close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

Патент BY 05642

код для вставкиСкачать
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ПАТЕНТУ
РЕСПУБЛИКА БЕЛАРУСЬ
BY (11) 5642
(13) C1
(19)
7
(51) A 61K 35/78
(12)
НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР
ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ
СОБСТВЕННОСТИ
(54)
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СУММЫ ФЛАВОНОИДОВ,
ОБЛАДАЮЩИХ КАРДИОТОНИЧЕСКИМ ДЕЙСТВИЕМ
(21) Номер заявки: a 19980870
(22) 1998.09.23
(46) 2003.12.30
(71) Заявители: Открытое акционерное
общество "Белмедпрепараты"; Кооператив "Биогель" (BY)
(72) Авторы: Захаревский Александр Степанович; Кузнецова Зинаида Павловна;
Царенков Валерий Минович; Стельмах
Виктор Александрович; Прихожий Сергей Степанович; Цыганков Василий
Георгиевич; Бондарук Алла Михайловна; Гаврилов Михаил Владимирович;
Левашкевич Антон Леонидович; Петров Петр Тимофеевич; Дидоренко Антонина Ивановна; Мурашко Алла Дмитриевна (BY)
(73) Патентообладатели: Открытое акционерное общество "Белмедпрепараты"; Кооператив "Биогель" (BY)
(57)
Способ получения суммы флавоноидов, обладающих кардиотоническим действием,
путем многократной экстракции растительного сырья раствором этилового спирта, упаривания экстракта, очистки хлороформом с последующей хроматографией на полиамиде,
отличающийся тем, что в качестве растительного сырья используют листья боярышника
мягковатого, и экстракцию ведут 80 %-ным раствором этилового спирта при 50-60 °С.
BY 5642 C1
(56)
Муравьева Д. А. Фармакогнозия. - М.: Медицина, 1991. - С. 464, 472-474.
BY 950901 A, 1997.
SU 457476, 1975.
Изобретение относится к фармацевтической промышленности - разработке лекарственных средств, используемых для профилактики и лечения заболеваний сердечнососудистой системы, а именно к получению суммарного комплекса флавоноидов из листьев боярышника мягковатого (Crataegus submollis Sarg.).
Известен способ получения флавоноидов, обладающих гипоазотемическим действием
[1]. Способ заключается в экстрагировании 2,5 кг сухой травы золотарника канадского
96 %-ным этиловым спиртом (методом мацерации), упариванием экстракта до полного
удаления спирта. Водный остаток обрабатывают хлороформом и упаривают до объема 0,5 л.
Затем подчищают полиамидом и элюируют 25 %-ным этиловым спиртом. Упаренные элюаты
растворяют в 120 мл 96 %-ного этанола и осаждают серным эфиром.
Выход целевого продукта 7,5 г.
BY 5642 C1
Недостатком этого способа является многостадийность процесса и невысокой выход
целевого продукта.
Прототипом заявляемого способа является способ получения средства, обладающего
гипоазотемической активностью [2], из листьев бегонии краснолистной (Begonia erythrophylla) путем экстрагирования сырья 70 %-ным этиловым спиртом при комнатной температуре, упаривании, очистки и экстрагировании целевого продукта 70-96 %-ным этанолом.
Заявляемый способ отличается от прототипа тем, что в качестве растительного сырья используют листья боярышника мягковатого, а экстрагирование биологически активных
веществ ведут при температуре 50-60 °С 80 %-ным этанолом. Изобретение расширяет
сырьевую базу получения лекарственных средств.
Пример получения.
1 кг воздушно-сухих листьев боярышника мягковатого многократно экстрагируют
80 %-ным этиловым спиртом при 50-60 °С. Количество растворителя в первую экстракцию составляет 17 л, а в последующие - по 12 л. Объединенные этанольные экстракты отгоняют в вакууме при температуре 60 °С до полного удаления этилового спирта.
Этиловый спирт может быть использован многократно с небольшими потерями. Для удаления балластных веществ водный остаток обрабатывают хлороформом с последующей
хроматографией на полиамиде (200 г). Элюирование целевого продукта ведут 80 %-ным
этиловым спиртом. Выход целевого продукта 2-3 % от веса сырья.
Суммарный комплекс флавоноидов из листьев боярышника мягковатого - аморфный
порошок зеленого цвета, хорошо растворим в этаноле любого разбавления и содержит
56 % флавонолов, 24 % катехинов и 4 % фенолкарболовых кислот.
Основными компонентами являются гиперин, авикулярин, кверцитрин, витексин, витексин-4-рамнозид, кратенацин и дезацетилкратенацин.
Боярышник мягковатый (Crataegus submollis Sarg.) - дерево 6-8 м высоты или высокий
многоствольный куст. Листья 4-9 см длины и 3-7 см ширины. Плоды созревают в сентябре. Цветет и плодоносит с 6-8 лет. Боярышник мягковатый может быть использован не
только как источник сырья для приготовления лекарственных средств, но и в качестве новой плодовой культуры. Плоды его приятны на вкус и характеризуются высоким содержанием аскорбиновой кислоты, каротина, флавонолов, катехинов, микроэлементов. Могут
быть использованы в свежем виде и для приготовления компотов, джемов, соков, которые
являются профилактическим средством при сердечно-сосудистых заболеваниях.
Боярышник мягковатый отличается быстрым ростом, большой облиственностью, не
очень требователен к почвенным и климатическим условиям, устойчив к заболеваниям.
Для получения 1 кг препарата необходимо 50 кг воздушно-сухих листьев боярышника
мягковатого. С одного дерева, с более доступных ярусов может быть собрано 10 кг воздушно-сухих листьев. Для приготовления препарата листья могут быть использованы как
в период плодообразования, так и после сбора плодов.
По количественному и качественному составу биологически активных веществ листья
боярышника мягковатого существенно отличаются от цветков и плодов. Предлагаемый
объект позволяет расширить сырьевую базу для получения препарата кардиотонического
действия и заменить цветки (плоды) боярышника листьями.
При внутрибрюшинном введении суммарного препарата полифенолов из листьев боярышника мягковатого (СППЛБМ) в дозе 65 мг/кг (10 % от LD5o) наркотизированным уретаном
(1 г/кг, в/б) белым крысам у них не отмечено изменений величины амплитуды зубца R электрокардиограммы и частоты сердечных сокращений. Предсердно-желудочковая (PQ = 0,04-0,05 с)
и желудочковая (QT = 0,06-0,1 с) проводимость электрической систолы также существенно не
изменялись. Смещения сегмента ST от изолинии и изменений его формы не наблюдалось.
В опытах на изолированном предсердии морских свинок СППЛБМ в конечной концентрации 10"6 г/мл увеличивает амплитуду (в среднем на 10 %), существенно не изменяя
частоту сокращений.
2
BY 5642 C1
Введение питуитрина (2 ЕД/кг, в/в) крысам, наркотизированным уретаном, сопровождается статистически достоверным увеличением амплитуды зубца R (на 57 %) и снижением частоты сердечных сокращений (на 51 %). Сегмент ST у большинства животных
(87,7 %) смещается вверх от изолинии с 0,23 MB до 0,69 MB. У части животных регистрируются единичные экстрасистолы (табл. 2).
Таблица 2
Влияние СППЛБМ на динамику питуитринового коронароспазма у белых крыс
ЭКГ
Исходная
Питутитрин
(2 ЕД/кг, в/в)
0,69 ± 0,06
СППЛБМ
(65 мг/кг, в/б)
0,49 ± 0,05
СППЛБМ + питуитрин
0,84 ± 0,07
Зубец R, MB
0,44 ± 0,06
Частота сокра482 ± 28
245 ± 33*
402 ± 24
302 ± 30
щений/мин
Смещение сег+0,23 ± 0,03
+0,69 ± 0,05*
+0,30 ± 0,06
+0,37 ± 0,06
мента ST, MB
Примечание: * - статистически достоверные различия (Р<0,05). Внутрибрюшинное
введение СППЛБМ в дозе 65 мг/кг наркотизированным крысам за 30 мин до питутитрина
(2ЕД/кг, в/в) сопровождалось увеличением амплитуды зубца R (на 21,1 %) и уменьшением
степени брадикардии, смещения сегмента ST от изолинии и возникновения экстрасистол.
Аконитина гидробромид при внутривенном введении наркотизированным уретаном
самкам белых крыс вызывает стойкую аритмию, проявляющуюся бигименией, политопной экстрасистолией, желудочковой тахикардией и фибрилляцией. Аритмогенная доза
аконитина гидробромида равна 21,7 ± 7,1 мкг/кг. СППЛБМ, вводимый внутривенно в дозе
10-20 мг/кг за 5 мин до введения аконитина гидробромида, увеличивает аритмогенную
дозу на 38-53 %, в дозе 40-60 мг/кг - на 82-118 %, а в дозе 90 мг/кг - в 2,7 раза (58,8 ± 13 мкг/кг).
Известные противоаритмические средства, в частности, ксикаин в дозе 2 % от LD5o
(2,6 мг/кг, в/в) не активен на этой модели аритмии, а хинидина сульфат в дозе 5,5 мг/кг,
внутривенно (3 % от LD5o) повышает аритмическую дозу аконитина лишь на 25 %.
При введении мышам в дозе 3,2 мг/кг, внутрибрюшинно (0,5 % от LDso) СППЛБМ не
нарушал ориентировочную реакцию и эмоциональную реактивность, по сравнению с контролем. Повышение дозы изучаемого препарата до 6,5; 13,0; 26,0 мг/кг (1-4 % от LD5o)
сопровождалось достоверным угнетением ориентировочной реакции: исследовательский
компонент снижался на 47 (13,5 + 2,7), 57 (10,0 ± 3,5) и 66 % (7,3 ± 3,3) соответственно, а
количество вставаний животных на задние лапки снизилось с 7,5 ± 2,1 до 3,0 ± 1,0 лишь
при действии препарата в дозе 26,0 мг/кг.
Внутрибрюшинное введение СППЛБМ в дозах 13,0 и 65,0 мг/кг существенно не изменяло длительность латентного периода засыпания (3,5 ± 0,4 и 4,5 ± 0,4 мин соответственно) и продолжительность бокового положения мышей (77,5 ± 1,1 и 82,1 ± 1,0 мин),
вызванных введением гексенала. У животных контрольной группы сон развивался через
3,7 ± 0,3 мин, а продолжительность его была равна 99,3 ± 15,2 мин.
В отличие от гексенала СППЛБМ потенцирует снотворное действие тиопентал-натрия
и хлоралгидрата.
Внутрибрюшинное введение мышам СППЛБМ в дозе 500 мкг/кг не вызывало гибели
животных, но сопровождалось выраженными признаками интоксикации (нарушение координации движений, общее угнетение, затрудненное дыхание и др.). Состояние животных нормализовалось через 1-1,5 ч. При увеличении дозы препарата до 600-700 мкг/кг
картина отравления развивалась быстрее и была более выражена. У части животных развивались общие судороги и наступала гибель от остановки дыхания и прекращения сердечной деятельности. LD50 препарата при внутрибрюшинном введении равна 656,0; LD16 3
BY 5642 C1
600,0 и LD84 - 699,0 мкг/кг соответственно, что свидетельствует о низкой токсичности
изученного препарата боярышника.
Суммарный препарат полифенолов из листьев боярышника мягковатого в дозе 10 %
от LD50 для мышей, при внутрибрюшинном введении не влияет на показатели электрокардиограммы здоровых бодрствующих и наркотизированных уретаном белых крыс. У
крыс, наркотизированных гексеналом, отмечается депрессия зубца R, смещение вверх
сегмента ST, тахикардия. СППЛБМ оказывает выраженное противоаритмическое и противоишемическое действие, предупреждает развитие питуитринового коронароспазма у
наркотизированных уретаном белых крыс.
На модели изолированного предсердия морской свинки СППЛБМ оказывает положительное инотропное действие в концентрации 10-6-10-5 г/мл.
СППЛБМ достоверно угнетает исследовательский и вертикальный компоненты ориентировочной реакции у белых крыс и превосходит в 3-4 раза по этому показателю препарат кратемон, получаемый из листьев боярышника однопестичного.
У суммарного препарата из листьев боярышника мягковатого выявлен кардиотонический и коронарорасширяющий эффект. По своей противоаритмической активности исследованный препарат превосходит широко применяемые в клинике ксикаин и хинидина
сульфат. Тормозящее влияние на ЦНС у СППЛБМ выражено в большей степени, чем у
кратемона.
Источники информации:
1. А.с. СССР 457476, МПК А 61К 27/14, 1975.
2. Заявка 950901, МПК 6 А 61К 35/78 (прототип).
Национальный центр интеллектуальной собственности.
220034, г. Минск, ул. Козлова, 20.
4
Документ
Категория
Без категории
Просмотров
0
Размер файла
168 Кб
Теги
05642, патент
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа