close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

14577

код для вставкиСкачать
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ПАТЕНТУ
РЕСПУБЛИКА БЕЛАРУСЬ
(46) 2011.06.30
(12)
(51) МПК
НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР
ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ
СОБСТВЕННОСТИ
(54)
BY (11) 14577
(13) C1
(19)
A 01N 1/02
(2006.01)
СПОСОБ КРИОКОНСЕРВАЦИИ АЛЛОГРАФТА
КЛАПАНА СЕРДЦА
(21) Номер заявки: a 20100642
(22) 2010.04.28
(71) Заявитель: Государственное учреждение "Республиканский научнопрактический центр "Кардиология"
Министерства здравоохранения Республики Беларусь" (BY)
(72) Авторы: Дроздовский Константин
Викентьевич; Дедович Виталий Владимирович; Островский Юрий Петрович (BY)
(73) Патентообладатель: Государственное
учреждение "Республиканский научно-практический центр "Кардиология"
Министерства здравоохранения Республики Беларусь" (BY)
(56) WO 89/01286 A1.
US 6521402 B1, 2003.
SU 1500231 A1, 1989.
BY 8118 C1, 2006.
BY 14577 C1 2011.06.30
(57)
Способ криоконсервации аллографта клапана сердца, заключающийся в том, что выделенный аллографт промывают в питательной среде RPMI 1640, помещают в стерильный
контейнер, содержащий питательную среду RPMI 1640, 1 г/л цефазолина, 200 мг/л метронидазола и 40 мг/л гентамицина, выдерживают при 4 °С в течение 24 ч, повторно промывают аллографт в стерильной питательной среде RPMI 1640, после чего его помещают в
контейнер со стерильным, охлажденным до 5 °С 10 %-ным раствором диметилсульфоксида в питательной среде RPMI 1640 и замораживают по следующей схеме: от 5 до -50 °С
температуру снижают со скоростью 0,7 °С/мин, от -50 до -80 °С - со скоростью
1,4 °С/мин.
Изобретение относится к медицине, а именно к хирургии сердца и сосудов, и может
быть использовано при приготовлении биопротезов, в частности аллографтов, для протезирования клапанов сердца.
Взаимосвязанные проблемы тромбоэмболии и антикоагуляционных осложнений являются основополагающим фактором в развитии поздних осложнений при лечении клапанной патологии как у взрослых, так и у детей. После сердечной недостаточности
тромбоэмболия - ведущая причина смерти при аортальном протезировании. Частота антикоагуляционных осложнений составляет около 5 % в год.
Клапанное протезирование представляет значительные сложности. Механические
клапаны сердца ассоциируются с антикоагуляционными осложнениями и гемодинамическими дисфункциями. Попытки применения ксенографтов остаются ограниченными из-за
большой частоты ранней послеоперационной недостаточности и последующей кальцификации.
Помимо этого, применение биопротезов сопряжено с необходимостью их консервации
для хранения. Известны различные методы подготовки и консервации биоклапанов [1].
BY 14577 C1 2011.06.30
Однако существующие технологии обработки биопротезов клапанов сердца, не решают
проблем ингибирования кальцификации и тромбообразования, а также отличаются крайней сложностью и многостадийностью.
Аллографты имеют некоторые преимущества для решения проблемы заболеваний имплантированных клапанов: лучшие гидравлические характеристики; снижение тромбоэмболических осложнений; резистентность к эндокардиту; приемлемый срок службы.
Применение аллографтов в кардиохирургии во многом обязано разработке методов
криоконсервации [2].
Известные методы криоконсервации на данном этапе уже являются рутинными, при
этом не лишены недостатков. Универсальность методики, без спецификации по типу консервируемых биотканей, не дает возможности повысить эффективность использования
криоконсервантов с учетом их функциональных и гистохимических особенностей.
Разработанная нами методика направлена на усовершенствование способа криоконсервации аллографта клапана сердца с учетом улучшения приживаемости клапана и его
функционирования, а именно физических и гистохимических характеристик аллографта
после его имплантации.
Указанный способ осуществляется следующим образом.
Аллографт клапана сердца промывают в питательной среде RPMI 1640 и помещают в
стерильный контейнер, содержащий среду RPMI 1640, цефазолин в концентрации 1 г/л,
метронидазол - 200 мг/л, гентамицин - 40 мг/л. Контейнер хранится в течение 24 ч при
температуре +4 °С, после чего аллографт повторно промывают в стерильной среде
RPMI 1640.
Аллографт помещают в контейнер со стерильным, охлажденным до +5 °С 10 %-м раствором диметилсульфоксида в среде RPMI 1640.
Контейнер с аллографтом подвергают криоконсервации по следующей программе:
1) от +5 до -50 °С температуру снижают со скоростью 0,7 °С в минуту;
2) при температуре -50 °С аллографт выдерживают 5 мин;
3) от -50 до -80 °С температуру снижают со скоростью 1,4 °С в минуту.
После чего аллографт помещают на хранение в банк аллографтов на расстояние 2-7 см
выше уровня жидкого азота.
Пример осуществления способа.
Забор аллографтов клапанов сердца проводится у трупного донора.
При заборе аллографтов клапанов сердца время ишемии (время от момента смерти
донора до момента забора аллографтов клапанов сердца) не допускается более 24-48 ч в
зависимости от условий хранения трупного донора.
Забор аллографтов клапанов сердца, который проводят в стерильных условиях, включает забор сердца с аортой до перешейка, легочной артерией до корней легких, нижней и
верхней полой венами, легочными венами.
Легочную артерию забирают с клапаном, участком миокарда правого желудочка и
межжелудочковой перегородки шириной до 20 мм, ветвями легочной артерии до корней
легких.
Аорту забирают до перешейка с устьями брахиоцефальных сосудов, устьями коронарных артерий, с клапаном, с передней створкой митрального клапана (если не производится забор цельного митрального клапана), участком миокарда левого желудочка и
межжелудочковой перегородки шириной до 20 мм.
Выделенный аллографт клапана сердца промывают в питательной среде RPMI 1640,
помещают в стерильный контейнер, содержащий среду RPMI 1640, 1 г/л цефазолина,
200 мг/л метронидазола и 40 мг/л гентамицина, выдерживают при +4 °С в течение 24 ч,
повторно промывают аллографт в стерильной среде RPMI 1640, после чего аллографт помещают в контейнер со стерильным, охлажденным до +5 °С 10 %-м раствором диметилсульфоксида в среде RPMI 1640 и замораживают по следующей схеме: от +5 до -50 °С
2
BY 14577 C1 2011.06.30
температуру снижают со скоростью 0,7 °С/мин; выдерживают 5 мин; от -50 до -80 °С температуру снижают со скоростью 1,4 °С/мин.
После чего аллографт помещают на хранение в банк аллографтов на расстояние 2-7 см
выше уровня жидкого азота.
Перед использованием аллографт размораживают следующим образом:
контейнер с аллографтом помещают на водяную баню при температуре 35-40 °С на 710 мин, затем в стерильных условиях извлекают аллографт из контейнера и поочередно
помещают в следующие сосуды:
1 сосуд - 100 мл 5 % раствора диметилсульфоксида в среде RPMI 1640, температура 28 °С, экспозиция 5 мин;
2 сосуд - 100 мл 2,5 % раствора диметилсульфоксида в среде RPMI 1640, температура
2-8 °С, экспозиция 5 мин;
3 сосуд - 100 мл среды RPMI 1640, температура 2-8 °С, экспозиция 5 мин;
4 сосуд - 100 мл среды RPMI 1640, содержащей антибиотики: 1 г/л цефазолина,
200 мг/л метронидазола и 40 мг/л гентамицина, в которой аллографт хранится при температуре 2-8 °С до момента его имплантации.
Указанным образом приготовленные аллографты были имплантированы пациентам на
базе РНПЦ "Кардиология" в период 2007-2010 гг.
Изучение криосохраненных аллографтов показало сохранность ультраструктуры аллографтов после различных сроков криохранения. При анализе отдаленных результатов
имплантации in vivo наблюдались процессы новообразования капилляров и мелких сосудов в средней оболочке аллографта. Компенсаторные изменения миоцитов средней оболочки и субэндотелиального слоя поддерживают мышечно-эластический каркас стенки
аллографта, что обусловливает хорошую функцию стенки аллографта и препятствует аневризмообразованию.
При имплантации криосохраненных аллографтов при коррекции врожденных пороков
сердца наблюдались хорошая их функция, удобство имплантации, отсутствовала необходимость в длительной антикоагулянтной терапии.
Источники информации:
1. RU 2008767 С1, 1994.
2. EP 382745 В1, 1994.
Национальный центр интеллектуальной собственности.
220034, г. Минск, ул. Козлова, 20.
3
Документ
Категория
Без категории
Просмотров
0
Размер файла
70 Кб
Теги
14577
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа