close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

15549

код для вставкиСкачать
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ПАТЕНТУ
РЕСПУБЛИКА БЕЛАРУСЬ
(46) 2012.02.28
(12)
(51) МПК
НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР
ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ
СОБСТВЕННОСТИ
(54)
BY (11) 15549
(13) C1
(19)
C 12N 9/99
A 61L 2/16
A 61L 101/06
(2006.01)
(2006.01)
(2006.01)
СПОСОБ ИНГИБИРОВАНИЯ АКТИВНОСТИ ВНЕКЛЕТОЧНЫХ
ГЕМОЛИЗИНОВ ПАТОГЕННОГО ШТАММА PSEUDОMONAS
AERUGINOSA
(21) Номер заявки: a 20091000
(22) 2009.07.06
(43) 2011.02.28
(71) Заявитель: Государственное учреждение
"Республиканский
научнопрактический центр эпидемиологии и
микробиологии" (BY)
(72) Авторы: Никандров Виталий Николаевич; Пыж Анна Эдуардовна (BY)
(73) Патентообладатель: Государственное
учреждение "Республиканский научно-практический центр эпидемиологии и микробиологии" (BY)
(56) НИКАНДРОВ В.Н. и др. Международный Евро-Азиатский конгресс по инфекционным болезням. Т.1. Актуальные
вопросы инфекционной патологии. Витебск, 2008. - С. 25-26.
НИКАНДРОВ В.Н. и др. Совершенствование осуществления государственного санитарного надзора в Республике
Беларусь: Материалы XI съезда гигиенистов и эпидемиологов Республики
Беларусь. - Минск: Минсктиппроект,
2007. - С. 205-211.
RU 2180849 C2, 2002.
BY 15549 C1 2012.02.28
(57)
Способ ингибирования активности внеклеточных гемолизинов патогенного штамма
Pseudomonas aeruginosa, отличающийся тем, что получают бесклеточный супернатант
бульонной культуры Pseudomonas aeruginosa, содержащий гемолизины, добавляют к нему
спиртовой раствор йода до конечной концентрации йода 0,05-0,10 % и инкубируют при
37 °С в течение 24 часов.
Изобретение относится к биологии и экспериментальной медицине, в частности к ингибированию активности гемолизинов патогенных штаммов Pseudomonas aeruginosa как
одного из факторов патогенности данного микроорганизма.
Известен способ ингибирования активности гемолизинов патогенных штаммов данного микроорганизма. Он заключается в том, что при добавлении к бесклеточным супернатантам бульонных культур госпитальных штаммов псевдомонад нитротетразолиевого
синего в концентрации 10-3 M наблюдается ингибирование гемолитической активности на
45 %[1].
Указанный способ является прототипом по отношению к заявляемому.
Общий признак для заявляемого способа и прототипа - ингибирование активности гемолизинов супернатантов бульонных культур госпитальных штаммов псевдомонад при
добавлении к реакционной системе вещества химической природы.
Однако применяемый для ингибирования активности гемолизинов бесклеточных супернатантов бульонных культур патогенных (госпитальных) штаммов Pseudomonas aeruginosa нитротетразолиевый синий является дефицитным и дорогостоящим реактивом,
вызывающим гибель клеток и не относящимся к разряду фармацевтических препаратов.
BY 15549 C1 2012.02.28
То есть использование нитротетразолиевого синего в качестве ингибитора гемолизинов этого микроорганизма для лечебных целей невозможно.
Задачей заявляемого изобретения является создание способа, позволяющего ингибировать активность гемолизинов патогенных (госпитальных) штаммов Pseudomonas aeruginosa фармацевтическим препаратом.
Поставленная задача достигается тем, что предложен способ ингибирования активности внеклеточных гемолизинов патогенного штамма Pseudomonas aeruginosa. Получают
бесклеточный супернатант бульонной культуры Pseudomonas aeruginosa, содержащий гемолизины, добавляют к нему спиртовой раствор йода в конечной концентрации 0,05-0,10 % и
ингибируют при 37 °С в течение 24 часов.
Йод - химический биогенный элемент с формулой I2, является жизненно необходимым
элементом и фармацевтическим препаратом.
В медицине йод используется (5 % спиртовой раствор) для наружного применения как
антисептик при воспалительных и других заболеваниях кожи и слизистых оболочек, а
также внутрь - при атеросклерозе, хронических воспалительных процессах в дыхательных
путях [2].
Использование йода позволяет достичь полного ингибирования активности гемолизинов госпитальных штаммов псевдомонад, исключив использование ксенобиотика нитротетразолиевого синего, являющегося дефицитным и дорогостоящим реактивом.
Пример 1
Используют образцы бесклеточных супернатантов бульонных культур госпитального
штамма № 23/2гоб2 Pseudomonas aeruginosa, выращенного в течение 10 ч на питательном
бульоне с гидролизатом кильки в стандартных условиях.
Готовят две пластины мясо-пептонного агара, содержащие 3 % взвесь эритроцитов
барана, приготовленные как описано ранее [3]. Для одной пластины эритроцитарноагаровую смесь готовят на 0,15 M растворе NaCl pH 7,2, содержащем спиртовой раствор
йода в конечной концентрации 0,05 % (опыт). Для второй пластины эритроцитарноагаровую смесь готовят на 0,15 M растворе NaCl pH 7,2 (контроль).
Аликвоты образцов наносят в предварительно вырезанные в агаре лунки на обе эритроцитарно-агаровые пластины. Пластины с нанесенными пробами инкубируют при 37 °С
в течение 24 ч. Гемолитическую активность учитывают по площади зон лизиса эритроцитов [3].
Площадь зон (в мм2) лизиса эритроцитов (n = 3): на опытной эритроцитарно-агаровой
пластине - 0; на контрольной эритроцитарно-агаровой пластине - 225 ± 6.
Следовательно, гемолитическая активность госпитального штамма Pseudomonas aeruginosa подавлялась на 100 %.
Пример 2
Используют образцы бесклеточных супернатантов бульонных культур госпитального
штамма № 23/2гоб2 Pseudomonas aeruginosa, выращенного в течение 22 ч на питательном
бульоне с гидролизатом кильки в стандартных условиях.
Готовят две пластины мясо-пептонного агара, содержащие 3 % взвесь эритроцитов
барана, приготовленные как описано ранее [3]. Для одной пластины эритроцитарноагаровую смесь готовят на 0,15 M растворе NaCl pH 7,2, содержащем спиртовой раствор
йода в конечной концентрации 0,10 % (опыт). Для второй пластины эритроцитарноагаровую смесь готовят на 0,15 M растворе NaCl pH 7,2 (контроль).
Аликвоты образцов наносят в предварительно вырезанные в агаре лунки на обе эритроцитарно-агаровые пластины. Пластины с нанесенными пробами инкубируют при 37 °С
в течение 24 ч. Гемолитическую активность учитывают по площади зон лизиса эритроцитов [3].
Площадь зон (в мм2) лизиса эритроцитов (n = 3): на опытной эритроцитарно-агаровой
пластине - 0; на контрольной эритроцитарно-агаровой пластине - 336 ± 0.
2
BY 15549 C1 2012.02.28
Следовательно, гемолитическая активность госпитального штамма Pseudomonas aeruginosa подавлялась на 100 %.
Таким образом, достигаемый технический результат заключается в том, что способ
позволяет подавлять активность внеклеточных гемолизинов госпитального штамма псевдомонад, использовать доступный ингибитор, являющийся лекарственным препаратом и
безопасный для медицинского персонала и пациентов. Данный способ может найти широкое применение при разработке рациональных путей борьбы в псевдомонадной инфекцией в локальном очаге.
Источники информации:
1. Никандров В.Н., Пыжова Н.С., Пыж А.Э. Проявление гемолитической и протеолитической активности госпитальными штаммами Pseudomonas aeruginosa // В кн.: "Материалы Международного Евро-Азиатского конгресса по инфекционным болезням. Том 1.
Актуальные вопросы инфекционной патологии". - Витебск, 2008. - С. 24-26.
2. Машковский М.Д. Лекарственные средства. Изд. 15-е, перераб., испр. доп. - М.: Новая Волна, 2005. - С. 702.
3. Евченко Т.А., Лютов А.Г., Алешкин В.А. Оценка качества иммуноглобулинов методом радиальной диффузии в геле // Актуальные вопросы разработки, производства и применения иммунобиологических и фармацевтических препаратов: Матер. конф., часть 1. Уфа, 2000. - С. 148-152.
Национальный центр интеллектуальной собственности.
220034, г. Минск, ул. Козлова, 20.
3
Документ
Категория
Без категории
Просмотров
0
Размер файла
73 Кб
Теги
15549
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа