close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

Патент BY 03865

код для вставкиСкачать
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ПАТЕНТУ
РЕСПУБЛИКА БЕЛАРУСЬ
(19)
BY (11) 3865
(13)
C1
7
(51) A 61K 39/15
(12)
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ ПАТЕНТНЫЙ
КОМИТЕТ РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ
(54)
ПРЕПАРАТ ПРОТИВ ДИАРЕИ ТЕЛЯТ "МОЛОЗИВНЫЙ
АГРОТИОГЛОБУЛИН"
(21) Номер заявки: 960171
(22) 1996.04.10
(46) 2001.06.30
(71) Заявитель: Красочко П.А. (BY)
(72) Авторы: Красочко П.А., Иванов В.Е., Пилуй А.Ф.
(BY)
(73) Патентообладатель: Красочко Петр Альбинович
(BY)
(57)
Препарат против диареи телят, включающий источник противовирусных антител - молозивный иммуноглобулин, отличающийся тем, что он содержит молозивный иммуноглобулин на сбалансированном водносолевом растворе и дополнительно противовирусный компонент-протаргол и антитоксический компонент тиосульфат натрия при следующем соотношении ингредиентов, мас. %:
протаргол
0,4-0,5
тиосульфат натрия
4-5
молозивный иммуноглобулин на сбалансированном водно-солевом растворе
остальное.
BY 3865 C1
(56)
GB 1560344В, 1980.
US 4843065 A, 1989.
US 4976970 A, 1990.
Изобретение относится к ветеринарии, в частности к лечению заболеваний диареей молодняка крупного
рогатого скота.
Известен лечебно-профилактический препарат, содержащий сыворотку крови убойных животных в синтетической среде Игла или 0,5 % гидролизате лактальбумина на сбалансированном водно-солевом растворе
Хенкса с добавлением тривитамина [1].
Однако этот препарат содержит недостаточное количество антител к возбудителям диареи телят (рота-,
корона- и диарейному вирусам), препарат вводится в больших количествах (500-1000 мл) в подогретом до
37 °С виде до первой выдойки молозива.
Наиболее близким к заявляемому является препарат для профилактики и терапии гастроэнтеритов телят
[2].
Однако недостатком данного препарата является то, что в его состав входят только антитела к ротавирусам человека, которые антигенно родственные ротавирусам крупного рогатого. Антитела к другим возбудителям гастроэнтеритов, вызываемых вирусами диареи и коронавирусами, отсутствуют.
Задачей изобретения является создание препарата, обладающего высокой противовирусной активностью
с повышенным содержанием антител к возбудителям вирусно-бактериальной природы, вызывающих энтериты новорожденных телят, и стимулирующего иммунную систему животных.
Поставленная задача достигается тем, что препарат против диареи телят, включающий источник антител
к возбудителям диареи телят на сбалансированном водно-солевом растворе, в качестве источника антител
содержит молозивный иммуноглобулин и дополнительно протаргол и тиосульфат натрия при следующем
соотношении ингредиентов, мас %:
протаргол
0,4-0,5
тиосульфат натрия
4-5
BY 3865 C1
молозивный иммуноглобулин на сбалансированном
водно-солевом растворе
остальное.
Использование молозивного иммуноглобулина в качестве источника противовирусных и антибактериальных антител в предложенном препарате обусловлено тем, что в молозиве 1-2 удоя содержание антител к
возбудителям вирусно-бактериальной природы, вызывающих энтериты новорожденных телят, в 10-12 раз
больше, чем в сыворотке крови (табл. 1). В отличие от сыворотки крови, молозивный иммуноглобулин обладает еще и высоким физиологическим действием на организм новорожденных телят [3].
Представленные в табл. 1 результаты сравнительного состава антител сывороток крови и молозивного
иммуноглобулина свидетельствуют о более высокой биологической активности молозивного иммуноглобулина по сравнению с сывороткой крови.
Использование в молозивном арготиоглобулине протаргола (альбумината серебра) вызвано тем, что наряду с общеизвестными бактерицидными свойствами он обладает еще и противовирусными [4]. Изучение
ингибирующих свойств протаргола в отношении репродукции вируса диареи на культуре клеток показало,
что в концентрации 0,3-0,5 % он задерживает репродукцию вируса, а в 2,5 % концентрации действует токсически на культуре клеток (табл. 2). Кроме того, проведены исследования по изучению стимулирующих
свойств протаргола на иммунную систему, содержания Т- и В-лимфоцитов, фагоцитов, бактерицидную активность сыворотки крови (табл. 3).
Из табл. 2 видно, что протаргол в концентрациях от 0,3 до 1,5 % предотвращает репродукцию вируса
диареи и в то же время не токсичен для культур клеток.
Из табл. 3 видно, что протаргол активизирует как клеточные, так и гуморальные звенья иммунной системы. При этом к 15 дню наблюдения отмечается повышенное содержание абсолютного количества Тлимфоцитов, фагоцитарного числа и фагоцитарного индекса и особенно повышена бактерицидная активность сыворотки крови. К 30 дню эти показатели пришли к уровню исходных показателей.
Тиосульфат натрия, входящий в состав предложенного препарата, обладает антитоксическими и иммуностимулирующими свойствами, позволяет снять токсикоз при диарее и в некоторой степени стимулировать
угнетенную иммунную систему [5], кроме того, используемые концентрации протаргола и тиосульфата натрия не снижают титр противовирусных антител в молозивном иммуноглобулине (табл. 4).
Исследования, приведенные в табл. 4 свидетельствуют о том, что как протаргол, так и тиосульфат натрия,
а также их сочетания не снижают титр антител в молозивном глобулине.
Пример приготовления молозивного арготиоглобулина.
Молозиво 1 и 2 удоя от клинически здоровых коров 3-й и более лактаций подогревают до 40-43 °С, сепарируют для отделения жира, тщательно перемешивают и вносят один из ферментных препаратов - 10 % раствор пепсина из расчета 15-20 мл на 1 л молозива или сычужный фермент - 1,5-2 мл на 1 л. Процесс створаживания длится до 3 ч. После полного створаживания молозива в течение суток в холодном месте
(температура +7 - +15 °С) происходит формирование казеинового сгустка и отделение молозивной сыворотки. Молозивную сыворотку отделяют с помощью сифона и лавсанового фильтра для отделения казеина и оставляют на 24 ч для осветления. В полученную молозивную сыворотку вносят полиэтиленгликоль ПЕГ 115
молекулярной массой 6000 до 10 % концентрации для осаждения иммуноглобулинов. Через 18-24 ч формируется осадок иммуноглобулина, который отделяют от сыворотки центрифугированием при 3-5 тыс.об./мин.
в течение 15-30 мин или сливом надосадочной жидкости при достаточно плотном осадке. Полученный осадок иммуноглобулинов растворяют до 10 % концентрации сбалансированным водно-солевым раствором
Рингера, состоящим из раствора натрия хлорида, калия хлорида и натрия гидрокарбоната на дистиллированной воде [6]. После получения раствора молозивного иммуноглобулина в него добавляют протаргол до 0,40,5 % концентрации и тиосульфат натрия до 4-5 % концентрации. Полученный молозивный арготиоглобулин
для осветления и стерилизации пропускают через фильтрующий и стерилизующий фильтры Сальникова.
Стерильный препарат фасуют в стерильные флаконы объемом 200,0 и 500,0 мл, хранят в темном прохладном месте при температуре +4 - +10 °С.
Проведение лабораторных исследований антидиарейного препарата «Молозивный арготиоглобулин» на
лабораторных животных показало, что все серии препарата стерильны, нетоксичны и безвредны для лабораторных животных.
Следующим этапом работ явились исследования по отработке оптимальной терапевтической дозы компонентов в препарате и их соотношения.
В табл. 5 представлены результаты отработки оптимального соотношения ингредиентов молозивного арготиоглобулина при пероральном введении больным диареей телятам.
Как видно из табл. 5, наивысшую лечебную эффективность показал молозивный арготиоглобулин со следующим соотношением компонентов: 0,4-0,5 % протаргола, 4-5 % тиосульфата натрия и до 100 % молозивного иммуноглобулина на растворе Рингера.
Для отработки терапевтической дозы предлагаемого препарата были сформированы 4 группы новорожденных телят, заболевших энтеритами вирусно-бактериальной этиологии. Первая группа телят (5 голов) по2
BY 3865 C1
лучала перорально 25 мл молозивного арготиоглобулина, вторая группа (5 голов) - по 50 мл, третья группа 100 мл, четвертая группа (контроль) - 100 мл сбалансированного водно-солевого раствора Рингера, результаты определения терапевтической дозы молозивного арготиоглобулина подставлены в табл. 6.
Как видно из табл. 6, оптимальной терапевтической дозой молозивного арготиоглобулина является 50100 мл при пероральном применении.
После отработки оптимального соотношения компонентов и терапевтической дозы препарата проведены
сравнительные исследования лечебно-профилактической эффективности антидиарейного препарата (прототип) и молозивного арготиоглобулина. Для этого в опыт было взято 203 теленка с признаками диареи. Из
них 89 обработали двукратно арготиоглобулином и 114 - антидиарейным препаратом. Результаты опыта
представлены в табл. 7.
Изучение терапевтической эффективности антидиарейного препарата молозивного арготиоглобулина в
сравнительном аспекте дает основание утверждать, что при двукратном применении предлагаемый вариант
более чем в 4 раза превосходит прототип.
Преимуществом антидиарейного препарата «Молозивный арготиоглобулин» является 10-кратное
уменьшение оптимальной терапевтической дозы по сравнению с прототипом, что облегчает процесс лечения
новорожденных телят.
Таблица 1
Антительный состав сывороток крови и молозивного иммуноглобулина коров
№ п/п
1
2
3
4
5
6
7
8
Наименование сывороток
Сборная сыворотка крови коров (серия № 1)
Сборная сыворотка крови коров (серия № 2)
Сборная сыворотка крови коров (серия № 3)
Средний титр сборной сыворотки крови коров
(серии № 1, 2, 3)
Молозивный иммуноглобулин (серия № 1)
Молозивный иммуноглобулин (серия № 2)
Молозивный иммуноглобулин
Средний титр сборных серий молозивного
иммуноглобулина
Титры антител к вирусам
ИРТ
ВД
1:32
1:32
1:64
1:32
1:32
1:64
1:42,7
1:128
1:256
1:256
1:42,7
1:128
1:256
1:512
1:213,3
1:298,7
Таблица 2
Ингибирующие свойства протаргола в отношении репродукции вируса диареи на культуре клеток
№№
п/п
Концентрация
протаргола
1
2
3
4
5
6
7
8
400 мг/мл (4 %)
300 мг/мл (3 %)
250 мг/мл (2,5 %)
200 мг/мл (2 %)
150 мг/мл (1,5 %)
100 мг/мл (1 %)
50 мг/мл (0,5 %)
25 мг/мл (0,25 %)
ЦПД вируса диареи с
протарголом
Интенсивность Время наступлеЦПД
ния ЦПД
++++
24 ч
+++
36 ч
±
48 ч
±
48 ч
±
48 ч
ЦПД с раствором протаргола
Интенсивность Время наступления
ЦПД
ЦПД
++++
24 ч
+++
36 ч
±
48 ч
±
48 ч
Продолжение таблицы 2
№№
п/п
Концентрация
протаргола
9
10
11
12
12,5 мг/мл (0,125 %)
6,25 мг/мл (0,0625 %)
3,2 мг/мл (0,032 %)
1,6 мг/мл (0,016 %)
ЦПД вируса диареи с
протарголом
Интенсивность Время наступлеЦПД
ния ЦПД
++
48 ч
++++
24 ч
++++
24 ч
н/и
н/и
Примечание: -, ±, ++, +++, ++++ - интенсивность ЦПД.
3
ЦПД с раствором протаргола
Интенсивность
ЦПД
-
Время наступления ЦПД
-
BY 3865 C1
Таблица 3
Иммуностимулирующие свойства протаргола
Бактерицидная
Сроки
Группы
исследова- активность
животных
сыворотки
ния
крови
Опытная Исходные
19,6±3,22
группа
данные
КонтИсходные
рольная
24,3±6,99
данные
группа
Опытная
На 15-й
58,6±5,19
группа
день
КонтНа 15-й
рольная
23,9±3,22
день
группа
Опытная
На 30-й
11,9±2,23
группа
день
КонтНа 30-й
рольная
11,9±2,08
день
группа
Т-лимфоциты
В-лимфоциты
Фагоцитоз
%
тыс./мм3
%
тыс./мм3
Индекс
Число (%)
41,2±1,5
1,96±0,31
25,8±2,36
1,22±0,08
2,24±0,1
74,4±2,56
42,8±1,29
1,89±0,28
25,2±1,72
1,07±0,07
2,43±0,1
76,8±1,72
45,2±1,29
2,91±0,35
28,2±1,5
1,9±0,16
3,5±0,17
85,6±2,8
42,6±1,29
2,18±0,29
22,8±2,79
1,36±0,19
2,4±0,13
74,4±4,29
50,6±1,29
2,58±0,37
2,46±0,86
1,27±0,22
2,6±0,25
75,2±3,43
46,6±1,72
2,22±0,24
20,8±1,72
0,98±0,08
3,1±0,28
75,2±3,43
Примечание: достоверность P≤0,05 - жирный текст; P≤0,01 - подчеркнутый текст.
Таблица 4
Влияние тиосульфата натрия и протаргола на титры антител к вирусам диареи
№ № п/п
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
Концентрация
протаргола (%)
—
—
—
—
0,25
0,5
0,8
0,5
0,5
0,8
0,8
Концентрация тиосульфата натрия (%)
—
2,5
5,0
10,0
—
—
—
5,0
10,0
5,0
10,0
4
Титр антител к
вирусу диареи
1:256
1:256
1:256
1:256
1:256
1:256
1:256
1:256
1:256
1:256
1:256
BY 3865 C1
Таблица 5
Испытание терапевтической эффективности молозивного арготиоглобулина при различных
соотношениях компонентов
Ингредиенты молозивного
арготиоглобулина
№№
1
Протаргол
Тиосульфат натрия
Молозивный иммуноглобулин на
растворе Рингера-Локка
Протаргол
Тиосульфат натрия
Молозивный иммуноглобулин на
растворе Рингера-Локка
Протаргол
Тиосульфат натрия
Молозивный иммуноглобулин
Протаргол
Тиосульфат натрия
Молозивный иммуноглобулин
Контроль
2
3
4
5
Количество
больных
телят
Количество
выздоровевших телят
до 100 %
5
3/60 %
0,4 %
4,0 %
8
8/100 %
7
7/100 %
6
6
7
2/28,5 %
Содержится в 1 дозе
препарата, %
0,2 %
2,0 %
до 100 %
0,5 %
5,0 %
до 100 %
0,75 %
7,5 %
до 100 %
Таблица 6
Отработка оптимальной терапевтической дозы препарата "Молозивный арготиоглобулина"
на клинически больных телятах
№ № п/п
Дозы препарата (мл)
Количество голов
в группе
Выздоровело голов/%
1
2
3
4
25,0
50,0
100,0
0
5
5
5
5
5/60,0 %
5/100 %
5/100 %
1/20,0 %
Таблица 7
Сравнительная терапевтическая эффективность молозивного арготиоглобулина и
антидиарейного препарата
№№
п/п
1
2
3
4
5
6
7
Молозивный
арготиоглобулин
голов
процент
89
100
Показатели
Всего больных телят в опыте
Выздоровело после первой дачи препарата
Выздоровело после второй дачи препарата
Всего выздоровело после
двукратной дачи препаратов
Выздоровело после многократного применения в сочетании с другими
препаратами
Продолжительность лечения
Терапевтическая эффективность после
двукратного применения
5
Антидиарейный
препарат
голов
процент
114
100
72
80,9
7
6,1
14
15,7
18
15,8
86
96,6
25
21,9
1
1,1
2,2 дня на голову
81
71,1
5,4 дня на голову
96,6
21,9
BY 3865 C1
Источники информации:
1. А. с. СССР 1070726, МПК А 61К 31/00. Препарат для лечения и профилактики диспепсии новорожденных телят «Антидиарейный» / З.П. Наумец, Е.В. Андреев, А.В. Драгомир, П.П. Хмельницкий. Заявл.
05.06.78 2624807/30-15.
2. Patent Specification The Patent office London 1560344 INT CL. A 61К 39/15/ Agent fîr the prophylaxis and
therapy of gastroenteritis./ App. 15618/77 filed 14.04.1977.
3. Иванов B.E. Молозивный иммуноглобулин в профилактике и лечении желудочно-кишечных болезней
новорожденных телят. Автореф. дис. канд. вет. наук. - Витебск, 1986. - С. 17.
4. Красочко П.А. с соавт. Использование протаргола с глобулином для профилактики и терапии смешанных вирусных респираторных инфекций молодняка крупного рогатого скота (рекомендации). - Кишинев.:
Молдагроинформреклама, 1992. - С. 8.
5. Тот А.И., Чекишев В.М. Применение тиосульфата натрия для стимуляции противосальмонеллезного
иммунитета у телят. Новосибирск, ИЭВСиДВ. 1991. - С. 3.
6. Червяков Д.К. с соавт. Лекарственные средства в ветеринарии. - М.: Колос, 1977. - С. 520.
Государственный патентный комитет Республики Беларусь.
220072, г. Минск, проспект Ф. Скорины, 66.
6
Документ
Категория
Без категории
Просмотров
0
Размер файла
149 Кб
Теги
03865, патент
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа