
(гибкость,
капиллярность,
поглотительная
способность, воздухопроницаемость, жесткость) [Филатов Ю.Н., 2001; Agawal S.,
2008; Усачев А.Н. и соавт., 2016]. Данная технология изготовления перевязочных
материалов позволяет изменять диаметр волокон и, кроме того, иммобилизировать
на них ферменты, металлы, антиоксиданты и др. [Дыгай А.М. и соавт., 2009;
Беклемышев В.И. и соавт., 2010].
Известна высокая активность серебра и меди в отношении возбудителей
гнойной микрофлоры. Разработка наноструктурированных форм меди и серебра
4
позволила повысить эффективность антибактериального действия металлов,
приобретающих в наноразмерном диапазоне особые характеристики [Мамонова
И.А., 2011; Бабушкина И.В. и соавт., 2013; Егорова Е.М. и соавт., 2014].
Таким образом, в настоящее время имеются предпосылки для разработки
перспективных перевязочных средств для использования при огнестрельных
ранениях, что обуславливает проведение патогенетического обоснования их
применения.
Степень разработанности темы исследования. В настоящее время
исследованы свойства и экспериментально определена эффективность лечения
гнойных
ран
перевязочными
материалами,
изготовленными
методом
электроформования с использованием прядильного раствора на основе полимеров
диальдегида целлюлозы и поливинилпирролидона в разных соотношениях
[Шин Ф.Е., 2004; Старичков И.Г., 2011; Попов В.А., 2013].
Доказано, что перевязочный материал на основе медицинского марлевого
бинта, импрегнированного наночастицами серебра, обладает антимикробной
активностью в отношении грамположительных и грамотрицательных бактерий,
выделенных из гнойных ран пациентов хирургического профиля [Довнар Р.И. и
соавт., 2010; Guzman M. et al., 2012].
Разработаны технологии изготовления перевязочных средств на основе
металлокомплексов путем иммобилизации меди или серебра на полимерные
волокна, исследованы их антибактериальные и ранозаживляющие свойства
[Толстых М.П. и соавт., 2001, 2004; Chen X. et al., 2008].
Однако патогенетические особенности и эффективность перевязочных
материалов, изготовленных методом ЭФВ-процесса, в том числе с использованием
нанокомплексов металлов, при лечении огнестрельного ранения изучены лишь
фрагментарно.
Цель исследования: оценить и патогенетически обосновать эффективность
микроволокнистых перевязочных материалов при использовании в начальную фазу
раневого процесса при огнестрельном ранении.
Задачи исследования:
1. Провести анализ основных механизмов саногенеза при использовании
микроволокнистых перевязочных материалов в начальную фазу раневого процесса
при огнестрельном ранении.
2. Оценить микробную обсеменённость раны, кислородзависимый
метаболизм лейкоцитов периферической крови и активность перекисного
окисления липидов в мышечной ткани области огнестрельного ранения при
использовании микроволокнистых перевязочных материалов.
3. Выявить особенности микроциркуляторных изменений в области
огнестрельного ранения при использовании микроволокнистых перевязочных
материалов.
4. Определить клеточный состав раны и гистоморфологическую структуру
тканей в области огнестрельного ранения после применения образцов
микроволокнистых перевязочных материалов.
5. Определить наиболее эффективные образцы микроволокнистых
перевязочных материалов для использования в начальную фазу раневого процесса
5
при огнестрельном ранении на основании анализа их влагоемкости и
макроскопической оценки течения раневого процесса.
Научная новизна исследования. Впервые выявлено, что при использовании
экспериментальных микроволокнистых материалов, полученных методом ЭФВпроцесса с использованием раствора полимеров ацетилцеллюлозы и
поливинилпирролидона (АЦПВП) в соотношении 5:1 с иммобилизованной
наноструктурированной формой меди (АЦПВП-Cu), серебра (АЦПВП-Ag), меди и
серебра (АЦПВП-Cu+Ag), после первичной хирургической обработки (ПХО) при
огнестрельном ранении, очищение раневой поверхности от гнойно-некротических
масс и формирования очагов грануляционной ткани по срокам, сокращались в
среднем на 4 сут (на 46,2%, р<0,05), полного заживления ран – на 7 сут (на 22,4%,
р<0,05).
Установлено, что по показателю влагоёмкости и антибактериальной
активности in vitro, результатам макроскопической оценки воспалительной реакции
паравульнарных тканей и скорости ранозаживления из образцов перевязочных
материалов АЦПВП-Cu, АЦПВП-Ag и АЦПВП-Cu+Ag наилучшим является
образец микроволокнистого материала с комплексом иммобилизованных
наноструктурированных частиц меди и серебра АЦПВП-Cu+Ag.
Впервые проведено патогенетическое обоснование эффективности
экспериментальных микроволокнистых материалов, полученных методом
ЭФВ-процесса с использованием раствора полимеров ацетилцеллюлозы и
поливинилпирролидона
в
соотношении
5:1
с
иммобилизованной
наноструктурированной формой меди и серебра АЦПВП-Cu+Ag в комплексном
лечении при экспериментальном огнестрельном ранении. Доказано, что механизмы
саногенеза при использовании экспериментального перевязочного материала с
иммобилизованной наноструктурированной формой меди и серебра АЦПВПCu+Ag направлены на основные звенья раневого процесса и реализуются в виде
дренажной функции, антибактериального и, опосредованного через него,
противовоспалительного эффектов.
Теоретическая и практическая значимость работы. Материалы
настоящего исследования расширяют представление о ранозаживляющем действии
микроволокнистых материалов, в том числе полученных методом ЭФВ-процесса с
использованием раствора полимеров ацетилцеллюлозы и поливинилпирролидона
иммобилизованного наноструктурированной формой меди и серебра при лечении
огнестрельных ран. Впервые изучены патогенетически значимые механизмы
ранозаживляющего
действия
исследованных
материалов:
влагоёмкость,
определяющая дренажные свойства повязки, а также антибактериальный эффект,
характеризующий противовоспалительные свойства материала. Показана
целесообразность изготовления опытной промышленной партии микроволокнистых
перевязочных материалов (повязки, салфетки и др.), с возможным последующим
включением их в состав медицинских комплектов для обеспечения лечебноэвакуационных мероприятий.
Методология и методы исследования. В работе использованы методы
экспериментов на животных, результаты которых могут быть экстраполированы на
этап
клинических
исследований,
экспериментального
моделирования
огнестрельного ранения, физические методы (определение влагоёмкости образцов
6
перевязочных материалов, оценка микроциркуляции в области ранения методом
лазерной допплеровской флоуметрии), биохимические методы (оценка
функциональной активности лейкоцитов периферической крови, активности
перекисного
окисления
липидов
в
тканях
области
повреждения),
микробиологические методы (оценка чувствительности бактерий к образцам
перевязочных материалов и количественная оценка бактериальной обсемененности
раны), морфологические методы (гистоморфологическое исследование тканей
области повреждения), статистические методы.
Основные положения, выносимые на защиту:
1. Из образцов экспериментальных перевязочных материалов, полученных
методом
электроформования
с
использованием
раствора
полимеров
ацетилцеллюлозы
и
поливинилпирролидона
в
соотношении
5:1
с
иммобилизованной наноструктурированной формой формой меди АЦПВП-Cu,
серебра АЦПВП-Ag, меди и серебра АЦПВП-Cu+Ag, материала без
металлизированных компонентов АЦПВП и нетканого материала «Медитекс»
наиболее эффективным при огнестрельном ранении является материал АЦПВПCu+Ag.
2. Механизмы саногенеза огнестрельного ранения при использовании
перевязочного материала на основе полимеров ацетилцеллюлозы и
поливинилпирролидона с иммобилизованной наноструктурированной формой меди
и серебра АЦПВП-Cu+Ag направлены на основные звенья раневого процесса и
реализуются в виде дренажной функции, антибактериальной активности и
антиоксидантного действия, что создает благоприятные условия для очищения
раны и протекания репаративных процессов.
Степень
достоверности
исследований.
Полученные
данные
и
обоснованность результатов работы обеспечиваются репрезентативностью групп
экспериментальных
животных,
достаточным
объемом
лабораторных,
инструментальных и гистоморфологического методов исследований, результаты
которых подвергнуты статистическому анализу и математической обработке.
Апробация результатов работы. Основные результаты диссертационного
исследования представлены на научно-практической конференции «Актуальные
вопросы хирургии» (Москва, 2011), 10 Всероссийской научно-практической
конференции «Боевой стресс. Медико-биологическая реабилитация лиц опасных
профессий» (Москва, 2012), Юбилейной Всеармейской научно-практической
конференции «Актуальные проблемы развития технических средств медицинской
службы» (Санкт-Петербург, 2015), Юбилейной научно-практической конференции,
посвященной 15-летию образования научно-исследовательского центра Военномедицинской академии имени С.М. Кирова (Санкт-Петербург, 2016), Всеармейской
научно-практической
конференции,
посвященной
50-летию
ликвидации
последствий землетрясения в Ташкенте и 30-летию ликвидации последствий аварии
на Чернобыльской АЭС «Опыт применения сил и средств медицинской службы
Вооруженных Сил Министерства обороны РФ (МО СССР) при ликвидации медикосанитарных последствий ЧС (Санкт-Петербург, 2016), Международном научном
конгрессе «Многопрофильная клиника XXI века. Инновации в медицине – 2017»
(Санкт-Петербург, 2017), Всероссийской научно-практической конференции
7
«Актуальные направления развития медицинских средств защиты от
экстремальных факторов» (Москва, 2017).
Публикации на тему исследования. По теме диссертации опубликовано 12
печатных работ, из них 4 – в журналах, включенных в перечень рецензируемых
научных изданий, рекомендованных Высшей аттестационной комиссией при
Минобрнауки России.
Личный вклад соискателя. Планирование диссертационного исследования,
его тема, основные идеи и содержание разработаны диссертантом совместно с
научным руководителем на основании анализа современных литературных данных.
Автор принимал личное участие в планировании, организации и проведении
экспериментальных исследований, направленных на изучение эффективности
исследуемого экспериментального перевязочного средства. Непосредственно
выполнял хирургическое пособие по осуществлению доступа к ране и
моделирование огнестрельного ранения. Лично проводил инструментальную и
лабораторную оценку показателей состояния организма экспериментальных
животных. Осуществлял учет, систематизацию и оценку полученных данных, их
статистическую обработку, анализ и обобщение, обосновал и сформулировал
выводы и рекомендации для научного и практического использования результатов
исследования.
Объем и структура диссертации. Результаты диссертационного
исследования изложены на 138 листах машинописного текста и состоит из
введения, четырех глав, в том числе главы, содержащей результаты собственных
исследований, заключения, выводов, практических рекомендаций и списка
литературы, включающего 180 источников, в том числе 150 отечественных и 29
зарубежных. Диссертация иллюстрирована 12 таблицами и 28 рисунками.
СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ
Материалы и методы исследования. Материалом исследования служили
результаты экспериментов по оценке эффективности экспериментальных
перевязочных материалов, полученных методом ЭФВ-процесса с использованием
полимеров
АЦПВП
в
соотношении
5:1
с
иммобилизованной
наноструктурированной формой меди, серебра, меди и серебра (АЦПВП-Cu,
АЦПВП-Ag и АЦПВП-Cu+Ag соответственно) при лечении экспериментального
огнестрельного ранения. Исследуемые перевязочные средства изготовлены на
пилотной установке специалистами Научно-исследовательского физикохимического института имени Л.Я. Карпова (г. Москва).
Эксперименты проведены на 190 белых беспородных крысах-самцах весом
250±10 г. с соблюдением требований Европейской конвенции по защите
позвоночных животных (Страсбург, 1986 г.). Все животные содержались в
одинаковых условиях виварного режима, прошли карантинный отбор.
Исследование проводилось на базе ФГБУ «Государственный научноисследовательский испытательный институт военной медицины» МО РФ в
соответствии с требованиями нормативно-правовой базы по проведению научных
исследований с использованием экспериментальных животных и требованиями
локального этического комитета.
8
Дизайн исследования включал два этапа (рисунок 1). На первом этапе из
образцов перевязочных материалов (АЦПВП-Cu, АЦПВП-Ag и АЦПВП-Cu+Ag) в
эксперименте in vitro был выбран образец с наибольшей влагоемкостью как
критерия эффективности дренажа воспалительного раневого экссудата. Кроме того
были проведены опыты in vivo, в ходе которых была проведена сравнительная
макроскопическая оценка раневого процесса, включая выраженность внешних
признаков воспаления и продолжительность периода заживления огнестрельной
раны в результате применения образцов перевязочных материалов, вследствие чего
был отобран перспективный образец материала.
ЭТАП 1
Выбор перспективного образца перевязочного материала
in vitro (оценка влагоемкости)
in vivo (макроскопическая оценка
и динамика раневого процесса)
ЭТАП 2
Оценка влияния образцов перевязочных материалов на основные механизмы
раневого процесса при огнестрельном ранении
(in vivo): люминол-зависимая хемилюминесценция лейкоцитов крови;
содержание продуктов ПОЛ в гомогенатах мягких тканей; бактериальная
обсемененность раны; микроциркуляция в области ранения; клеточный
состав раны; гистоморфологическое исследование мягких тканей
Рисунок 1 - Дизайн исследования по патогенетическому обоснованию
применения перевязочных средств с иммобилизованными наночастицами меди
и серебра в начальную фазу раневого процесса при огнестрельном ранении
На втором этапе были сформированы экспериментальные группы животных
для проведения исследований по оценке влияния отобранного экспериментального
материала на основные механизмы раневого процесса. Для этого оценивали
люминол-зависимую активность лейкоцитов периферической крови, содержание
продуктов перекисного окисления липидов в гомогенатах мышечной ткани,
бактериальную обсемененность раны, микроциркуляцию в мягких тканях области
повреждения, клеточный состав раны, результаты гистоморфологического
исследования тканей области ранения.
На всех этапах исследования в качестве образцов сравнения служили: 1 –
образец экспериментального перевязочного материала АЦПВП в соотношении 5:1
без иммобилизованной наноструктурированной формы меди или серебра; 2 –
материал подушечки перевязочного пакета индивидуального (ППИ АВ-3),
(регистрационное удостоверение № ФСР 2010/08170, ООО «Предприятие
«Владекс»). Основой подушечки является нетканый материал «Медитекс».
Материал
обладает
атравматичностью
и
сорбционой
способностью,
влагомикробонепроницаемостью, что обеспечивает профилактику нагноений при
первичных травмах [Шин Ф.Е., 2004; Иванков М.П., 2014].
9
Порядок проведения экспериментов in vivo на первом и втором этапах
включал: 1 - моделирование огнестрельного ранения; 2 - проведение ПХО
огнестрельной раны; 3 - формирование групп экспериментальных животных; 4 проведение перевязок с применением экспериментальных перевязочных
материалов; 5 - контрольные исследования в ходе динамического наблюдения за
животными до окончания срока заживления ран; 6 - регистрация и анализ
результатов, формулировка выводов и практических рекомендаций (рисунок 2).
Моделирование огнестрельного ранения,
проведение первичной хирургической обработки раны
Формирование экспериментальных групп и применение образцов
перевязочного материала на раневую поверхность
Опытная
группа-1
(АЦПВП-Cu)
Опытная
группа-2
(АЦПВП-Ag)
Опытная
группа-3
(АЦПВПСu+Ag)
Применение образцов перевязочного
материала до момента появления
грануляций
Группа
сравнения-1
(АЦПВП)
Группа
сравнения-2
(«Медитекс»)
Наружные повязки с мазью
«Левомеколь» до момента
эпителизации
Рисунок 2 - Порядок проведения экспериментов in vivo по патогенетическому
обоснованию применения перевязочных средств с иммобилизованными
наночастицами меди и серебра в начальную фазу раневого процесса при
огнестрельном ранении
Моделирование огнестрельного ранения осуществляли под общим
обезболиванием. Для этого крысам за 15 мин до нанесения ранения внутримышечно
вводили кетамин и ксилазин из расчета 60 мг/кг и 10 мг/кг веса тела соответственно
каждого препарата. Далее крыс фиксировали на экспериментальных планшетах.
Огнестрельную рану наносили в область средней трети правого бедра крысы из
пистолета Марголина (калибр 5,6 мм, начальная скорость полета пули 320 м/сек,
скорость пули измеряли с помощью регистратора скорости РС-140) с расстояния 6
метров. ПХО огнестрельной раны проводили путем иссечения тканей по ходу
раневого канала, с последующим промыванием раневого канала раствором
антисептика (хлоргексидин).
В зависимости от используемых образцов раневых покрытий животные были
разделены на: первую, вторую и третью опытные группы, животным которых
применяли образцы АЦПВП-Cu, АЦПВП-Ag и АЦПВП-Cu+Ag соответственно;
первую и вторую группы сравнения, животным которых применяли образцы
АЦПВП и «Медитекс» соответственно. Образцы перевязочных материалов
применяли после ПХО ран путем рыхлого заполнения раневого канала. В
дальнейшем проводили перевязки ежедневно до полного очищения раны от
10
некротизированных тканей и появления грануляций. Дальнейшее лечение до
момента эпителизации раны осуществляли ежедневными наружными повязками с
мазью «Левомеколь».
Для определения значений среднестатистических показателей у здоровых
животных формировали группу интактных животных (n=6), которым
огнестрельную рану не наносили.
Оценку влагоемкости образцов перевязочных материалов проводили
согласно методике, приведенной в ГОСТ 3816-81. При определении свойств
материала «Медитекс» исследованиям подвергали гидрофильный слой, защитный
слой и гидрофобную сетку удаляли.
Макроскопическую оценку раневого процесса проводили по выраженности и
продолжительности внешних признаков воспалительной реакции в области раны
(отек, гиперемия, инфильтрация паравульнарных тканей, количество и характер
гнойного отделяемого), а также сроков (сутки) отторжения струпа, появления
грануляций и полного заживления.
Для определения изменений в функционировании лейкоцитов в крови
экспериментальных животных использовали измерение нормированной люминолзависимой хемилюминесценции (ЛХЛ) с помощью хемилюминометра ХЛМ-3
(усиление 102, полоса 102) при 370С. В исследовании использовали цельную кровь,
забранную в объеме 4 мл из полости сердца наркотизированного животного. Для
получения плазмы кровь с раствором гепарина центрифугировали при 3000 об/мин
в течение 15 мин. После чего супернатант сливали в пробирки эпендорф и
использовали в исследовании. Для выполнения метода исследования использовали
реактивы: раствор Хенкса (рН-7,43), люминол и опсонизированный зимозан.
[Ковальчук Г.А. и соавт., 2010].
Для оценки интенсивности ПОЛ в области огнестрельного ранения
определяли содержание продуктов гомолитического распада, реагирующих с
2'-тиобарбитуровой кислотой (ТБК-РП) в гомогенатах мышечной ткани [Андреева
Л.И. и соавт.,1988]. Мягкие ткани для приготовления гомогената брали массой 0,40,7 г из области бедра животного единым блоком с раневым каналом и хранили в
замороженном состоянии при -260С. Полученные образцы биоматериала помещали
в закрытые бюксы и для приготовления гомогената размораживали.
C целью количественной оценки бактериальной обсемененности раны под
воздействием перевязочных средств проводили исследование на 3, 5, 12, 18 сут от
момента начала лечения Объектом микробиологического исследования являлись
мазки со стенок раневого канала, отобранные при строгом соблюдении правил
асептики. Пробы отбирали, используя стерильные одноразовые транспортные
системы COPAN (Италия), состоящие из аппликатора с тампоном и пластиковой
пробирки, заполненной транспортной средой. Посев биоматериала проводили
немедленно после доставки в лабораторию не позднее 2 ч после забора с
использованием общепринятых методик в соответствии с приказом МЗ СССР
№ 535 от 22 апреля 1985 г. «Об унификации микробиологических
(бактериологических) методов исследования, применяемых в клиникодиагностических лабораториях лечебно-профилактических учреждений» и
инструкций производителей питательных сред.
11
Идентификацию выделенных культур микроорганизмов проводили
общепринятыми методами в соответствии с их культуральными, тинкториальными,
морфологическими и ферментативными свойствами. Использовали ускоренный
метод ориентировочной идентификации возбудителей [Добрынин В.М. и соавт.,
1999]. Для количественной оценки фактической бактериальной обсеменённости (с
учётом разведений и объёма высеваемого смыва) рассчитывали число
колониеобразующих единиц (КОЕ/мл) в 1,0 мл смыва.
Для оценки микроциркуляции в области повреждения применяли
компьютеризированную лазерную допплеровскую флоуметрию с использованием
лазерного анализатора кровотока «ЛАКК-01» (НПП «ЛАЗМА», Москва) в
комплексе с PC/AT Р4. В качестве излучателя в приборе «ЛАКК-01» использовали
гелий-неоновый лазер типа ЛГИ-207Б с длиной волны 0,63 мкм. Для регистрации и
анализа полученного сигнала использовалось оригинальное программное
обеспечение Lakk-25. [Дуванский В.А. и соавт., 2007; Козлов В.И. и соавт., 2012].
Оценку микроциркуляции в мягких тканях области повреждения осуществляли
через 1, 5, 12 и 18 сут после начала лечения.
Исследование клеточного состава поверхности огнестрельного ранения
проводили методом «раневых отпечатков» по М.П. Покровскому и М.С. Макаровой
в модификации Д.М. Штейнберга [Фенчин К.М., 1979]. Клеточный состав
выражали в процентах, подсчитывая от 100 до 200 клеток в различных местах
препарата. Забор материала у крыс осуществляли при заборе материала для
морфологического исследования через 5 сут, 12 сут и 18 сут после начала лечения.
Изучение процессов регенерации, происходящих в тканях под влиянием
исследуемых перевязочных образцов, проводили путем морфологического анализа
фрагментов раневой поверхности, взятых методом иссечения через 3, 5, 12 и 18 сут
после ранения и фиксированных нейтральным формалином. Полученные образцы
обрабатывали по стандартной методике с заливкой материала в парафин.
Изготовляли срезы толщиной 3-4 мкм с последующей окраской гематоксилинэозином по Карацци (обзорные препараты), фосфорно-вольфрамовым
гематоксилином по методу Маллори для выявления миофибриллярных структур,
метиловым зеленым-пиронином по методу Браше для выявления тучных клеток и
внутриклеточных белоксинтезирующих структур и пикрофуксином по методу Ван
Гизон для выявления коллагеновых волокон. В исследовании использовали
микроскоп Leica DM 2500. Фотосъемку осуществляли с помощью цифровой
фотокамеры Leica DFC 490 c базовым программным обеспечением Leica Image
Manager.
Результаты экспериментальных исследований обрабатывались статистически:
минимальные и максимальные значения каждого показателя анализировались на
предмет корректности учета в анализе; законы распределения каждого показателя
проверялись на соответствие нормальному закону распределения; гипотезы об
отсутствии различий средних арифметических значений одинаковых показателей в
сопоставляемых группах наблюдений проверялись по непараметрическому
критерию Манна-Уитни (U), достоверными считали различия при р<0,05.
Основные результаты исследований
В соответствии с классификацией [Кузин М.И. и соавт., 1990] разделение
12
фазы воспаления на два периода акцентирует патогенетическую направленность
лечебных мероприятий в первой стадии раневого процесса – купирование
воспалительных изменений и ускорение очищения раны. В связи с этим важным
свойством перевязочных материалов является сорбционная способность,
обеспечивающая дренажную функцию для удаления детрита и токсинов,
образующихся в ране в результате разрушения тканей и размножения раневой
микрофлоры [Ославский А.И., 2016].
Как показали результаты настоящего исследования, влагоемкость
материалов, изготовленных по методу электроформования АЦПВП-Cu,
АЦПВП-Ag, АЦПВП-Cu+Ag, не различается между собой, но статистически
значимо (р<0,05) в 1,47 раза выше материала «Медитекс» (рисунок 3).
Рисунок 3 – Влагоемкость образцов перевязочных материалов. * - достоверность
различий (р<0,05) относительно значений в группе «Медитекс»
Таким образом, исследования влагоемкостных свойств in vitro позволили
предположить наличие положительного эффекта перевязочных материалов
АЦПВП-Cu, АЦПВП-Ag, АЦПВП-Cu+Ag при их использовании для лечения ран.
Для дальнейшего дифференцированного подхода к выбору наиболее
эффективного средства были проведены эксперименты in vivo на модели
огнестрельного ранения.
Результаты макроскопической оценки течения раневого процесса показали,
что сроки исчезновения признаков отека и гиперемии тканей вокруг огнестрельной
раны, ее очищения, появления грануляций и полного заживления у крыс, которым
применяли образцы перевязочных средств с наноструктурированной формой меди
или серебра, не различались между собой, но наступали на 2-3 сут раньше чем у
животных в группах сравнения. Образцы перевязочного материала с комплексом
АЦПВП-Cu+Ag ускоряли процесс ранозаживления, относительно влияния других
образцов. По сравнению с показателями в группах сравнения, в которых животных
лечили образцами материалов АЦПВП без иммобилизированных металлов и
материалом «Медитекс», сроки очищения раневой поверхности от гнойнонекротических масс и формирования очагов грануляционной ткани были меньше в
среднем на 4 сут (на 46,2%, р<0,05), продолжительность периода полного
заживления ран сокращалась на 7 сут (на 22,4%, р<0,05) (рисунок 4).
13
Таким образом, в результате первого этапа исследований было сделано
заключение о более высокой эффективности материала АЦПВП-Cu+Ag при
огнестрельном ранении у лабораторных крыс, что указывало на значимое
преимущество экспериментального материала в рамках применения для лечения
огнестрельных ранений в начальную фазу раневого процесса.
В рамках объяснения механизмов действия перевязочного материала
АЦПВП-Cu+Ag, лежащих в основе ранозаживляющего эффекта, были проведены
исследования по оценке антибактериальных свойств повязки, выраженности
воспалительной реакции (по активности лейкоцитов периферической крови и
содержанию продуктов ПОЛ в тканях области повреждения), по изучению
морфологической картины микроциркуляции тканей в области повреждения и
последующей регенерации.
Известно, что характерной особенностью раневого процесса является
разрушение естественных барьеров организма микрофлорой, что связано с
наличием травматического дефекта и местного повреждения тканевых структур.
Огнестрельные раны являются бактериально загрязненными, т.е. первично
инфицированными. Загрязнение наступает в момент нанесения ранения. При этом
локальные проявления гнойного процесса зависят от степени посттравматической
деструкции ткани, активности микроорганизмов, состояния общих и локальных
механизмов защиты, способных подавить развитие попавших в рану
микроорганизмов, что в целом определяет характер и выраженность местного
воспаления [Цыбуляк Г.Н., 2005].
Антибактериальные свойства АЦПВП-Cu+Ag положительно проявились по
результатам опытов in vivo: у животных с огнестрельным ранением, которым
применяли материал АЦПВП-Cu+Ag, с 5-х сут и до окончания периода наблюдения
(18 сут после ранения) отмечалось динамичное снижение показателя
обсемененности раны (от 108 до 102 КОЕ/мл). При этом у животных после
использования материалов сравнения (АЦПВП и «Медитекс») количественный
показатель бактериальной обсемененности ран сохранялся на высоком уровне
вплоть до 18-х сут наблюдения (в большом количестве обнаруживались колонии
Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli) (рисунок 5).
Таким образом, учитывая принятый критический уровень микробной
обсемененности раны, не приводящий к дисбалансу защитных антибактериальных
механизмов организма (105 КОЕ/мл) [Александер Дж. и соавт., 1974], перевязочный
материал АЦПВП-Cu+Ag можно считать высокоэффективным антибактериальным
средством при местном лечении огнестрельного ранения. Антимикробные свойства
повязок определяют возможность остановки размножения раневой микрофлоры,
приводящей к вторичному некрозу тканей как в области ранения, так и в
грануляционной ткани, образующейся в процессе регенерации [Назаренко Г.И. и
соавт., 2002; Горюнов С.В. и соавт., 2014].
14
Рисунок 4 – Характеристика макроскопической оценки течения раневого процесса при экспериментальной огнестрельной ране у крыс.
*/+ - достоверность различий (р<0,05) относительно значений в группах АЦПВП/ АЦПВП-Cu и АЦПВП-Ag
15
Известно, что серебро в наноразмерном диапазоне обладает выраженным
бактерицидным, противовирусным, противогрибковым и антисептическим
действием, служит высокоэффективным антибактериальным средством в отношении
широкого спектра патогенных микроорганизмов [Бурмистрова В.А. и соавт., 2014;
Рыбачук А.В. и соавт., 2014; Чегодарь Д.В. и соавт., 2015]. Механизм
антибактериального действия наночастиц серебра связан с адсорбцией на
поверхности микробной клетки, повреждением целостности клеточной мембраны,
проникновением внутрь клетки и нарушением ее функции [Melaiye A. et al., 2005].
При этом разрушение мембраны и гибель микробных клеток происходит по прямому
пути воздействия наночастиц или опосредованно через активацию ПОЛ
[Егорова Е.М. и соавт., 2014], ингибировании ферментов дыхательной цепи.
Рисунок 5 – Количественная характеристика бактериальной обсемененности
экспериментального огнестрельного ранения мягких тканей бедра крысы (КОЕ/ мл)
Имеются отдельные примеры изучения бактерицидного эффекта наночастиц
меди на штаммы E.coli, и S.aureus [Богословская О.А. и соавт., 2006]. Препараты
меди, введённые в организм животных в виде наночастиц, обладали
пролонгированным действием и меньшей токсичностью по сравнению с солями.
Наночастицы меди при введении в организм стимулировали механизмы регуляции
микроэлементного
состава
и
активность
антиоксидантных
ферментов
[Глущенко Н.Н. и соавт., 2006; Арсентьева И.П. и соавт., 2007]. В отношении
клинических штаммов S.aureus антибактериальная активность наночастиц меди
выражена в широком диапазоне концентраций: от 0,001 до 1 мг/мл. Даже при
кратковременном воздействии (30 мин) наблюдалось уменьшение количества
микробных клеток, выросших на твердой питательной среде, на 97-100% по
сравнению с контролем (p<0,001) [Бабушкина И.В. и соавт., 2010].
Таким образом, механизм антибактериального эффекта экспериментальных
перевязочных материалов складывается из непосредственного действия металлов,
иммобилизированных в повязке, а также сорбции раневого отделяемого. При этом
16
х105квант/сек
очевидным явилось потенцирование металлов, иммобилизированных в нетканом
материале АЦПВП.
Применение образца перевязочного материала АЦПВП-Cu+Ag для лечения
огнестрельного ранения более выраженно влияло на нормализацию функциональной
активности фагоцитов, отражающей активность воспалительной реакции в организме
животных. АЦПВП-Cu+Ag статистически значимо, по сравнению с аналогичным
образцом перевязочного материала без металлизированных компонентов АЦПВП, а
также нетканым материалом «Медитекс», уменьшал уровень люминол-зависимой
хемилюминесценции лейкоцитов периферической крови и снижал интенсивность
ПОЛ в тканях зоны повреждения (рисунок 6).
Механизм ингибирования активности циркулирующих лейкоцитов, в
результате применения перевязочного материала АЦПВП-Cu+Ag при огнестрельном
ранении, можно рассматривать как антибактериальное действие серебра и меди.
Сроки исследования, сут
Рисунок 6 – Нормированная люминол-зависимая хемилюминесценция фагоцитов (в
пересчете на 1 млн. клеток), ×105 квант/сек4. * - достоверность различий (р<0,05)
относительно значений в группах АЦПВП и «Медитекс»
Активация свободнорадикальных реакций, наблюдаемая при огнестрельном
ранении, приводит к деградации тканей раневой поверхности, денатурации белков и
нуклеиновых кислот, что является благоприятной почвой для присоединения и
развития раневой микрофлоры, цитолитические эффекты которой усугубляют
разрушение тканей. Высвобождение биологически активных веществ из
разрушенных клеток инициирует воспалительные реакции [Липатов В.А., 2005;
Цыбуляк Г.Н., 2005]. Образование продуктов деградации и разрушения тканей,
выполняющих роль хемоаттрактантов, повышают активность лейкоцитов. Так как
антибактериальное действие наноструктурированных металлов в составе образца
АЦПВП-Cu+Ag уменьшает пул микробиоты раны, что в совокупности с дренажным
эффектом нетканой основы в виде АЦПВП способствует снижению процессов
свободнорадикальной деградации биологического материала раны и, тем самым,
17
нМ МДА/мг ткани
уменьшает уровень функциональной активности лейкоцитов, направленной на
утилизацию источника воспаления.
Выявленные особенности лабораторных показателей свободнорадикального
окисления и активности лейкоцитов подтвердились результатами клинических
проявлений течения раневого процесса и установленной концентрацией продуктов
ПОЛ в гомогенате мягких тканей области огнестрельного ранения (рисунок 7). Так,
относительно показателей в группах сравнения, животным которых применяли
образцы материала АЦПВП без иммобилизированных металлов и материал
«Медитекс», сроки исчезновения признаков воспаления вокруг ран после лечения
материалом АЦПВП-Cu+Ag сокращались в среднем на 6 сут (на 58,4%).
Сроки исследования, сут
Рисунок 7 – Концентрация продуктов ПОЛ в гомогенате мышечной ткани у крыс с
экспериментальной огнестрельной раной, нМ МДА/мг ткани. */+ - достоверность
различий (р<0,05) относительно значений до лечения / в групах АЦПВП и
«Медитекс»
Таким образом, одним из эффектов экспериментального перевязочного
материала АЦПВП-Cu+Ag, проявляющимся при его использовании после ПХО,
является антиоксидантное действие, опосредованное антибактериальным эффектом,
направленным на уменьшение повреждающих эффектов воспалительной реакции и
последствий деструкции тканей и цитолиза. Это имело важное значения для
профилактики развития вторичных некрозов и регуляции процесса заживления
огнестрельного ранения в целом.
Для раневого процесса характерны нарушения тканевого метаболизма во всех
его фазах из-за несоответствия местного кровотока потребностям тканей в доставке
веществ, необходимых клеткам для обмена. Сосудистая реакция захватывающая
артериолы, капилляры и венулы в зоне травмы включает в себя следующие
взаимосвязанные элементы: изменения в самих сосудах, внутрисосудистые и
внесосудистые изменения, замедление локального кровотока, увеличение вязкости
крови, понижение способности эритроцитов к деформируемости, повышение их
агрегации и развитие сладж-синдрома [Новицкий В.В. и соавт., 2004].
18
В результате проведенных исследований установлено, что у крыс, которым
применяли АЦПВП- Сu+Ag, показатели микроциркуляции в тканях околораневой
зоны восстанавливались до исходного уровня через 7 сут после начала
использования. У животных в контрольной группе, где применяли АЦПВП или
«Медитекс», в аналогичный период исследования нарушения микроциркуляции
сохранялись (рисунок 8). Можно предполагать, что механизм положительного
влияния экспериментального перевязочного материала на микроциркуляцию
опосредован антисептическим и противовоспалительным действиями наночастиц
меди и серебра. Локальное применение перевязочных материалов позволило
прервать развитие микроциркуляторных нарушений, интенсивность нормализации
которых зависела от применяемых образцов перевязочных материалов. Выявленные
изменения свидетельствовали о более эффективном положительном воздействии
образца АЦПВП- Сu+Ag, по сравнению с материалом АЦПВП и «Медитекс», на
состояние микроциркуляции в тканях области раневого дефекта.
В результате исследования установлено, что у крыс с огнестрельным ранением
в группах сравнения, с применением образцов материала на основе АЦПВП без
иммобилизированных наноструктурированных металлов и материала «Медитекс»,
морфологическая картина тканей в области повреждения свидетельствовала о
вялотекущем
воспалительном
процессе.
Сроки
очищения
ран
от
девитализированных тканей и микроорганизмов были более продолжительными.
Большое количество нейтрофилов и их измененных форм при незначительном
содержании макрофагов и клеток фибробластического ряда указывало на замедление
пролиферативной фазы воспаления. Применение АЦПВП-Cu+Ag сопровождалось
более ранней (начиная с 5-х сут после ранения) активацией репарационных
процессов за счет клеток регенеративного ряда (полибласты, фибробласты).
Для оценки регенеративной активности тканей у крыс в области
экспериментальной огнестрельной раны были исследованы мазки-отпечатки с
раневой поверхности через 5, 12 и 18 сут после травмы. Выявлено, что уже в ранние
сроки (5-е сут) после ранения у крыс, которым применяли материал АЦПВП-Сu+Ag
клеточный состав раневой поверхности отличался от соответствующих показателей в
группах сравнения в виде уменьшения доли клеток начальной фазы воспаления
(палочко-ядерные лейкоциты) и появления клеток второй линии воспалительного
ответа (моноциты, лимфоциты). В последующие сроки наблюдения (12 и 18 сут
после ранения) выявленные межгрупповые различия показателей клеточного состава
ран сохранялись. У крыс после применения материала АЦПВП-Сu+Ag было
статистически значимо (р<0,05) снижено содержание клеток воспалительного ряда,
при одновременном увеличении доли клеток регенеративного ряда (полибласты,
фибробласты).
В целом, результаты исследования клеточного состава раневой поверхности у
крыс с огнестрельным ранением свидетельствовали о более выраженном
положительном влиянии образца материала АЦПВП-Сu+Ag на репаративные
процессы уже в ранние сроки после начала его использования. Об этом
свидетельствовали признаки более раннего очищения ран от гнойно-некротического
детрита и последующего образования грануляционной ткани за счет клеток
регенеративного ряда, что в конечном итоге обеспечивает переход к стадии
рубцевания.
19
А
Б
В
Г
Рисунок 8 – Показатели микроциркуляции в мягких тканях бедра в области экспериментального огнестрельного ранения. А /
Б / В / Г – показатели по состоянию через 1 / 5 / 12 / 18 сут после начала лечения. * / + - достоверность различий (р<0,05)
относительно значений у крыс в интактной группе / группах АЦПВП и «Медитекс»
20
Наиболее действенным влиянием на заживление огнестрельной раны обладал
образец АЦПВП-Cu+Ag. В зоне сотрясения были менее выражены дистрофические
и некротические процессы, что, в конечном счете, реализовалось уменьшением
распространенности вторичного некротизирования поврежденной ткани. В области
вторичного некроза зоны сотрясения признаки репарации в виде образования и
созревания грануляционной ткани, развивались в более ранние сроки. Все это
обеспечивало возможность восстановления жизнеспособности поврежденных
тканей в зоне сотрясения и развитие полноценных грануляций. В целом,
применение АЦПВП-Cu+Ag после ПХО огнестрельного ранения у крыс, по
сравнению с использованием перевязочного материала без металлизированных
компонентов АЦПВП, а также материала «Медитекс», сопровождалось более
ранним (к 5-м суткам после начала лечения) уменьшением проявлений вторичного
некротизирования
поврежденной
ткани,
образованием
и
созреванием
грануляционной ткани в области вторичного некроза зоны сотрясения.
Таким образом, в результате проведенного исследования были выявлены
следующие эффекты применения микроволокнистого экспериментального
перевязочного
материала
АЦПВП-Cu+Ag,
изготовленного
методом
электроформования в соотношении 5:1, при использовании в начальную фазу
огнестрельного ранения (таблица 1).
Таблица 1 – Эффекты применения экспериментального перевязочного материала
АЦПВП- Cu+Ag в начальную фазу огнестрельного ранения
Проявления раневого процесса
огнестрельного ранения
Деструктивные изменения
тканей в области повреждения
Экссудация и воспалительный
отек
Нарушение микроциркуляции в
тканях в области повреждения
Активация
свободнорадикальных
процессов в тканях области
повреждения
Размножение раневой
микрофлоры
Клинические проявления
Эффекты АЦПВП-Cu+Ag
Ускорение очищения раневой поверхности от
гнойно-некротических масс
Дренаж и очищение раны от гнойнонекротического секвестра
Ускорение наступления периода
восстановления микроциркуляции в тканях в
области повреждения
Уменьшение функциональной активности
фагоцитов, повышенной в результате
повреждения тканей; снижение интенсивности
свободнорадикальных процессов в тканях
области повреждения
Количественное и качественное уменьшение
микробной обсемененности раны после
проведенной ПХО
Сокращение сроков исчезновения местных
признаков воспаления; ускорение
формирования очагов грануляционной ткани;
ускорение полного заживления ран
(у лабораторных крыс на 7 сут (22,4%)
21
Указанные эффекты были подтверждены результатами физических,
биохимических, микробиологических, морфологических методов исследования,
обусловлены составом и свойствами перевязочного материала и направлены на
основные звенья патогенеза огнестрельного ранения. Их реализация позволяет
прервать порочные круги, формирующиеся в патогенезе раневого процесса
(рисунок 9).
ВОЗДЕЙСТВИЕ РАНЯЩЕГО СНАРЯДА НА
ЗДОРОВЫЕ ТКАНИ
ПЕРВИЧНЫЙ НЕКРОЗ
(деструкция тканей и разрушение клеток
в зоне воздействия ранящего снаряда)
Микробное обсеменение раны
Выход в интерстиций БАВ
(гистамин, серотонин, гидролитические ферменты и др.)
×
Активация
свертывания
крови
×
Повышение
проницаемости
сосудов и отек
тканей
×
=
Размножение раневой
микрофлоры
Цитотоксическое
действие микроорганизмов
Инициация воспаления
(в т.ч. активация макрофагов)
Нарушение микроциркуляции
Гипоксия
Нарушение
трофики тканей
Нарушение метаболизма
сохранившихся
и образующихся клеток
Образование свободных радикалов
Ацидоз
ВТОРИЧНЫЙ
НЕКРОЗ
Рисунок 9 – Схема патогенеза огнестрельного ранения и саногенетические
эффекты экспериментального перевязочного микроволокнистого материала
АЦПВП-Cu+Ag при использовании в начальную фазу раневого процесса.
×/=– точки реализации сорбционного / антибактериального свойства
АЦПВП-Cu+Ag.
Проведение комплекса лабораторных, инструментальных, цитологического и
гистоморфологического методов исследования позволил выявить сравнительно
более выраженное влияние на раневой процесс перевязочного материала
АЦПВП-Cu+Ag. Полученные результаты исследования свидетельствуют о
патогенетически обоснованных механизмах действия данного материала,
22
позволивших сделать выводы о важной роли его свойств в саногенезе
огнестрельного ранения.
ВЫВОДЫ
1.
Основные
механизмы
саногенеза
при
использовании
микроволокнистого
перевязочного
материала
с
иммобилизованной
наноструктурированной формой меди и серебра при огнестрельном ранении
направлены на основные звенья раневого процесса и реализуются в виде улучшения
дренажной
функции,
повышения
антибактериальной
активности
и
антиоксидантного действия, что создает благоприятные условия для очищения
раны и протекания репаративных процессов.
2.
Применение
материала
АЦПВП-Cu+Ag
после
первичной
хирургической обработки при огнестрельном ранении у крыс снижало в 1,2 раза
микробную обсемененность раны с 5-х сут после ранения, при сохраняющейся в
течение 12-и сут высокой микробной обсемененности ран после применения
материалов АЦПВП или «Медитекс», способствует более ранней (к 5-м суткам
после начала лечения) нормализации функциональной активности фагоцитов и
снижению в 1,6 раза интенсивности перекисного окисления липидов в мышечной
ткани области огнестрельного ранения.
3.
В области огнестрельного ранения при использовании материала
АЦПВП-Cu+Ag в тканях околораневой зоны микроциркуляция восстанавливалась
до исходного уровня через 7 сут, при сохраняющихся нарушениях у животных в
группах сравнения, которым применяли перевязочный материал АЦПВП или
«Медитекс» до 10-11 сут.
4.
Применение АЦПВП-Cu+Ag после первичной хирургической
обработки огнестрельного ранения у крыс, по сравнению с использованием
перевязочного материала АЦПВП и «Медитекс», сопровождалось более ранней
(начиная с 5-х сут после ранения) активацией репарационных процессов за счет
клеток регенеративного ряда (полибласты, фибробласты), что способствовало
сокращению сроков формирования очагов грануляционной ткани в среднем на
4-е сут (на 46,2%, р<0,05), полного заживления раны – на 7-е сут (на 22,4%, р<0,05).
5.
По влагоемкости, макроскопической оценке динамики раневого
процесса из образцов перевязочных материалов, полученных методом
электроформования волокнистых материалов с использованием полимеров
ацетилцеллюлозы
и
поливинилпирролидона
в
соотношении
5:1
с
иммобилизованной наноструктурированной формой меди, серебра, меди и серебра
АЦПВП-Cu, АЦПВП-Ag и АЦПВП-Cu+Ag соответственно, наиболее эффективным
для лечебного применения в начальную фазу раневого процесса при огнестрельном
ранении является материал АЦПВП-Cu+Ag.
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
1. Для повышения эффективности лечения огнестрельных ранений
целесообразно внедрять в клиническую практику перевязочные средства на основе
микроволокнистых
материалов,
полученных
методом
ЭФВ-процесса
23
с использованием растворов полимеров ацетилцеллюлозы и поливинилпирролидона
с иммобилизованной наноструктурированной формой меди и серебра.
2. Совершенствование методологии и подходов к проведению доклинической
оценки эффективности разрабатываемых перевязочных материалов позволит
повысить качество экстраполяции результатов экспериментальных исследований и
оптимизировать способы лечения огнестрельных ранений.
СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ
1. Толстых, П.И. Современные лазерные технологии и биологические
активные раневые покрытия в лечении ран различного генеза / П.И. Толстых,
Ф.Е. Шин, С.Н. Васягин [и др.] // Военно-медицинский журнал. - 2010. - Т.331,
№8. – С. 41-42.
2. Шин, Ф.Е. Микроволокнистые нетканые перевязочные средства в
лечении гнойных ран / Ф.Е. Шин, А.К. Соболенко, С.Н. Васягин [и др.] //
Военно-медицинский журнал. - 2011. - Т. 332, №10. – С. 76-77.
3. Шин, Ф.Е. Лечение экспериментальных гнойных ран микроволокнистыми
раневыми покрытиями на основе технологии электроформования волокнистых
материалов / Ф.Е. Шин, И.Ю. Кулешов, Е.Ф. Шин и [и др.] // Материалы областной
научно-практической конференции посвященной пятилетию открытия кафедры
общей и факультетской хирургии ГКА им. Маймонида «Актуальные вопросы
хирургии».- М., 2011. – С. 136-138.
4. Васягин, С.Н. Оценка эффективности микроволокнистых нетканых
перевязочных средств в лечении гнойных ран / С.Н. Васягин, О.Г. Пригорелов, Е.Ф.
Шин // Боевой стресс. Медико-биологическая реабилитация лиц опасных
профессий: материалы Х Всероссийской научно-практической конференции. – М.:
ВМУ ФСБ, 2012. - С. 168-169.
5. Васягин, С.Н. Особенности заживления экспериментальных
огнестрельных
кожно-мышечных
повреждений
при
использовании
микроволокнистых
раневых
покрытий,
полученных
методом
электроформования, иммобилизованных наночастицами меди и серебра / С.Н.
Васягин, Н.В. Шперлинг, А.Б. Юдин [и др.] // Военно-медицинский журнал. –
2016. – Т. 337, №12. – С. 54-56.
6. Васягин, С.Н. Особенности влияния микроволокнистых раневых покрытий,
полученных методом электроформования, на скорость ранозаживления
экспериментальной огнестрельной раны / С.Н. Васягин, Н.В. Шперлинг, А.Б. Юдин
// Материалы Юбилейной научно-практической конференции, посвященной
15-летию образования научно-исследовательского центра Военно-медицинской
академии имени С.М. Кирова. – СПб., 2016. - С. 162.
7. Васягин, С.Н. Особенности заживления огнестрельных повреждений при
использовании микроволокнистых раневых покрытий, полученных методом
электроформования / С.Н. Васягин, Н.В. Шперлинг, А.Б. Юдин // Материалы
Всеармейской научно-практической конференции «Опыт применения сил и средств
медицинской службы Вооруженных Сил Министерства обороны РФ (МО СССР)
при ликвидации медико-санитарных последствий ЧС», посвященной 50-летию
ликвидации последствий землетрясения в Ташкенте и 30-летию ликвидации
24
последствий аварии на Чернобыльской АЭС. – СПб.: ВМедА имени С.М. Кирова,
2016. – С. 103.
8. Васягин, С.Н. Динамика микроциркуляторных нарушений в
огнестрельной ране под влиянием экспериментального перевязочного
материала с наноструктурированными медью и серебром (экспериментальное
исследование) / С.Н. Васягин, Н.В. Шперлинг, А.Б. Юдин и [и др.] // Крымский
журнал экспериментальной и клинической медицины. -2017. -Т. 7, № 1.-С. 4-10.
9. Васягин, С.Н. Динамика воспалительной реакции в области огнестрельной
раны при лечении перевязочным средством с иммобилизированными
наночастицами металлов / С.Н. Васягин, Н.В. Шперлинг // Многопрофильная
клиника XXI века. Инновации в медицине. – СПб., 2017. – С. 84-85.
10. Васягин, С.Н. Перекисное окисление липидов в мягких тканях области
огнестрельной раны, леченной перевязочным материалом с нанометаллами / С.Н.
Васягин, Н.В. Шперлинг // Многопрофильная клиника XXI века. Инновации в
медицине. – СПб., 2017. – С. 96-97.
11. Васягин, С.Н. Особенности воспалительной реакции при раневом
процессе при лечении перевязочным средством с наночастицами металлов / С.Н.
Васягин, Н.В. Шперлинг // Сборник материалов Всероссийской научнопрактической конференции, посвященной 25-летию ФГУП НПЦ «Фармзащита»
ФМБА России «Актуальные направления развития медицинских средств защиты от
экстремальных факторов. – М.: ФГУП НПЦ «Фармзащита», 2017. - С. 245.
12. Васягин, С.Н. Микроциркуляция в области экспериментальной
огнестрельной раны при лечении перспективным перевязочным материалом с
наноструктурированными металлами/ С.Н. Васягин, Н.В. Шперлинг // Сборник
материалов Всероссийской научно-практической конференции, посвященной 25летию ФГУП НПЦ «Фармзащита» ФМБА России «Актуальные направления
развития медицинских средств защиты от экстремальных факторов. – М.: ФГУП
НПЦ «Фармзащита», 2017. - С. 243.
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ И УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ
АЦПВП
АЦПВП-Cu
АЦПВП-Ag
АЦПВП-Cu+Ag
МДА
ПОЛ
ПХО
ТБК
ЭФВ
- раствор полимеров ацетилцеллюлозы и поливинилпирролидона
- раствор полимеров ацетилцеллюлозы и поливинилпирролидона
иммобилизованный наноструктурированной формой меди
- раствор полимеров ацетилцеллюлозы и поливинилпирролидона
иммобилизованный наноструктурированной формой серебра
- раствор полимеров ацетилцеллюлозы и поливинилпирролидона
иммобилизованный наноструктурированной формой меди и
cеребра
- малоновый диальдегид
- перекисное окисление липидов
- первичная хирургическая обработка
- 2'-тиобарбитуровая кислота
- процесс электроформования волокон
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа