close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

bd000100417

код для вставкиСкачать
На правах рукописи
МАКСИМОВА АННА ВАЛЕРЬЕВНА
ФУНКЦИОНАЛЬНАЯ АКТИВНОСТЬ ФАГОЦИТИРУЮЩИХ КЛЕТОК У ЗДОРОВЫХ ЛИЦ И БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМИ ОБСТРУКТИВНЫМИ ЗАБОЛЕВАНИЯМИ ЛЕГКИХ, ПРОЖИВАЮЩИХ В
РАЙОНАХ С РАЗЛИЧНОЙ ТЕХНОГЕННОЙ НАГРУЗКОЙ.
03.00.16. – Экология
14.00.16 - Патологическая физиология
АВТОРЕФЕРАТ
Диссертации на соискание ученой степени
кандидата биологических наук
Красноярск – 2006
Работа выполнена на кафедре биохимии и физиологии человека и животных
Красноярского государственного университета и в Красноярской государственной медицинской академии
Научный руководитель:
доктор медицинских наук, профессор Гринштейн Ю. И.
доктор медицинских наук, профессор Савченко А.А.
Официальные оппоненты:
кандидат биологических наук, доцент Риммель Н. Н.
доктор медицинских наук, профессор Климацкая Л. Г.
Ведущая организация:
Красноярский научный центр Сибирского отделения Российской академии
наук
Защита состоится «26» декабря 2006 г. в 10-00 часов на заседании диссертационного совета К 212.099.02. в Красноярском государственном университете (660041, г. Красноярск, пр. Свободный, 79). С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке КрасГУ.
Автореферат разослан «24» ноября 2006 г.
Ученый секретарь
диссертационного совета
кандидат биологических наук, доцент
Скопцова Г.Н.
2
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность проблемы. За последние 100 лет человечество увеличило промышленно производство почти в 100 раз, в энергопотребление –
почти в 1000 раз (Гичев Ю. П., 2002). При этом в столь относительно короткий промежуток времени в биосферу было внесено громадное число химических веществ, около 4 млн. видов из них признано потенциально опасными
для окружающей среды, а свыше 180 тысяч веществ обладают выраженными
токсическим и мутагенным эффектами. Мощность антропогенного воздействия увеличивается с каждым годом (Абалаков А. Д. и др., 1999; Иванова Ю.
Д. и др., 2001). В условиях такого стремительного загрязнения окружающей
среды организм человека подвергается воздействиям вредных факторов окружающей среды и вынужден постоянно мобилизовывать свои компенсаторно-приспособительные механизмы, резервы которых могут со временем истощаться. В итоге интенсивное и хроническое воздействие экологически неблагоприятных факторов окружающей среды сопровождается перенапряжением и нарушением адаптационных возможностей организма, что предрасполагает к срыву адаптации, развитию предболезненных состояний и хронизации основных патологических процессов, которые вследствие этого являются экологически обусловленными. Иначе говоря, давление окружающей
среды на человека сегодня явно превышает его адаптивные возможности
(Велданова В. М., 2000; Гичев Ю. П., 2000).
Необходимость социально-гигиенического мониторинга воздействия
вредных веществ на население Красноярского края определяется сосредоточением на его территориях крупных предприятий цветной и черной металлургии, угольной, теплоэнергетической, горнорудной, химической и нефтеперерабатывающей промышленности, создающих значительные антропотехногенные химические нагрузки на окружающую среду, а также природноклиматическими условиями нашего края. О значимости воздействия химического фактора на население Красноярского края свидетельствуют данные об
удельном весе лиц, подверженных в условиях загрязнения окружающей среды воздействию отдельных вредных веществ. Так, воздействию формальдегида, фенола, взвешенных веществ, бенз(а)пирена и диоксида азота в концентрациях, превышающих предельно допустимые концентрации в атмосферном воздухе, подвергается 27,4-42,4% населения края (г.г. Красноярск, Норильск, Ачинск, Канск, Лесосибирск, Назарово и др.) (Куркатов С. В., 2003).
А именно эти вещества, по мнению большого числа исследователей, являются одной из причин возникновения новых случаев и обострения уже имеющихся хронических обструктивных заболеваний дыхательных путей человека (Вострикова Е. А. и др., 2005; Капцов В. А. и др., 2001; Косариков А. Н.,
2003; Лещенко И. В. и др., 2004; Прозорова Г. Г. и др., 2004).
Современная трактовка понятия «хронические обструктивные заболевания легких» (ХОЗЛ) исходит из представления о том, что это гетерогенная группа болезней. Внутри этой группы можно выделить заболевания, про3
текающие с распространенным постоянным (хроническая обструктивная болезнь легких) или периодическим (бронхиальная астма) сужением (обструкцией) дыхательных путей, приводящих у дыхательной недостаточности.
ХОЗЛ отличаются высокой распространенностью (Биличенко Т. Н.,
1994; Петрухин И. С., 1991; Higgins M. W. и др., 2000; Manfreda J. и др.,
2001; Masakazu A., 2004), а по показателям заболеваемости и смертности занимают одно из первых мест в мире, причем эти показатели с разной скоростью в разных странах, но повсеместно продолжают увеличиваться (Гоголева
О. П., 2001). По некоторым данным, заболеваемость ХОЗЛ в последние десятилетия достигает от 10 до 40% в разных регионах мира (Алферов В. П.,
2001; Ertle A. R. и др., 1999). Исключением, к сожалению, не является и Россия, где распространенность ХОЗЛ с каждым годом увеличивается. По официальной статистике, в России около 1 млн. больных ХОЗЛ, на самом деле
эта цифра может достигать 11 млн. В целом по России в 1997 году уровень
болезненности, связанной с болезнями органов дыхания составил 219,2 ‰, а
уровень первичной заболеваемости – 172,1 ‰ (Карпин В. А. и др, 2002).
В Красноярском крае за последние шесть лет заболеваемость БА увеличилась в 2,5 раза и составила в 2002 году 6,2 на 1000 населения, причем у
1171 пациента диагноз установлен впервые (ТерещенкоЮ. А., Тисленко Л.
Н., 2003). В причинной структуре смертности болезни органов дыхания в
Красноярском крае занимают четвертое место (после сердечно-сосудистых
заболеваний, онкологических заболеваний и травм) – 5,1 % (Шнайдер И. А.,
2002). Анализируя данные социально-гигиенического мониторинга, проведенного в крае в 1997-2002 г.г., С. В. Куркатов выявил зависимости, описываемые уравнениями линейной регрессии, суммарной заболеваемости и болезней органов дыхания от среднегодовых концентраций взвешенных веществ в атмосферном воздухе. Доли вклада загрязнений атмосферного воздуха взвешенными веществами с суммарные уровни заболеваемости детей
достигают в Норильске, Ачинске, Красноярске и Канске 28,9-42,3 %, в уровни болезней органов дыхания – до 23,9-33 %.
Таким образом, ХОЗЛ, как одна из самых распространенных и тяжело, хронически протекающих патологий, занимает особое место среди многочисленных заболеваний человека. В то же время, проведено недостаточно
исследований, посвященных изучению взаимосвязи между степенью загрязнения атмосферного воздуха антропотехногенными выбросами и основными
патогенетическими механизмами возникновения и самоподдержания хронического воспалительного процесса в дыхательных путях. Участие в патогенезе ХОЗЛ системы мононуклеарных фагоцитов и полиморфноядерных лейкоцитов в существенной степени обуславливает развитие хронического воспаления в бронхиальном дереве при ХОЗЛ, поэтому исследование функциональной активности фагоцитирующих клеток бронхиального дерева, в частности продукция ими высокоактивных кислородных радикалов, явилось
предметом нашего исследования.
Цель исследования. Целью нашей работы стало комплексное изучение функциональной активности популяции фагоцитирующих клеток брон4
хиального дерева и периферической крови у здоровых красноярцев и у больных бронхиальной астмой (БА) и хронической обструктивной болезнью легких (ХОБЛ), проживающих в районах города с разной техногенной загрязненностью, а также выявление особенностей функционирования фагоцитов в
зависимости нозологии заболевания и тяжести воспалительного процесса,
протекающего в бронхиальном дереве.
Задачи исследования.
1. Оценить функциональную активность фагоцитирующих клеток периферической крови, а также фагоцитов, выделенных из бронхиального
смыва у здоровых красноярцев, проживающих в районах города с различной техногенной нагрузкой методом люминол-зависимой хемилюминесценции (ЛЗ ХЛ) и в тесте фагоцитоза с латексом.
2. Определить количество лейкоцитов в бронхиальном смыве у пациентов
с БА и ХОБЛ и практически здоровых лиц, проживающих в районах
города с различной техногенной нагрузкой, оценить их популяционный
состав в зависимости от техногенного загрязнения и нозологической
формы заболевания.
3. Определить функциональную активность фагоцитирующих клеток
бронхиального смыва у больных БА и ХОБЛ в тесте фагоцитоза с латексом (поглотительная способность фагоцитов) и в тесте ЛЗ ХЛ.
4. Выявить особенности функционирования фагоцитирующих клеток в
зависимости от нозологической формы заболевания, степени тяжести
патологического процесса, степени техногенного воздействия.
Научная новизна работы.
В ходе исследования получены новые данные о состоянии фагоцитарного звена иммунной системы и состоянии местного иммунитета дыхательных путей у практически здоровых лиц, а также пациентов, страдающих
ХОБЛ и БА, проживающих в районах города с разной техногенной нагрузкой. Впервые выявлено, что у пациентов с БА степень продукции активных
форм кислорода фагоцитами бронхиального смыва зависит от места проживания: у пациентов – жителей Ленинского района г. Красноярска показатели
спонтанного и стимулированного хемилюминесцентного ответа (ХЛ-ответа)
фагоцитов бронхов достоверно превышают таковые у жителей левобережного Советского района.
Показано, что цитологические особенности воспаления дыхательных
путей и фагоцитарные свойства местного иммунитета зависят от нозологической формы заболевания и существенно отличаются у больных БА и ХОБЛ:
спонтанная хемилюминесцентная активность (ХЛ-активность) фагоцитирующих клеток бронхиального дерева у пациентов с ХОБЛ достоверно и
многократно превышает уровень спонтанного ХЛ-ответа у больных БА. Таким образом, тестирование функциональной активности фагоцитирующих
клеток бронхиального содержимого с помощью ЛЗ ХЛ может быть использовано в качестве дополнительного маркера, позволяющего проводить дифференциальную диагностику при обострениях БА и ХОБЛ. Установлено, что
функциональная активность фагоцитирующих клеток у больных БА зависит
5
от степени тяжести обострения заболевания и его нозологической формы
(эндогенная и экзогенная БА).
Практическая значимость работы.
Определение ХЛ-активности фагоцитирующих клеток бронхиального
дерева может использоваться для скрининговой диагностики состояния фагоцитарного звена у практически здоровых лиц, проживающих в условиях
техногенного загрязнения окружающей среды.
Предложены дополнительные цитооксидантные маркеры диагностики воспаления дыхательных путей в фазу подострого обострения БА и
ХОБЛ. Предложен и апробирован способ дифференциальной диагностики
хронических обструктивных заболеваний легких, в основе которого лежит
определение ХЛ-активности фагоцитирующих клеток бронхиального содержимого (патент РФ № 2262095 от 25.02.2004). Отработана и внедрена в практику методика определения функциональной активности фагоцитирующих
клеток бронхиального смыва в тесте ЛЗ ХЛ и в тесте фагоцитоза с латексом.
Положения, выносимые на защиту.
1. Активность фагоцитирующих клеток, выделенных из периферической
крови и бронхиального смыва у здоровых красноярцев, а также пациентов, страдающих хроническими обструктивными заболеваниями легких, зависит от особенностей эколого-техногенного воздействия (Советский и Ленинский районы г. Красноярска).
2. Цитологические особенности воспаления дыхательных путей, а также
функциональная активность фагоцитирующих клеток у больных хроническими обструктивными заболеваниями легких отличается от таковой у практически здоровых людей и зависит от нозологической формы заболевания и степени тяжести воспалительного процесса в бронхах.
3. Показатели спонтанного ХЛ-ответа фагоцитирующих клеток бронхиального содержимого являются надежными маркерами при проведении
дифференциальной диагностики между БА и ХОБЛ.
Внедрение результатов исследования. По материалам работы получен патент РФ № 2262095 от 25.02.2004 «Способ дифференциальной диагностики хронических обструктивных заболеваний легких», оформлены 4 рацпредложения: «Способ получения индуцированной мокроты для цитологического исследования» (КрасГМА, № 2232, 18 марта 2003 г.); «Способ дифференциальной диагностики обструктивных заболеваний легких» (КрасГМА, №
2240, 16 мая 2003 г.); «Способ диагностики атопической бронхиальной астмы» (КрасГМА, № 2241, 16 мая 2003 г.); «Способ оценки эффективности терапии у больных с бронхиальной астмой» (КрасГМА, № 2242, 16 мая 2003
г.).
Апробация материалов диссертации. Основные положения диссертации доложены и обсуждены на IV Российском национальном конгрессе
«Человек и лекарство» в г. Москве, 1999 г. Тема доклада: «Хемилюминесцентная активность фагоцитов в очаге хронического воспаления при БА». На
Х Национальном конгрессе по болезням органов дыхания в г. Санкт6
Петербурге, 2000 г. Тема доклада: «Дифференциальная терапия тяжелых
обострений бронхиальной астмы». На 6 пульмонологических конференциях
г. Красноярска и Красноярского края (1998-2004 г.г.), в том числе: «Актуальные вопросы практической пульмонологии» (2000 г.); «Актуальные вопросы
болезней органов дыхания», (2002 г.); «Актуальные проблемы поликлинической пульмонологии», (2003 г.) и др.; на юбилейной конференции пульмонологического центра г. Красноярска и юбилейной конференции ГКБ № 20
(Красноярск, 2003 г.), на региональной конференции «Актуальные вопросы
охраны здоровья населения регионов Сибири», (Красноярск, 2006 г.).
Публикации. По теме проведенных исследований опубликовано более 25 печатных работ в региональной и центральной печати, включая методические рекомендации.
Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 143
страницах машинописного текста. Она состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов, двух глав собственных исследований,
заключения и выводов. Работа иллюстрирована 22 рисунками и 24 таблицами. Список литературы содержит 274 источника, включая 136 отечественных
и 138 иностранных.
Материалы и методы исследования. Для выполнения поставленной цели и задач обследовалось население, длительно (не менее 10 лет) проживающее в зонах выбросов крупных промышленных предприятий – жители
Ленинского и Советского районов г. Красноярска. Ленинский район города,
лежащий на правом берегу р. Енисей, характеризуется сосредоточением
большого числа промышленных предприятий, расположенных в селитебной
зоне. На территории района находятся стационарные источники веществзагрязнителей атмосферы: ТЭЦ-1, цеха объединения «Химволокно», завод
синтетического каучука, завод резинотехнических изделий, шинный завод,
завод холодильников, завод «Сибтяжмаш», завод «Сибэлектросталь», цеха
объединения «Красмаш», целлюлозно-бумажный комбинат, Красноярский
биохимический завод, химический комбинат «Енисей», Красноярский завод
цветных металлов, ДОЗ-2, Злобинская нефтебаза. Основными техногенными
поллютантами атмосферного воздуха, поставляемыми стационарными источниками и потоками автотранспорта являются бенз(а)пирен, диоксид азота,
диоксид серы, оксид углерода, бензол, толуол, фенол, сероводород, сероуглерод, хлор, взвешенные вещества, формальдегид, этилбензол. Низкая береговая линия, близость предгорий Восточного Саяна, расположение основных
транспортных магистралей района и строений способствует аккумуляции
вредных примесей в атмосфере. В таблице 1 отражена годовая динамика
концентрации отдельных загрязняющих веществ в атмосфере Ленинского
района на основании данных территориального Центра по мониторингу загрязнения окружающей среды. В качестве территории сравнения взят Советский район (левобережная часть г. Красноярска), где основными аэрополлютантами являются выбросы автотранспорта, а также фтористые соединения выбросы Красноярского алюминиевого завода, являющимся крупнейшим
стационарным источником загрязнения воздушного бассейна (табл. 1).
7
Фтористый
водород
Взвешенные вещества
Этил
бензол
Формаль
дегид
Оксид азота
Диоксид
азота
Оксид углерода
Поллютант
Район
Таблица 1
Годовая динамика концентрации загрязняющих веществ в атмосферном воздухе г. Красноярска (2003 г.)
Ленинский район
Советский район
ПДК
среднесу1,0
0,04
0,06
0,003
0,02
0,15
0,005
точная,
мг/м3
январь
1,3-2,4
1,2
февраль
1,2-1,5
1,1
март
1,1-1,5
2,2
1,2
1,1
апрель
1,2-1,6
май
1,1
1,3
июнь
1,1
1,1-1,4
1,6
2,9
июль
1,6
1,2-3,4
1,1-3,0
2,5
август
1,1-1,3
сентябрь
1,1-2,4
1,4 - 3,0
октябрь
1,4
1,1-1,2
1,1-1,8
1,2-1,6
ноябрь
1,2
1,3
1,2
1,1
декабрь
2,1
1,2
январь
1,2-2,6 1,1-2,1 1,1-1,2 1,7-1,9 1,5-2,5
февраль 2,0-3,2 1,1-3,1
1,3-3,1
1,5
1,2-1,6
март
1,2-2,0 1,1-4,2
1,1-1,7 1,5-3,0
1,2
апрель
1,1-1,8
1,1-3,3 1,5-2,0 1,8-3,4
май
1,1-1,7
1,1-8,0 1,5-2,0 1,2-1,4 1,5-1,9
июнь
1,1-1,3
1,1-5,2
1,5
1,2-1,4
июль
1,1-4,6
1,05-6,4 1,5-6,0 1,6-8,4 1,1-2,8
август
1,1-1,2
1,2-4,1 1,5-2,0 1,4-5,2
сентябрь
1,2
1,1-2,1
1,1-2,4 1,5-2,0 1,2-7,2
октябрь
1,2-2,0 1,1-2,0
1,1-3,4 1,5-2,0 1,2-2,4
ноябрь
1,2-1,4 1,1-2,1
1,1-1,5 1,5-3,0 1,6-1,8
декабрь
1,1-1,5
1,1-2,4 1,5-2,5 1,2-3,4
Примечание: цифрами обозначена кратность превышения ПДК, прочерк –
среднесуточная ПДК не превышала в указанный период гигиенической нормы.
Также на территории Советского района находятся Красноярский металлургический завод и предприятия строительной промышленности (завод железобетонных изделий, КПО «Железобетон» и др.). Характер распространения
воздушных эмиссий предприятий обуславливают преобладающие ветры и
8
особенности рельефа (район расположен на возвышенности, черта города
граничит с земледельческими угодьями Емельяновского района), которые
способствуют относительно быстрой элиминации вредных примесей и перемещению воздушных потоков в западном направлении. Территории изолированы друг от друга р. Енисей и разным ландшафтом. При сравнении данных,
приведенных в таблице 1 и в таблице 2, видно, что Советский район г. Красноярска отличается более благоприятной экологической обстановкой – в течение года отмечается относительно редкое превышение ПДК по диоксиду
азота, формальдегиду, взвешенным веществам, фтористым соединениям. В
то же время в Ленинском районе содержание в атмосферном воздухе этих и
других поллютантов постоянно превышает среднесуточные ПДК как минимум в 1,5-2 раза.
Контрольную группу составили 122 практически здоровых человека, проживающих в разных районах г. Красноярска, у которых анамнестически, клинически и с помощью дополнительных методов исследования не было выявлено патологии бронхолегочной системы.
Также обследовано 50 больных с ХОБЛ и 112 больных БА, проживающих в разных районах г. Красноярска. В группе обследованных лиц преобладали лица трудоспособного возраста от 16 до 69 лет и мужского пола,
как и в группах контроля. Давность заболевания в исследуемых группах не
имела существенных различий и составила в группе пациентов с БА 8,5 ± 0,8
лет, а в группе пациентов с ХОБЛ – 8,9 ± 1,2 лет.
По этиологической классификации среди больных БА, включенных
в исследование, было диагностировано: эндогенной БА – 65 случаев и экзогенной БА – 47 случаев. Группа пациентов, страдающих БА была также разделена на подгруппы в зависимости от степени тяжести обострения БА. Распределение обследуемого населения по районам г. Красноярска представлено
в таблице 2.
Таблица 2
Распределение обследуемого населения по районам
Нозология
Количество обследуемых лиц
Ленинский район
Советский район
n
n
Контрольная группа)
83
39
Пациенты с БА
97
15
Пациенты с ХОБЛ
30
20
У всех обследованных лиц был исследован клеточный состав бронхиальных смывов, полученных в ходе фибробронхоскопического исследования, с определением количества лейкоцитов в 1 мл бронхиального смыва и
популяционного состава лейкоцитарной фракции. Функциональная активность фагоцитов у больных ХОЗЛ и в группе контроля, исследовалась в тесте
люминолзависимой хемилюминесценции (ЛЗ ХЛ), а также в тесте фагоцитоза с латексом с определением фагоцитарного индекса. Показатели функцио9
нальной активности фагоцитов исследовались у клеток, выделенных из периферической крови и бронхиального смыва.
По результатам исследования в пакете электронных таблиц MS Excel
7,0 была сформирована база данных, на основе которой с помощью пакета
прикладных программ “Statistica 7,0” (StatSoft Inc., 2004)производился статистический анализ. Для всех данных определяли среднее арифметическое значение (М), среднее квадратичное отклонение (s), ошибку средней арифметической (m). Проверку гипотезы о статистической достоверности различий
двух выборок проводили с помощью критерия Вилкоксона-Манна-Уитни
(Гельман, В. Я., 2002).
Результаты исследования и их обсуждение.
Известно, что в формировании воспаления дыхательных путей у
больных ХОБЛ и БА принимают участие многие клетки и многочисленные
медиаторы, и их функции во многом взаимосвязаны и взаимозависимы. Но в
целом о течении воспалительного процесса и его динамических особенностях
с большой долей вероятности можно судить по уровню содержания ключевых эффекторных клеток (эозинофилов, нейтрофилов, лимфоцитов, АМ).
Таблица 3
Клеточный состав бронхиальных смывов у больных с хронической
обструктивной патологией легких (M ± m)
Группа Количество Нейтро Эозино
Макро
Лимфо
Базо
лейкоцитов, филы,
филы,
фаги,
циты,
филы,
6
%
×10 /мл
%
%
%
%
Контроль 1,46 ± 0,15
5,6±1,0 0,18±0,1 83,6 ± 1,4 10,3±1,4 0,25±0,1
(n = 22)
ХОБЛ
5,8 ± 1,8
70,9±2,5 4,5±1,5
20,0±2,2
4,1±0,5 0,19±0,06
(n = 50)
*
*
*
*
*
БА
4,5 ± 0,7
64,2±1,9 7,2±0,9
27,6±3,5
4,1±0,4 0,18±0,05
(n = 112)
*/**
*/**
*/**
*/**
*
Примечание: * - р<0,05 при сравнении с контролем, ** - р< 0,05 при
сравнении с группой пациентов с ХОБЛ.
Результаты проведенного нами исследования позволили установить
повышение уровня эозинофилов в дыхательных путях при обострении БА и
ХОБЛ, которое было известно и раньше, подтверждено нашими исследованиями и не вызывает сомнения (табл. 3). Исходя из наших наблюдений эозинофильный компонент не везде одинаков, и имеет различное количественное
выражение при разных нозологических формах хронических обструктивных
заболеваниях легких: при ХОБЛ количество эозинофилов в бронхиальном
дереве достоверно ниже, чем у пациентов, страдающих БА. Закономерным
представляется более высокое содержание эозинофилов у больных экзогенной формой БА по сравнению с эндогенной формой. Достоверное повышение относительного количества нейтрофилов в бронхиальном смыве и снижение процентного показателя АМ в сравнении с аналогичными показателя10
ми в контрольной группе, выявленное в наших исследованиях, по нашему
мнению, обусловлено и логично объясняются длительностью персистирующего воспалительного процесса в бронхах: давность заболевания в исследуемых группах не имела существенных различий и составила как в группе пациентов с БА, так и в группе пациентов с ХОБЛ в среднем не менее восьми
лет. Кроме того, количество нейтрофилов в бронхиальных смывах у больных
БА достоверно повышалось при увеличении степени тяжести обострения БА
(табл. 4).
Таблица 4
Клеточный состав бронхиальных смывов у больных с БА в зависимости от
степени тяжести обострения БА (M ± m)
Нейтро- Эозино
Макро
Лимфо
Базо
Группа
Количество
филы,
филы,
фаги,
циты,
филы,
лейкоци%
%
%
%
%
тов,
×106/мл
Контроль
1,46 ±
5,6 ± 1,0
0,18 ±
83,6 ±
10,3 ±
0,25 ±
(n = 22)
0,15
0,1
1,4
1,4
0,1
Обострение БА
3,5 ± 0,8*
59,2 ±
7,8 ±
30,5 ±
3,7 ±
легкой степени
4,2*
1,8*
3,8*
0,8*
тяжести (n = 18)
Обострение БА
3,7 ± 0,3*
62,1 ±
7,3 ±
31,1 ±
3,9 ±
0,30 ±
средней степени
2,5*
1,4*
5,8*
0,5*
0,08
тяжести (n = 68)
Тяжелое обост7,0 ± 2,6*
72,1 ±
6,6 ±
17,7 ±
5,0 ±
0,14 ±
рение БА (n = 26)
3,9*
1,7*
2,7*
0,9*
0,08
Примечание: * - р<0,05 при сравнении с контролем.
Кроме того, учитывая важность влияния окружающей среды на организм человека в целом и на дыхательные пути в частности, мы оценивали
функциональное состояние фагоцитирующих клеток периферической крови
и бронхиального дерева у здоровых жителей г. Красноярска, а также пациентов с БА и ХОБЛ в зависимости от эколого-техногенной зоны проживания –
в Советском районе города и, учитывая годовую динамику содержания поллютантов в атмосферном воздухе (табл. 1), более неблагополучном в экологическом отношении Ленинском районе г. Красноярска. Состав лейкоцитарной формулы бронхиального смыва при этом практически не отличается у
здоровых красноярцев, проживающих в разных эколого-техногенных зонах
города, а также пациентов с БА и ХОБЛ, проживающих в разных районах города. Предполагаем, что в данном случае определяющее и решающее значение имеет нозология хронического бронхообструктивного заболевания, а не
место жительства пациента в пределах одного города (табл. 5).
11
Таблица 5
Клеточный состав бронхиального смыва у здоровых лиц и пациентов с хронической обструктивной патологией легких, проживающих в разных районах
г. Красноярска
(M ± m)
Группа
Контрольная группа Бронхиальная астХОБЛ
ма
СоветЛенинСоветЛенинСоветЛенинский райский
ский
ский
ский рай- ский район
район,
район
район,
он
он,
n = 10
n = 12
n = 15
n = 97
n = 20
n = 30
Количество
2,5 ± 0,2
1,4 ± 0,2 2,8 ± 0,4 4,8 ± 0,8 4,4 ± 0,6
7,0 ± 2,2
**
*
*/**
*
*/**
лейкоцитов
6
(×10 /мл)
Нейтрофилы, % 3,0 ± 0,8
5,3 ± 1,3
68,0 ±
63,5 ±
71,9 ± 4,7 71,9 ± 3,1
*
*
**
4,2
2,1
*
*
Эозинофилы, % 0,8 ± 0,1
0,2 ± 0,1 6,6 ± 1,6 7,2 ± 1,1 3,0 ± 0,8
2,4 ± 1,1
*
*
*
*
Макрофаги, % 86,0 ± 2,0 84,2 ± 1,9
24,2 ±
24,7 ±
16,4 ± 4,1 20,1 ± 2,5
4,3
1,9
*
*
*
*
Лимфоциты, % 10,1 ± 1,5 10,3 ± 1,9 3,6 ± 0,9 4,2 ± 0,4 3,5 ± 0,9
4,6 ± 0,7
*
*
*
*
Базофилы, %
0,1 ± 0,01
0,08±0,01
0,4 ± 0,1 0,1±0,05
0,20±0,09
0,20±0,08
Примечание: * - p<0,05 при сравнении с контрольной группой аналогичного
района; ** - p<0,05 при сравнении с показателями жителей Советского района.
Однако, у пациентов с БА и ХОБЛ, проживающих в Ленинском районе города, количество лейкоцитов в 1 мл бронхиального смыва достоверно
выше такового у жителей Советского района, что также позволяет предположить, что в условиях экологически неблагополучного района воспалительный процесс в дыхательных путях как у пациентов с БА, так и больных
ХОБЛ, протекает более активно, что может способствовать более тяжелому
течению заболевания и ухудшает его прогноз.
В клинической практике наиболее часто приходится проводить дифференциальный диагноз между БА и ХОБЛ. Эта ситуация всегда имеет место
у больных с обострениями этих болезней. С целью дифференциальной диагностики и верификации боле точного диагноза нередко возникает необходимость проводить расширенное клиническое обследование, включая исследование диагностических биомаркеров. Среди них наибольшее значение прида12
ется цитологическому анализу воспалительного процесса в бронхах, исследованию оксида азота и перекиси водорода в выдыхаемом воздухе, изучению
процессов свободнорадикального окисления в органах дыхания.
Свободнорадикальное окисление, основными инициаторами которого
являются активные метаболиты кислорода, играет одну из ключевых ролей в
молекулярных механизмах воспалительного патогенеза БА и ХОБЛ. При несостоятельности защитной антиоксидантной системы, что нередко имеет место при обострении этих заболеваний, АФК способны повреждать окружающие ткани, а также инактивировать антипротеазные механизмы. Повреждение альвеолярного эпителия создает благоприятные условия для имплантации и колонизации дыхательных путей микрофлорой, которая является мощным аттрактантным стимулом для фагоцитов. При обострении хронических
обструктивных заболеваний легких это ведет к усилению оксидативного
стресса и протеолитической деструкции как микроорганизмов, так и окружающих тканей (гипотеза порочного круга). Одним из высокоинформативных методов, позволяющих интегрально оценить степень активности фагоцитарного звена местного иммунитета, является регистрация хемилюминесцентного (ХЛ) свечения биологического материала. Этот метод возможно
успешно использовать для выяснения механизмов развития обструктивных
заболеваний легких, прогнозирования их исхода, контроля над эффективностью проводимого лечения, диагностики и, как показали наши исследования,
дифференциальной диагностики хронической бронхообструктивной патологии легких. Согласно нашим данным, ХЛ активность фагоцитирующих клеток крови у больных бронхообструктивными заболеваниями, превышает
уровень, характерный для практически здоровых лиц (табл. 6).
Таблица 6
Хемилюминесцентная активность фагоцитирующих клеток периферической крови в норме и у больных с хронической обструктивной патологией легких (M ± m)
Группа
Т спон- I спонтанТ стимули- I стимулироИндекс
танной ной пробы,
рованной
ванной про- стимуляции
пробы, с
пробы,
бы,
усл. ед.
с
усл. ед.
Контроль 952 ± 88 5026 ± 281
1860 ± 37
34334 ± 1812 8,58 ± 0,55
(n = 100)
ХОБЛ
709 ± 41 19219±1766
1064 ± 87
30475 ± 3053 1,94 ± 0,25
(n = 50)
*
*
БА
972 ± 70 21957±1571
1450 ± 96
39074 ± 5441 2,64 ± 0,53
(n =112)
*
*
Примечание: * - р<0,05 при сравнении с контролем.
В то же время, значения стимулированного (измеренного при дополнительной стимуляции in vitro фагоцитирующих клеток опсонизированным
зимозаном) ХЛ-ответа во всех основных обследованных группах оставались
13
практически на одном и том же уровне и не имели достоверных отличий. Таким образом, значение расчетной величины индекса стимуляции, определенного как отношение показателя стимулированного ХЛ-ответа к значению
спонтанного ХЛ-ответа, у пациентов, страдающих ХОЗЛ, достоверно ниже,
нежели в контрольной группе. Подобные результаты, по нашему мнению,
могут свидетельствовать о функциональном истощении фагоцитирующих
клеток, что, в свою очередь, может привести к срыву всей системы при наложении дополнительной (инфекционной или др.) стимуляции в условиях in
vivo, а как известно, неэффективный фагоцитоз приводит к неадекватному
реагированию всей иммунной системы в целом. Повышенные показатели
ХЛ-активности фагоцитов крови у пациентов с различными формами БА однонаправлены и не имеют принципиальных отличий с нарастанием степени
тяжести обострения БА.
Состояние фагоцитарно-клеточного компонента местного иммунитета по показателям хемилюминесцентного биотестирования бронхиального
содержимого характеризуется достоверным повышением активности, наиболее выраженной в группе больных с обострением ХОБЛ. В то же время у пациентов с БА эти показатели также существенно выше, чем в группе контроля, но повышение функциональной активности фагоцитов бронхов у больных
с обострением БА вдвое ниже, чем у больных с обострением ХОБЛ (табл. 7).
Выявленный в наших исследованиях высокий уровень продукции АФК при
воспалении дыхательных путей у больных с обострениями обструктивных
заболеваний легких согласуется с повышенным содержанием нейтрофилов в
бронхиальных смывах. Это наиболее характерно для больных с обострением
ХОБЛ. Повышенный уровень процентного содержания эозинофилов в бронхиальных смывах у больных с обострением экзогенной БА при одновременно
высоком уровне показателей спонтанной ХЛ также может свидетельствовать
о возможном участии этих клеток в поддержании процесса хронического
воспаления в бронхиальном дереве у больных БА.
Таблица 7
Хемилюминесцентная активность фагоцитирующих клеток бронхиального дерева в норме и у больных с хронической обструктивной патологией легких (M ± m)
Группа
Т спон- I спонтанТ стимулироI стимулироИндекс
ванной пробы, ванной пробы, стимуляции
танной ной пробы,
пробы, с
усл. ед.
с
усл. ед.
Контроль 732±220
530 ± 95
824 ± 285
1401 ± 273
4,08 ± 1,03
(n = 22)
ХОБЛ
946 ± 95 8886±2672
1346 ± 149
19912 ± 4037 1,23 ± 0,11
(n = 50)
*/**
*/**
*
БА
1055±80 3878±1147
1266 ± 92
4804 ± 1284
2,16 ± 0,34
(n =112)
*
*
*
Примечание: * - р<0,05 при сравнении с контролем, ** - р< 0,05 при
сравнении с группой пациентов с ХОБЛ.
14
Очевидно, что хемилюминесцентная активность фагоцитирующих
клеток является объективным диагностическим маркером при проведении
дифференциальной диагностики между БА и ХОБЛ, а также отражает степень тяжести обострения БА. Выявленные нами особенности функционирования фагоцитов при различных нозологических вариантах хронических обструктивных заболеваниях легких отражены в полученном нами патенте РФ
№ 2262095 от 25.02.2004 «Способ дифференциальной диагностики хронических обструктивных заболеваний легких» поставленная задача решается следующим образом. Для проведения тестирования с помощью метода люминолзависимой хемилюминесценции не проводят разделения фагоцитирующих клеток бронхиального смыва на фракции (альвеолярные макрофаги,
нейтрофилы, эозинофилы), а используют все фагоцитирующие клетки и при
значениях максимума свечения спонтанной ХЛ в диапазоне от 2700 до 6200
усл. ед. диагностируют БА, от 6200 усл. ед. и выше – ХОБЛ. Значения максимума свечения спонтанной ХЛ фагоцитов бронхиального содержимого до
2700 усл. ед. считаются нормальными.
Анализируя изменение параметров хемилюминесцентной активности
фагоцитов бронхов у пациентов с БА различной степени тяжести следует отметить нарастание активности фагоцитов: чем тяжелее протекает БА, тем
выше ХЛ-активность фагоцитирующих клеток, тем выше уровень спонтанной продукции АФК этими клетками. Однако эта тенденция несколько нарушается при сравнении максимума свечения в стимулированной пробе. По
нашему мнению, подобный результат может свидетельствовать об истощении функционального резерва фагоцитов бронхов у пациентов с тяжелым течением БА.
Наряду с уже описанными изменениями, следует указать, что сохраняя высокую способность к экстрацеллюлярной продукции АФК, фагоциты бронхов
обладают пониженной поглотительной активностью, что проявляется в снижении фагоцитарного индекса фагоцитирующих клеток бронхиального дерева: у пациентов с БА фагоцитарный индекс достоверно снижен по сравнению
с группой контроля (31,1±1,7% у пациентов с БА против 35,9±1,5% группы
контроля, р<0,05). Угнетение поглотительной активности фагоцитов бронхов
у больных с БА зависит от степени тяжести обострения БА: чем тяжелее протекает БА, тем более выражено снижение фагоцитарного индекса. Таким образом, возможно, что экстрацеллюлярный выброс АФК у фагоцитов бронхов
больных ХОЗЛ преобладает над «классическим» вариантом фагоцитоза, когда происходит поглощение фагоцитируемого объекта специализированной
клеткой и его последующее «уничтожение» внутри фаголизосомы, что, в
свою очередь, способствует повреждению окружающих тканей АФК с недостаточной элиминацией разрушенных фрагментов вследствие все той же сниженной поглотительной способности фагоцитов.
Учитывая высокую степень влияния окружающей среды на организм
человека, а также значительное загрязнение воздушного бассейна г. Красноярска различными техногенными аэрополлютантами, обладающими помимо
15
самостоятельной высокой активности еще и дополнительным эффектом суммации (отдельные поллютанты, одновременно присутствующие во вдыхаемом воздухе, усиливают свое влияние и оказывают токсическое действие на
организм человека до достижения ПДК по каждому из компонентов в отдельности), актуальной является оценка функционального состояния фагоцитарного звена бронхиального дерева и периферической крови в зависимости
от места проживания горожан в районах с различной техногенной нагрузкой.
В результате проведенных исследований, достоверных отличий в показателях ХЛ-ответа и ФИ крови у здоровых горожан, проживающих в разных районах г. Красноярска, нами не выявлено. Отмечается лишь недостоверное повышение максимальных значений спонтанного и стимулированного
ХЛ-ответа, а также ФИ фагоцитов крови у здоровых жителей Ленинского
района. Так, максимальная интенсивность спонтанного ХЛ-ответа у жителей
Советского района составляет 4538 ± 467 усл. ед., у жителей Ленинского
района – 5346 ± 398 усл. ед.; а стимулированного ХЛ-ответа 35088 ± 443 усл.
ед. и 35351 ± 230 усл. ед. соответственно. В тоже время, максимальная интенсивность спонтанного и стимулированного ХЛ-ответа фагоцитирующих
клеток бронхиального дерева имеет тенденцию к снижению (у жителей Советского района 439 ± 101 усл. ед. в спонтанном ХЛ-ответе и 2022 ± 543 усл.
ед. в стимулированном; у жителей Ленинского района 428 ± 118 усл. ед. в
спонтанном и 1334 ± 372 в стимулированном), а ФИ бронхов достоверно ниже у здоровых жителей Ленинского района по сравнению с проживающими
в Советском районе города (46,0 ± 3,8% и 36,9 ± 4,2%; p<0,005).
Можно предположить, что подобная разнонаправленность изменений
функциональной активности фагоцитирующих клеток периферической крови
и бронхов является взаимосвязанной и носит компенсаторный характер:
снижение «местной» бактерицидной и поглотительной активности фагоцитов
бронхов под действием более высокой степени загрязненности атмосферного
воздуха ведет к снижению эффективности функционирования ткани легких
как барьерной ткани на пути различных агентов как инфекционной, так и неинфекционной природы, а следовательно, требуются дополнительные «усилия» со стороны системного иммунитета в целом, в том числе и фагоцитов
периферической крови, что и проявляется в повышенных значениях Imax как
спонтанного, так и стимулированного ХЛ-ответа у жителей правобережного
Ленинского района.
Анализ интенсивности спонтанного и стимулированного ХЛ-ответа
фагоцитов бронхов у пациентов с БА показал, что у жителей Ленинского
района г. Красноярска Imax как в спонтанной, так и в стимулированной пробе
достоверно выше такового по сравнению с жителями Советского района,
страдающими этим заболеванием (p<0,05) (табл. 8). Более высокий уровень
продукции АФК создает благоприятные условия для частых обострений заболевания, его резистентности к проводимой терапии, а следовательно, более
тяжелому течению БА и снижению качества жизни пациентов. В то же время
у пациентов с ХОБЛ, проживающих в Ленинском районе, фагоциты крови
16
Бронхиальный смыв
Периферическая кровь
достигают максимальных значений раньше, а значения максимума спонтанного ХЛ-ответа достоверно ниже, чем у жителей Советского района (табл. 8).
Таблица 8
Показатели ХЛ-ответа фагоцитов бронхиального смыва и периферической
крови у пациентов с БА и ХОБЛ, проживающих в разных районах г. Красноярска (M ± m)
Группа
Контрольная
БА
ХОБЛ
группа
Совет- Ленин- СоветЛенинСоветЛенинский
ский
ский
ский
ский райский
район,
район
район,
район
он,
район
n = 10
n = 15
n = 97
n = 20
n = 30
n = 12
Тmax спонтан- 728±101 717± 927±148 1076±89 993±108 975±149
ной пробы, с
172
*
*
*
*
Imax спонтанной 439±101 428 ± 811±225 3878±
9390±777
9424±
пробы, усл. ед.
118
*
1245
*
374
*/**
*
Tmax стимули- 992±166 934±
1095±
1294±
1385±193 1387 ±
рованной про264
160
104
228
бы, с
Imax стимулиро2022±
1334± 1390 ±
3557±
9826±673 12712 ±
ванной пробы,
543
372
444
655
*
674*
*/**
усл. ед.
Индекс стиму- 4,8 ± 1,1 4,4±1,4 2,2±0,9 2,1±0,4
1,1±0,2
1,3±0,2
ляции
*
*
*
*
Тmax спонтан863 ±
884 ± 938 ± 73 1215 ±
841 ± 50 625 ± 60
ной пробы, с
151
124
242
**
**
Imax спонтанной 4538 ± 5346 ± 22133 ± 20674 ±
22784 ±
16501 ±
пробы, усл. ед.
467
398
1669*
4817*
346*/**
199*/**
Tmax стимули1853 ± 1865 ± 1907 ±
1387 ±
1289 ±
930 ±
рованной про66
51
357
97
132
119
бы, с
*/**
*/**
Imax стимулиро- 35088 ± 35351 40839 ± 38830 ±
34744 ±
27488 ±
ванной пробы,
443
± 230
6312*
6139*
5328*
3618*
усл. ед.
Индекс стиму- 8,9 ± 1,1 8,5±0,7 2,6±0,5* 2,6±0,6* 1,8±0,4* 2,1±0,4*
ляции
Примечание: * - p<0,05 при сравнении с контрольной группой аналогичного
района, ** - p<0,05 при сравнении показателей Ленинского и Советского
районов
Можно предположить, что на системном уровне у этих пациентов
следует ожидать более спокойного течения заболевания, чем у жителей Со17
ветского района. В пользу этого предположения говорит и более низкий уровень заболеваемости ХОБЛ среди жителей Ленинского района (табл. 9).
Таблица 9
Первичная заболеваемость ХОБЛ и БА в Ленинском и Советском
районах г. Красноярска за 2000-2002 г.г.
БА
ХОБЛ
2000
2001
2002
2000
2001
2002
I
II
I
II
I
II
I
II
I
II
I
II
Ленинский
район
Советский
район
580
4,7
998
8,1
948
7,7
365
2,9
555
4,5
637
5,2
982
4,9
107
0
5,3
147
6
7,3
142
4
7,1
148
2
7,4
230 11,5
2
Примечание: I – абсолютное количество случаев, II – заболеваемость
на 1000 населения.
Анализируя литературные данные и полученные нами результаты,
можно предположить, что ингаляции поллютантов, находящихся в городском
воздухе, могут приводить при длительном воздействии к возникновению
хронического воспалительного процесса в дыхательных путях с помощью
различных механизмов, включая аллергические реакции (этилбензол, оксиды
азота, формальдегид), химическое раздражение слизистой бронхиального дерева (фториды, оксид углерода, этилбензол, оксиды азота, формальдегид),
механическое повреждение слизистой бронхиального дерева (взвешенные
вещества). Кроме того, содержащиеся во вдыхаемом воздухе оксиды азота,
вероятно, могут способствовать развитию бронхоспастических состояний
опосредованно, воздействуя на гладкую мускулатуру бронхиального дерева,
затрудняя при этом удаление слизи с поверхности бронхов и способствуя
возникновению застойных явлений. Таким образом можно предположить,
что содержащиеся во вдыхаемом воздухе аэрополлютанты при длительном
воздействии способны изменять нормальные условия функционирования фагоцитов бронхиального дерева, что мы и наблюдали при анализе показателей
ХЛ-ответа и ФИ и пациентов с хроническим воспалительными процессами в
бронхиальном дереве, проживающих в районах с различной техногенной нагрузкой. Оказывая стимулирующее действие на фагоциты, аэрополлютанты
способствуют усилению свободнорадикальных процессов («кислородный
взрыв»), что в свою очередь приводит к активации тучных клеток и процессов ПОЛ, которые также активно поддерживают хронический воспалительный процесс. Такая активация способствует выделению большого количества
БАВ (тучные клетки) и активному разрушению клеточных мембран (ПОЛ),
18
вызывая усиленный приток новых мононуклеарных фагоцитов и полиморфноядерных лейкоцитов из периферической крови в очаг воспалительной реакции, замыкая таким образом «порочный круг».
Учитывая высокий уровень загрязнения атмосферного воздуха двух
сравниваемых районов города перечисленными выше аэрополлютантами, мы
проанализировали уровень первичной заболеваемости жителей этих районов
БА и ХОБЛ за три года и установили, что заболеваемость хроническими обструктивными заболеваниями легких в обоих исследуемых районах г. Красноярска на протяжении трех лет увеличивалась (табл. 9). При этом в Ленинском районе наблюдается более высокий уровень заболеваемости БА, тогда
как в Советском районе более высокой заболеваемостью характеризуется
ХОБЛ. Можно предположить, что сочетание поллютантов атмосферного воздуха Ленинского района, определяемое эмиссиями химического производства, самой мощной ТЭЦ города и выбросами автотранспорта с преобладанием
формальдегида, диоксида азота, взвешенных веществ, этилбензола способствует возникновению и формированию симптомокомплекса, характерного для
БА. В атмосферном воздухе Советского района присутствуют все вышеперечисленные аэрополлютанты, но в концентрации, как правило, не превышающей гигиенические нормативы, а также фтористые соединения (эмиссии
КрАЗа), сочетанное действие которых у жителей района приводит к более
частому формированию ХОБЛ. В основе патогенеза обоих заболеваний лежит хроническое воспаление дыхательных путей, в развитии которого принимают активное участие и фагоцитирующие клетки. Однако в молекулярноклеточной организации воспалительного процесса при БА и ХОБЛ имеются
некоторые отличительные особенности, являющиеся в настоящее время
предметом научных дискуссий. В проведенных нами исследованиях было
выявлено, что в условиях различной техногенной нагрузки (как в количественном, так и в качественном выражении) на дыхательные пути человека фагоцитирующие клетки как эффекторы воспаления по разному реализуют свой
потенциал. Так, именно у пациентов, страдающих БА и проживающих в Ленинском районе города (он характеризуется более высокой заболеваемостью
БА) мы наблюдали повышенную по сравнению с жителями Советского района ХЛ-активность фагоцитов, выделенных непосредственно из очага воспаления – из бронхиального дерева. В то же время, базовый уровень продукции
АФК фагоцитами бронхиального дерева у здоровых жителей обоих районов
не имеет достоверных отличий. Возможно, что наблюдаемое у пациентов с
БА достоверное повышение продукции АФК у формируется у жителей Ленинского района при сочетанном воздействии факторов окружающей среды
(в том числе и техногенного загрязнения атмосферного воздуха) и индивидуальных особенностей функционирования самого организма на этапе предболезни, когда уже имеются изменения на молекулярно-клеточном уровне, но
еще нет клинических проявлений заболевания.
Наблюдаемое нами достоверно повышенное содержание лейкоцитов
в 1 мл бронхиального смыва у здоровых жителей Советского района (по
сравнению с Ленинским районом) (табл. 5) на фоне испытываемого техно19
генного влияния на дыхательные пути может предположительно служить одним из пусковых моментов, приводящих к формированию хронической обструктивной патологии легких, в том числе и ХОБЛ. Возможно, выявленные
нами изменения в качественных и количественных характеристиках состояния фагоцитарного звена у здоровых жителей двух сравниваемых нами районов, а также у пациентов, страдающих хроническими обструктивными заболеваниями дыхательных путей могут быть сформированы под воздействием различной техногенной нагрузки и приводить к изменению структуры заболеваемости БА и ХОБЛ.
Таким образом, в результате проведенного исследования, мы получили новые данные о состоянии фагоцитарно-клеточного компонента на местном (бронхиальное дерево) и системном (периферическая кровь) уровне у
жителей крупного промышленного центра, проживающих в районах с различной степенью эколого-техногенного воздействия на дыхательные пути,
как у практически здоровых лиц, так и пациентов, страдающих хроническими обструктивными заболеваниями легких. Выявленные нами изменения в
показателях ХЛ-активности и поглотительной способности фагоцитирующих
клеток бронхиального дерева и периферической крови жителей г. Красноярска однонаправлены, но количественно различаются между собой, что может
быть использовано как в оценке состояния здоровья жителей экологически
неблагоприятного района, так и в клинической практике.
ВЫВОДЫ.
1. Количество лейкоцитов в 1 мл бронхиального смыва у практически
здоровых жителей Ленинского района г. Красноярска достоверно ниже, в то
время как относительное содержание нейтрофилов достоверно выше, чем у
жителей Советского района. Поглотительная активность фагоцитов бронхов, выделенных из бронхиального смыва достоверно ниже у практически
здоровых красноярцев, проживающих в Ленинском районе города.
2. У пациентов с БА, проживающих в Ленинском районе г. Красноярска,
показатели интенсивности спонтанного и стимулированного ХЛ-ответа фагоцитирующих клеток бронхиального смыва, достоверно выше таковых у
жителей Советского района, страдающих БА.
3. Количество лейкоцитов в 1 мл бронхиального смыва у жителей Ленинского района г. Красноярска, страдающих хроническими обструктивными
заболеваниями легких, достоверно превышает таковое у жителей Советского района. Количество лейкоцитов в бронхиальных смывах у больных с обструктивной патологией легких достоверно повышено по сравнению с контрольной группой, и это повышение является более выраженным у пациентов с ХОБЛ, чем у больных БА и у пациентов с эндогенной БА по сравнению с экзогенной.
4. Клеточный состав бронхиального смыва у больных с хроническими обструктивными заболеваниями легких изменяется по сравнению с группой
контроля: если у практически здоровых лиц в бронхиальном смыве преобладают альвеолярные макрофаги, то у пациентов с ХОБЛ – нейтрофилы, а у
20
пациентов с БА - нейтрофилы и эозинофилы. Чем тяжелее протекает БА,
тем выше содержание лейкоцитов и относительное количество нейтрофилов в бронхиальных смывах у больных.
5. Поглотительная активность фагоцитирующих клеток крови у больных
с ХОБЛ и БА снижена по сравнению с группой контроля. Снижение поглотительной активности фагоцитирующих клеток крови и бронхиального
смыва более выражено у пациентов с эндогенной БА по сравнению с экзогенной БА. Способность фагоцитов пациентов, страдающих БА, к поглощению латексных частиц зависит от степени тяжести обострения БА: чем тяжелее обострение БА, тем более выражено снижение функциональной активности фагоцитов в тесте фагоцитоза с латексом.
6. Показатели хемилюминесцентной активности фагоцитирующих клеток
крови у больных хроническими обструктивными заболеваниями легких отличается от таковой у практически здоровых лиц: максимальные значения
спонтанного ХЛ-ответа фагоцитов крови значительно выше таковых в контрольной группе, в то время как показатели стимулированного ХЛ-ответа
практически не изменяются, что приводит к снижению индекса стимуляции. Показатели ХЛ-активности фагоцитирующих клеток бронхов у больных с хронической бронхообструктивной патологией достоверно отличаются от таковых в контрольной группе: у пациентов, страдающих хронической бронхообструктивной патологией, фагоциты бронхов обладают повышенной способностью к продукции АФК (как спонтанной, так и при стимуляции опсонизированным зимозаном). При этом показатели спонтанного
ХЛ-ответа у больных ХОБЛ достоверно и многократно превышает уровень
спонтанной ХЛ у больных БА. Показатели хемилюминесценции фагоцитирующих клеток бронхиального содержимого являются дополнительными
маркерами дифференциальной диагностики БА и ХОБЛ.
7. Интенсивность спонтанного ХЛ-ответа фагоцитов бронхов у больных
БА зависит от степени тяжести обострения заболевания: чем тяжелее протекает БА, тем выше показатели ХЛ-ответа.
СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ
1. Гринштейн, Ю. И. Особенности системы иммунитета у больных пневмонией и хроническим бронхитом в стадии обострения / Ю. И. Гринштейн,
А. В. Кулигина, В. В. Васильева, Н. С. Эйдемиллер // Всероссийская научнопрактическая
конференция,
посвященная
30-летию
легочноаллергологического центра: Сб. резюме. – Красноярск, 1997. – С. 11.
2. Гринштейн, Ю. И. Состояние местного и общего иммунитета у больных с обструктивной патологией легких / Ю. И. Гринштейн, А. В. Кулигина,
А. Н. Мельникова, О. В. Кемеж, С. В. Мельник, В. А. Шестовицкий, В. И. Загилов // Национальный конгресс по болезням органов дыхания, 8-й: Сб. резюме. – М., 1998. – С. 192.
3. Кулигина, А. В. Функциональная активность фагоицтирующих клеток
в бронхиальном секрете у больных бронхиальной астмой / А. В. Кулигина, А.
21
Н. Мельникова, О. В. Кемеж, С. В. Мельник, Ю. И. Гринштейн // Научнопрактическая конференция, посвященная 40-летию Городской клинической
больницы № 20. – Красноярск, 1998. – С. 101.
4. Гринштейн, Ю. И. Хемилюминесцентная активность фагоцитов в очаге
хронического воспаления при бронхиальной астме / Ю. И. Гринштейн, А. Н.
Мельникова, А. В. Кулигина, В. А. Шестовицкий // Российский национальный конгресс «Человек и лекарство», 6-й: Сб. резюме. – М., 1999. – С. 134.
5. Гринштейн, Ю. И. Хемилюминесцентная активность нейтрофилов
бронхиального секрета у больных бронхиальной астмой / Ю. И. Гринштейн,
А. В. Кулигина, А. Н. Мельникова, А. А. Женихов, В. А. Шестовицкий // Национальный конгресс по болезням органов дыхания, 9-й: Сб. резюме. – М.,
1999. – С. 16.
6. Гринштейн, Ю. И. Дифференцированная терапия тяжелых обострений
бронхиальной астмы / Ю. И. Гринштейн, В. А. Шестовицкий, И. И. Черкашина, А. В. Кулигина // Национальный конгресс по болезням органов дыхания, 10-й: Сб. резюме. – М., 1999. – С. 16.
7. Черкашина, И. И. Эреспал в лечении бронхиальной астмы / И. И. Черкашина, В. А. Шестовицкий, В. И. Загилов, А. В. Кулигина // Национальный
конгресс по болезням органов дыхания, 10-й: Сб. резюме. – М., 1999. – С. 63.
8. Кулигина, А. В. Функциональная активность полиморфонуклеаров в
бронхиальном секрете при обструктивной патологии легких // А. В. Кулигина. А. Н. Мельникова. О. В. Кемеж, С. В. Мельник, В. А. Шестовицкий, Г. Г.
Микушина, Ю. И. Гринштейн // Сборник научно-исследовательских работ,
посвященный 80-летию почетного профессора КрасГМА проф. Опалевой В.
А. – Красноярск. 1999. – С. 41.
9. Шестовицкий, В. А. Бронхиальная астма, диагностика и лечение обострений / В. А. Шестовицкий, И. И. Черкашина, А. В. Кулигина // Методические рекомендации под редакцией Ю. И. Гринштейна. – Красноярск, 2000. –
10 с.
10.
Гринштейн, Ю. И. Диагностика и дифференцированная терапия
тяжелых обострений обструктивных заболеваний легких / Ю. И. Гринштейн,
В. А. Шестовицкий, А. В. Кулигина, В. П. Тедеева // Российский национальный конгресс «Человек и лекарство», 8-й: Сб. резюме. – М., 2001. – С. 128129.
11.
Кулигина, А. В. Хемилюминесцентная активность фагоцитов у
больных с разными типами бронхиальной астмы / А. В. Кулигина, Ю. И.
Гринштейн, В. А. Шестовицкий, И. В. Кобаненко, И. И. Черкашина // Национальный конгресс по болезням органов дыхания, 11-й: Сб. резюме. – М.,
2001. – С. 39.
12.
Шестовицкий, В. А. Диагностика и терапия тяжелых обострений
обструктивной патологии легких / В. А. Шестовицкий, А. В. КулигинаМаксимова, Ю. И. Гринштейн, И. И. Черкашина // Сибирский медицинский
журнал (Иркутск). – 2001. - № 5. - . 35-39.
13. Шестовицкий, В. А. Цитологические маркеры воспаления бронхов
при бронхиальной астме // А. В. Шестовицкий, Ю. И. Гринштейн, И. И. Чер22
кашина, А. И. Аристов, А. В. Кулигина-Максимова // Фармакотерапия, диагностика и реабилитация в клинике внутренних болезней. Обзоры, статьи и
тезисы докладов. Материалы Первого Сибирского Конгресса «Человек и лекарство». – Красноясрк, 2003. – С. 160-161.
14. Шестовицкий, В. А. Диагностика и лечение тяжелой вирусиндуцированной астмы / В. А. Шестовицкий, И. И. Черкашина, Ю. И. Гринштейн, А.
В. Кулигина-Максимова // Российский национальный конгресс «Человек и
лекарство», 10-й: Сб. резюме. – М., 2003. – С. 561.
15. Гринштейн, Ю. И. Цитооксидантные маркеры воспаления в оценке
эффективности дифференцированной терапии тяжелых форм обструктивных
заболеваний легких / Ю. И. Гринштейн, В. А. Шестовицкий, А. В. КулигинаМаксимова, И. И, Черкашина, А. И. Аристов // Клиническая медицина. –
2003. - № 7. – С. 28-31.
16. Шестовицкий, В. А. Цитооксидантные особенности воспаления бронхов при обструктивных заболеваниях легких / В. А. Шестовицкий, Ю. И.
Гринштейн, А. В. Кулигина-Максимова // Пульмонология. – 2003. - № 3. – С.
31-36.
17. Шестовицкий, В. А. Цитологические особенности воспаления бронхов при обструктивных заболеваниях легких / В. А. Шестовицкий, Ю. И.
Гринштейн, А. В. Кулигина-Максимова // Сибирское медицинское обозрение
– 2003. - № 2-3 (27-28). – С. 42-45.
18.
Шестовицкий, В. А. Цитологическая характеристика воспаления
бронхов при обструктивных заболеваниях легких / В. А. Шестовицкий, Ю. И.
Гринштейн, А. В. Кулигина-Максимова, И. И. Черкашина, А. И. Аристов, В.
В. Харламова // Национальный конгресс по болезням органов дыхания, 13-й:
Сб. резюме. – М., 2003. – С. 39.
19. Гринштейн, Ю. И. Клиническое значение цитологической характеристики воспаления бронхов при обструктивных заболеваниях легких / Ю. И.
Гринштейн, В. А. Шестовицкий, А. В. Кулигина-Максимова // Терапевтический архив. – 2004. - № 3. – С. 36-40.
20. Максимова, А. В. Состояние иммунной системы у парктически здоровых лиц г. Красноярска / А. В. Максимова, Ю. И. Гринштейн, Г. Г. Микушина, И. В. Кобаненко, Б. В. Протопопов, В. В. Черняк // Метаболические
механизмы иммунореактивности. – Красноярск, 2004. – С. 78-79.
21. Максимова, А. В. Функциональная активность фагоцитов бронхов у
больных бронхообструктивными заболеваниями / А. В. Максимова, Ю. И.
Гринштейн. В. А. Шестовицкий, Г. Г. Микушина, И. В. Кобаненко // Метаболические механизмы иммунореактивности. – Красноярск, 2004. – С. 168-170.
22. Максимова, А. В. Функциональная активность фагоцитов у больных
экзогенной бронхиальной астмой, проживающих в экологически неблагоприятном районе / А. В. Максимова, Ю. И. Гринштейн, В. А. Шестовицкий //
Дни иммунологии в Сибири: Материалы Всероссийской научнопрактической конференции. – Красноясрк: Издательство КрасГМА, 2005. –
С. 162-163.
23
23. Шестовицкий, В. А. Цитооксидантные маркеры дифференциальной
диагностики бронхиальной астмы и хронической обструктивной болезни
легких / В. А. Шестовицкий, Ю. И. Гринштейн, А. В. Максимова // Дни иммунологии в Сибири: Материалы Всероссийской научно-практической конференции. – Красноясрк: Издательство КрасГМА, 2005. – С. 203-204.
24. Максимова, А. В. Особенности клеточного состава и функциональной
активности фагоцитов бронхиального смыва здоровых красноярцев, проживающих в районах города с различной техногенной нагрузкой / А. В. Максимова, А. А. Савченко, Ю. И. Гринштейн // Дни иммунологии в Сибири: Материалы Всероссийской научно-практической конференции, Красноярск, 2021 сентября 2006 г. – Красноясрк: Издательство КрасГМА, 2006. – С. 24-25.
25. Максимова, А. В. Состояние хемилюминесцентного ответа фагоцитов
крови у пациентов с хронической обструктивной болезнью легких, проживающих в разных районах г. Красноярска / А. В. Максимова, А. А. Савченко,
Ю. И. Гринштейн // Дни иммунологии в Сибири: Материалы Всероссийской
научно-практической конференции, Красноярск, 20-21 сентября 2006 г. –
Красноясрк: Издательство КрасГМА, 2006. – С. 26-27.
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.
БА – бронхиальная астма
ЛЗ ХЛ – люминолзависимая хемилюминесценция
ФИ – фагоцитарный индекс
ХОБЛ – хроническая обструктивная болезнь легких
24
Документ
Категория
Без категории
Просмотров
0
Размер файла
237 Кб
Теги
bd000100417
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа