close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

Нарушения системного и мукозального иммунитета и их коррекция при экспериментальных и клинических кератоконьюктивитах

код для вставкиСкачать
На правах рукописи
МЕДВЕДЕВА МАРИНА ВИКТОРОВНА
НАРУШЕНИЯ СИСТЕМНОГО И МУКОЗАЛЬНОГО ИММУНИТЕТА И ИХ
КОРРЕКЦИЯ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ И КЛИНИЧЕСКИХ
КЕРАТОКОНЪЮКТИВИТАХ
14.03.09 – клиническая иммунология, аллергология
Автореферат
диссертации на соискание учѐной степени
доктора медицинских наук
Москва – 2018
Работа выполнена в ФГБОУ ВО «Курский государственный медицинский университет»
Министерства здравоохранения Российской Федерации
Научный консультант:
доктор медицинских наук,
профессор
Калуцкий Павел Вячеславович
Официальные оппоненты:
Тотолян Арег Артѐмович - академик РАН, доктор медицинских наук, профессор,
ФБУН «Санкт-Петербургский научно-исследовательский институт эпидемиологии и
микробиологии
им.
Пастера»
Роспотребнадзора
лаборатория
молекулярной
иммунологии, заведующий лабораторией, директор;
Долгушин Илья Ильич - доктор медицинских наук, профессор, академик
РАН,
ФГБОУ ВО «Южно-Уральский государственный медицинский университет» Минздрава
России,
кафедра
микробиологии,
вирусологии,
иммунологии
и
клинической
лабораторной диагностики, заведующий кафедрой;
Лихванцева Вера Геннадьевна - доктор медицинских наук, профессор, ФГБОУ ДПО
«Институт повышения квалификации Федерального медико-биологического агентства»,
кафедра офтальмологии,
профессор кафедры.
Ведущая организация: ФГБОУ ВО «Российский национальный исследовательский
медицинский университет имени Н.И. Пирогова» Минздрава России
Защита состоится «___» __________ 2018 г. в ____ на заседании диссертационного
совета Д 208.040.08 в ФГБОУ ВО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России
по адресу: 119991, г. Москва, ул. Трубецкая, д. 8, стр. 2.
С диссертацией можно ознакомиться в Центральной научной медицинской
библиотеке Первого МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России по адресу: 119034, г.
Москва, Зубовский бульвар, д. 37/1 и на сайте www.mma.ru
Автореферат разослан «___» _____________ 2018 г.
Ученый секретарь диссертационного совета,
доктор медицинский наук, профессор
2
Калюжин Олег Витальевич
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность проблемы. По данным статистики в России офтальмологической
патологией страдают около 4,7 млн. человек. При этом воспалительные заболевания
переднего отрезка глаза регистрируются у 30-40% больных, обращающихся за
офтальмологической медицинской помощью. В общей структуре инфекционновоспалительных заболеваний переднего отрезка глаза лидирующую позицию занимают
конъюнктивиты (66,7%), второе место – блефариты (22,3%) (Майчук Ю.Ф., 2014;
McGrath D., 2012). Кератиты, преимущественно вирусной этиологии, встречаются не
более чем в 10% случаев. До 48,9% случаев кератитов имеют осложнѐнное течение:
абсцесс роговицы, десцеметоцеле, перфорация, эндофтальмит (Шаимова В.А., 2007). По
данным M.D. Green и соавт. (2007) частота неблагоприятных исходов кератитов
достигает 54,2%, причѐм до 23,7% случаев заболевания заканчивается энуклеацией или
эвисцерацией, что существенно снижает качество жизни пациентов и затрудняет их
социальную адаптацию (Butler T.K.H. et al., 2005).
Вирусная инфекция конъюнктивы и роговицы зачастую сопровождается
воспалительными процессами бактериальной природы. По данным отечественных и
зарубежных авторов частота бактериальных конъюнктивитов составляет от 40 до 73%
всех
случаев
воспалительных заболеваний
глаз
(Азнабаев Р.А. и
др.,
2011).
Рецидивирующему течению этой патологии способствуют нарушения системного и
местного иммунитета (Ковалевская М.А., Туровец Е.К., 2012).
В последние годы широкое, часто бесконтрольное применение антибиотиков
обусловило изменение как этиологической структуры гнойной инфекции, так и
биологических свойств возбудителей с появлением антибиотикорезистентных штаммов.
Следствием этих изменений явилось прогрессирующее снижение эффективности
антибиотикотерапии на фоне растущей аллергизации населения (Ковалевский Е.И.,
1996), а имеющее место совершенствование генофонда микроорганизмов (бактерий,
вирусов, простейших, риккетсий, хламидий, микоплазм) заставляет практическое
здравоохранение обращать всѐ большее внимание на лечение, профилактику ранее
известных и вновь выявляемых инфекционных заболеваний (Караулов А.В. и др., 2015;
2017). В связи с этим весьма актуальным является поиск новых методов лечения
воспалительных заболеваний переднего отрезка глаза. Обширный экспериментальный и
клинический
материал
свидетельствует
3
о
необходимости
применения
иммуномодулирующих препаратов при большинстве инфекционных заболеваний,
поскольку в подавляющем числе случаев при этом формируются нарушения иммунной
системы, осложняющие течение и исход основного процесса (Караулов А.В. и др.,
2000).
Кроме
того,
дистрофические
изменения
конъюнктивы
и
роговицы,
развивающиеся при длительно текущих хронических заболеваниях в результате
нарушения как иммунного, так и оксидативного баланса организма, обосновывают
необходимость использования в схемах лечения препаратов, направленных на снижение
выраженности повреждающего эффекта воспалительного процесса.
Не
менее
важной
причиной,
осложняющей
ситуацию
в
современной
офтальмологии, следует считать отмеченные в последние годы неблагоприятные
изменения иммунобиологической реактивности организма под действием факторов
технического прогресса (загрязнение окружающей среды, «химизация» образа жизни,
ионизирующее облучение и др.).
Слизистые открытых полостей макроорганизма представляют собой единую
систему.
Их
микробиоценозы
–
динамическая
микроэкологическая
система,
компонентами которой являются макроорганизм, его микрофлора и окружающая среда,
характеризующаяся единством и способностью к саморегуляции (Караулов А.В. и др.,
2015). Реакция в ответ на развитие патологического процесса в глазу со стороны
защитных факторов слезы и конъюнктивы превышает соответствующий общий
иммунный ответ организма, а специфика еѐ зависит от характера патологического
процесса.
Факторы
защиты
слѐзной
жидкости
очень
восприимчивы
даже
к
минимальным изменениям со стороны метаболизма тканей глаза. При этом необходимо
отметить, что на состояние органа зрения, процессы метаболизма составляющих его
тканей могут оказывать воздействие различные экологические факторы, среди которых
большую роль играют магнитные поля. Магнитные поля аномальных характеристик, как
было показано во многих работах (Агаджанян Н.А. и соавт., 1992, 2001; Бельский В.В. и
соавт., 1997, 2003, 2007; Беседин А.В., Калуцкий П.В., 2006; Валлизер О.Х., 2002; и др.),
оказывают влияние на характер и силу ответной реакции организма. Показано, что
аномальное геомагнитное поле (ГМП) региона Курской магнитной аномалии – КМА,
где его напряжѐнность в 4-5 раз превышает фоновые значения других регионов, влияет
как на здоровый, так и на патологически изменѐнный организм (Калуцкий П.В. и др.,
1997; Киселева В.В, Закарян Л.М., 1997; Бельский В.В. и др., 2000; Беседин А.В.,
4
Калуцкий П.В., 2007; и др.). При этом в результате истощения приспособительных
механизмов организма изменения гомеостаза выходят из-под контроля нейроэндокринно-иммунной регуляторной системы, что приводит к развитию различных
патологических изменений (Прокопенко Л.Г., Конопля А.И., 2000).
Поэтому важным и весьма актуальным является изучение особенностей течения
воспалительных процессов в условиях воздействия неблагоприятных экологических
факторов (в том числе аномальных магнитных полей). Недостаточная эффективность
этиотропной терапии, с одной стороны, и способность магнитных полей влиять на
активность лекарственных средств в организме, с другой стороны, делает актуальным
работы по разработке патогенетически обоснованных методов лечения, учитывающих
особенности развития патологического процесса в условиях воздействия таких
неустранимых экологических факторов среды обитания человека, как магнитные поля
повышенной напряжѐнности.
Цель исследования: установить характер и степень выраженности нарушений
иммунного и оксидантного статуса при кератоконъюнктивитах в условиях воздействия
неблагоприятных
экологических
факторов
(магнитного
поля
повышенной
напряжѐнности) и разработать патогенетически обоснованные методы их коррекции.
Задачи исследования:
1. Изучить структуру заболеваемости офтальмопатологией у жителей Курской
области, проживающих в условиях нормальной или повышенной напряжѐнности
геомагнитного поля.
2. Выявить
функции
циркулирующих
нейтрофилов,
а
также
уровня
иммуноглобулинов, про- и противовоспалительных цитокинов в сыворотке крови и
слѐзной жидкости у клинически здоровых лиц, проживающих в условиях воздействия
магнитного поля различной напряжѐнности.
3. Оценить особенности показателей оксидантных и антиоксидантных систем в
сыворотке крови и слѐзной жидкости у клинически здоровых лиц, проживающих в
условиях воздействия магнитного поля различной напряжѐнности.
4. Установить системные и местные иммунологические сдвиги и состояние
оксидантно-антиоксидантного баланса у больных кератоконъюнктивитами в условиях
воздействия магнитного поля различной напряжѐнности.
5. Проанализировать клиническую эффективность стандартного лечения и
сопровождающие
его
изменения
показателей
5
иммунного
статуса,
перекисного
окисления
липидов
и
кератоконъюнктивитами
в
системы
антиоксидантной
условиях
воздействия
защиты
магнитного
у
поля
больных
различной
напряжѐнности.
6. На модели стафилококкового кератоконъюнктивита у морских свинок в
условиях повышенной напряжѐнности магнитного поля сравнить влияние азоксимера
бромида
(АБ),
глюкозаминилмурамилдипептида
кислоты+полиуридиловой
(ПГЭН),
комбинации
кислоты
(ПАдК+ПУрК),
полиадениловая
пентагидроксиэтилнафтохинон
(ГМДП),
полиадениловой
пентагидроксиэтилнафтохинон
кислота+полиуридиловая
кислота
и
на течение заболевания, а также на показатели
иммунного статуса, перекисного окисления липидов и системы антиоксидантной
защиты экспериментальных животных.
7. Выявить изменения показателей иммунного и оксидантного статуса у больных
кератоконъюнктивитами
напряжѐнности
(полиадениловая
при
в
условиях
включении
в
воздействия
магнитного
стандартную
терапию
кислота+полиуридиловая
кислота)
поля
различной
иммуномодулятора
или
антиоксиданта
(пентагидроксиэтилнафтохинон), а также их комбинации.
8. Провести оценку клинической эффективности схем лечения пациентов с
воспалительными заболеваниями переднего отрезка глаза, включающих традиционную
терапию и препараты иммунокорригирующего и антиоксидантного действия.
9. Разработать рекомендации по коррекции иммунных и оксидантных расстройств
у больных с воспалительными заболеваниями переднего отрезка глаза в условиях
воздействия магнитного поля повышенной напряжѐнности.
Научная
новизна.
Впервые
установлено,
что
у
больных
на
фоне
рецидивирующего кератоконъюнктивита формируются нарушения иммунного и
оксидантного статусов, характер и выраженность которых зависят от уровня
напряжѐнности
геомагнитного
поля.
Развитие
у
пациентов
региона
КМА
воспалительных форм офтальмопатологии сопровождается более выраженными по
сравнению с регионом с фоновыми значениями геомагнитного поля клиническими
изменениями, частотой и характером осложнений. Доказано, что стандартная терапия не
обеспечивает адекватной коррекции разбалансированных показателей иммунного и
оксидантного статуса и нормализации клинических проявлений у больных. В
эксперименте показано, что наибольшим иммунокорригирующим эффектом при
6
кератоконъюнктивите обладают пентагидроксиэтилнафтохинон и полиадениловая
кислота+полиуридиловая кислота как при изолированном применении, так и в
комбинации. Установлено, что по совокупности результатов воздействия на показатели
иммунной защиты, оксидантного статуса и клиническую картину у больных с
кератоконъюнктивитами, особенно проживающих в экологически неблагоприятном по
геомагнитной обстановке регионе КМА, наиболее эффективной является схема лечения,
сочетающая стандартную терапию с внутримышечным введением антиоксиданта
пентагидроксиэтилнафтохинон и инстилляциями иммуномодулятора полиадениловая
кислота+полиуридиловая кислота.
Теоретическая и практическая значимость работы. Выявленные особенности
в структуре и распространѐнности заболеваний глаз у жителей Курской области,
проживающих в условиях повышенной либо нормальной напряжѐнности геомагнитного
поля, служат основой для разработки мер по прогнозированию работы лечебнопрофилактических организаций региона КМА. Расширены представления об иммунных
и оксидантных механизмах на системном и местном уровне, лежащих в основе развития
кератоконъюнтивита, и особенностях реакции организма больного в зависимости от
воздействия геомагнитного поля различной напряжѐнности. Продемонстрирована
возможность использования показателей функционально-метаболической активности
фагоцитов и уровня цитокинов крови и слѐзной жидкости для прогнозирования
характера
течения
локального
и
кератоконъюнктивита
системного
иммунитета
и
оценки
выраженности
в
геомагнитном
поле
дисбаланса
повышенной
напряжѐнности.
Экспериментально обоснована и клинически подтверждена эффективность
применения
антиоксиданта
(пентагидроксиэтилнафтохинон),
иммуномодулятора
(полиадениловая кислота+полиуридиловая кислота) и их комбинации в составе
комплексной
терапии
для
коррекции
иммунных
расстройств
и
оксидативно-
антиоксидантного дисбаланса при кератоконъюнктивите в условиях воздействии
экологически неблагоприятных факторов КМА.
Внедрение результатов исследования в практику. Полученные данные вошли в
учебные программы и используются в лекционных курсах и на практических занятиях
ряда кафедр Курского государственного медицинского университета, Белгородского
7
государственного
университета,
Воронежского
государственного
медицинского
университета им. Н.Н. Бурденко.
Основные положения, выносимые на защиту:
1. У жителей региона КМА, характеризующегося неблагоприятной экологической
обстановкой (значительно повышенным уровнем напряжѐнности геомагнитного поля),
по сравнению с жителями региона с фоновыми значениями геомагнитного поля чаще
встречаются заболевания век, слизистой оболочки, патология слѐзных путей, болезни
сосудистой оболочки глаза и патология роговицы.
2. У здоровых людей под воздействием аномального геомагнитного поля региона
КМА развиваются нарушения фагоцитарного звена иммунитета, цитокинового статуса и
продукции основных классов иммуноглобулинов, а также антиоксидантной системы.
3. Развитие воспалительных заболеваний переднего отрезка глаза у пациентов
региона КМА приводит к усугублению нарушений иммунного и оксидантного статуса.
4. Стандартная
фармакотерапия
не
позволяет
достичь
коррекции
разбалансированных показателей иммунного и оксидантного статуса и нормализации
клинических проявлений у больных кератоконъюнктивитами, проживающих в
различных по экологической характеристике регионах.
5. В неблагоприятных экологических условиях пентагидроксиэтилнафтохинон и
полиадениловая
кислота+полиуридиловая
кислота
как изолированно, так и
в
комбинации обладают максимальным корригирующим действием на показатели
иммунного и оксидантно-антиоксидантного гомеостаза организма животных и
улучшают течение экспериментального кератоконъюнктивита.
6. У
больных
с
кератоконъюнктивитом,
подвергающихся
воздействию
экологических факторов КМА, наибольший корригирующий эффект на иммунную,
антиоксидантную системы и клиническую картину заболевания отмечается при
сочетании стандартной терапии с пентагидроксиэтилнафтохиноном и полиадениловой
кислотой+полиуридиловой кислотой.
Личный вклад автора состоит в непосредственном участии на всех этапах
исследовательской работы. Автором проведены анализ и обобщение отечественных и
зарубежных источников литературы по теме диссертации, совместно с научным
консультантом определены цель, задачи, разработан дизайн исследования. Автор
принимал участие в формировании клинических групп, самостоятельно проводил
8
анкетирование, обследование и наблюдение пациентов, взятие биологического
материала.
Автором
лично
проведѐн
анализ
и
интерпретация
клинических,
лабораторных, иммунологических данных, их систематизация и статистическая
обработка, подготовка публикаций и докладов.
Апробация работы. Основные положения диссертации представлены на научных
конференциях Курского государственного медицинского университета (Курск, 20102016); VI Российском общенациональном офтальмологическом форуме (Москва, 2013);
VII Всероссийской научной конференции молодых учѐных с участием иностранных
специалистов «Актуальные проблемы офтальмологии» (Москва, 2012); научнопрактической конференции с международным участием «Актуальные проблемы
современной инфектологии» (Иркутск, 2013); научно-практической конференции
молодых учѐных с международным участием «Актуальные вопросы экспериментальной
и клинической медицины» (Чебоксары, 2014); научно-практической конференции
офтальмологов
Южного
офтальмологической
федерального
практике
округа
регионов»
«Инновационные
(Астрахань,
2014);
технологии
72-й
в
итоговой
региональной научной конференции молодых учѐных и студентов с международным
участием (Хабаровск, 2015); Международном конгрессе «Инновационные технологии в
иммунологии и аллергологии» (Москва, 2015); XXII Всемирном конгрессе по
клинической патологии и реабилитации в медицине (Дубай, ОАЭ, 2016); XI
международной научной конференции «Приоритеты мировой науки: эксперимент и
научная
дискуссия»
(Северный
Чарльстон,
Южная
Каролина,
США,
2016);
Всероссийской научно-практической конференции «Нерешенные вопросы этиотропной
терапии актуальных инфекций» (Санкт-Петербург, 2016); I Калининградском научном
иммунологическом форуме (Калининград, 2016); ХI Всероссийской конференции с
международным участием «Иммунологические чтения в г. Челябинске» (Челябинск,
2016); II Всероссийской научно-практической конференции с элементами научной
школы для молодых учѐных и специалистов «Эндогенные бактериальные инфекции:
микробиологические и иммунологические аспекты» (Оренбург, 2016). Апробация
работы состоялась на совместном заседании кафедр микробиологии, вирусологии,
иммунологии, офтальмологии ФГБОУ ВО КГМУ Минздрава России 14 октября 2016
года (протокол №15).
9
Соответствие диссертации паспорту научной специальности. Выявление
системных и местных иммунологических сдвигов у больных с кератоконъюнктивитом,
которые могут использоваться как критерии диагностики и прогноза развития
заболевания, соответствует формуле научной специальности 14.03.09 – клиническая
иммунология, аллергология – и следующим областям исследований этой специальности:
- изучение патогенеза иммунозависимых заболеваний (иммунодефицитных
состояний, аллергической и аутоиммунной патологии);
-
разработка
и
усовершенствование
методов
диагностики,
лечения
и
профилактики аллергических и иммунопатологических процессов.
Публикации. По материалам диссертации опубликовано 24 работы (в том числе
13 – в рецензируемых изданиях, рекомендованных ВАК Министерства образования и
науки РФ для публикации основных научных трудов), в которых содержится полный
объѐм информации, касающейся темы диссертации.
Объѐм и структура диссертации. Диссертация изложена на 248 страницах
машинописного текста и включает в себя введение, обзор литературы, материалы и
методы исследования, главы собственных исследований, заключение, выводы,
практические рекомендации, список литературы, состоящий из 282 источников
отечественных и зарубежных авторов. Работа иллюстрирована 37 таблицами и 63
рисунками.
Материалы и методы исследования
Экспериментальные исследования.
Экспериментальная часть исследований проведена на 220 морских свинках
массой 180–200 г. В опытах использовали животных, прошедших карантинный режим
вивария Курского государственного медицинского университета и не имевших внешних
признаков каких-либо заболеваний. Все животные содержались в одинаковых условиях
на обычном пищевом режиме. Для получения статистически достоверных результатов
группы формировали из 15–17 животных. В контрольные и опытные группы входили
животные одного возраста, полученные из питомника одновременно. Разброс в группах
по исходной массе не превышал 10%. Все исследования проводили в одно и то же
время суток во второй половине дня с соблюдением принципов, изложенных в
Конвенции по защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и
других целей (г. Страсбург, Франция, 1986).
10
Модель экспериментального кератоконъюнктивита.
Экспериментальный
кератоконъюнктивит
вызывали
у
животных
путѐм
инфицирования конъюнктивы и роговицы глаза взвесью суточной агаровой культуры
Staphylococcus aureus в концентрации 2х109 микробных тел/мл после их травмирования
с последующей оценкой показателей фагоцитарного звена антиинфекционной защиты,
активности оксидантных и антиоксидантных ферментных систем и обсеменѐнности
слизистой.
Физические факторы воздействия.
Для
изучения
влияния
аномального
магнитного
поля
использовалась
экспериментальная установка, состоящая из высокостабилизированного источника
постоянного тока и 2 колец Гельмгольца диаметром 1,5 м (расстояние между кольцами
1 м) (Калуцкий П.В., 1997). Вектор напряжѐнности поля находился в суперпозиции с
вектором вертикальной составляющей ГМП на территории г. Курска (фоновое значение
вертикальной составляющей ГМП 4,5х10-5 Тл). Экспериментальные животные и
животные групп сравнения помещались в искусственное магнитное поле за 2 недели до
начала эксперимента с целью адаптации к условиям среды обитания. Морские свинки
контрольной группы находились при фоновых значениях естественного ГМП на широте
г. Курска (напряжѐнность поля 0,45 эрстеда). Исследование клинических проявлений
инфекционного процесса, иммунологических показателей периферической крови,
оксидантной и антиоксидантной систем, обсеменѐнности слизистой глаза животных
проводилось на 3, 7 и 14 день после инфицирования.
У животных экспериментальных групп и групп сравнения для определения
исследуемых показателей производился внутрисердечный забор крови в объѐме 5 мл на
3, 7 и 14 сутки моделирования экспериментального кератоконъюнктивита. У животных
контрольной группы аналогичный забор крови проводился однократно.
Способы введения и дозировки препаратов, использованных у животных с
экспериментальным кератоконъюнктивитом.
Применение лекарственных препаратов в эксперименте начиналось с третьего дня
после инфицирования, когда у морских свинок формировался инфекционный процесс, и
продолжалось в течение 10 дней. В эксперименте использовали следующие препараты:
азоксимера
бромид
(полиоксидоний),
глюкозаминилмурамилдипептид
11
(ликопид),
полиадениловая
кислота+полиуридиловая
кислота
(полудан)
и
пентагидроксиэтилнафтохинон (гистохром), обладающие иммуномодулирующим и/или
антиоксидантным действием. Азоксимера бромид вводился внутримышечно, а
глюкозаминилмурамилдипептид – внутрижелудочно через зонд 1 раз в день в первой
половине дня в дозах, рассчитанных согласно инструкциям по применению препаратов
в пересчѐте на массу тела животных. Пентагидроксиэтилнафтохинон вводили путѐм
внутримышечных инъекций препарата концентрацией 0,02% в дозировке 0,007 мл/кг.
Полиадениловую кислоту+полиуридиловую кислоту инстиллировали ежедневным 15минутным форсажем с концентрацией 1 ЕД в инфицированный глаз.
Характеристика клинических наблюдений.
В клиническом исследовании, на основании информированного согласия,
приняло участие 160 человек, страдающих заболеваниями переднего отрезка глаза, в
возрасте 25–50 лет, из них 80 человек – жители г. Курска (регион с фоновым значением
напряжѐнности ГМП – 0,45 эрстеда), проживающие в регионе не менее 2 лет, и 80 –
жители центра КМА – г. Железногорска (напряжѐнность ГМП 3 эрстеда). Группа
контроля состояла из 20 здоровых добровольцев в г. Курске и из 20 человек в
г. Железногорске. Исследования проводились на базах городской поликлиники
г. Железногорска и областной офтальмологической поликлиники г. Курска. В основные
группы входили жители г. Курска и г. Железногорска, обратившиеся в Курскую и
Железногорскую поликлиники с характерными жалобами.
Диагноз кератоконъюнктивит устанавливался на основании характерных жалоб
пациентов, данных инструментального исследования. Для интегральной оценки тяжести
воспалительного процесса была разработана шкала оценки для исследуемых групп
пациентов.
У всех обследуемых основных и контрольных групп для исследования
иммунологических параметров производился отбор крови и слѐзной жидкости. Кровь
забирали из локтевой вены в объѐме 5 мл утром натощак. Чистую слѐзную жидкость,
представляющую собой в основном секрет слѐзных желѐз, получали без микротравм с
помощью микрокапилляра с наружной поверхности нижнего века.
12
Способы введения и дозировки препаратов, использованных у больных с
кератоконъюнктивитами.
С целью исследования влияния ПГЭН и ПАдК+ПУрК на иммунологические
факторы крови и слѐзной жидкости данные препараты применялись у больных с начала
заболевания. Две группы сравнения в городах Курск и Железногорск по 20 человек в
каждой
получали
лечение
по
общепринятой
методике
ведения
пациентов
с
заболеваниями переднего отрезка глаза. Пациенты исследовательских групп в городах
Курск и Железногорск по 20 человек в каждой получали дополнительно курс ПГЭН
внутримышечно объѐме 0,5 мл раствора 0,2 мг/мл в течение 10 дней. В двух других
исследовательских группах в городах Курск и Железногорск по 20 человек в каждой
больные получали дополнительно курс инстилляций ПАдК+ПУрК по 1 капле 6 раз в
день в течение 10 дней или дополнительно сочетание внутримышечного введения ПГЭН
и инстилляций ПАдК+ПУрК на протяжении 10 дней.
Лабораторные методы исследования.
Для оценки функционально-метаболической активности нейтрофилов крови
изучены фагоцитарный показатель (ФП) – процент активных фагоцитов из числа
сосчитанных нейтрофилов; фагоцитарное число (ФЧ) – среднее число частиц латекса,
поглощѐнных одним фагоцитом из числа сосчитанных полиморфноядерных лейкоцитов.
Полноценность фагоцитарного процесса оценивалась по завершѐнности фагоцитоза
(ЗФ) и индексу активности фагоцитов (ИАФ) (Теплова С.Н., 1978). Кислородзависимую
активность бактерицидных систем нейтрофилов изучали в тесте восстановления
нитросинего тетразолия (НСТ-тест) с расчѐтом индекса стимуляции нейтрофилов (ИСН)
и функционального резерва нейтрофилов (ФРН) (Бажора Ю.И. и др., 1981; Виксман
М.Е.,
Маянский
А.Н.,
1979).
Уровень
миелопероксидазы
(МП)
определялся
цитохимически по методу Грехема-Кнолля с расчѐтом среднего цитохимического
коэффициента (СЦК) (Нарциссов Р.П., 1964; Шафран М.Г. и др., 1979). Состояние
кислороднезависимых
бактерицидных
систем
оценивалось
по
среднему
гистохимическому коэффициенту (СГК) при постановке лизосомально-катионного теста
(ЛКТ) (Пигаревский В.Е., Мазинг Ю.А., 1981; Шубич М.Г., 1974).
Количественная оценка уровней IgG, IgM, IgA, ФНО-α, ИЛ-1β, ИЛ-2, ИЛ-4, ИЛ-6,
ИЛ-10, ИНФ-α, ИНФ-γ проводилась с помощью набора реагентов ВЕКТОР-БЕСТ (ООО
«ВЕКТОР-БЕСТ», г. Новосибирск) методом твѐрдофазного иммуноферментного
анализа.
13
Оценку уровня лактатдегидрогеназы (ЛДГ) производили по В.В. Меньшикову
(1987), каталазы – по методике М.А. Королюк и соавт. (1988), супероксиддисмутазы
(СОД) – по H.P. Mirsa, Y. Fredovich (1972), церулоплазмина – по методике, описанной
В.С. Камышниковым (2003), малонового диальдегида (МДА) – по В.Г. Гаврилову и
соавт. (1987), лактоферрина – методом твѐрдофазного иммуноферментного анализа.
Методы статистической обработки результатов.
Степень иммунных расстройств (СИР) для иммунологических показателей
рассчитывали по формуле А.М. Земскова В.М. Земсков (1994). Рейтинговый алгоритм
устанавливали по величине СИР, для чего исследованные иммунологические показатели
выстраивались в порядке снижающейся значимости отличий от заданных значений
(Земсков А.М., Земсков В.М., 1994). С помощью коэффициента диагностической
ценности определяли формулу расстройств иммунной системы (ФРИС) путѐм выбора из
всех изученных лабораторных параметров трѐх ведущих, наиболее отличающихся от
уровня нормы (Земсков В.М. и др., 1993).
Статистическая
обработка
данных
проводилась
с
использованием
аналитического пакета приложения Excel Office 2010 с использованием библиотеки
статистических
функций.
Проверку
распределения
данных
на
соответствие
нормальному закону распределения осуществляли с помощью критерия согласия
распределения
Колмогорова-Смирнова.
При
соответствии
эмпирического
распределения нормальному теоретическому распределению критический уровень
статистической значимости принимали равным 0,05. Для оценки значимости различий
двух групп независимых наблюдений использовали параметрический критерий – tкритерий Стьюдента после дополнительной проверки равенства дисперсий двух
сравниваемых групп посредством F-критерия Фишера-Снедекора, а также критерий
Вилкоксона-Манна и Уитни. Для сравнения средних значений нескольких выборок
использовали
непараметрический
критерий
Краскела-Уоллиса.
Определение
достоверности разницы двух наблюдаемых частот с вероятностью 95% производилось
по формуле, описанной А.И. Венчиковым, В.А. Венчиковым (1974).
Для оценки взаимосвязей исследуемых показателей использовали методы
многомерной статистики: корреляционный и кластерный анализы. Проверку наличия
взаимосвязи
между
изучаемыми
переменными
осуществляли
с
использованием
корреляционного анализа методом попарной корреляции Пирсона. Для разделения
14
данных на группы однородности и оценки надѐжности и точности выводов, сделанных на
основании
ограниченного
статистического
материала,
в
кластерном
анализе
использовали иерархическую агломеративную процедуру с объединением данных в
кластеры по правилу одиночной связи. В качестве меры сходства, использовали метрику
– величину, обратную коэффициенту корреляции Пирсона. При оценке результатов
кластерного анализа на дендрограммах учитываются только статистически значимые
взаимосвязи при р<0,05.
Результаты исследования
Проведѐнный
анализ
структуры
и
заболеваемости
офтальмологической
патологией в регионах с различными уровнями напряжѐнности естественного ГМП
показал, что частота встречаемости заболеваний век, слизистой оболочки, патологии
слѐзных путей, болезней сосудистой оболочки глаза и патологии роговицы на
протяжении 11 лет стабильно выше у жителей региона КМА, характеризующегося
неблагоприятной
экологической
обстановкой
(в
первую
очередь
значительно
повышенным уровнем напряжѐнности ГМП) (Карта аномального магнитного поля (∆Т)
России и прилегающих акваторий. – М.: ФГБУ «ВСЕГЕИ», 2004). Обращает на себя
внимание тот факт, что наибольшие различия зарегистрированы для патологии век и
заболеваний слизистой оболочки глаз.
Необходимо отметить, что в регионе КМА достоверно чаще встречаются
заболевания глаз воспалительной природы. В связи с тем, что механизм развития
воспалительной реакции в первую очередь зависит от состояния как системных, так и
локальных факторов иммунной защиты, целесообразно было оценить состояние
иммунной и антиоксидантной систем организма жителей региона КМА на системном и
местном уровне.
Оценка состояния фагоцитарной активности нейтрофилов крови здоровых людей
показала, что у жителей г. Железногорска, являющегося административным центром
КМА, фагоцитарный показатель, индекс активности фагоцитов крови, показатели
спонтанного НСТ-теста и уровень миелопероксидазы достоверно превышали данные
жителей г. Курска, на территории которого ГМП имеет фоновые характеристики (табл.
1). Индекс стимуляции нейтрофилов, их функциональный резерв, и завершѐнность
фагоцитоза у здоровых лиц, проживающих в условиях непрерывного воздействия ГМП
15
аномальных характеристик, были достоверно ниже по сравнению с жителями региона с
фоновыми значениями уровня ГМП.
В крови жителей региона с повышенным уровнем ГМП отмечалось более высокое
содержание ИЛ-1β, ИЛ-2, ИНФ-γ, IgG, церулоплазмина и лактатдегидрогеназы по
сравнению с лицами, проживающими при фоновых значениях ГМП. При этом
концентрация ИЛ-4, IgM, лактоферрина, малонового диальдегида, супероксиддисмутазы
и каталазы у жителей г. Железногорска была достоверно ниже.
Таблица 1
Показатели иммунного и оксидативного статуса в крови здоровых
жителей городов Курск и Железногорск
Показатель
Курск
Железногорск
(M±m)
(M±m)
ФП, %
52,10±3,30
65,20±4,10*
ФЧ, у.е.
5,50±0,70
5,20±0,50
ЗФ, %
69,50±4,10
60,40±4,70*
ИАФ, у.е.
2,90±0,15
3,25±0,13*
НСТ-спонтанный, %
21,20±4,10
30,30±3,20*
НСТ-стимулированный, %
50,30±4,20
52,40±5,30
ФРН, %
29,20±3,20
22,40±4,30*
ИСН, у.е.
2,90±0,30
2,20±0,30*
Миелопероксидаза, СЦК
214,102,10
230,001,80*
Лизосомально-катионный тест, СГК
1,23±0,01
1,22±0,01
ИЛ-4, пг/мл
5,99±0,68
4,37±0,60*
ИЛ-1β, пг/мл
2,95±0,47
4,70±0,40*
ФНО-α, пг/мл
4,01±1,09
4,40±0,36
ИЛ-10, пг/мл
4,65±0,51
4,77±0,36
ИЛ-2, пг/мл
6,95±2,31
13,10±2,90*
ИНФ-γ, пг/мл
3,22±0,2
4,60±0,40*
IgA, мг/дл
224,20±36,59
214,10±320
IgM, мг/дл
125,75±13,84
97,95±7,50*
IgG, мг/дл
1359,45±24,84
1535,75±38,40*
Лактоферрин, нг/мл
4783,55±112,72
3957,10±742,50*
Церулоплазмин, г/л
0,28±0,03
0,37±0,030*
МДА, мкмоль/л
1,89±0,14
0,03±0,01*
СОД, у.е.
18,875±0,91
15,79±0,46*
Каталаза, мккал/мл
17,93±1,07
15,20±0,49*
ЛДГ, ммоль/л
0,39±0,04
0,57±0,05*
Примечание. Здесь и в следующей таблице знаком * отмечены различия с
достоверностью р<0,05 по отношению к показателям, определѐнным у жителей
г. Курска.
16
В слѐзной жидкости здоровых лиц региона КМА уровень ФНО-α, ИЛ-10, ИЛ-2,
ИНФ-γ, IgM, IgG, малонового диальдегида и каталазы был повышен, а IgA и
супероксиддисмутазы – снижен по сравнению с показателями жителей г. Курска (табл.
2). Необходимо отметить, что содержание лактатдегидрогеназы у здоровых лиц обоих
сравниваемых регионов было ниже порога чувствительности тест-системы.
Таблица 2
Показатели иммунного и оксидативного статуса в слѐзной жидкости
здоровых жителей городов Курск и Железногорск
Показатель
ИЛ-4, пг/мл
ИЛ-1β, пг/мл
ФНО-α, пг/мл
ИЛ-10, пг/мл
ИЛ-2, пг/мл
ИНФ-γ, пг/мл
IgA, мг/дл
IgM, мг/дл
IgG, мг/дл
Лактоферрин, нг/мл
Церулоплазмин, г/л
МДА, мкмоль/л
СОД, у.е.
Каталаза, мккал/мл
ЛДГ, ммоль/л
Курск
(M±m)
4,70±0,90
0,03±0,01
5,50±0,37
2,95±0,45
19,50±1,20
4,64±0,21
1,13±0,08
0,29±0,07
76,80±2,50
6258,65±240,70
0,02±0,01
0,02±0,01
0,02±0,01
0,01±0,01
-
Железногорск
(M±m)
5,63±0,67
0,02±0,01
6,4±0,10*
3,58±0,32*
21,10±0,76*
5,04±0,12*
0,12±0,01*
0,42±0,04*
81,45±2,50*
6017,25±536,78
0,02±0,01
0,11±0,02*
-*
0,04±0,02*
-
Различия в уровне цитокинемии со стороны провоспалительных цитокинов при
воздействии изученного геофизического фактора может быть связана с особенностями
их биологических характеристик. Ответная реакция противовоспалительных цитокинов
не соответствовала изменениям, зарегистрированным в отношении провоспалительных
цитокинов.
Таким образом, длительное воздействие экологически неблагоприятных факторов
в регионе КМА приводит к выраженным изменениям со стороны фагоцитарного,
гуморального и цитокинового звеньев иммунной защиты, а также антиоксидантной
системы организма людей. Выявленные нарушения могут приводить к развитию
17
иммунологической недостаточности у жителей экологически неблагоприятного региона
и усугублять течение патологических процессов, в том числе и воспалительного генеза.
Исследование факторов иммунитета и антиоксидантной защиты организма
больных воспалительными заболеваниями переднего отрезка глаза, проживающих в
г. Курске, выявило, что из 19 изученных иммунологических показателей крови 63,2%
отличались от уровня здоровых лиц. При этом отмечалось повышение значений
фагоцитарного числа, индекса активности фагоцитов, ИЛ-1β, ИЛ-2, ИНФ-γ, IgA, IgM и
снижение
уровня
стимулированного
НСТ-теста,
завершѐнности
фагоцитоза,
функционального резерва и индекса стимуляции нейтрофилов и IgG, причѐм 5
показателей имели вторую или третью степень иммунных расстройств. В то же время в
слѐзной жидкости изменѐнными оказались 66,7% показателей, при этом 3 из них (IgA,
IgM, IgG) были максимально ниже контроля (третья степень иммунных расстройств), а
уровни ФНО-α, ИЛ-4 и ИЛ-2 превышали значения здоровых лиц (первая степень
иммунных расстройств). Сопоставление формул расстройств иммунной системы
показывает наличие сходства между ФРИС крови и слѐзной жидкости (IgM+3, ИЛ-2+3,
IgA+3 для крови и IgA-3, IgM-3, IgG-3 для слѐзной жидкости).
Рисунок 1. Показатели фагоцитоза, цитокинов, антител, лактоферрина и
оксидантно-антиоксидантной системы в крови здоровых и больных жителей
города Железногорска
Примечание: звѐздочкой отмечены достоверные отличия показателей больных
от данных здоровых лиц
18
У пациентов региона КМА наблюдалось отклонение от значений здоровых лиц
63,2% исследованных иммунологических показателей крови, 4 из которых имели третью
или вторую степень иммунных расстройств. Отмечалось увеличение уровней ИЛ-1β,
ИЛ-2, IgM и снижение фагоцитарного показателя и числа, индекса активности
фагоцитов, стимулированного НСТ-теста, функционального резерва и индекса
стимуляции нейтрофилов, завершѐнности фагоцитоза, IgA и IgG (рис. 1). В случае
развития воспалительного процесса у пациентов, проживающих в условиях аномального
магнитного поля, в слѐзной жидкости изменялись 88,9% показателей: уровни ИЛ-1β,
ИЛ-4 и ИЛ-10 увеличивались, концентрация ФНО-α, ИЛ-2, IgA, IgM, IgG снижалась (рис.
2). При этом ФРИС выглядела следующим образом: крови – IgM+3, ИЛ-2+2, IgA-2,
слѐзной жидкости – Ig M-3, ИЛ-1β+3, IgG-2.
Рисунок 2. Уровень цитокинов, антител, лактоферрина и показателей
оксидантно-антиоксидантной системы в слѐзной жидкости здоровых и больных
жителей города Железногорска
Примечание: звѐздочкой отмечены достоверные отличия показателей больных
от данных здоровых лиц
Развитие кератоконъюнктивита у больных региона с фоновым значением ГМП
сопровождалось увеличением в крови и слѐзной жидкости уровня церулоплазмина и
малонового диальдегида, снижением супероксиддисмутазы (для слѐзной жидкости –
19
ниже порога чувствительности тест-системы). Кроме того, в сыворотке крови
повышалось содержание лактатдегидрогеназы на фоне снижения концентрации
каталазы.
В крови больных региона КМА
при кератоконъюнктивите
повысилась
концентрация церулоплазмина, малонового диальдегида и лактатдегидрогеназы на фоне
снижения активности супероксиддисмутазы и каталазы. У этих же пациентов в слѐзной
жидкости
увеличился
уровень
супероксиддисмутазы,
снизилась
концентрация
малонового диальдегида и каталазы.
При интегральной оценке тяжести воспалительного процесса были выявлены
значительные отличия в исследуемых группах в зависимости от места проживания. Так,
у больных г. Курска сумма баллов в среднем составила 21,03, а у пациентов
г. Железногорска – 27,56, при этом гендерных различий не установлено. Анкетирование
пациентов показало, что рецидивирующие и хронические кератоконъюнктивиты чаще
встречаются у пациентов, проживающих в условиях аномального ГМП. В этой группе
достоверно чаще регистрировались осложнения кератоконъюнктивитов в виде синдрома
сухого глаза и стойких помутнений роговицы. Кроме того, хронизация воспалительных
заболеваний у жителей г. Железногорска в 6 раз превышала показатель курских
пациентов.
Результаты корреляционного и кластерного анализа показателей иммунного и
оксидантно-антиоксидантного
статуса
у
больных
с
кератоконъюнктивитами,
подвергающихся действию экологических факторов КМА, по сравнению с пациентами,
проживающими на территории с фоновыми значениями ГМП, свидетельствуют о том,
что
данный
фактор
окружающей
среды
вызывает
дезадаптацию
механизмов
поддержания иммунного и антиоксидантного гомеостаза как на системном, так и на
местном уровнях. Доказательством этому служат достоверно большее количество
корреляционных
взаимосвязей
между
изученными
показателями
у
жителей
г. Железногорска (48 для крови и 6 для слѐзной жидкости) по сравнению с жителями
г. Курска (18 для крови и 1 для слѐзной жидкости).
Оценка иммунокорригирующего эффекта стандартной терапии у больных
кератоконъюнктивитами на фоне воздействия различных экологических условий
показала следующее. У больных г. Курска на фоне проводимого лечения отмечалось
усугубление
нарушений
иммунной
системы,
20
сопровождающееся
увеличением
количества изменѐнных показателей в крови с 12 до 14 (ФРИС IgM+3, ИЛ-1β+3, НСТ-ст2).
При этом число показателей с третьей степенью иммунных расстройств составило 2
(до лечения 4), со второй – 4 (до лечения 1), а с первой – 8 (до лечения 7). В то же время
динамики ФРИС и распределения иммунологических показателей по степеням СИР у
больных региона КМА до и после стандартной терапии не отмечено. ФРИС пациентов
г. Железногорска после лечения включала 3 показателя: IgM+3, ФРН-2, НСТ-ст-2.
Рисунок 3. Показатели фагоцитоза, цитокинов, антител, лактоферрина и
оксидантно-антиоксидантной системы в крови здоровых и больных жителей
города Железногорска на фоне стандартного лечения
Примечание: звѐздочкой отмечены достоверные отличия показателей по
отношению к исходным до лечения
В результате лечения в крови больных г. Курска подверглись коррекции 3 (12%)
показателя (фагоцитарное число, ИЛ-2 и IgA). В г. Железногорске значения 2
показателей (8%) нормализовались (фагоцитарное число и ИЛ-2) и ещѐ 4 (16%) (индекс
активности фагоцитов, ИЛ-1β, IgG и церулоплазмин) подверглись статистически
значимой коррекции (рис. 3). В итоге у больных региона КМА от уровня региональной
нормы отличались значения 13 показателей (52%), а у больных региона с фоновыми
значениями ГМП – 16 (64%).
В слѐзной жидкости больных г. Курска вследствие нормализации 5 (33,3%)
показателей (ФНО-α, ИЛ-2, IgA, церулоплазмин, малоновый диальдегид) и коррекции 1
21
(6,7%) показателя (IgG), ФРИС составила IgM-3, ИЛ-4+2, ИЛ-10+1. У пациентов
г. Железногорска в состав ФРИС вошли IgA+3, IgG-2, ИЛ-10+2, что явилось результатом
нормализации 2 (13,3%) показателей (ИЛ-4, IgM) и коррекции ещѐ 3 (20%) (ИЛ-1β, IgG,
супероксиддисмутаза) (рис. 4).
Рисунок 4. Показатели цитокинов, антител, лактоферрина и оксидантноантиоксидантной системы в слѐзной жидкости здоровых и больных жителей города
Железногорска на фоне стандартного лечения
Примечание: звѐздочкой отмечены достоверные отличия показателей по
отношению к исходным до лечения
Стандартное лечение привело к снижению выраженности субъективных
проявлений у пациентов обеих групп (в 3 раза в г. Курске и 2,9 раза в г. Железногорске),
однако она продолжала оставаться выше у пациентов г. Железногорска, как и значения
показателей, характеризующих степень выраженности воспалительного процесса. Это
может свидетельствовать как о менее благоприятном течении кератоконъюнктивита в
условиях аномального магнитного поля, так и о недостаточной эффективности
стандартного лечения.
Вышеизложенное обосновывает необходимость включения в схемы терапии
препаратов, обладающих корригирующим воздействием на изменѐнные показатели
иммунного и антиоксидантного статуса.
22
Для разработки методов коррекции установленных нарушений были поставлены
модельные
эксперименты
на
морских
свинках,
у
которых
формировали
кератоконъюнктивит стафилококковой этиологии в условиях воздействия ГМП и
аномального магнитного поля, сопоставимого с ГМП региона КМА.
В ГМП г. Курска к концу эксперимента отмечалось увеличение фагоцитарного
показателя, фагоцитарного числа, индекса активности фагоцитов, спонтанного и
стимулированного НСТ-теста, миелопероксидазы, лактатдегидрогеназы и снижение
значений
лактоферрина,
церулоплазмина,
функционального
резерва
и
индекса
стимуляции нейтрофилов крови.
Развитие воспалительного процесса переднего отрезка глаза при нахождении
морских свинок в аномальном магнитном поле, сопоставимым с ГМП региона КМА,
привело к увеличению фагоцитарных показателя и числа, значений стимулированного
НСТ-теста,
миелопероксидазы,
лактоферрина,
церулоплазмина,
малонового
диальдегида, супероксиддисмутазы, каталазы и лактатдегидрогеназы и снижению (ниже
данных
здоровых
животных)
завершѐнности
фагоцитоза,
индекса
активности
фагоцитов, функционального резерва и индекса стимуляции нейтрофилов.
Таким образом, развитие у лабораторных животных экспериментального
бактериального кератоконъюнктивита в условиях воздействия аномального магнитного
поля приводит к более выраженному по сравнению с пребыванием при фоновых
значениях ГМП нарушению функционально-метаболической активности фагоцитарного
звена иммунитета и антиоксидантной системы. Кроме того, повышенный уровень
лактатдегидрогеназы
свидетельствует о наличии клеточных повреждений.
Это
обосновывает необходимость использования для лечения патологического процесса
препаратов как с иммуномодулирующей активностью, так и оказывающих действие на
окислительно-восстановительную систему организма.
Среди них наиболее часто применяются такие иммуномодуляторы, как
глюкозаминилмурамилдипептид
и
азоксимера
бромид.
Установлено,
что
при
использовании для иммунокоррекции ГМДП в сравнении с показателями не
получавших препарат экспериментальных животных, находившихся при фоновых
значениях напряжѐнности ГМП на широте г. Курска, более высокие значения
фагоцитарного
показателя,
завершѐнности
фагоцитоза,
спонтанного
НСТ-теста,
лактоферрина и церулоплазмина были зафиксированы в группе, которой вводили
23
препарат. Наряду с этим параметры фагоцитарного числа, индекса активности
фагоцитов, стимулированного НСТ-теста, функционального резерва нейтрофилов
характеризовались более низкими значениями. Таким образом, применение ГМДП
привело к выраженной коррекции 5 (фагоцитарное число, индекс активности фагоцитов,
индекс стимуляции нейтрофилов, лактоферрин, церулоплазмин) и нормализации 2
показателей (миелопероксидаза и лактатдегидрогеназа).
Сравнение показателей, определѐнных к концу опыта у морских свинок,
находившихся в аномальном магнитном поле, на фоне отсутствия терапии и применения
ГМДП показало, что значения таких параметров, как фагоцитарное число, индекс
активности фагоцитов, стимулированный НСТ-тест, лизосомальные катионные белки,
миелопероксидаза, лактоферрин, супероксиддисмутаза и лактатдегидрогеназа были
ниже в группе животных, которые получали ГМДП. И, наоборот, значения
фагоцитарного показателя, завершѐнности фагоцитоза, спонтанного НСТ-теста, индекса
стимуляции нейтрофилов и церулоплазмина достоверно превышали показатели морских
свинок с кератоконъюнктивитом, которые при нахождении в аномальном магнитном
поле никакого лечения не получали. В результате этого наблюдалась коррекция 4
(фагоцитарное
число,
супероксиддисмутаза
индекс
и)
и
стимуляции
нормализация
нейтрофилов,
3
(индекс
миелопероксидаза
активности
и
фагоцитов,
стимулированный НСТ-тест, лактатдегидрогеназа) показателей. Иммунокоррекция
способствовала уменьшению выраженности симптоматики у лабораторных животных и
снижению обсеменѐнности слизистой оболочки глаз как в условиях фоновых значений
ГМП, так и при воздействии магнитного поля аномальных характеристик.
Использование
АБ
у
морских
свинок
с
экспериментальным
кератоконъюнктивитом при фоновых значениях ГМП привело к тому, что в сравнении с
показателями
не
получавших
препарат
животных
фагоцитарный
показатель,
фагоцитарное число, индекс активности фагоцитов, значения стимулированного НСТтеста и миелопероксидазы были ниже, а завершѐнность фагоцитоза, функциональный
резерв, индекс стимуляции нейтрофилов, уровни лактоферрина и церулоплазмина –
выше при использовании азоксимера бромида. В результате 10 из 16 показателей не
отличались
от
определѐнных
у
здоровых
животных
(исключение
составляли
фагоцитарный показатель, фагоцитарное число, индекс активности фагоцитов,
завершѐнность фагоцитоза, спонтанный НСТ-тест, миелопероксидаза).
24
На фоне введения АБ животным с кератоконъюнктивитом, пребывавшим в
аномальном магнитном поле, достигали уровня контроля значения половины
исследованных показателей: стимулированного НСТ-теста, функционального резерва и
индекса
стимуляции
миелопероксидазы,
нейтрофилов,
малонового
лизосомальных
диальдегида,
катионных
белков,
супероксиддисмутазы
и
лактатдегидрогеназы. Содержание подавляющего большинства остальных (7 из 8)
превышали их. Так же, как и в случае применения ГМДП отмечалось уменьшение
выраженности
инфекционного
процесса
и
снижение
количества
выделяемых
микроорганизмов у морских свинок, находившихся во время опыта при различных
уровнях напряжѐнности магнитного поля.
Ещѐ
одним
биосинтетический
использованным
для
иммунокоррекции
полирибонуклеотидный
комплекс
препаратом
был
полиадениловая
кислота+полиуридиловая кислота, обладающий иммуномодулирующим действием.
Сопоставление полученных к концу эксперимента данных групп животных, получавших
и не получавших ПАдК+ПУрК и находившихся в условиях воздействия фонового
уровня ГМП, показало, что значения фагоцитарного показателя, стимулированного
НСТ-теста и уровня миелопероксидазы были выше у морских свинок, не получавших
препарат, а индекса активности фагоцитов, функционального резерва нейтрофилов и
церулоплазмина – у экспериментальной группы. Сопоставимыми с показателями
здоровых животных были 6 показателей (завершѐнность фагоцитоза, уровень
лизосомальных катионных белков, миелопероксидазы, церулоплазмина, малонового
диальдегида и каталазы), а значения ещѐ 3 (фагоцитарный показатель, стимулированный
НСТ-тест и церулоплазмин) корригировались, но не до уровня контроля. При этом
выраженность объективных проявлений патологического процесса была меньше по
сравнению с группой морских свинок без лечения.
В сопоставлении с результатами животных, не получавших инстилляции
ПАдК+ПУрК в условиях воздействия аномального магнитного поля, применение
препарата
способствовало
наличию
к
концу
опыта
более
низких
значений
фагоцитарного показателя и числа, индекса активности фагоцитов, стимулированного
НСТ-теста,
миелопероксидазы,
лактоферрина,
церулоплазмиина,
малонового
диальдегида, супероксиддисмутазы, каталазы и лактатдегидрогеназы. Завершѐнность
фагоцитоза, спонтанный НСТ-тест, функциональный резерв и индекс стимуляции
25
нейтрофилов были, наоборот, выше. В целом, 7 из 16 показателей (функциональный
резерв нейтрофилов, лизосомальные катионные белки, миелопероксидаза, малоновый
диальдегид, супероксиддисмутаза, каталаза и лактатдегидрогеназа) были сопоставимы
со значениями группы контроля, а ещѐ 6 (фагоцитарные показатель и число,
стимулированный
НСТ-тест, миелопероксидаза, лактоферрин
и
церулоплазмин)
подверглись значительной коррекции. Коррекция нарушенных параметров иммунного и
антиоксидантного
статусов
морских
свинок
с
экспериментальным
кератоконъюнктивитом при использовании ПАдК+ПУрК снижала выраженность
воспалительного процесса.
Учитывая
антиоксидантный
выявленный
дисбаланс
у
больных
для
пентагидроксиэтилнафтохинон,
и
коррекции
относящийся
в
эксперименте
нарушений
к
был
антиоксидантным
оксидативноиспользован
препаратам.
Применение ПГЭН у животных при фоновых значениях ГМП привело к тому, что
значения фагоцитарного числа, индекса активности фагоцитов, завершѐнности
фагоцитоза, спонтанного НСТ-теста, функционального резерва и индекса стимуляции
нейтрофилов, лактоферрина и церулоплазмина были достоверно выше, а фагоцитарного
показателя и уровня лизосомальных катионных белков – ниже, чем у животных,
которые не получали препарат. Сопоставимыми с показателями здоровых морских
свинок были значения функционального резерва и индекса стимуляции нейтрофилов,
лизосомальных
катионных
белков,
лактоферрина,
церулоплазмина,
малонового
диальдегида, супероксиддисмутазы, каталазы и лактатдегидрогеназы, а фагоцитарный
показатель корригировался, но не до уровня контроля.
После применения ПГЭН у экспериментальных животных, содержавшихся в
условиях воздействия аномального магнитного поля, фагоцитарное число, индекс
активности фагоцитов,
уровни
миелопероксидазы, церулоплазмина, малонового
диальдегида, супероксиддисмутазы, каталазы и лактатдегидрогеназы были ниже
значений, определѐнных в группе морских свинок, не получавших терапии. При этом
уровни завершѐнности фагоцитоза, спонтанного НСТ-теста, функционального резерва и
индекса стимуляции нейтрофилов в опытной группе были достоверно выше. С учѐтом
того, что все эти показатели у не получавших лечение животных были достоверно
отличны от значений контроля, то можно сделать вывод о выраженной их коррекции
под действием ПГЭН. Выявленные изменения иммунного и антиоксидантного статусов
26
при использовании ПГЭН приводили к снижению выраженности воспалительного
процесса и более быстрому купированию его проявлений.
Результаты, полученные при использовании с целью коррекции иммунных и
оксидативно-антиоксидантных нарушений ПГЭН и ПАдК+ПУрК показали, что они
оказывают
выраженное
иммунитета
и
корригирующее
антиоксидантной
действие
системы
на
изменѐнные
организма
морских
параметры
свинок
с
экспериментальным кератоконъюнктивитом, но не приводят к их полноценной
нормализации.
В
связи
с
этим
были
проведены
исследования
по
оценке
комбинированного использования препаратов.
В сравнении с показателями не получавших лечения морских свинок с
кератоконъюнктивитом использование комбинации ПАдК+ПУрК и ПГЭН при фоновых
значениях ГМП привело к более высоким значениям фагоцитарного числа, индекса
активности фагоцитов, завершѐнности фагоцитоза, активности спонтанного НСТ-теста,
функционального резерва и индекса стимуляции нейтрофилов, а также лактоферрина и
церулоплазмина. В то же время фагоцитарный показатель, стимулированный НСТ-тест
и уровень миелопероксидазы были ниже. В итоге при использовании комбинации
препаратов 10 из 16 показателей не отличались от контроля, а ещѐ 2 корригировались. В
число этих показателей не входили только фагоцитарное число, индекс активности
фагоцитов, спонтанный НСТ-тест и завершѐнность фагоцитоза.
В условиях воздействия аномального магнитного поля сопоставление показателей
четырнадцатых суток животных, получавших и не получавших комбинацию препаратов,
показало, что 7 показателей, характеризующих иммунный и антиоксидантный статус, не
отличались от контроля, а ещѐ 6 были корригированы. Выраженность проявлений
заболевания была достоверно меньше при использовании комбинации ПГЭН и
ПАдК+ПУрК.
Таким образом, исследование показало, что ПГЭН и ПАдК+ПУрК как
изолированно, так и в комбинации оказывают наиболее благоприятное действие на
факторы иммунного и антиоксидантного гомеостаза организма животных и улучшают
течение экспериментального кератоконъюнктивита у морских свинок в аномальном
магнитном поле, что связано с адекватной активацией внутриклеточных антимикробных
систем фагоцитов, лактоферрина и церуллоплазмина и снижением уровней малонового
диальдегида, супероксиддисмутазы, каталазы и лактатдегидрогеназы. Следовательно,
27
эти препараты могут быть использованы в лечении кератоконъюнктивитов у людей,
проживающих в экологически неблагоприятных, в том числе по уровню напряжѐнности
ГМП, зонах.
Оценивая эффект применения у больных г. Курска ПГЭН можно отметить, что из
изученных в крови 17 разбалансированных показателей иммунной и антиоксидантной
систем
после
проведѐнной
(стимулированный
НСТ-тест,
терапии
нормализовались
функциональный
резерв
5
и
(20%)
показателей
индекс
стимуляции
нейтрофилов, ИЛ-2, ИНФ-γ). Кроме того, в отношении ещѐ 3 (12%) показателей
(завершѐнность фагоцитоза, IgM, лактатдегидрогеназа) была достигнута статистически
значимая коррекция их значений. В результате после комплексной терапии с
использованием ПГЭН в крови больных г. Курска число разбалансированных
показателей сократилось до 14. При этом рейтинговый алгоритм показателей
иммунитета в крови включал 3 показателя с третьей СИР, 3 – со второй и 6 – с первой
(ФРИС: IgA+3, IgM+3, ИЛ-1β+3).
Рисунок 5. Показатели фагоцитоза, цитокинов, антител, лактоферрина и
оксидантно-антиоксидантной системы в крови здоровых и больных жителей
города Железногорска на фоне комплексного лечения с использованием
пентагидроксиэтилнафтохинона
Примечание: звѐздочкой отмечены достоверные отличия показателей по
отношению к исходным до лечения
28
У пациентов г. Железногорска на фоне лечения количество отличающихся от
региональной нормы и не поддающихся коррекции показателей снизилось с 17 до 8 за
счѐт нормализации 2 (8%) показателей (фагоцитарное число, ИЛ-2) и коррекции 6 (24%)
показателей (фагоцитарный показатель, завершѐнность фагоцитоза, индекс активности
фагоцитов, стимулированный НСТ-тест, IgG, лактатдегидрогеназа) (рис. 5). В состав
рейтингового алгоритма иммунологических показателей вошли 2 показателя с третьей
степенью иммунных расстройств и 9 – с первой (ФРИС: IgM+3, IgA+3, ИЛ-1β-1).
В слѐзной жидкости курских пациентов из 9 изменѐнных параметров уровня
здоровых лиц достигли 4 (26,7%) показателя (ИЛ-4, IgM, IgG, малоновый диальдегид) и
1 (6,7%) (IgA) подвергся коррекции. Вследствие этого с третьей степенью иммунных
расстройств был 1 показатель, со второй и первой – по 2, а ФРИС включала ИЛ-1β-3,
IgA-2, ИЛ-10+2.
Рисунок 6. Показатели цитокинов, антител, лактоферрина и оксидантно-антиоксидантной
системы в слѐзной жидкости здоровых и больных жителей города Железногорска на фоне
комплексного лечения с использованием пентагидроксиэтилнафтохинона
Примечание: звѐздочкой отмечены достоверные отличия показателей по отношению к
исходным до лечения
Для слѐзной жидкости железногорских больных было характерно уменьшение
количества не поддающихся коррекции показателей до 9 за счѐт нормализации уровня
ИЛ-1β и ИЛ-10 и коррекции содержания IgM, IgG и супероксиддисмутазы (рис. 6). При
29
этом в составе рейтингового алгоритма 1 показатель имел третью, 2 – вторую и 3 –
первую СИР, а ФРИС включала IgA+3, ФНО-α-2, ИЛ-4-2.
Комбинированная терапия кератоконъюнктивитов у больных г. Курска с
использованием ПАдК+ПУрК привела к тому, что уровня здоровых лиц достигли
значения завершѐнности фагоцитоза, стимулированного НСТ-теста, функционального
резерва и индекса стимуляции нейтрофилов, IgG, а в отношении ещѐ 5 (20%) (ИЛ-2, IgA,
IgM, малонового диальдегида, лактатдегидрогеназы) имела место статистически
достоверная коррекция. В результате в состав рейтингового алгоритма вошли 10
показателей, 3 из которых имели третью степень иммунных расстройств, 5 – вторую и 2
– первую (ФРИС (IgM+3, ИЛ-2+3, ИЛ-1β+3).
Рисунок 7. Показатели фагоцитоза, цитокинов, антител, лактоферрина и
оксидантно-антиоксидантной системы в крови здоровых и больных жителей
города Железногорска
на
фоне комплексного лечения с
использованием
полиадениловой кислоты+полиуридиловой кислоты
Примечание: звѐздочкой отмечены достоверные отличия показателей по
отношению к исходным до лечения
После
применения
ПАдК+ПУрК
в
крови
пациентов
г. Железногорска
нормализовались 4 (16%) показателя (фагоцитарное число, завершѐнность фагоцитоза,
функциональный резерв и индекс стимуляции нейтрофилов), а ещѐ 9 (36%)
30
(фагоцитарный показатель, стимулированный НСТ-тест, ИЛ-1β, ИЛ-2, IgA, IgG,
церулоплазмин, малоновый диальдегид, лактатдегидрогеназа) подверглись коррекции
(рис. 7). В рейтинговый алгоритм крови входили 1 показатель с третьей степенью
иммунных расстройств и 9 – с первой, а ФРИС имела следующий вид: IgM+3, ФНО-α-1,
IgA-1.
Рисунок 8. Показатели цитокинов, антител, лактоферрина и оксидантноантиоксидантной системы в слѐзной жидкости здоровых и больных жителей города
Железногорска на фоне комплексного лечения с использованием полиадениловой
кислоты+полиуридиловой кислоты
Примечание: звѐздочкой отмечены достоверные отличия показателей по
отношению к исходным до лечения
В слѐзной жидкости больных региона с фоновым уровнем напряжѐнности третью
степень иммунных расстройств имели 2 показателя, вторую – 1, а первую – 4; ФРИС
состояла из IgM-3, ИЛ-1β-3, IgG+2. У пациентов региона КМА в рейтинговый алгоритм
слѐзной жидкости входили 3 показателя с третьей, 2 – со второй и 1 – с первой степенью
иммунных расстройств (ФРИС: IgM-3, ИЛ-1β-3, IgA+3). При этом у курских пациентов
нормализовались 3 (20%) показателя (ФНО-α, IgA, малоновый диальдегид) и
корригировался уровень IgG. У железногорских больных комбинированная терапия
кератоконъюнктивита привела к нормализации из 11 исходно разбалансированных
31
показателей содержания ИЛ-4, ИЛ-10 и коррекции 3 (20%) показателей (IgG, малоновый
диальдегид, супероксиддисмутаза) (рис. 8).
Рисунок 9. Показатели фагоцитоза, цитокинов, антител, лактоферрина и
оксидантно-антиоксидантной системы в крови здоровых и больных жителей
города Железногорска
на
фоне комплексного лечения с использованием
пентагидроксиэтилнафтохинона
и
полиадениловой
кислоты+полиуридиловой
кислоты
Примечание: звѐздочкой отмечены достоверные отличия показателей по
отношению к исходным до лечения
Использование
у
жителей
г. Курска
в
составе
схемы
лечения
кератоконъюнктивитов комбинации ПГЭН и ПАдК+ПУрК привела к нормализации в
крови значений 5 (20%) показателей (завершѐнность фагоцитоза, стимулированный
НСТ-тест, функциональный резерв и индекс стимуляции нейтрофилов, IgG) и
коррекции ещѐ 6 (24%) (фагоцитарное число, ИЛ-2, IgA, IgM, малоновый диальдегид,
лактатдегидрогеназа). Вследствие этого в состав рейтингового алгоритма вошли 4
показателя с третьей СИР, 1 – со второй, 4 – с первой, а ФРИС состояла из IgM+3, ИЛ2+3, IgA+3.
У жителей региона КМА уровня здоровых лиц достигли значения 7 (28%)
показателей
(фагоцитарные
стимулированный
НСТ-тест,
показатель
и
число,
функциональный
32
завершѐнность
резерв
и
индекс
фагоцитоза,
стимуляции
нейтрофилов, ИЛ-1β), а 5 (20%) – подверглись коррекции (индекс активности
фагоцитов, ИЛ-2, IgM, малоновый диальдегид, лактатдегидрогеназа) (рис. 9).В состав
рейтингового алгоритма пациентов г. Железногорска вошли 1 показатель с третьей
степенью иммунных расстройств, 2 – со второй и 4 – с первой. ФРИС имела следующий
вид: IgM+3, IgA+2, ИЛ-2+2.
Рисунок 10. Показатели цитокинов, антител, лактоферрина и оксидантноантиоксидантной системы в слѐзной жидкости здоровых и больных жителей города
Железногорска
на
фоне
комплексного
пентагидроксиэтилнафтохинона
и
лечения
полиадениловой
с
использованием
кислоты+полиуридиловой
кислоты
Примечание: звѐздочкой отмечены достоверные отличия показателей по
отношению к исходным до лечения
В слѐзной жидкости в составе рейтингового алгоритма пациентов, проживающих
в г. Курске, было по 2 показателя с третьей и первой СИР, а в состав ФРИС входили ИЛ1β-3, IgM-3, IgG-1. У железногорских жителей количество показателей с третьей СИР
было 2, со второй – 1, а с первой – 3. ФРИС имела следующий вид: IgM-3, IgA+3, ИЛ-1β-2.
В слѐзной жидкости больных г. Курска нормализация установлена для 6 (40%)
показателей
(ИЛ-4,
ФНО-α,
ИЛ-2,
IgA,
малоновый
диальдегид,
каталаза),
а
статистически достоверная коррекция – для IgG. У жителей г. Железногорска уровня
33
региональной нормы достигли значения ИЛ-4 и ИЛ-10, а содержание IgG и
супероксиддисмутазы было скорректировано (рис. 10).
Таким образом, каждая из схем терапии обладала корригирующим воздействием
на изменѐнные показатели иммунной и оксидантно-антиоксидантной систем пациентов.
Выраженность этого воздействия зависела как от характера терапии, так и от
исследуемого субстрата. Так, у больных, постоянно проживающих при фоновых
значениях ГМП, наибольшее число нормализованных показателей в крови и слѐзной
жидкости отмечалось при использовании ПГЭН + ПАдК+ПУрК. При этом по степени
эффективности
коррекции
изменѐнных
показателей
расположились следующим образом в порядке
в
снижения:
крови
схемы
лечения
стандартная терапия
+
ПГЭН + ПАдК+ПУрК
стандартная терапия + ПАдК+ПУрК
стандартная терапия + ПГЭН = стандартная
терапия. В слѐзной жидкости корригирующая активность всех использованных схем
терапии была одинаковой. Исходя из этого, можно сделать заключение о наибольшем
нормализующем и корригирующем влиянии на нарушенные показатели иммунной и
антиоксидантной систем у данной группы больных комбинации стандартная терапия +
ПГЭН + ПАдК+ПУрК.
Аналогичный анализ у пациентов, находящихся в неблагоприятных условиях
КМА, также выявил наибольший процент нормализованных показателей в крови и
слѐзной жидкости при использовании комбинации ПГЭН с ПАдК+ПУрК. Процент
корригированных показателей в крови был наиболее высоким при включении в схему
лечения ПАдК+ПУрК, тогда как в слѐзной жидкости достоверных различий между
группами обнаружить не удалось. Основываясь на этих данных можно сделать
заключение о наиболее высокой эффективности коррекции нарушений иммунного и
антиоксидантного статуса у пациентов г. Железногорска комбинации стандартная
терапия + ПГЭН + ПАдК+ПУрК.
Результаты корреляционного и кластерного анализа также позволили прийти к
заключению,
что
по
совокупности
воздействия
на
показатели
иммунного
и
антиоксидантного статуса наиболее эффективной у больных с кератоконъюнктивитами,
проживающих как в г. Курске, так и в экологически неблагоприятном по геомагнитной
обстановке регионе КМА, является схема лечения, включающая стандартную терапию,
дополненную ПГЭН и ПАдК+ПУрК.
34
Однако сложность организации регуляции гомеостаза организма человека не
позволяет на основании только лишь определения изменений лабораторных данных
сделать заключение об эффективности использования какой либо схемы терапии.
Большое значение имеет оценка клинической результативности их применения.
По результатам лечения пациентов обоих регионов с включением в состав
комплексной терапии ПГЭН, ПАдК+ПУрК, а также их комбинации, было отмечено
более благоприятное воздействие на течение патологического процесса. Пациенты
отмечали меньшую выраженность субъективных ощущений к концу лечения по
сравнению со стандартной терапией, кроме того, динамика регресса значений
показателей, характеризующих степень выраженности воспалительного процесса, была
выше, особенно в регионе КМА.
Таким образом, можно констатировать, что по совокупности результатов
воздействия на показатели иммунной и антиоксидантной систем, клинических
проявлений наиболее эффективной у больных с кератоконъюнктивитами, проживающих
в экологически неблагоприятном по геомагнитной обстановке регионе КМА, является
схема лечения, сочетающая стандартную терапию с внутримышечным введением ПГЭН
и инстилляциями ПАдК+ПУрК.
ВЫВОДЫ
1. У жителей региона КМА, характеризующегося неблагоприятной экологической
обстановкой (значительно повышенным уровнем напряжѐнности ГМП), по сравнению с
регионом с фоновыми значениями ГМП отмечается достоверно более высокая
заболеваемость офтальмологической патологией, преимущественно болезнями век и
слизистой оболочки глаза.
2. У клинически здоровых жителей неблагополучной по геомагнитной обстановке
территории в крови повышены показатели активности и интенсивности фагоцитоза,
уровень миелопероксидазы, содержание ИЛ-1β, ИЛ-2, ИНФ-γ, IgG и снижены –
резервная функция нейтрофилов, завершѐнность фагоцитоза, уровни ИЛ-4 и IgM. В
слѐзной жидкости увеличена концентрация ФНО-α, ИЛ-2, ИЛ-10, ИНФ-γ, IgM и IgG, а
IgA – снижена.
3. В сыворотке крови жителей региона КМА повышены значения церулоплазмина
и лактатдегидрогеназы и снижены – лактоферрина, продуктов перекисного окисления
липидов и ферментов антиоксидантной системы. В слѐзной жидкости жителей региона
35
КМА увеличены значения каталазы, малонового диальдегида и уменьшены –
супероксиддисмутазы.
4. Развитие кератоконъюнктивита у жителей экологически неблагополучного
региона сопровождается снижением в крови значений фагоцитарной и функциональнометаболической активности нейтрофилов, IgA, IgG, супероксиддисмутазы и каталазы, а
также
увеличением
уровней
ИЛ-1β,
ИЛ-2, IgM,
церулоплазмина,
малонового
диальдегида, лактатдегидрогеназы по отношению к региональной норме. В слѐзной
жидкости
больных
повышается
концентрация
ИЛ-1β,
ИЛ-4,
ИЛ-10,
супероксиддисмутазы и уменьшается содержание ФНО-α, ИЛ-2, иммуноглобулинов,
малонового диальдегида и каталазы.
5. В результате стандартной терапии в крови у больных региона КМА
нормализуются значения фагоцитарного числа и ИЛ-2, подвергаются статистически
значимой коррекции индекс активности фагоцитов, содержание IgG, ИЛ-1β и
церулоплазмина при отсутствии положительной динамики остальных изменѐнных
показателей иммунной и антиоксидантной систем. В слѐзной жидкости нормализуется
уровень ИЛ-4 и IgM, а концентрация IgG, ИЛ-1β и супероксиддисмутазы корригируется.
6. На модели стафилококкового кератоконъюнктивита
у морских свинок
установлено, что наиболее выраженным корригирующим воздействием на показатели
иммунной и антиоксидантной систем в условиях действия магнитного поля
повышенной напряжѐнности как изолированно, так и в комбинации обладают
иммуномодулятор полиадениловая кислота+полиуридиловая кислота и антиоксидант
пентагидроксиэтилнафтохинон.
кислоты+полиуридиловой
Сочетанное
кислоты
и
применение
полиадениловой
пентагидроксиэтилнафтохинона
позволяет
нормализовать как показатели функционально-метаболической активности нейтрофилов
крови, так и содержание продуктов перекисного окисления липидов и ферментов
антиоксидантной системы.
7. Включение
в
состав
комплексной
терапии
больных
региона
КМА
пентагидроксиэтилнафтохинона приводит к нормализации в крови лишь фагоцитарного
числа и уровня ИЛ-2, а в слѐзной жидкости – ИЛ-1β и ИЛ-10; в случае включения в
состав
терапии
полиадениловой
кислоты+полиуридиловой
кислоты
отмечается
нормализация фагоцитарной и резервной функции нейтрофилов крови и концентрации
ИЛ-4 и ИЛ-10 – в слѐзной жидкости. В то же время при сочетанном назначении
36
пентагидроксиэтилнафтохинона и полиадениловой кислоты+полиуридиловой кислоты в
крови
нормализуется
большинство
показателей
функционально-метаболической
активности нейтрофилов и уровень ИЛ-1β, а также – содержание ИЛ-4 и ИЛ-10 в
слѐзной жидкости.
8. Проведение стандартной терапии у больных экологически неблагополучного
региона не позволяет достичь полного клинического выздоровления, приводит к
формированию
рецидивирующего
течения
кератоконъюнктивита
и
развитию
отдалѐнных дистрофических осложнений. В то же время наибольший клинический
эффект, проявляющийся в уменьшении субъективных ощущений и повышении скорости
регресса симптомов воспалительного процесса у больных, проживающих в регионе
КМА, достигается при сочетании стандартной терапии с внутримышечным введением
пентагидроксиэтилнафтохинона
и
инстилляциями
полиадениловой
кислоты+полиуридиловой кислоты.
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
1. У больных кератоконъюнктивитами вирусно-бактериальной этиологии с
признаками
дистрофии
метаболического
статуса
роговицы
и
с
целью
повышения
коррекции
клинической
нарушений
эффективности
иммунолечения
рекомендуется включать в схему стандартной терапии пентагидроксиэтилнафтохинон
(внутримышечные инъекции препарата концентрацией 0,02% в дозировке 0,007 мл/кг) и
полиадениловую кислоту+полиуридиловую кислоту (инстилляции ежедневным 15минутным форсажем с концентрацией 1 ЕД в инфицированный глаз). Эта рекомендация
имеет особое значение для больных, находящихся в условиях ГМП повышенной
напряжѐнности.
2. Информацию о характере и степени иммуно-метаболических нарушений,
развивающихся при кератоконъюнктивитах вирусно-бактериальной этиологии в
условиях воздействия магнитных полей повышенной напряжѐнности и способах их
коррекции, рекомендуется использовать при подготовке врачей в высших учебных
заведениях.
37
СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ
1. Медведева, М.В. Анализ распределения офтальмологической патологии по
нозологическим группам
в регионах Курской области с различным уровнем
напряженности геомагнитного поля / М.В. Медведева // Журнал инфекционной
патологии. – 2013. – Т. 20, № 1-4. – С. 152-153.
2. Медведева, М.В.
Факторы
антиинфекционной
защиты
крови,
слѐзной
жидкости и слюны здоровых лиц, проживающих в регионах с различным уровнем
напряжѐнности
геомагнитного
поля
М.В. Медведева
/
//
Курский
научно-
практический вестник «Человек и его здоровье». – 2013. – № 2. – С. 13-18.
3. Медведева, М.В.
Характеристика
цитокинового
статуса
крови,
слѐзной
жидкости и слюны здоровых лиц, проживающих в регионах с различным уровнем
напряжѐнности геомагнитного поля / М.В. Медведева, П.В. Калуцкий // Курский
научно-практический вестник «Человек и его здоровье». – 2013. – № 4. – С. 21-25.
4. Медведева, М.В.
Состояние
антиинфекционной
защиты
крови,
слѐзной
жидкости и слюны здоровых лиц, проживающих в регионе с повышенным уровнем
напряжѐнности
геомагнитного
поля
/
М.В. Медведева
//
VI
Российский
общенациональный офтальмологический форум. Сб. науч. тр. науч.-практ. конф. с
междун. участием. Москва, 1-3 октября 2013 г. – М., 2013. – Т. 2. – С. 530-534.
5. Геомагнитное поле и иммунитет / А.И. Конопля, А.В. Караулов, П.В. Калуцкий,
М.В. Медведева // Физиология и патология иммунной системы. – 2013. – Т. 17, № 8. –
С. 3-13.
6. Климкин, А.С. Состояние антиинфекционной защиты крови, слезной жидкости
и слюны здоровых лиц, проживающих в регионе с повышенным уровнем напряженности
геомагнитного поля / А.С. Климкин, М.В. Медведева // Научный медицинский вестник
Югры. – 2014. – № 1-2 (5-6). – С. 82-84.
7. Медведева, М.В. Влияние гистохрома на факторы антиинфекционной защиты
организма морских свинок с экспериментальным конъюнктивитом в условиях
постоянного воздействия аномального магнитного поля / М.В. Медведева, А.С. Биляк //
Курский научно-практический вестник «Человек и его здоровье». – 2015. – № 2. –
С. 85-88.
38
8. Медведева, М.В.
Применение
препарата
гистохром
в
лечении
экспериментального конъюнктивита на фоне действия аномального магнитного поля /
М.В. Медведева, А.С. Биляк // Аллергология и иммунология. – 2015. – Т. 16, № 4. –
С. 392-393.
9. Медведева, М.В. Воздействие препарата полудан на иммунологические и
биохимические показатели крови животных с экспериментальным конъюнктивитом в
магнитном поле повышенной напряжѐнности / М.В. Медведева, А.С. Биляк // Курский
научно-практический вестник «Человек и его здоровье». – 2015. – № 4. – С. 104-107.
10.
Медведева, М.В.
Анализ
распространения
офтальмопатологии
по
нозологическим группам в регионах Курской области в зависимости от различной
напряжѐнности геомагнитного поля / М.В. Медведева, А.С. Климкин // Молодежная
наука-2015: Сб. материалов 79-й итоговой студенческой науч.-практ. конф. с междунар.
участием, посвящ. 85-летию со дня рождения проф. А.Н. Орлова (20-24 апреля 2015 г.).
– Красноярск, 2015. – С. 261-263.
11.
Медведева, М.В.
Эффективность
полудана
при
экспериментальном
конъюнктивите в условиях действия аномального магнитного поля / М.В. Медведева,
А.С. Биляк // Аллергология и иммунология. – 2016. – Т. 17, № 1. – С. 66.
12.
Медведева, М.В. Биохимические показатели крови животных на фоне
воздействия препарата полудан при экспериментальном конъюнктивите в магнитном
поле повышенной напряженности / М.В. Медведева, Д.М. Ярмамедов // Медицинский
вестник Башкортостана. – 2016. – Т. 11, № 1. – С. 110-113.
13.
Медведева, М.В. Эффективность применения препарата «гистохром» в
составе комплексной терапии бактериального кератоконъюнктивита в условиях
действия
аномального
магнитного
поля
/
М.В. Медведева
//
Астраханский
медицинский журнал. – 2016. – Т. 11, № 4. – С. 119-124.
14.
Медведева, М.В. Динамика биохимических показателей крови животных с
экспериментальным конъюнктивитом в условиях магнитного поля повышенной
напряженности / М.В. Медведева, Д.М. Ярмамедов // Курский научно-практический
вестник «Человек и его здоровье». – 2016. – № 4. – С. 67-69.
15.
Медведева, М.В.
Провоспалительные
цитокины
у
пациентов
с
бактериальными конъюнктивитами, проживающих в условиях действия аномального
39
магнитного поля / М.В. Медведева, А.С. Биляк // Российский иммунологический
журнал. – 2016. – Т. 10 (19), № 2 (1). – С. 406-408.
16.
Медведева, М.В. Иммунологические показатели крови животных на фоне
воздействия препарата полудан при экспериментальном конъюнктивите в магнитном
поле повышенной напряжѐнности / М.В. Медведева, Д.М. Ярмамедов // Российский
иммунологический журнал. – 2016. – Т. 10 (19), № 2 (1). – С. 445-447.
17.
Медведева, М.В. Особенности терапии бактериальных конъюнктивитов у
пациентов, проживающих в условиях воздействия магнитного поля аномальных
характеристик / М.В. Медведева, Д.М. Ярмамедов // Российский иммунологический
журнал. – 2016. – Т. 10 (19), № 3. – С. 314-316.
18.
Медведева, М.В.
Применение
препарата
гистохром
в
лечении
экспериментального конъюнктивита у лабораторных животных в условиях воздействия
магнитного поля аномальных характеристик / М.В. Медведева, Д.М. Ярмамедов // В
сб.: Приоритеты мировой науки: эксперимент и научная дискуссия: Мат-лы XI междун.
науч. конф. 15-16 июня 2016 г. Scientific Publishing Center «Discovery». – North
Charleston, SC, USA: CreateSpace, 2016. – С. 59-60.
19.
Медведева, М.В. Влияние ликопида на фагоцитарное звено иммунитета
морских свинок с бактериальным кератоконъюнктивитом в условиях воздействия
магнитного поля повышенных значений / М.В. Медведева // Тезисы Всерос. науч.практ. конф., посвящ. 120-летию первой в России кафедры инфекционных болезней
Военно-медицинской академии имени С.М. Кирова «Нерешѐнные вопросы этиотропной
терапии актуальных инфекций» (8-9 декабря, 2016). – С.-Пб., 2016. – С. 46-47.
20.
Современные аспекты в лечении инфекционных заболеваний переднего
отрезка глаза (обзор литературы) / В.И. Баранов, М.В. Медведева, В.А. Липатов,
А.А. Новикова, Д.М. Ярмамедов. – Innova. – 2016. – № 2 (3). – С. 60-63.
21.
Медведева, М.В.
Особенности
иммунотерапии
бактериальных
кератоконъюнктивитов у пациентов, проживающих в условиях воздействия магнитного
поля аномальных характеристик / М.В. Медведева, Д.М. Ярмамедов // В сб.:
МОЛОДЕЖЬ, НАУКА, МЕДИЦИНА. Мат-лы 63-й всерос. межвуз. студенч. науч. конф.
с междун. участием. Редколлегия: М.Н. Калинкин [и др.]. –Тверь: Государственное
бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования
40
Тверская государственная медицинская академия Министерства здравоохранения
Российской Федерации. – 2017. – С. 569-572.
22.
Медведева, М.В. Эффективность сочетанного применения гистохрома и
полудана в составе комплексной терапии у больных с кератоконъюнктивитами,
подвергающихся действию аномального геомагнитного поля / М.В. Медведева //
Курский научно-практический вестник «Человек и его здоровье». – 2017. – № 1. –
С. 51-56.
23.
Медведева, М.В. Эффективность сочетанного использования полудана и
гистохрома у животных с экспериментальным кератоконъюнктивитом в условиях
воздействия
магнитного
поля
различной
напряжѐнности
/
М.В. Медведева,
П.В. Калуцкий // Курский научно-практический вестник «Человек и его здоровье».
– 2017. – № 2. – С. 112-117.
24.
Медведева, М.В.
Иммунологическая
эффективность
использования
ликопида у животных с экспериментальным кератоконъюнктивитом в условиях
воздействия магнитного поля различной напряжѐнности / М.В. Медведева // Курский
научно-практический вестник «Человек и его здоровье». – 2017. – № 4. – С. 115-119.
ПРИНЯТЫЕ СОКРАЩЕНИЯ
АБ
– азоксимера бромид (полиоксидоний);
ГМДП
– глюкозаминилмурамилдипептид (ликопид);
ГМП
– геомагнитное поле;
ЗФ
– завершѐнность фагоцитоза;
ИАФ
– индекс активности фагоцитов;
ИЛ
– интерлейкин;
ИНФ
– интерферон;
ИСН
– индекс стимуляции нейтрофилов;
КМА
– Курская магнитная аномалия;
ЛДГ
– лактатдегидрогеназа;
ЛКТ
– лизосомально-катионный тест;
МДА
– малоновый диальдегид;
МП
– миелопероксидаза;
НСТ-тест
– тест восстановления нитросинего тетразолия;
41
НСТ-сп.
– спонтанный НСТ-тест;
НСТ-ст.
– стимулированный НСТ-тест;
ПАдК+ПУрК– полиадениловая кислота+полиуридиловая кислота (полудан);
ПГЭН – пентагидроксиэтилнафтохинон (гистохром);
СГК
– средний гистохимический коэффициент;
СИР
– степень иммунных расстройств;
СОД
– супероксиддисмутаза;
СЦК
– средний цитохимический коэффициент;
ФНО-α
– фактор некроза опухолей альфа;
ФП
– фагоцитарный показатель;
ФРИС
– формула расстройств иммунной системы;
ФРН
– функциональный резерв нейтрофилов;
ФЧ
– фагоцитарное число;
Ig
– иммуноглобулин.
42
Лицензия ЛР № 020862 от 30.04.99 г.
Сдано в набор __.__.201_ г. Подписано в печать __.__.201_ г.
Формат 30×421/8. Бумага офсетная. Гарнитура Times New Rom.
Печать офсетная. Усл. печ. л. 2,0.
Тираж 100 экз. Заказ.
Издательство Курского государственного медицинского университета
305041, г. Курск, ул. К. Маркса, 3.
43
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа