close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

08414

код для вставкиСкачать
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ПАТЕНТУ
РЕСПУБЛИКА БЕЛАРУСЬ
BY (11) 8414
(13) C1
(19)
(46) 2006.08.30
(12)
7
(51) A 61D 19/00
НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР
ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ
СОБСТВЕННОСТИ
(54)
СРЕДА ДЛЯ ПОДГОТОВКИ СПЕРМЫ К ОСЕМЕНЕНИЮ
BY 8414 C1 2006.08.30
(21) Номер заявки: a 19990308
(22) 1999.04.01
(43) 2000.12.30
(71) Заявитель: Республиканское унитарное предприятие "Институт животноводства Национальной академии
наук Беларуси" (BY)
(72) Авторы: Голубец Леонид Викторович; Шейко Иван Павлович; Шпаковская Ольга Анатольевна; Симоненко Владимир Павлович (BY)
(73) Патентообладатель: Республиканское
унитарное предприятие "Институт животноводства Национальной академии
наук Беларуси" (BY)
(56) SU 1189448 A, 1985.
SU 880420, 1981.
SU 897237, 1982.
SU 1155262 A, 1985.
RU 96116187 A, 1998.
WO 92/21234 A1.
(57)
Среда для подготовки спермы к осеменению, содержащая хлорид натрия, гидрокарбонат натрия, фосфат натрия, лактат натрия, пируват натрия, хлорид калия, хлорид магния,
хлорид кальция, бычий сывороточный альбумин, гепарин, гентамицин, феноловый красный, буфер Hepes и деионизированную воду при следующем соотношении компонентов,
мас. %:
хлорид натрия
5,800-5,880
гидрокарбонат натрия
2,055-2,150
фосфат натрия
0,034-0,036
лактат натрия
3,935-3,990
пируват натрия
0,105-0,115
хлорид калия
0,220-0,240
хлорид магния
0,395-0,405
хлорид кальция
0,029-0,030
бычий сывороточный альбумин
5,950-6,050
гепарин
0,145-0,155
гентамицин
0,045- 0,055
феноловый красный
0,010-0,012
буфер Hepes
0,220-0,240
вода деионизированная
остальное.
Изобретение относится к животноводству, в частности к средам для использования
спермиев быков при получении предымплантационных зародышей крупного рогатого
скота из ооцитов вне организма.
Известна среда для разбавления спермы животного, предназначенная для повышения
выживаемости и оплодотворяющей способности сперматозоидов, включающая следующие компоненты при нижеследующем соотношении компонентов, мас. %: дисахарид-
BY 8414 C1 2006.08.30
лактоза 6,10-10,00; трис-аминометан 0,05-0,10; двунатриевая соль уксусной кислоты
0,06-0,12; декстрин 0,30-5,00; желток куриного яйца 13,0-14,0; глицерин 8,0-9,0 и вода
дистиллированная остальное [1].
Однако данная среда для разбавления спермы и активизации сперматозоидов малоэффективна при подготовке спермиев к осеменению (капацитация) для получения качественных предымплантационных зародышей крупного рогатого скота.
Задача изобретения - повышение эффективности активизации спермиев быков при получении предымплантационных зародышей вне организма.
Для решения данной задачи предлагается среда для подготовки спермы к осеменению,
содержащая хлорид натрия, гидрокарбонат натрия, фосфат натрия, лактат натрия, пируват
натрия, хлорид калия, хлорид магния, хлорид кальция, бычий сывороточный альбумин,
гепарин, гентамицин, феноловый красный, буфер Hepes и деионизированную воду при
следующем соотношении компонентов, мас. %:
хлорид натрия
5,800-5,880
гидрокарбонат натрия
2,055-2,150
фосфат натрия
0,034-0,036
лактат натрия
3,935-3,990
пируват натрия
0,105-0,115
хлорид калия
0,220-0,240
хлорид магния
0,395-0,405
хлорид кальция
0,029-0,030
бычий сывороточный альбумин
5,950-6,050
гепарин
0,145-0,155
гентамицин
0,045-0,055
феноловый красный
0,010-0,012
буфер Hepes
0,220-0,240
вода деионизированная
остальное.
Эффективность активизирования спермиев проверенного по потомству быка-производителя изучали при осеменении полноценных ооцитов коров вне организма при различном соотношении исходных компонентов в трех составах сред, приведенных в табл. 1.
Таблица 1
Состав среды
Компоненты
1
2
3
Хлорид натрия
5,800
5,840
5,880
Гидрокарбонат натрия
2,055
2,100
2,150
Фосфат натрия
0,034
0,035
0,036
Хлорид калия
0,220
0,230
0,240
Хлорид магния
0,395
0,400
0,405
Хлорид кальция
0,029
0,0295
0,030
Лактат натрия
3,935
3,960
3,990
Пируват натрия
0,105
0,110
0,115
Бычий сывороточный альбумин
5,950
6,000
6,050
Гепарин
0,145
0,150
0,155
Гентамицин
0,045
0,050
0,055
Феноловый красный
0,010
0,010
0,012
Буфер Hepes
0,220
0,230
0,240
Вода деионизированная
до 100
до 100
до 100
Кроме того, каждый состав указанных сред был испытан на влияние его на подвижность и выживаемость сперматозоидов при комнатной температуре в течение 6 часов.
2
BY 8414 C1 2006.08.30
Лучшие результаты по этим показателям получены при использовании среды второго состава, данные показаны в табл. 2.
Таблица 2
Подвижность спермиев,
Показатель выживаемости
Состав среды
n
баллов (М ± m)
(М ± m)
Первый
20
4,3 ± 0,07
215 ± 10,8
Второй
20
4,7 ± 0,06
224 ± 10,9
Третий
20
4,5 ± 0,08
221 ± 11,5
Контроль (ТС-199)
20
4,1 ± 0,09
180 ± 11,9
Среду готовят следующим образом. В стерильную чистую химическую колбу вносят
точно отмеренные компоненты оптимального (второго) состава сред для подготовки
спермы к осеменению ооцитов крупного рогатого скота, доводят до соответствующего
объема деионизированной водой комнатной температуры, содержимое тщательно перемешивают. Стерилизацию среды осуществляют путем фильтрации через фильтр с диаметром пор, равным 0,22 мк. Фильтрат хранят в темном месте при температуре 4-9 °С. По мере необходимости среду нужного объема переносят в чашки Петри, доводят до
температуры 38-39 °С, которая соответствует температуре тела крупного рогатого скота,
помещают туда специально подготовленные сперматозоиды для доведения их до кондиции активного осеменения ооцитов вне организма (капацитация). Среда представляет собой однородную эмульсию, рН которой равна 7,4 ± 0,2.
Оптимальный состав (второй) среды испытали на эффективность стимулирования
сперматозоидов быка-производителя при оплодотворении ооцитов отличного и хорошего
качества вне организма. Спермии были подготовлены по известной методике, помещены в
питательную среду, куда затем помещали качественные ооциты коров-доноров. Контролем служила отечественная среда ТС-199, используемая для капацитации спермиев в биотехнологии. Результаты исследований - в табл. 3.
Таблица 3
Использовано
Зародышей на стадии
Морул и бластоцистов
Среда
ооцитов в опыте,
дробления
шт.
n
%
n
%
Предлагаемая
736
373
50,7
279
37,9
ТС-199
380
98
26,0
Таким образом, использование среды предложенного состава для подготовки спермы
быков-производителей к осеменению ооцитов коров-доноров вне организма (капацитация) позволяет значительно активизировать сперматозоиды, повысить их жизнеспособность, что сказывается на эффективности оплодотворения ооцитов животных в предымплантационный период коровам-реципиентам.
Источники информации:
1. А.с. СССР № 1197660, МПК А 61D 7/02 // Бюл. № 46. - 1985.
Национальный центр интеллектуальной собственности.
220034, г. Минск, ул. Козлова, 20.
3
Документ
Категория
Без категории
Просмотров
0
Размер файла
73 Кб
Теги
08414
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа