close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

Фармакологические эффекты производных 3-гидроксипиридина в терапии экспериментального сахарного диабета 2 типа

код для вставкиСкачать
На правах рукописи
ШОКИНА СВЕТЛАНА ВЯЧЕСЛАВОВНА
ФАРМАКОЛОГИЧЕСКИЕ ЭФФЕКТЫ ПРОИЗВОДНЫХ 3ГИДРОКСИПИРИДИНА В ТЕРАПИИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО
САХАРНОГО ДИАБЕТА 2 ТИПА
14.03.06 – Фармакология, клиническая фармакология
(медицинские науки)
Автореферат
диссертации на соискание ученой степени
кандидата медицинских наук
Саранск - 2018
Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном
образовательном учреждении высшего образования «Национальный
исследовательский Мордовский государственный университет им. Н.П.
Огарева» (ФГБОУ ВО «МГУ им. Н.П. Огарева»)
Научный руководитель:
доктор медицинских наук, профессор Инчина Вера Ивановна
Официальные оппоненты:
Моисеева Инесса Яковлевна – доктор медицинских наук, профессор,
Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение
высшего образования «Пензенский государственный университет»
Министерства образования и науки Российской Федерации, кафедра «Общая
и клиническая фармакология», заведующая кафедрой
Котляров Андрей Александрович – доктор медицинских наук, профессор,
Обнинский институт атомной энергетики – филиал Федерального
государственного автономного образовательного учреждения высшего
образования «Национальный исследовательский ядерный университет
«МИФИ» Министерства образования и науки Российской Федерации, декан
медицинского факультета
Ведущая организация:
Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение
высшего образования «Приволжский исследовательский медицинский
университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации
Защита состоится «___» _________ 2018 года в ___ часов на заседании
диссертационного совета Д 208.041.01, созданного на базе ФГБОУ ВО
МГМСУ им. А.И. Евдокимова Минздрава России, по адресу 127473, г.
Москва, ул. Делегатская, д. 20/1
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГБОУ ВО МГМСУ им.
А.И. Евдокимова Минздрава России по адресу: 127206, г. Москва, ул.
Вучетича, д. 10а и на сайте университета http://dissov.msmsu.ru/
Автореферат разослан «___»___________2018 г.
Ученый секретарь
диссертационного совета,
доктор медицинских наук, профессор
Лобанова Елена Георгиевна
2
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность
Сахарный диабет 2 типа - одно из самых распространенных
заболеваний эндокринной системы. В Российской Федерации количество
больных данной патологией составляет 8 миллионов человек. Несмотря на
имеющийся арсенал современных лекарственных средств, ежегодно
увеличивается число лиц, страдающих осложнениями сахарного диабета.
Важнейшей составляющей развития осложнений сахарного диабета является
дислипидемия [Warraich HL etal., 2015].
Диабетическая дислипидемия, сопровождающаяся гиперхолестеринемией плюс гипергликемией, приводит к повышению уровня
окислительного стресса, при этом активность антиоксидантной защиты
снижается. Окислительный стресс, возникающий при диабете, вызывает
развитие эндотелиальной дисфункции сосудов, что приводит к развитию
гипоксии в результате ухудшения их релаксации и тканевой перфузии.
Развитие таких осложнений диабета, как ретинопатия, нейропатия,
нефропатия и прочих,
напрямую связано с активацией перекисного
окисления липидов [Дедов И.И., Шестакова М.В., 2015].
Активация перекисного окисления липидов является важнейшим
звеном в патогенезе диабета и его осложнений, поэтому антиоксидантные
препараты составляют неотъемлемую часть комплексной терапии. Ряд
клинических исследований последних лет подтверждает данное
предположение. Использование препаратов антиоксидантного типа действия,
в частности производных 3-гидроксипиридина (мексидола и эмоксипина) в
комбинированной терапии сахарного диабета 2 типа, позволило добиться
высокой терапевтической эффективности применяемой схемы лечения [В.И.
Мазуров, М.Е. Болотова, 2008; С.А. Бутрова 2005; О.Е. Колесова и соавт.,
2000; Занозина О.В. и соавт., 2006]. Стимулом
для
проведения
исследования явилась недостаточная изученность фармакологических
эффектов соединений, входящих в группу 3-гидроксипиридина - фумарата 3ГП и никотината 3-ГП
Цель работы: изучить фармакологические эффекты новых
производных 3-гидроксипиридина и их липосомальных форм при
экспериментальном сахарном диабете 2 типа.
Задачи исследования:
1. Изучить влияние никотината 3-ГП и фумарата 3-ГП и их
липосомальных форм на уровень глюкозы в периферической крови крыс с
экспериментальным сахарным диабетом.
2. Изучить влияние фумарата 3-ГП и никотината 3-ГП и их
липосомальных форм на липидный статус крыс с экспериментальным
сахарным диабетом.
3. Исследовать влияние фумарата 3-ГП и никотината 3-ГП, а также их
липосомальных форм на процессы перекисного окисления липидов крыс с
экспериментальным сахарным диабетом.
4. Изучить инсулинпотенцирующую и антиадренергическую виды
3
активности фумарата 3-ГП, никотината 3-ГП (липосомальные формы) у крыс
с экспериментальным сахарным диабетом.
5. Провести сравнительный анализ терапевтической эффективности
фумарата 3-ГП и никотината 3-ГП с препаратами сравнения –
этилметилгидроксипиридина сукцинат и глибенкламид.
Научная новизна работы
Впервые были изучены фармакологические эффекты новых
производных 3-ГП – фумарата и никотината и их липосомальных форм у
крыс с экспериментальным сахарным диабетом.
Экспериментальные данные показали наличие у фумарата 3-ГП и
никотината 3-ГП выраженных гипогликемических, гиполипидемических и
антиоксидантных свойств.
Изучаемые соединения обладают цитопротективным действием на
ткань надпочечников.
Липосомальная
форма
фумарата
3-ГП
проявляет
антиадренергическую активность и пролонгирует эффект экзогенного
инсулина.
Теоретическая и практическая ценность работы
Теоретически обоснована целесообразность использования в схемах
комплексной
терапии
сахарного
диабета
2
типа
препаратов
антиоксидантного типа действия.
Полученные результаты являются обоснованием для дальнейшей
разработки новых потенциальных лекарственных средств на основе новых
производных 3-ГП и в качестве корректоров метаболических нарушений при
диабете.
Выявленные фармакологические эффекты у производных 3-ГП служат
обоснованием для продолжения исследования в области «структураактивность» среди новых производных 3-гидроксипиридина.
Производные 3-ГП: никотинат и фумарат 3-ГП - могут быть
рекомендованы для доклинических исследований с целью оценки их
безопасности.
Разработан лабораторный регламент создания липосомальных
лекарственных форм производных 3-гидроксипиридина.
Результаты исследования внедрены в научно-исследовательскую
работу и учебный процесс кафедры фармакологии ФГБОУ ВО «Мордовский
государственный университет им. Н.П. Огарева».
Методология и методы исследования
Для решения поставленных задач в работе использовалась модель
стероидного диабета, широко используемая в экспериментальной
фармакологии. Методологически важным алгоритмом в исследовании
является изучение влияния новых фармакологических веществ на основные
показатели состояния организма, характеризующих тяжесть течения
сахарного диабета 2 типа. Использованный комплекс методов исследования
(лабораторно-клинические,
биохимические,
морфологические,
статистические) позволил оценить коррекцию метаболических нарушений
4
при диабете и терапевтическую эффективность применяемых схем лечения у
экспериментальных животных.
Основные положения, выносимые на защиту:
1. Соединения фумарат 3-ГП, никотинат 3-ГП оказывают
метаболические эффекты на модели стероидного диабета.
2. Фумарат 3-ГП и никотинат 3-ГП оказывают антиоксидантный
эффект при экспериментальной стероидной модели сахарного диабета.
3. Соединение фумарат 3-гидроксипиридина проявляет выраженную
антиадренергическую,
а
также
инсулинпотенцирующую
и
инсулинпролонгирующую виды активности на модели стероидного диабета.
4. Применение липосомальных форм данных соединений оказывает
более выраженный фармакологический эффект, чем субстанция.
Степень достоверности результатов
Достоверность полученных результатов выполненной работы
подтверждена достаточным количеством тест-систем, на которых
проводились исследования (168 аутбредные крысы самцы Wistar), с
использованием адекватной экспериментальной модели сахарного диабета,
применением современных методов исследования и корректно проведенной
статистической обработкой полученных данных.
Апробация результатов работы
Апробация результатов диссертационного исследования проведена на
расширенном заседании кафедр фармакологии и клинической фармакологии
с курсом фармацевтической технологии, амбулаторно-поликлинической
терапии с курсом общественного здоровья и организации здравоохранения,
нормальной и патологической физиологии с курсом гигиены Медицинского
института ФГБОУ ВО «МГУ им. Н.П. Огарёва», протокол №3 от 13.10.2017
г.
Научный доклад по теме диссертации представлялся в рамках
Государственной итоговой аттестации по окончании аспирантуры ФГБОУ
ВО «МГУ им. Н.П. Огарева».
Результаты исследовательской работы докладывались и обсуждались
на Международной научно-практической конференции г. Тамбов (2013), г.
Кишинев (2017), на ежегодной научной конференции молодых ученых
Мордовского госуниверситета г. Саранск (2015, 2016); на XLIV Огаревских
чтениях г. Саранск (2016).
Внедрение результатов исследования в практику
Результаты проведенных исследований внедрены в научноисследовательскую деятельность и учебный процесс кафедры фармакологии
и клинической фармакологии с курсом фармацевтической технологии, а
также используются в послевузовском профессиональном образовании при
подготовке аспирантов и клинических ординаторов по фармакологии в
ФГБОУ ВО «МГУ им. Н.П. Огарева».
Личный вклад автора
Автором лично проанализированы материалы литературных
источников по теме работы, разработан дизайн исследования, в соответствии
5
с которым выполнены эксперименты. Автором освоены и выполнены
исследования по моделированию сахарного диабета, составлены методики по
оценке
инсулинопотенцирующей,
антиоксидантной,
метаболической
активности исследуемых соединений. Диссертантом также проведена
систематизация и статистическая обработка полученных результатов,
сформулированы выводы и практические рекомендации, подготовлены
публикации по результатам работы.
Публикации
По теме диссертации опубликовано 11 работ, в том числе 5 в
изданиях, рекомендованных ВАК Минобрнауки России.
Структура и объем диссертации
Диссертация изложена на 116 страницах машинописного текста, состоит
из введения, обзора литературы, описания материалов и методов, 4 глав
собственных исследований, заключения, описания перспектив дальнейшего
развития темы, выводов, практических рекомендаций и библиографического
списка, включающего выходные данные 213 работ, в том числе 142
отечественных и 57 зарубежных авторов. Работа иллюстрирована 14
таблицами и 17 рисунками.
ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ
Материалы и методы
Манипуляции с животными проводились с соблюдением «Правил
проведения работ с использованием экспериментальных животных» (Приказ
№ 742 от 13.11.84. Министерства высшего и среднего специального
образования СССР, М.).
Исследование проводилось на 168 аутбредных крысах самцах Wistar в
возрасте 8-12 недель, массой 180-220 г., полученных из питомника
«Андреевка» ФГБУН "НЦБМТ" ФМБА России.
Животных распределяли по группам, используя в качестве критерия
массу тела. На начало эксперимента отклонения в массе животных были
минимальны и не превышали ±10% от средней массы ранее дозированных
животных. Каждому животному при формировании группы присваивали
номер в соответствии с цветовой маркировкой.
Условия содержания соответствовали видовой принадлежности и
способствовали сохранению здоровья и комфорта животных. Во время
исследования животных содержали группами по 6-9 особей в клетке при
свободном доступе к воде и корму. Световой цикл состоял из 12 часов дня и
12 ночи. Животных содержали в контролируемых условиях окружающей
среды (температура 19-25 °С, относительная влажность 30-70%).
Экспериментальную
модель
сахарного
диабета
вызывали
внутримышечным введением дексаметазона фосфата из расчета 125 мг на 1
кг массы животного [Buren J., Ereksson J., 1999].
Тест-объектами служили новые производные 3-ГП - фумарат 3-ГП и
никотинат 3-ГП, синтезированные на кафедре органической химии
Мордовского ГУ, г. Саранска, к.х.н. Семеновым А.В. Их структура была
6
подтверждена путем анализа спектра ЯМР 1Н, спектра ЯМР 13С и спектра
ИК. Препаратами сравнения служили этилметилгидроксипиридина сукцинат
(«Мексидол®»), производитель ЗАО «ЗиО-Здоровье», Россия, Московская
область, г. Подольск и глибенкламид («Манинил®»), производитель БерлинХеми, Германия, которые были закуплены в аптечной сети.
Общая структура исследования представлена в таблице 1.
Одновременно с инъекциями дексаметазона на протяжении 15 суток вводили
сравниваемые соединения. Первую группу составили интактные животные,
которые получали 0,1 мл физ. р-ра на одну особь. Вторая группа –
контрольная, крысы с моделированным стероидным диабетом, которые
перорально получали 0,9% раствор NaCl в дозе 0,1 мл. Животные 3 группы
получали фумарат 3-ГП в дозе 50 мг/кг per os. 4 группе крыс
этилметилгидроксипиридина сукцинат в дозе 50 мг/кг в/м. Для пятой группы
использовали никотинат 3-ГП в дозе 50 мг/кг per os. 6 группа получала
глибенкламид в дозе 5 мг/кг per os. Такая же последовательность
экспериментальных доз была соблюдена при использовании липосомальных
форм данных соединений.
Т а б л и ц а 1 . Структура экспериментального исследования
Экспериментальные
Схемы введения
Количество
группы
животных
Стероидный диабет, фармакологические вещества, препараты сравнения
0,1 мл физиологического раствора на одну 9
1 Интактные животные
особь, в течение 15 дней.
Ежедневно дексаметазон 125 мг/кг + 0,1 мл 9
2 Контроль
физиологического раствора на одну особь в
течение 15 дней.
3 Фумарат 3-гидроксипи- Ежедневно дексаметазон 125 мг/кг + 9
фумарат 3-гидроксипиридина в дозе 50 мг/кг
ридина 50 мг/кг
в течение 15 дней.
4 Этилметилгидроксипир Ежедневно дексаметазон 125 мг/кг + 9
в
идина сукцинат 50 мг/кг этилметилгидроксипиридина сукцинат
дозе 50 мг/кг в течение 15 дней.
5 Никотинат
3- Ежедневно дексаметазон 125 мг/кг + 9
гидроксипи-ридина 50 никотинат 3-ГП в дозе 50 мг/кг, в течение 15
дней.
мг/кг
Ежедневно дексаметазон 125 мг/кг + 9
6 Глибенкламид 5 мг/кг
глибенкламид в дозе 5 мг/кг в течение 15
дней.
Стероидный диабет, липосомальные формы фармакологического вещества, препараты
сравнения
0,1 мл физиологического раствора на одну 9
1 Интактные животные
особь, в течение 15 дней.
Ежедневно дексаметазон 125 мг/кг + 0,1 мл 9
2 Контроль
физиологического раствора на одну особь в
течение 15 дней.
3 Фумарат 3-гидроксипи- Ежедневно дексаметазон 125 мг/кг + 9
ридина
50
мг/кг липосомальная форма фумарат 3-ГП в дозе
50 мг/кг в течение 15 дней.
липосомальная форма
7
Т а б л и ц а 1 (продолжение)
Этилметилгидроксипирид
ина сукцинат 50 мг/кг
Ежедневно дексаметазон 125 мг/кг + 9
этилметилгидроксипиридина сукцинат в
дозе 50 мг/кг в течение 15 дней.
5 Никотинат 3-гидроксипи- Ежедневно дексаметазон 125 мг/кг + 9
ридина
50
мг/кг липосомальная фарма никотинат 3-ГП в
дозе 50 мг/кг в течение15 дней.
липосомальная форма
Ежедневно дексаметазон 125 мг/кг + 9
6 Глибенкламид 5 мг/кг
глибенкламид в дозе 5 мг/кг в течение 15
дней.
Стероидный диабет, липосомальные формы фармакологического вещества, препараты
сравнения, Инсуман® Базал ГТ
0,1 мл физиологического раствора на одну 6
1 Интактные животные
особь, в течение 15 дней
Ежедневно дексаметазон 125 мг/кг + 0,1 мл 6
2 Контроль
физиологического раствора на одну особь в
течение15 дней.
3 Фумарат 3-гидроксипи- Ежедневно дексаметазон 125 мг/кг + 6
ридина
50
мг/кг липосомальная форма фумарат 3-ГП в дозе
50 мг/кг в течение 15 дней, 1ЕД
липосомальная форма
Инсуман® Базал ГТ подкожно на 15 день.
4 Этилметилгидроксипирид Ежедневно дексаметазон 125 мг/кг + 6
этилметилгидроксипиридина сукцинат в
ина сукцинат 50 мг/кг
дозе 50 мг/кг в течение 15 дней. 1ЕД
Инсуман® Базал ГТ подкожно на 15 день.
5 Никотинат 3-гидроксипи- Ежедневно дексаметазон 125 мг/кг + 6
ридина
50
мг/кг никотинат 3-ГП в дозе 50 мг/кг
липосомальная форма в течение 15 дней.
липосомальная форма
1ЕД Инсуман® Базал ГТ подкожно на 15
день.
Стероидный диабет, липосомальные формы фармакологического вещества, препараты
сравнения, адреналовая гипергликемия
0,1 мл физиологического раствора на одну 6
1 Интактные животные
особь, в течение 15 дней
Ежедневно дексаметазон 125 мг/кг + 0,1 мл 6
2 Контроль
физиологического раствора на одну особь.
Однократно адреналина гидрохлорид в
дозе 0,05 мг/кг в/м.
3 Фумарат 3-гидроксипи- Ежедневно дексаметазон 125 мг/кг + 6
ридина
50
мг/кг липосомальная форма фумарат 3-ГП в дозе
50 мг/кг в течение 15 дней. Однократно
липосомальная форма
адреналина гидрохлорид в дозе 0,05 мг/кг
в/м на 15 день.
4 Этилметилгидроксипирид Ежедневно дексаметазон 125 мг/кг + 6
этилметилгидроксипиридина сукцинат в
ина сукцинат 50 мг/кг
дозе 50 мг/кг в течение 15 дней.
Однократно адреналина гидрохлорид в
дозе 0,05 мг/кг в/м на 15 день.
5 Никотинат 3-гидроксипи- Ежедневно дексаметазон 125 мг/кг + 6
ридина
50
мг/кг липосомальная форма никотинат 3-ГП в
дозе 50 мг/кг в течение 15 дней.
липосомальная форма
Однократно адреналина гидрохлорид в
дозе 0,05 мг/кг в/м на 15 день.
4
8
Липосомальные формы соединений вводили внутрибрюшинно.
Для оценки инсулинпотенцирующей способности фумарата 3-ГП,
никотината 3-ГП (липосомальные формы) и этилметилгидроксипиридина
сукцината животным подкожно вводили Инсуман® Базал ГТ (СанофиАвентис Правит. Ко.Лтд, Франция) на 15 день эксперимента (препарат
инсулина длительного действия) с последующим определением уровня
глюкозы в капиллярной крови с помощью электронного глюкометра «One
Touch Ultra» (Швейцария) через 1, 5 и 10 часов.
С целью изучения метаболической антиадренергической активности
соединений животным однократно вводили адреналина гидрохлорид в дозе
0,05 мг/кг в/м на 15 день эксперимента, с последующим определением
уровня глюкозы в капиллярной крови с помощью электронного глюкометра
«One Touch Ultra» через 30 минут, 1,5 часа и через 3 часа.
По истечении эксперимента животных каждой группы подвергали
эвтаназии под фторотановым наркозом.
Содержание глюкозы определяли глюкозоксидазным методом,
используя стандартные наборы реактивов (ОЛЬВЕКС Диагностикум).
Интенсивность процессов липопероксидации оценивалась по
содержанию в плазме крови вторичного продукта перекисного окисления
липидов (ПОЛ) – малонового диальдегида (МДА) и активности каталазы.
Определение МДА проводили по методу С.Г. Конюховой (1989), активность
каталазы в плазме крови по М.А. Королюк.
Определение содержания общего холестерина в сыворотке крови
проводили с помощью набора для количественного определения общего
холестерина (эстерифицированного и неэстерифицированного) в сыворотке
крови. Содержание триглицеридов (ТГ), холестерина (ХС) липопротеидов
низкой плотности (ЛПНП) в сыворотке крови определяли, используя
стандартные наборы реактивов (ОЛЬВЕКС Диагностикум). Исследование этих
показателей проводили на фотоэлектроколориметре ERMA (Япония).
Уровень липопротеидов очень низкой плотности (ЛПОНП) и
липопротеидов высокой плотности (ЛПВП) и индекс атерогенности (ИА)
рассчитывали по формулам:
Липосомы получали методом обращения фаз из лецитина и
холестерина. Препарат инкапсулировался методом пассивной загрузки.
Липосомы чистились с помощью ультрацентрифуги. Концентрации веществ
в растворе липосом: никотинат 3-ГП – 4,9% фумарат 3-ГП – 1,1%.
Для получения гистологических препаратов органов вскрывали
брюшную полость и извлекали надпочечники, тщательно отмывали от крови
охлажденным 0,9% раствором хлорида натрия. Отмытые от крови кусочки
органов аутбредных крыс Wistar фиксировали в 10 % растворе нейтрального
9
формалина. Зафиксированные образцы после промывки в проточной воде
подвергались обезвоживанию, путем помещения исследуемого материала в
спирты возрастающей концентрации. После дегидратации материал по
общепринятой методике заливали в парафин (А.И. Кононский, 1976), а затем
на роторном микротоме получали срезы и окрашивали гематоксилинэозином (Г.А. Меркулов, 1969). Морфогистологическую картину
изменений в органах оценивали на световом исследовательском
микроскопе «Биолам» (Россия) при увеличении в 100 и 200 раз и
фотографировали на цифровом аппарате модели «PowerShotA 400 Canon»
7.0
MEGAPIXELSAF
(Китай)
с
помощью
заводского
набора
микрофотонасадок.
Производилась оценка некоторых фенотипических признаков тяжести
течения экспериментальной модели сахарного диабета, для этого нами была
разработана специальная условная шкала, где каждый признак оценивается в
баллах в зависимости от проявления клинических признаков
экспериментального диабета. Характеристики признаков представлены в
таблице 2.
Т а б л и ц а 2 . Критерии оценки фенотипических признаков тяжести течения сахарного
диабета у подопытных животных
Изучаемый
признак
1
Количество баллов
2
Состояние кожных Неудовлетворительное Удовлетворительное
и шерстяных
(шерстка
тусклая, (шерстка
покровов
пилоэрекция,
тускловатая)
алопеция)
Масса тела
Выраженное снижение Умеренное снижение
животного
массы, больше чем на (на 10-20%)
30%
Локомоторная
Гиподинамичны,
Животные умеренно
активность
снижен
мышечный подвижны, при манитонус
и
снижена пуляциях оказывают
реакция на выем из сопротивление
клетки
3
Хорошее
(шерстка гладкая,
блестящая,
ровная)
Сохранение
исходной массы тела или увеличение
Животные активные, пытаются освободиться, могут
вокализировать
Результаты исследования и их обсуждение
Введение дексаметазона сопровождалось развитием достоверной
гипергликемии: уровень глюкозы в сыворотке крови крыс из группы
контроля был в 3,8 раз выше, чем у интактных животных (3,73±0,41 ммоль/л
у интактных крыс и 14,14±1,03 ммоль/л в группе контроля) (табл. 3).
На фоне терапии глибенкламидом уровень глюкозы в сыворотки крови
подопытных животных находился в пределах нормы и составил 4,52±0,27
ммоль/л. На фоне введения этилметилгидроксипиридина сукцината уровень
глюкозы был ниже, чем в контрольной группе животных на 39%. Никотинат
3-ГП оказывал сопоставимое с этилметилгидроксипиридина сукцинатом
снижение уровня гликемии на 41%. Фумарат 3-ГП вызывал достоверное
10
0
снижение
уровня
глюкозы,
превосходящее
действие
этилметилгидроксипиридина сукцината, на 49 % по отношению к контролю
(рис.1).
1-контроль; 2-фумарат 3-ГП 50 мг/кг per os; 3-этилметилгидроксипиридина сукцинат 50
мг/кг в/м; 4-никотинат 3-ГП 50 мг/кг per os; 5 – глибенкламид 5 мг/кг per os
Рис.1. Процентные показатели уровня гликемии у крыс при стероидном диабете под
действием экспериментальных соединений и препаратов сравнения
Примечание: ** - достоверность по отношению к группе контроля (p<0,05)
При изучении влияния исследуемых соединений на уровень ОХ
сыворотки крови выявлено достоверное снижение уровня ОХ в группах
животных, получавших фумарат 3-ГП и никотинат 3-ГП на 12% и 36%
соответственно.
В
группах
животных,
получавших
этилметилгидроксипиридина сукцинат и глибенкламид, также отмечалось
снижение уровня общего холестерина (ОХ), однако изменения были
недостоверны (табл. 3).
Таблица 3. Показатели уровня глюкозы общего холестерина и триглицеридов
сыворотки крови подопытных животных
Экспериментальные группы
Интактные животные
Контроль
Фумарат 3-ГП 50 мг/кг per os
Этилметилгидроксипиридина
сукцинат 50 мг/кг в/м
Никотинат 3-ГП 50 мг/кг per os
Глибенкламид 5 мг/кг per os
Глюкоза,
ммоль/л
(M±m)
Общий
холестерин,
ммоль/л
(M±m)
Триглицериды,
ммоль/л
(M±m)
3,73 ± 0,41
14,14±1,03*
7,28±0,56**
8,58±0,4**
1,44 ± 0,11
2,15±0,08*
1,98±0,03**
1,3±0,05
0,59±0,03
1,24±0,03*
0,82±0,09**
0,41±0,05
8,28 ± 0,58**
4,53 ± 0,27**
1,36 ± 0,21
1,74 ± 0,14
0,73 ± 0,17
0,41 ± 0,09**
Примечание: *- достоверность по отношению к интактным животным; **-по отношению к
группе контроля (p<0,05)
Уровень триглицеридов (ТГ) в контрольной группе животных был в
2,1 раза выше, чем у интактных животных (1,24±0,03 ммоль/л и 0,59±0,03
ммоль/л соответственно) (табл. 3). На фоне терапии глибенкламидом
наблюдалось достоверное снижение уровня ТГ на 67%. Фумарат 3-ГП
вызывал снижение уровня ТГ на 34% (p<0,05). На фоне введения
11
1
этилметилгидроксипиридина сукцината и никотината 3-ГП изменения уровня
ТГ были недостоверны (рис.2).
1-контроль; 2-фумарат 3-ГП 50 мг/кг per os; 3-этилметилгидроксипиридина сукцинат 50
мг/кг в/м; 4-никотинат 3-ГП 50 мг/кг per os; 5 – глибенкламид 5 мг/кг per os
Рис. 2 – Процентные показатели уровней триглицеридов сыворотки крови аутбредных
крыс Wistar при стероидном диабете на фоне введения исследуемых соединений и
препаратов сравнения
Примечание: *- достоверность по отношению к интактным животным (p<0,05);**- по
отношению к контрольной группе животных (p<0,05).
Выявлено достоверное снижение холестерина липопротеидов низкой
плотности (ЛПНП) в группах аутбредных крыс Wistar, получавших фумарат
3-ГП и никотинат 3-ГП на 28% и 8% соответственно; также в указанных
группах происходило снижение холестерина липопротеидов очень низкой
плотности (ЛПОНП) на 34% и 43% соответственно по отношению к
контрольной группе животных (рис.3).
1,6
1,5
1,45**
1,4
1,4
1,15**
ммоль/л
1,2
1,1*
1
0,79*
0,8
0,57*
0,6
0,4
0,2
0,38**
0,3
0,18
0,1
0,33**
0,13**
0,1
0,19
0,19
0,12**
0,09
0
1
2
3
ЛПНП
4
ЛПОНП
5
6
ЛПВП
1- интактные; 2 – контроль; 3-фумарат 3-ГП 50 мг/кг per os; 4этилметилгидроксипиридина сукцинат 50 мг/кг в/м; 5-никотинат 3-ГП 50 мг/кг per os; 6–
глибенкламид 5 мг/кг per os
Рис.3. Влияние исследуемых соединений и препаратов сравнения на уровень ХС ЛПНП,
ХС ЛПОНП и ХС ЛПВП сыворотки крови белых крыс при экспериментальном
стероидном диабете
Примечание: *- достоверность по отношению к интактным животным (p<0,05); **- по
отношению к группе контроля (p<0,05)
12
2
Достоверное
повышение
антиатерогенного
холестерина
липопротеидов высокой плотности (ЛПВП) наблюдалось в группах,
получавших фумарат 3-ГП, этилметилгидроксипиридина сукцинат и
глибенкламид на 83%, 46% и 39 % соответственно по отношению к
контрольной группе (рис.3).
Глюкокортикостероидные (ГКС) гормоны оказывают выраженное
влияние на процессы метаболизма, в первую очередь, благодаря своему
катаболическому действию, затрагивая практически все виды обмена
веществ. Поэтому на фоне приема стероидных препаратов довольно часто
отмечаются побочные эффекты, связанные с минералокортикоидной
активностью: гипернатриемия (и как следствие, происходит задержка
жидкости, вызывая периферические отеки), гипокалиемия (может развиться
аритмия, повышение потоотделения, необычная слабость, миалгии или спазм
мышц, и, как следствие, утомляемость). Последнее можно объяснить также
развитием гипокальциемии и усиленным распадом белка. Поэтому данное
исследование также подразумевало оценку эффективности исследуемых
соединений, прежде всего, их действие на определенные внешние признаки,
которые
отражают
состояние
животных
и
тяжесть
течения
экспериментальной модели сахарного диабета. Результаты анализа отражены
в таблице 4.
В результате оценки внешних объективных данных было установлено,
что наиболее благоприятное влияние на общее состояние аутбредных крыс
Wistar с экспериментальным стероидным диабетом, а значит, и на
метаболические процессы в организме подопытных животных оказали
фумарат 3-ГП 50 мг/кг per os и глибенкламид 5 мг/кг per os.
Т а б л и ц а 4 . Оценка в баллах некоторых
экспериментального сахарного диабета у животных
Экспериментальные группы
Интактные
Контроль
Фумарат 3-ГП 50 мг/кг per/os
Этилметилгидроксипиридина сукцинат 50 мг/кг в/м
Никотинат 3-ГП 50 мг/кг per/os
Глибенкламид 5 мг/кг per/os
внешних
признаков
проявления
Количество баллов
(M±m)
9,1±0,33
5,12±0,11*
8,45±0,17**
7,5±0,16**
7,5±0,11**
8,5±0,18**
Примечание: * – достоверность по отношению к интактным, (p<0,001)
отношению к контролю (p<0,001)
** – по
Фумарат 3-ГП и никотинат 3-ГП проявляют антиоксидантную
активность на модели стероидного диабета. Уровень МДА в группе крыс,
получавших фумарат 3-ГП, был в 2 раза меньше, чем в контрольной группе;
никотинат 3-ГП – в 2,2 раза. Активность каталазы при этом достоверно
возрастала до 17,54±1,13 мкКат/сек.л в группе крыс, получавших фумарат 3ГП и до 16,35±1,42 мкКат/сек.л никотинат 3-ГП (в контрольной группе –
11,63±1,49 мкКат/сек.л ) (таб. 5).
13
3
Т а б л и ц а 5 . Уровень малонового диальдегида и каталазы в сыворотке крови крыс при
стероидном диабете на фоне терапии исследуемыми соединениями и препаратами
сравнения
Экспериментальные группы
Контроль
Фумарат 3-ГП 50 мг/кг per os
Этилметилгидроксипиридина
сукцинат 50 мг/кг в/м
Никотинат 3-ГП 50 мг/кг per os
Глибенкламид 5 мг/кг per os
МДА, ммоль/л
16,15±0,06
8,0±2,44**
7,9±2,17**
7,6 ± 2,0**
12,1 ± 0,71**
Каталаза, мкКат/сек.л
11,63±1,49
17,54±1,13**
16,12±0,54**
16,35 ± 1,42**
13,24 ± 0,86
Примечание: ** -достоверность по отношению к группе контроля (p<0,05)
Таким образом, новые производные 3-ГП проявляют выраженную
метаболическую (снижают уровень глюкозы, ОХ, ТГ, холестерина ЛПНП и
ЛПОНП) и антиоксидантную (снижают уровень МДА и повышают
активность каталазы) активность на модели стероидного диабета.
При гистологическом изучении ткани надпочечников контрольной
группы животных были выявлены следующие изменения по сравнению с
тканью надпочечников интактных животных: нарушение гистологической
структуры надпочечников; атрофия коркового вещества; в мозговом слое –
резкое полнокровие кровеносных сосудов.
Терапия всеми изучаемыми соединениями позволила сохранить
гистологическую структуру надпочечников подопытных животных.
Признаки атрофии коры надпочечников менее выражены в группах крыс,
получавших фумарат 3-ГП и никотинат 3-ГП
Таким образом, исследуемые соединения обладают протективным
действием на ткань надпочечников, а учитывая тот факт, что надпочечники
являются одной из основных эндокринных желез, регулирующих
метаболизм, фумарат 3-ГП и никотинат 3-ГП способствуют восстановлению
функции надпочечников, который неизбежно нарушается на фоне
длительного применения ГКС.
В последнее время ведущие фармацевтические компании активно
изучают липосомальные формы лекарственных соединений как более
эффективные. Их рассматривают как идеальные «контейнеры» для переноса
биологически активных веществ, в том числе лекарственных, которые могут
включаться как в оболочку липосом, так и в их содержимое. Актуальным
является изучение возможности терапии СД с использованием
липосомальных форм лекарственных препаратов, способных «латать»
поврежденные клеточные мембраны, а соответственно воздействовать на все
основные звенья данного недуга. Нами исследованы липосомальные формы
никотината 3-гидроксипиридина и фумарата 3-ГП на модели стероидного
диабета.
В контрольной группе животных, получавших дексаметазон,
отмечалась достоверная гипергликемия (уровень глюкозы в сыворотке крови
3,3±0,2 ммоль/л у интактных крыс по сравнению с 14,4±1,0 ммоль/л в группе
контроля) (табл.6). Терапия глибенкламидом позволила сохранить уровень
14
4
глюкозы в сыворотке крови подопытных животных в пределах нормы
(средний уровень глюкозы в крови в данной группе составил 4,5±0,3
ммоль/л). На фоне терапии этилметилгидроксипиридина сукцинатом уровень
глюкозы в крови был на 41% ниже, чем таковой в контрольной группе
животных (рис.4).
1-контроль; 2-фумарат 3-ГП липосомальная форма 50 мг/кг; 3-никотинат 3-ГП
липосомальная форма 50 мг/кг; 4- этилметилгидроксипиридина сукцинат 50 мг/кг в/м; 5 –
глибенкламид 5 мг/кг per os
Рис. 4. Влияние исследуемых соединений и препаратов сравнения на уровень гликемии
сыворотки крови аутбредных крыс Wistar при стероидном диабете в процентах по
отношению к контрольной группе животных
Примечание: ** - достоверность по отношению к группе контроля (p<0,05)
Никотинат
3-гидроксипиридина
проявлял
сопоставимый
с
этилметилгидроксипиридина сукцинатом гипогликемический эффект
(средний уровень глюкозы в крови в группе никотината 3-гидроксипиридина
- 8,28±0,4 ммоль/л, в группе этилметилгидроксипиридина сукцината - 8,6±0,4
ммоль/л, р<0,05). При введении липосомальной формы никотината 3гидроксипиридина средний уровень глюкозы находился на верхней границе
нормы и был на 26% ниже, чем в группе терапии субстанцией без
липосомальной капсулы. (р<0,05).
Максимального снижения уровня гипергликемии удалось добиться
использованием липосомальной формы фумарата 3-ГП, эффект также более
выражен, чем на фоне применения субстанции. Различия в эффектах могут
быть связаны с более высокой биодоступностью липосомальной формы, а
также с собственным мембранопротективным эффектом липосомальной
капсулы, состоящей из фосфолипидов и лецитина.
Для уточнения механизма усиления гипогликемического эффекта при
применении липосомальной формы никотината 3-гидроксипиридина
необходимо проведение дальнейших исследований. Уменьшение уровня
гипергликемии приведет к снижению грозного осложнения СДдиабетической нефропатии.
15
5
Таблица 6. Показатели глюкозы, уровня общего холестерина, триглицеридов
сыворотки крови аутбредных крыс Wistar, при введении липосомальной формы
исследуемых соединений
Экспериментальные группы
Интактные животные
Контроль
Фумарат 3-ГП липосомальная
форма 50 мг/кг
Этилметилгидроксипиридина
сукцинат 50 мг/кг в/м
Никотинат
3-ГП
липосомальная форма 50 мг/кг
Глибенкламид 5 мг/кг per os
Глюкоза, ммоль/л
ОХ, ммоль/л
(M±m)
(M±m)
3,3±0,2
1,44 ± 0,01
14,4± 1,0*
2,91±0,14*
ТГ, ммоль/л
0,58±0,01
1,92±0,15*
5,6±0,27**
2,39±0,62**
1,39±0,31
8,28±0,4**
2,3±0,15**
0,61±0,15
8,6±0,4**
1,83 ± 0,04**
0,77 ± 0,06**
4,5±0,3**
2,74 ± 0,24
0,81 ± 0,29**
Примечание: *- достоверность: по отношению к интактным животным(p<0,05); **-по
отношению к группе контроля (p<0,05)
На фоне введения дексаметазона происходило значительное
увеличение уровня ОХ (в 2 раза) по сравнению с интактными животными
(таб. 6). Максимальное снижение уровня гиперхолестеринемии удалось
добиться введением липосомальной формы никотината 3-ГП на 37% по
отношению к контролю (рис. 5). Гипохолестеринемический эффект фумарата
3-ГП и этилметилгидроксипиридина сукцината был примерно одинаков.
Изменения ОХ на фоне терапии глибенкламидом носили недостоверный
характер. Таким образом, гипохолестеринемический эффект липосомальных
форм изучаемых соединений оказался выше по сравнению с использованием
субстанций.
1-контроль;
2-фумарат
3-ГП
липосомальная
форма
50
мг/кг;
3этилметилгидроксипиридина сукцинат 50 мг/кг в/м; 4- никотинат 3-ГП липосомальная
форма 50 мг/кг; 5 – глибенкламид 5 мг/кг per os
Рис. 5 - Процентные показатели уровня общего холестерина в сыворотке крови
аутбредных крыс Wistar при стероидном диабете на фоне введения исследуемых
субстанций и препаратов сравнения
Примечание: *- достоверность по отношению к интактным животным, (p<0,05), **-по
отношению к группе контроля (p<0,05)
16
6
Максимальное снижение уровня ТГ наблюдалось на фоне введения
липосомальной формы никотината 3-ГП в 2,5 раза по отношению к
контрольной группе, причем изменения, в отличие от субстанции данного
соединения носили достоверный характер (таб.6, рис.6). Также достоверное
снижение
уровня
ТГ
происходило
на
фоне
глибенкламида.
1-контроль;
2-фумарат
3-ГП
липосомальная
форма
50
мг/кг;
3этилметилгидроксипиридина сукцинат 50 мг/кг в/м; 4- никотинат 3-ГП липосомальная
форма 50 мг/кг; 5 – глибенкламид 5 мг/кг per os
Рис. 6. Влияние исследуемых соединений и препаратов сравнения на уровень ТГ
сыворотки крови белых крыс при стероидном диабете в процентах по отношению к
контрольной группе животных
Примечание: ** - достоверность по отношению к интактным животным (p<0,05)
При изучении уровня ХС ЛПНП, ХС ЛПОНП и ХС ЛПВП сыворотки
крови крыс при экспериментальном стероидном диабете было обнаружено
достоверное снижение уровня ХС ЛПНП на фоне терапией липосомальной
формы никотината 3-ГП на 37% по отношению к контрольной группе.
Остальные изменения не носили достоверный характер.
Таким образом, по результатам анализа липидного спектра наилучшие
результаты удалось добиться введением липосомальной формы никотината
3-ГП (достоверное снижение ОХ, ТГ и ХС ЛПНП), что сопровождалось
улучшением фенотипических признаков и отсутствием летальности
экспериментальных животных, получавших исследуемое соединение.
Результаты анализа эффективности исследуемых соединений и
препаратов сравнения по их влиянию на внешние признаки отражены в
таблице 7.
Наименее низкие баллы наблюдались в контрольной группе животных.
Следует также отметить, что летальность в данной группе составила 22%. В
группах
крыс,
получавших
препараты
сравнения
(этилметилгидроксипиридина сукцинат и глибенкламид), оценочный балл
был сопоставим (на 18% и 16% меньше по сравнению с интактными
животными).
17
7
Максимальные баллы были отмечены на
липосомальных формы фумарата 3-ГП никотината 3-ГП.
Таблица 7. Оценка в баллах некоторых
экспериментального сахарного диабета у животных
внешних
Экспериментальные группы
Интактные животные
Контроль
Фумарат 3-гидроксипиридина липосомальная форма 50 мг/кг
Этилметилгидроксипиридина сукцинат 50 мг/кг в/м
Никотинат 3-гидроксипиридина липосомальная форма 50 мг/кг
Глибенкламид 5 мг/кг per os
фоне
введения
признаков
проявления
Количество баллов
(M±m)
8,8±0,3
3,4±0,2*
8,6±0,2**
8,1±0,3**
7,2±0,7**
7,4±0,7**
Примечание: * – достоверность по отношению к интактным крысам, ** – достоверность
по отношению к контрольной группе животных. (p<0,05)
Снижение массы тела в контрольной группе животных, вероятно,
обусловлено выраженным катаболическим действием дексаметазона в дозе
125 мг/кг на жировую ткань. Летальных исходов на фоне введения всех
изучаемых соединений и среди интактных животных выявлено не было.
Липосомальные формы фумарата 3-ГП и никотината 3-ГП проявляют
выраженную антиоксидантную активность на модели стероидного диабета.
Уровень МДА в группе крыс, получавших фумарат 3-ГП, был в 2,05 раза
ниже, чем в контрольной группе; никотинат 3-ГП – в 2,23 раза. Активность
каталазы при этом достоверно возрастала до 17,7±1,15 мкКат/сек.л в группе
крыс, получавших фумарат 3- ГП, и до 16,76±1,33 мкКат/сек.л в группе
никотината3-ГП (в контрольной группе – 12,6±1,19 мкКат/сек.л ) (табл. 8).
Таблица 8. Уровень малонового диальдегида и каталазы в сыворотке крови аутбредных
крыс Wistar при стероидном диабете на фоне терапии исследуемыми соединениями и
препаратами сравнения
Экспериментальные группы
Контроль
Фумарат 3-ГП липосомальная форма 50
мг/кг
Этилметилгидроксипиридина сукцинат 50
мг/кг в/м
Никотинат 3-ГП липосомальная форма 50
мг/кг
Глибенкламид 5 мг/кг per os
МДА
ммоль/л
17,22±0,08
8,4±2,08**
Каталаза
мкКат/сек.л
12,6±1,19
17,7±1,15**
8,2±2,17**
16,18±0,54**
7,7 ± 2,0**
16,76 ± 1,33**
12,1 ± 0,71
10,24 ± 0,66
Примечание: достоверность: **-по отношению к группе контроля (p<0,05)
Первоочередной задачей лечения диабета является потенцирование
вводимого извне инсулина, это позволило бы снизить его суточную дозу, а
также уменьшить риск развития инсулинорезистентности и сосудистых
осложнений и, как следствие, снизить затраты на лечение больных СД.
Для диабета характерна усиленная продукция адреналина. При этом
18
8
катехоламины вмешиваются в углеводный обмен через β-адренорецепторы,
возбуждение которых сопровождается активацией аденилатциклазы и
повышением скорости гликогенолиза. Проявлением этого может быть
известное клиницистам гипогликемическое действие β-адреноблокаторов у
больных СД. Так же всем известно, что на фоне стресса повышается уровень
глюкозы в крови. В современном ритме жизни ограничить стрессовые
факторы крайне сложно.
В связи с этим было проведено изучение инсулинпотенцирующей и
антиадренергической активности липосомальных форм (как наиболее
эффективных) исследуемых соединений, где препаратом сравнения выступил
этилметилгидроксипиридина сукцинат.
Через 1 час после введения 1ЕД Инсуман® Базал ГТ уровень гликемии
в сыворотке крови животных контрольной группы снизился на 47,2 % по
отношению к исходному значению; на фоне введения фумарата 3 – ГП
уровень сахара крови снизился в 2 раза, этилметилгидроксипиридина
сукцината
в
1,94
раза,
никотината
3-ГП
в
1,8
раза
(рис.7).
9
Рис. 7 - Влияние фумарата 3-гидроксипиридина, никотината 3-гидроксипиридина и
этилметилгидроксипиридина сукцината на гипогликемический эффект инсулина на
модели экспериментального стероидного диабета
Примечание: *- достоверность по отношению к интактным животным (p<0,05)
Через 5 часов после введения 1ЕД Инсуман® Базал ГТ уровень
гликемии сыворотки крови крыс из группы контроля не достиг нормальных
значений и составил 7,96±0,19 ммоль/л (табл.9). На фоне введения фумарата
3-ГП, этилметилгидроксипиридина сукцината и никотината 3-ГП уровень
глюкозы сыворотки крови находился в пределах нормы (3,67±0,18 ммоль/л,
4,24±0,23 ммоль/л и 5,66±0,13 ммоль/л соответственно).
Через 10 часов после введения 1ЕД Инсуман® Базал ГТ в контрольной
группе животных препарат прекращал свое действие, уровень глюкозы
19
сыворотки крови приближался к исходным значениям и составлял
16,5±0,29ммоль/л. В группах животных, получавших фумарат 3-ГП и
этилметилгидроксипиридина сукцинат, сохранялся гипогликемический
эффект инсулина - уровень глюкозы сыворотки крови находился в пределах
нормы и составил 4,14±0,27 ммоль/л (для фумарата 3-ГП) и 4,4±0,26 ммоль/л
(для этилметилгидроксипиридина сукцината).
Таблица 9. Показатели уровня глюкозы в сыворотке крови аутбредных крыс Wistar на
фоне введения инсулина, исследуемых соединений и препаратов сравнения
Экспериментальные
группы
Интактные животные
Контроль
(крысы
с
экспериментальным
стероидным диабетом)
Фумарат
3-ГП
липосомальная форма 50
мг/кг
Этилметилгидроксипиридина
сукцинат 50 мг/кг
Никотинат
3-ГП
липосомальная форма 50
мг/кг
4,7 ± 0,42
16,7±4,14
Уровень глюкозы,ммоль/л
Через 1 час Через
5 Через
10
часов
часов
4,9 ± 0,41
4,8 ± 0,39
5,0 ± 0,42
11,34±0,35* 7,96±0,19*
16,5±0,29*
8,12±0,41
6,18±0,17*
3,67±0,18*
4,14±0,27*
8,62±0,4
6,66±0,22*
4,24±0,23*
4,4±0,26*
9,2±0,14
8,4±0,18
5,66±0,13*
7,9±0,17
Исходный
Примечание: * - достоверность по отношению к интактным животным (p<0,05)
0
Следовательно, введение фумарата 3-ГП в дозе 50 мг/кг в течение 15
дней потенцирует и пролонгирует действие инсулина.
Изучение антиадренергической активности исследуемых соединений
было проведено в опытах на животных: ее наличие оценивали по
способности блокировать у не лишенных корма крыс гипергликемизирующее
действие адреналина (табл.10).
Т абли ц а 10. Показатели глюкозы сыворотки крови аутбредных крыс Wistar при
адреналовой гипергликемии на фоне введения исследуемых соединений и препаратов
сравнения
Экспериментальные группы
Уровень глюкозы, ммоль/л
Исходный
Через 30
Через 1 час 30
Через 3
минут
минут
часа
4,7±0,43
7,5±0,34
7,7±0,30
4,9±0,29
с 16,9±4,19 18,34±3,58*
19,76±3,33
18,38±3,25
Интактные животные
Контроль
(крысы
дексаметазоновым диабетом)
Фумарат липосомальная форма 8,34±0,42
3-ГП 50 мг/кг
Этилметилгидроксипиридина
8,62±0,44
сукцинат 50 мг/кг
Никотинат
липосомальная 9,22±0,64
форма 3-ГП 50 мг/кг
8,45±0,13
8,56±0,28*
8,38±0,3*
9,18±0,38
9,76±0,24
9,32±0,25*
10,5±0,18
11,0±0,22
9,9±0,28
Примечание: * - достоверность по отношению к интактным животным (p<0,05)
20
В контрольной группе животных отмечалось быстрое и выраженное
повышение содержания глюкозы в крови с достижением ее пика через 1,5
часа после введения адреналина (уровень глюкозы в сыворотке крови
возрастал более чем на 2 ммоль/л по отношению к исходному значению). В
группе белых крыс, получавших этилметилгидроксипиридина сукцинат,
прирост уровня гликемии через 1 час 30 минут составил 13 %.
Минимальный прирост уровня гликемии наблюдался в группе крыс,
получавших фумарат 3-ГП (2,6%). Следует отметить, что на фоне введения
фумарата 3-ГП к концу 3-го часа после адреналиновой нагрузки отмечалось
возвращения уровня гликемии к исходным значениям (в отличие от
контрольной
группы
животных
и
животных,
получавших
этилметилгидроксипиридина сукцинат) . Достоверных изменений в группе
крыс, получавших никотинат 3-ГП, обнаружено не было.
Следовательно, фумарат 3-ГП в дозе 50 мг/кг проявляет
антиадренергическую активность (уменьшает рост уровня гликемии
сыворотки крови крыс в ответ на введение адреналина гидрохлорида) на
модели стероидного диабета.
Таким образом, на модели стероидного диабета липосомальная форма
фумарата 3-ГП в дозе 50 мг/кг проявляет антиадренергическую активность, а
также потенцирует и пролонгирует действие экзогенного инсулина.
В результате нашего исследования выявлено, что новые произвольные
3-ГП не уступают по своему действию этилметилгидроксипиридина
сукцинату, а по некоторым показателям превышают его эффективность
(оказывают более выраженный гипогликемический и гиполипидемические
эффекты). Учитывая, что никотинат 3-ГП проявил себя как хороший
гиперхолестеринемический препарат, рекомендуется включение его в
терапию проблем липидного обмена на фоне метаболических нарушений, в
том
числе
сахарного
диабета.
Фумарат
3-ГП,
обладающий
инсулинопотенцирующей активностью, с успехом может применяться
лицами, по жизненным показаниям применяющими инсулин, что позволит
уменьшить его суточную дозу, а соответственно улучшить качество жизни
пациентов. Антиадренергическая активность изучаемых соединений
позволит с успехом применять их в условиях стрессовой гипергликемии,
которой неизбежно сопровождаются все нарушения обмена веществ в
современном обществе.
ВЫВОДЫ
1.
Новые производные из группы 3-гидроксипиридина фамарат 3гидроксипиридина и никотината 3-гидроксипиридина в дозе 50 мг/кг
проявляют гипогликемический эффект на модели экспериментального
стероидного диабета: по отношению к группе контроля уровень глюкозы
сыворотки крови крыс на фоне применения никотината 3-ГП снижался на
41%, на фоне фумарата 3-ГП на 49%. Применение липосомальных форм
исследуемых субстанций в аналогичных дозах вызвало уменьшение, по
отношению к группе контроля, гликемии на 58% (никотинат 3-ГП) и на 61 %
21
1
(фумарат 3-ГП). Выявлено, что на фоне использования липосомальной
формы никотината 3-ГП, уровень гликемии был достоверно ниже на 26%,
чем в группе, получавших субстанцию.
2.
Исследуемые
субстанции
обладают
достоверной
гипохолестеринемической активностью. Уровень общего холестерина был
ниже по отношению к контролю: на 12 % в группе фумарата 3-ГП и на 36 %
в
группе
никотината
3-ГП.
Гипохолестеринемический
эффект
липосомальных форм изучаемых соединений в аналогичных дозировках
выше их простых форм. Введение липосомальной формы фумарата 3-ГП
приводило к снижению показателя холестерина на 18 %. Лучший результат –
снижение показателя ОХ на 37 % от контроля - показал никотинат 3-ГП в
липосомальной форме.
3.
Обнаружено наличие антиоксидантных свойств фумарата и
никотината 3-ГП, характеризующееся снижением уровня малонового
диальдегида, а также повышением активности каталазы сыворотки крови
аутбредных крыс Wistar.
4.
Липосомальная форма фумарата 3-гидроксипиридина на модели
стероидного диабета обладает антиадренергической активностью, кроме
этого пролонгирует и потенцирует фармакологическое действие экзогенного
инсулина.
5.
Исследуемые новые производные из группы 3-гидроксипиридина
не уступают по своему действию этилметилгидроксипиридина сукцинату, а
по некоторым показателям превышают его эффективность (оказывают более
выраженный гипогликемический и гиполипидемические эффекты).
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
Исходя из того, что у фумарата и никотината 3-ГП выявлены явные
гипогликемическая,
гипохолестеринемическая
и
антиоксидантная
активность, а также учитывая протективное влияние исследуемых
соединений на ткань надпочечников, целесообразно дальнейшее изучение
данных соединений при различных патологических процессах.
Дальнейшие исследования необходимы и для уточнения механизмов
усиления гипогликемического, гипохолестеринемического эффектов при
применении липосомальных форм фумарата 3-гидроксипиридина и
никотината 3-гидроксипиридина в сравнении с применением субстанций.
СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ
ДИССЕРТАЦИИ
1. Уланова Т.В. Изучение влияния новых производных 3гидроксипиридина на адреналовую гипергликемию в эксперименте
/В.И Инчина, Н.С. Русейкин, С.В. Худойкина // Современные
тенденции в образовании и науке: сборник научных трудов по
материалам Международной научно-практической конференции.
Тамбов, 2013. – С.142-143
22
2
2. Уланова Т.В. Возможности потенцирования действия экзогенного
инсулина препаратами антиоксидантного типа действия
/В.И.Инчина, С.В. Худойкина// Вестник ВГМУ. Волгоград, 2014. –
С. 138-139.
3. Уланова Т.В. Модификация гиполипидемической активности
симвастатина никотинатом 3-гидроксипиридина в эксперименте
/В.И Инчина, Н.С. Русейкин, С.В. Худойкина//Современные
проблемы науки и образования. – 2014. – №5; https://www.scienceeducation.ru/ru/article/view?id=14972.
4. Уланова Т.В. Проведение тестов функциональной диагностики на
модели аллоксанового диабета./ Н.С. Русейкин, В.И Инчина, С.В.
Худойкина// Научный альманах №7, 2015. – С. 926-929.
5. Уланова Т.В. Возможности коррекции диабетической гепатопатии
препаратами метаболического типа действия. / Н.С. Русейкин, В.И
Инчина, С.В. Худойкина// Научный альманах №10, 2015. – С. 363-366.
6. Уланова
Т.В.
Изучение
сахароснижающей
активности
липосомальной
формы
фумарата-3-гидроксипиридина
в
эксперименте/В.И. Инчина, Е.В. Семенова, А.В. Семенов, С.В.
Худойкина// Современные проблемы науки и образования. – 2016.
– №3;URL: URL: http://science-education.ru/ru/article/view?id=24463.
7. Уланова Т.В. Исследование влияния новых производных 3гидроксипиридина и препаратов сравнения на выживаемость и
некоторые биохимические показатели крови белых крыс при
экспериментальном диабете /Н.С. Русейкин, В.И. Инчина, С.В.
Худойкина, Э.В. Романова // Вестник Мордовского университета
том 26, №2, 2016. –С. 180-192.
8. Худойкина С.В. Сравнение гипогликемической активности фумарата 3гидроксипиридина и его липосомальной формы / С.В. Худойкина, Т.В.
Уланова, Н.С. Русейкин, В.И., Инчина В.И., С.Е. Хоронеко // В
сборнике: XLІV Огарёвские чтения материалы научной конференции: в
3 частях. Ответственный за выпуск П. В. Сенин. 2016. – С. 165-168
9. Худойкина С.В. Фармакологические эффекты липосомальной формы
фумарата 3-гидроксипиридина /С.В. Худойкина, Т.В. Уланова,
Н.С.Русейкин, В.И. Инчина, М.В. Вильдяева // Инновационное
направление учебно-методической и научной деятельности кафедр
материаловедения и технологий конструкционных материалов:
материалы Всерос. совещ. с междунар. участием. – Саранск, 2016. – С.
248-250
10.Уланова Т.В. Сравнение гипогликемической активности
никотината 3-гидроксипиридина и его липосомальной формы на
фоне индуцированных дексаметазоном метаболических нарушений
/ В.И. Инчина, Е.В. Семенова, А.В. Семенов, С.В. Шокина, Н.С.
Русейкин //Современные проблемы науки и образования. – 2017. –
№ 2; URL: http://www.science-education.ru/article/view?id=26316.
23
3
11. Шокина С.В. Применение новых производных 3-гидроксипиридина с
целью фармакологической коррекции нарушений обмена веществ на
фоне сахарного диабета //Развитие современной науки: теоретические
и прикладные аспекты: материалы Международной (заочной) научнопрактической конференции. – Кишинев, 2017. – С. 176-180.
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
3-ГП – 3-гидроксипиридин
ЛПВП - липопротеиды высокой плотности
ЛПНП - липопротеиды низкой плотности
ЛПОНП – липопротеиды очень низкой плотности
МДА – малоновый диальдегид
ОХ – общий холестерин
ПОЛ – перекисное окисление липидов
СД - сахарный диабет
ТГ – триацилглицериды
ПЖ – поджелудочная железа
ГКС – глюкокортикостероиды
4
Формат 60x84 1/16. Бумага офсетная. Печать методом ризографии.
Заказ №772. Подписано в печать 20.03.2018. Усл. печ. л. 1,5.
Уч. изд. л. 1,1. Тираж 100 экз.
Отпечатано в полном соответствии с качеством предоставленных
оригиналов
в типографии «Полиграф» (ИП Ковалева Елена Николаевна)
Свидетельство Х-11 № 11091, выдано Администрацией
Пролетарского района г. Саранска 03.09.03 г.
430003, г. Саранск, ул. Рабочая, 155
24
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа