close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

Патент BY 09035

код для вставкиСкачать
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ПАТЕНТУ
РЕСПУБЛИКА БЕЛАРУСЬ
BY (11) 9035
(13) C1
(19)
(46) 2007.04.30
(12)
7
(51) C 07D 207/16,
A 61K 31/401,
A 61P 3/10
НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР
ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ
СОБСТВЕННОСТИ
(54)
АНТИДИАБЕТИЧЕСКИЕ АГЕНТЫ
(21) Номер заявки: a 20020397
(22) 2000.11.30
(31) 9928330.1 (32) 1999.11.30 (33) GB
(85) 2002.06.30
(86) PCT/GB 00/04572, 2000.11.30
(87) WO 01/40180, 2001.06.07
(43) 2002.12.30
(71) Заявитель: Ферринг БВ (NL)
(72) Автор: Дэвид Майкл ИВЭНС (GB)
(73) Патентообладатель: Ферринг БВ (NL)
(56) WO 98/19998 A2.
WO 97/40832 A1.
WO 95/15309 A1.
(57)
1. Соединение общей формулы 1:
R1
,
N
A
O
(1)
CN
где А обозначает группу формулы 2 или 4:
X
R9
N
,
2
BY 9035 C1 2007.04.30
R
(2)
R8
O
(4)
N
R2
;
R1 представляет собой Н, разветвленный или неразветвленный C1-С6-алкил, C3-С6циклоалкил, (CH2)aNHW1, (CH2)bCOW2, (CH2)cOW3, CH(Me)OW4, (CH2)d-C6H4-W5 или
(CH2)eSW6, где а равно 2-5, b равно 1-4, с равно 1-2, d равно 1-2, e равно 1-3, W1 обозначает COW6, CO2W6 или SO2W6, W2 обозначает ОН, NH2, OW6 или NHW6, W3 обозначает Н
или W6, W4 обозначает Н или W6, W5 обозначает Н, ОН или OMe, W6 обозначает C1-C6алкил, бензил, необязательно замещенный фенил, где необязательные заместители (до
двух групп) выбраны из группы, включающей C1-C3-алкил, C1-C3-алкокси, F и Cl;
R2 представляет собой H или (CH2)nNH-C5H3N-Y, где n равно 2-4, Y - Н, F, Cl, NO2 или
CN, или
R1 и R2 вместе представляют -(СН2)p-, где p равно 3 или 4;
Х представляет собой:
(i) одну или более L-альфа-аминоацильную группу, выбранную из группы, включающей Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gin, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr
и Val;
(ii) группу R3CO, где R3 обозначает Н, разветвленный или неразветвленный C1-С6алкил, C3-С6-циклоалкил или фенил;
BY 9035 C1 2007.04.30
(iii) группу R4COOC(R5)(R6)OCO, где R4 обозначает Н, разветвленный или неразветвленный C1-C6-алкил, C3-С6-циклоалкил, бензил или необязательно замещенный фенил, в
котором заместители (до двух групп) выбраны из группы, включающей C1-C3-алкил, C1C3-алкокси, F и Cl; R5 и R6 каждый независимо обозначает Н или C1-C6-алкил, или R5 и R6
вместе обозначают -(СН2)m-, где m равно 4-6; или
(iv) метоксикарбонильную, этоксикарбонильную или бензилоксикарбонильную группу;
R8 обозначает Н или C1-C3-алкил;
R9 обозначает Н, C1-C6-алкил, фенил или C1-C6-алкокси;
при условии, что указанное соединение формулы 1 не представляет собой N-(Z-Val)-2цианопирролидин;
или его фармацевтически приемлемая соль.
2. Соединение по п. 1, отличающееся тем, что R1 не является Н, R2 обозначает Н.
3. Соединение по п. 2, отличающееся тем, что R1 обозначает C1-C6-алкил.
4. Соединение по п. 1, отличающееся тем, что R1 представляет собой Н, R2 обозначает -(СН2)nNH-C5Н3N-Y.
5. Соединение по п. 4, отличающееся тем, что n равно 2, Y обозначает CN.
6. Соединение по п. 5, отличающееся тем, что заместитель NH находится в положении 2, цианогруппа находится в положении 5 пиридинового кольца.
7. Соединение по п. 1, отличающееся тем, что А обозначает группу общей формулы
2, Х обозначает L-альфа-аминоацильную группу.
8. Соединение по п. 7, отличающееся тем, что L-альфа-аминоацильная группа является лизильной или аргининильной группой.
9. Соединение по п. 8, отличающееся тем, что L-альфа-аминоацильная группа является аргининильной группой.
10. Соединение по п. 7, отличающееся тем, что L-альфа-аминоацильная группа является глицинильной группой.
11. Соединение по п. 1, отличающееся тем, что А обозначает группу общей формулы
2, Х обозначает группу R4COOC(R5)(R6)OCO.
12. Соединение по п. 11, отличающееся тем, что R4 обозначает C1-С6-алкил.
13. Соединение по п. 11, отличающееся тем, что один из R5 и R6 обозначает Н, а другой - метил.
14. Соединение по п. 11, отличающееся тем, что R4 обозначает метил, один из R5 и R6
обозначает Н, а другой - метил.
15. Соединение по п. 1, отличающееся тем, что А обозначает группу общей формулы
2, Х обозначает метоксикарбонил.
16. Соединение по п. 1, отличающееся тем, что А обозначает группу общей формулы 4.
17. Соединение по п. 16, отличающееся тем, что R8 обозначает C1-С3-алкил.
18. Соединение по п. 17, отличающееся тем, что R8 обозначает метил.
19. Соединение по п. 16, отличающееся тем, что R9 обозначает С1-С3-алкил или C1С3-алкокси.
20. Соединение по п. 19, отличающееся тем, что R9 обозначает метил или метоксигруппу.
21. Соединение по п. 1, отличающееся тем, что выбрано из группы, включающей:
(2S)-1-((2'S)-2'-(1''-ацетоксиэтоксикарбониламино)-3,3'-диметилбутаноил)пирролидин2-карбонитрил,
(2S)-1-(N'-(1''-ацетоксиэтоксикарбонил)изолейцил)пирролидин-2-карбонитрил,
(2S)-1-(N'-(метоксикарбонил)изолейцил)пирролидин-2-карбонитрил,
(2S)-1-((N')-(4''-оксопент-2''-ен-2''-ил)изолейцил)пирролидин-2-карбонитрил,
(2S)-1-(глицилизолейцил)пирролидин-2-карбонитрил,
(2S)-1-(аргинилизолейцил)пирролидин-2-карбонитрил,
2
BY 9035 C1 2007.04.30
(2S)-1-((2'S)-2'-(ацетоксиметоксикарбониламино)-3,3'-диметилбутаноил)пирролидин2-карбонитрил,
(2S)-1-((2'S)-2'-(1''-ацетоксиэтоксикарбониламино)-2'-циклогексилацетил)пирролидин2-карбонитрил,
(2S)-1-((2'S)-2'-(1''-ацетоксиэтоксикарбониламино)-4',4'-диметилпентаноил)пирролидин2-карбонитрил,
(2S)-1-(N'-(1''-ацетоксиэтоксикарбонил)-O'-трет-бутилсеринил)пирролидин-2-карбонитрил,
(2S)-1(Nα-(1'-ацетоксиэтоксикарбонил)-Nω-пара-толуолсульфониллизинил)пирролидин-2карбонитрил,
(2S)-1-(N'-(1'-ацетоксиэтоксикарбонил)-N-(2''-(5'''-цианопиридин-2'''-иламино)этил)глицинил)пирролидин-2-карбонитрил,
(2S)-1-(N'-(бензилоксикарбонил)-O'-трет-бутилтреонинил)пирролидин-2-карбонитрил,
(2S)-1-(S'-трет-бутил-N'-(этилоксикарбонил)цистеинил)пирролидин-2-карбонитрил,
(2S)-1(Nω-ацетил-Nα-бензоиллизинил)пирролидин-2-карбонитрил и
(2S)-1-(Nα-(ацетил)-Nω-(бензилоксикарбонил)орнитинил)пирролидин-2-карбонитрил.
22. Соединение по любому из пп. 1-21, отличающееся тем, что представляет собой
оптический изомер.
23. Соединение по любому из пп. 1-22, отличающееся тем, что представляет собой
фармацевтически приемлемую соль.
24. Фармацевтическая композиция для лечения нарушенной толерантности к глюкозе
и диабета типа 2, включающая соединение общей формулы 1 по любому из пп. 1-23 и
фармацевтически приемлемый наполнитель.
25. Применение соединения по любому из пп. 1-23 для получения лекарственного
средства для лечения нарушенной толерантности к глюкозе и диабета типа 2.
Данное изобретение относится к ряду новых соединений, которые полезны для лечения диабета типа 2, нарушенной толерантности к глюкозе и некоторых других состояний.
Считают, что фермент дипептидилпептидаза IV (ЕС.3.4.14.5, здесь обозначена как DP-IV,
еще известна как DPP-IV или DAP-IV) включена в регуляцию активностей некоторых
гормонов. Одним из таких гормонов является глюкагон-подобный пептид 1 (GLP-1), который вовлечен в регуляцию уровня глюкозы в крови после приема пищи и который под
действием DP-IV переводится из своей активной формы GLP-l(5-36) в неактивную GLPl(7-36). В случаях диабета типа 2 и нарушенной толерантности к глюкозе, когда гипергликемия может привести к поражению тканей, было бы полезно усилить эффект эндогенной
GLP-1. В связи с этим ингибиторы DP-IV предложены в качестве лекарственных средствкандидатов для лечения диабета типа 2 и нарушенной толерантности к глюкозе. Например, в Demuth и др. (WO97/40832) раскрыто действие N-изолейцилпирролидина на уровень глюкозы в крови на подходящих моделях животных. Однако данное соединение не
может быть достаточно сильным, чтобы являться жизнеспособным терапевтическим агентом. Более сильные ингибиторы DP-IV раскрыты в Jenkins и др. (WO95/15309) и Villhauer
(WO98/19998), но они имеют склонность к нестабильности и циклизации в растворе. Данная нестабильность приводила бы к сложностям при получении и хранении материала соответствующего качества для терапевтического применения человеком. Таким образом,
остается потребность в агенте, который ингибирует DP-IV in vivo, но достаточно стабилен
для коммерческого производства.
Краткое описание изобретения
Обнаружены ряды производных, которые химически стабильны, но претерпевают метаболическую активацию после введения субъекту, выделяя высокоактивные ингибиторы
DP-IV. В данной области такие производные обычно называют пролекарствами. Соедине-
3
BY 9035 C1 2007.04.30
ния настоящего изобретения полезны для лечения диабета типа 2 и нарушенной толерантности к глюкозе, а также других состояний, при которых усиление действия гормона,
обычно инактивированного посредством DP-IV, приносит терапевтическую пользу.
Соединения данного изобретения представляют собой производные 1-(2'-аминоацил)2-цианопирролидина общей формулы 1:
R1
X
N
A
O
R9
N
O
R2
CN
(2)
(1)
R8
N
R2
,
(4)
где А выбран из групп 2 и 4; X выбран из аминоацильной группы, соответствующей одной из природной аминокислот, ацильной группы R3CO, группы R4COOC(R5)(R6)OCO,
метоксикарбонила, этоксикарбонила и бензилоксикарбонила; R1 выбран из Н, C1-С6 алкильного остатка, (CH2)aNHW1, (CH2)bCOW2, (CH2)cOW3, CH(Me)OW4, (CH2)d-C6H4-W5,
(CH2)eSW6, где а равно 2-5, b равно 1-4, с равно 1-2, d равно 1-2, e равно 1-3, W1 обозначает
COW6, CO2W6 или SO2W6, W2 обозначает ОН, NH2, OW6 или NHW6, W3 обозначает Н или W6,
W4 обозначает Н или W6, W5 обозначает Н, ОН или OMe, и W6 обозначает C1-C6 алкил,
необязательно замещенный фенил, необязательно замещенный гетероарил или бензил, и
R2 выбран из H и (CH2)n-C5H3N-Y, где n равно 2-4, и Y обозначает Н, F, Cl, NO2 или CN,
или R1 и R2 вместе представляют -(СН2)p-, где p равно 3 или 4; R3 выбран из Н, C1С6 алкила и фенила; R4 выбран из Н, C1-C6 алкила, бензила и необязательно замещенного
фенила; R5 и R6, каждый, независимо выбран из Н и C1-C6 алкила или вместе представляют
-(СН2)m-, где m равно 4-6; R7 выбран из пиридила и необязательно замещенного фенила;
R8 выбран из Н и C1-C3 алкила; и R9 выбран из Н, C1-C6 алкила, C1-C6 алкокси и фенила.
Настоящее изобретение относится к новым соединениям, определенным выше, фармацевтическим композициям, в которых, по меньшей мере, один активный агент является
соединением данного изобретения, применению таких композиций для лечения некоторых медицинских состояний и способов лечения, при которых нуждающемуся в лечении
субъекту вводят соединения данного изобретения.
С одной стороны настоящее изобретение относится к ряду новых соединений, которые
являются пролекарствами терапевтически полезных ингибиторов DP-IV. Соединения настоящего изобретения представляют собой производные 1-(2'-аминоацил)-2-цианопирролидина приведенной ниже общей формулы 1:
R1
N
A
O
.
CN
(1)
В данной формуле А является группой, выбранной из 2 и 4:
X
R9
N
R8
O
R2
(2)
N
R2
(4)
4
BY 9035 C1 2007.04.30
Пунктирная связь (прерывистая линия) обозначает ковалентную связь, которая соединяет атом азота группы А с 1.
Группа X является ацильной или оксикарбонильной группой. Подходящими являются
группы:
(i) аминоацильные группы, соответствующие одной из природных аминокислот: аланин (Ala), аргинин (Arg), аспарагин (Asn), аспарагиновая кислота (Asp), цистеин (Cys),
глутамин (Gln), глутаминовая кислота (Glu), глицин (Gly), гистидин (His), изолейцин (Ile),
лейцин (Leu), лизин (Lys), метионин (Met), фенилаланин (Phe), пролин (Pro), серин (Ser),
треонин (Thr), триптофан (Trp), тирозин (Туr) и валин (Val);
(ii) ацильные группы R3CO, где R3 выбран из атома водорода, С1-С6 алкильной группы
и фенильной группы;
(iii) ацилоксиметиленоксикарбонильные группы R4COOC(R5)(R6)OCO, где R4 выбран
из атома водорода, С1-С6 алкильной группы, бензильной группы или фенильной группы,
которая может иметь в качестве заместителя С1-С3 алкильную группу, и R5 и R6, каждый,
независимо является атомом водорода или С1-С6 алкильной группой, или R5 и R6 вместе
представляют полиметиленовую цепь -(СН2)m-, где m равно целому числу 4-6; и
(iv) метоксикарбонил, этоксикарбонил и бензилоксикарбонил.
R1 представляет боковую цепь встречающихся в природе аминокислот или их аналогов.
Более конкретно, R1 выбран из атома водорода, С1-С6 алкильных остатков, (CH2)aNHW1,
(CH2)bCOW2, (CH2)cOW3, CH(Me)OW4, (CH2)d-C6H4-W5 и (CH2)eSW6, где а равно 2-5, b
равно целому числу 1-4, с равно 1 или 2, d равно 1 или 2, е равно целому числу 1-3, W1
обозначает COW6, CO2W6 или SO2W6, W2 обозначает ОН, NH2, OW6 или NHW6, W3 обозначает Н или W6, W4 обозначает Н или W6, W5 обозначает Н, ОН или ОМе, и W6 обозначает
С1-С6 алкил, необязательно замещенный фенил или бензил. Подходящие необязательные
заместители включают С1-С3 алкил и С1-С3 алкоксигруппы, а также атомы фтора и хлора.
Может присутствовать до двух таких заместителей.
R2 является атомом водорода или группой - (СН2)nNH-C5H3N-Y, где n равно целому
числу 2-4, C5H3N является двухвалентным пиридильным фрагментом и Y обозначает атом
водорода, атом галогена, такой как атом фтора или хлора, нитрогруппу, цианогруппу.
Альтернативно, R1 и R2 вместе могут представлять -(СН2)p-, где p равно 3 или 4.
R7 выбран из пиридила и необязательно замещенного фенила. Подходящие необязательные заместители включают С1-С3 алкильные группы, С1-С3 алкоксигруппы, атомы галогенов, нитрогруппу, цианогруппу и карбоксигруппу. Может присутствовать до двух
таких заместителей.
R8 обозначает атом водорода или С1-С3 алкильную группу.
R9 обозначает атом водорода, С1-С6 алкильную группу, С1-С6 алкоксигруппу или фенильную группу.
В описании настоящего описания термин "алкил" включает линейные и разветвленные
алкильные группы, а также циклоалкильные группы. Например, С1-С6 алкил включает метильную, этильную, изопропильную, трет-бутильную, неопентильную и циклогексильную
группы.
Некоторые из соединений настоящего изобретения обладают кислотными или основными свойствами и, таким образом, могут существовать в виде солей. До тех пор, пока
такие соли нетоксичны и фармацевтически приемлемы в других отношениях, они включены в объем данного изобретения. Примеры таких солей включают (но не ограничены
ими) ацетат, гидрохлорид, сульфат, фосфат и бензоат основных соединений и соли натрия,
калия и тетраалкиламмония кислотных соединений.
За исключением случая, когда R1 является Н, соединения общей формулы 1 имеют два
стереогенных центра (асимметрических атомов углерода), обозначенных ниже как С*.
Предпочтительно проиллюстрирована стереохимия по этим двум положениям. Некоторые
варианты R1 и X позволяют ввести дополнительные стереогенные центры, таким образом,
5
BY 9035 C1 2007.04.30
соединения данного изобретения могут существовать как эпимеры, включая диастереомеры. Считается, что все подобные оптические изомеры, включая смеси таких оптических
изомеров, включены в объем данного изобретения.
R1
A
C*
N
O
C*
CN
В предпочтительном варианте настоящее изобретение включает соединение общей
формулы 1, в котором R1 отличен от Н, и R2, если присутствует, обозначает Н. В более
предпочтительном варианте R1 обозначает С1-С6 алкил.
В другом предпочтительном варианте настоящее изобретение включает соединение
общей формулы 1, в котором R1 обозначает Н, и А выбран из групп, соответствующих
общим формулам 2 и 4, где R2 обозначает - (СН2)nNH-C5H3N-Y. В более предпочтительном варианте n равно 2, и Y обозначает CN. В наиболее предпочтительном варианте группа NH находится в положении 2, и группа CN находится в положении 5 пиридинового
кольца.
В другом предпочтительном варианте настоящее изобретение включает соединение
общей формулы 1, в котором А обозначает группу общей формулы 2, и X обозначает аминоацильную группу. В одном более предпочтительном варианте X обозначает аминоацильную группу, соответствующую основной аминокислоте, такой как лизин или
аргинин, наиболее предпочтительно аргинин. В другом более предпочтительном варианте
X обозначает аминоацильную группу, соответствующую глицину.
Еще в одном предпочтительном варианте настоящее изобретение включает соединение общей формулы 1, в котором А обозначает группу общей формулы 2, и X обозначает
группу R4COOC(R5)(R6)OCO. В одном более предпочтительном варианте R4 обозначает
С1-С6 алкил. В другом более предпочтительном варианте один из R5 и R6 обозначает Н, а
другой - метил. Наиболее предпочтительно, когда R4 и один из R5 и R6 являются метилами, и другой из R5 и R6 является Н.
В другом предпочтительном варианте настоящее изобретение включает соединение
общей формулы 1, в котором А обозначает группу общей формулы 2, и X обозначает метоксикарбонильную группу.
В другом предпочтительном варианте настоящее изобретение включает соединение
общей формулы 1, в котором А обозначает группу общей формулы 4. В более предпочтительном варианте R8 обозначает С1-С3 алкил и наиболее предпочтительно метил. В другом
более предпочтительном варианте R9 обозначает С1-С3 алкил или С1-С3 алкокси и наиболее предпочтительно метил или метокси.
Соединения, которые включают отличительные признаки более чем одного из указанных предпочтительных вариантов, являются особо предпочтительными. Наиболее предпочтительным вариантом настоящего изобретения является соединение, выбранное из:
(2S)-1-((2'S)-2'-(1''-ацетоксиэтоксикарбониламино)-3,3'-диметилбутаноил)пирролидин2-карбонитрил,
(2S)-1-(N'-(1''-ацетоксиэтоксикарбонил)изолейцил)пирролидин-2-карбонитрил;
(2S)-1-(N'-(метоксикарбонил)изолейцил)пирролидин-2-карбонитрил;
(2S)-1-((N')-(4''-оксопент-2''-ен-2''-ил)изолейцил)пирролидин-2-карбонитрил;
(2S)-1-(глицилизолейцил)пирролидин-2-карбонитрил;
(2S)-1-(аргинилизолейцил)пирролидин-2-карбонитрил;
(2S)-1-((2'S)-2'-(ацетоксиметоксикарбониламино)-3,3'-диметилбутаноил)пирролидин2-карбонитрил;
(2S)-1-((2'S)-2'-(1''-ацетоксиэтоксикарбониламино)-2'-циклогексилацетил)пирролидин2-карбонитрил;
6
BY 9035 C1 2007.04.30
(2S)-1-((2'S)-2'-(1''-ацетоксиэтоксикарбониламино)-4',4'-диметилпентаноил)пирролидин-2карбонитрил;
(2S)-1-(N'-(1''-ацетоксиэтоксикарбонил)-O'-трет-бутилсеринил)пирролидин-2-карбонитрил;
(2S)-1-(Nα-(1'-ацетоксиэтоксикарбонил)-Nω-пара-толуолсульфониллизинил)пирролидин2-карбонитрил;
(2S)-1-(N'-(1'-ацетоксиэтоксикарбонил)-N-(2''-(5'''-цианопиридин-2'''-иламино)этил)глицинил)пирролидин-2-карбонитрил;
(2S)-1-(N'-(бензилоксикарбонил)-O'-трет-бутилтреонинил)пирролидин-2-карбонитрил;
(2S)-1-(S'-трет-бутил-N'-(этилоксикарбонил)цистеинил)пирролидин-2-карбонитрил;
(2S)-1-(Nω-ацетил-Nα-бензоиллизинил)пирролидин-2-карбонитрил и
(2S)-1-(Nα-(ацетил)-Nω-(бензилоксикарбонил)орнитинил)пирролидин-2-карбонитрил.
Соединения настоящего изобретения можно получить по стандартным методикам, которые хорошо известны специалистам в области органической химии. Во многих случаях
подходящим исходным веществом является амин общей формулы 5, в котором R1 и R2
имеют такие же значения, как определено ранее.
R1
R2
N
N
H
O
(5)
CN
Синтез таких соединений описан, например, в Jenkins и др. (WO95/15309), Villhauer
(WO98/19998), Ashworth и др. (Bioorg. Med. Chem. Lett., 1996, 6(10), 1163-66) и Li и др.
(Arch. Biochem. Biophys., 1995, 323(1), 148-54). Соединения, не описанные подробно в
данных публикациях, можно получить путем обычной модификации приведенных в них
способов. Стадии, включенные в получение соединений данного изобретения из соединений общей формулы 5, зависят от природы группы А.
X
(i) A=
N
R2
X = аминоацильная группа.
Схема 1
R1
Chn*
PG
OH
N
H
R2
+
O
N
N
H
O
(6)
PG
H
N
(5)
R1
O
Chn*
CN
N
H
R1
O
N
O
H2N
CN
Chn
N
H
N
O
(1A)
(7)
7
CN
BY 9035 C1 2007.04.30
Схема 1 иллюстрирует получение данных соединений в две стадии. Chn обозначает
боковую цепь аминокислоты. В зависимости от используемой аминокислоты Chn может
быть Н (для глицина), СН3 (аланин), (СН3)2СН (валин), (СН3)2СНСН2 (лейцин), СН3СН2СН
(СН3) (изолейцин), С6Н5СН2 (фенилаланин), НОС6Н4СН2 (тирозин), C8H6NCH2 (триптофан),
НООССН2 (аспарагиновая кислота), НООССН2СН2 (глутаминовая кислота), H2NOCCH2
(аспарагин), H2NOCCH2CH2 (глутамин), НОСН2 (серин), СН3СН(ОН) (треонин), HSCH2
(цистеин), CH3SCH2CH2 (метионин), C3H3N2CH2 (гистидин), H2N(CH2)4 (лизин) и H2NC
(:NH)(CH2)3 (аргинин). Как будет ясно для специалистов в практической химии пептидов,
некоторые из указанных боковых цепей содержат функциональные группы, которые реакционноспособны в условиях, необходимых для осуществления конденсации двух фрагментов. Данные функциональные группы должны быть защищены подходящими маскирующими группами. Такие группы описаны, например, в работе "Protective Groups in Organic
Synthesis", T.W. Greene, Wiley-Interscience, 1981. Chn* обозначает такие же боковые цепи,
но с необходимыми защитными группами.
Также PG обозначает защитную группу для амино-функции.
1-(2'-Аминоацил)-2-цианопирролидин 5 можно конденсировать с защищенной подходящим образом аминокислотой 6 с получением промежуточного продукта 7, используя
разнообразные условия, которые хорошо известны в области химии пептидов. Как правило, два компонента растворяют в подходящем растворителе, который обычно является апротонным растворителем, таким как дихлорметан, диметилформамид или их смесь, и
раствор охлаждают до 0 °С или ниже. К раствору можно добавить один или два эквивалента аминного основания, такого как диизопропилэтиламин или диметиламинопиридин.
Затем добавляют конденсирующий агент и смесь перемешивают до расходования исходных веществ, как показывает, например, аналитическая тонкослойная хроматография. Если реакция протекает медленно, то для ускорения процесса может быть целесообразно
дать смеси нагреться до комнатной температуры. Подходящие конденсирующие агенты
включают DCC (дициклогексилкарбодиимид), ВОР ((гексафторфосфат бензотриазол-1илокси)трис(диметиламино)фосфония), РуВОР® ((гексафторфосфат бензотриазол-1-илокси)трипирролидинофосфония), РуВгоР® (гексафторфосфат бромтрипирролидинофосфония) и HBTU (гексафторфосфат О-(бензотриазол-1-ил)-N,N,N',N'-тетраметилурония).
Удаление защиты у промежуточного продукта 7 дает целевое соединение 1А (а именно, соединение общей формулы 1 с группой А общей формулы 2 и аминокислотным остатком X).
Вместо 6 можно использовать защищенный подходящим образом пролин, получая
аналогичное соединение, где X является пролиловым остатком. Все защищенные аминокислоты являются коммерческими продуктами.
X
N
(ii) A=
;
X=R3CO.
R2
Схема 2
O
R3
R1
R2
N
H
+
N
O
(5)
или
O
CN
R3
R3
R3
8
N
N
R2
O
O
R1
O
Cl
O
(1B)
CN
BY 9035 C1 2007.04.30
Схема 2 иллюстрирует получение данных соединений. Исходное вещество 5 обрабатывают ацилхлоридом или ангидридом в апротонном растворителе и в присутствии аминного основания, такого как описанные выше, получая продукт 1В. Если R3 = H,
невозможно использовать ацилхлорид или ангидрид. В данном случае используют смешанный ангидрид. Реагент удобно получать из муравьиной кислоты и уксусного ангидрида.
X
N
(iii) A=
;
X=R4COOC(R5)(R6)OCO.
R2
Схема 3
R1
R2
N
N
H
O
CN
O
(5)
R4
+
O
R4
NO2
R5 R6 O
O
O
R1
R5 R6 O
O
O
N
N
R2
O
CN
(1C)
O
(8)
Схема 3 иллюстрирует получение данных соединений.
Исходное вещество 5 обрабатывают пара-нитрофенилкарбонатом 8 в апротонном растворителе и в присутствии аминного основания, такого как описанные ранее, получая
продукт 1C. Карбонат получают согласно способу, описанному в Alexander и др., J. Med.
Chem. 31, 318, 1988.
X
(iv) A=
N
R
;
2
X = метоксикарбонил, этоксикарбонил, бензилоксикарбонил.
Схема 4
R1
O
H3C
O
R2
MeOCOCl
R
R
EtOCOCl
2
N
H
O
H3C
N
O
(5)
O
CN
R1
O
1
N
N
N
N
R2
O
CN
CN
BnOCOCl
или
BnOCOONSu
R1
O
O
R2
9
N
N
O
CN
BY 9035 C1 2007.04.30
Схема 4 иллюстрирует получение данных соединений. Исходное вещество 5 обрабатывают хлорформиатом в апротонном растворителе и в присутствии аминного основания,
такого как описанные ранее, получая продукт 1D. Так как бензилхлорформиат (BnOCOCl)
не очень стабилен, его удобно заменить на бензил 1-сукцинимидилкарбонат (BnOCONSu).
Данный и все хлорформиаты являются коммерческими продуктами.
H
(v) A=
R7
N
Схема 5
R1
N
H2N
O
R7
+
R1
H
H
R7
O
N
N
O
CN
(5A)
CN
(1E)
(9)
Схема 5 иллюстрирует получение данных соединений. Исходное вещество 5A (а именно, соединение общей формулы 5 с R2 = H) подвергают взаимодействию с альдегидом 9 в
присутствии кислотного катализатора, такого как, например, паратолуолсульфоновая кислота. Взаимодействие проводят в растворителе, таком как циклогексан или толуол, при
повышенной температуре, такой как температура кипения растворителя. Постоянно удаляют воду либо азеотропной перегонкой, либо при помощи осушителя, такого как активированные молекулярные сита.
Альдегид 9 является коммерческим продуктом.
R9
R8
(vi) A=
N
O
R2
Схема 6
R1
R9
2
R
N
H
N
+
R8
O
O
(5)
R9
O
CN
O
R8
R1
R2
(10)
N
N
O
CN
(1F)
Схема 6 иллюстрирует получение данных соединений. Исходное вещество 5 подвергают взаимодействию с 1,3-дикарбонильным соединением 10 в апротонном растворителе
и в присутствии аминного основания, как описано ранее, при комнатной температуре.
Дикарбонильные соединения 10 являются коммерческими продуктами или их можно
получить хорошо известными способами.
Конечно, возможны другие способы синтеза. Обычно они отличаются от описанного
выше порядком проведения стадий. На схеме 7 показаны два примера.
10
BY 9035 C1 2007.04.30
Схема 7
N
A
CONH2
R1
R1
(12)
HN
O
OH
A
CONH2
(13)
O
(11)
HN
(14)
CN
R1
N
A
O
CN
Промежуточный продукт 11 получают описанными выше способами. Его можно конденсировать с пролинамидом 12 способами, описанными на схеме 1, получая промежуточный продукт 13. Его можно дегидратировать обработкой трифторуксусным ангидридом, получая целевое соединение. Альтернативно, промежуточный продукт 11 можно
конденсировать с пролиннитрилом 14, непосредственно получая целевое соединение.
Соединения общей формулы 1 (соединения настоящего изобретения) претерпевают
метаболизм в организме, давая соединения общей формулы 5. Данные метаболиты являются ингибиторами DP-IV.
Схема 8
R1
R1
in vivo
N
A
O
R2
N
H
CN
N
O
CN
(5)
(1)
Как обсуждалось ранее, считают, что ингибиторы DP-IV полезны для лечения некоторых медицинских состояний. Следовательно, соединения настоящего изобретения полезны для лечения таких состояний. В частности, соединения настоящего изобретения
полезны для лечения нарушенной толерантности к глюкозе или диабета типа 2. Они также
могут быть полезны при лечении репродуктивных нарушений, таких как бесплодие вследствие синдрома поликистоза яичников. Еще одним применением является лечение недостаточности гормона роста, приводящей к малому росту. Объем данного изобретения
охватывает также другие медицинские состояния.
Для применения при лечении данных нарушений соединения настоящего изобретения
обычно включают в состав фармацевтической композиции и готовят подходящим образом
для выбранного способа введения. Такие композиции являются вторым аспектом настоящего изобретения. Фармацевтическая композиция может включать другие фармацевтически приемлемые наполнители, в общем известные в данной области, такие как агенты,
придающие объем, разбавители, диспергирующие агенты, консерванты, красители, вкусовые агенты и подобные. Выбор наполнителей зависит от способов приготовления и введения композиции. Данную композицию можно вводить обычными известными в данной
области способами. Например, композицию можно приготовить в виде таблетки, капсулы,
сиропа или порошка для перорального применения, в виде пастилки или облатки для
подъязычного или трансбуккального введения, суппозитория для ректального или ваги-
11
BY 9035 C1 2007.04.30
нального применения, раствора или порошка для назального введения, крема или лосьона
для местного применения, пластыря для трансдермального применения или в виде раствора
или суспензии для подкожной, внутримышечной или внутривенной инъекции. Вводимые
инъекцией формы могут включать капсулированные и другие известные в данной области
формы с регулируемым высвобождением активного вещества, которые подходят для введения депо. Предпочтительной композицией является таблетка для перорального приема.
С третьей стороны, данное изобретение включает способ лечения непереносимости
глюкозы или диабета типа 2, при котором пациенту, нуждающемуся в таком лечении, вводят терапевтически эффективное количество описанного выше соединения. Схему приема
дозы обычно определяет лечащий врач, принимая во внимание конкретные особенности
пациента. Обычно доза составляет от 1 до 500 мг один раз в день или до четырех раз в день.
Предыдущее описание дополнительно проиллюстрировано ниже рядом примеров.
Они предназначены для иллюстрации осуществления данного изобретения, но никоим образом не ограничивают описанный здесь объем изобретения.
Примеры
Растворители и реагенты обычно используют в полученном виде без дополнительной
очистки. Структуры всех промежуточных продуктов подтверждены методом 1Н ЯМР. Конечные продукты, кроме того, охарактеризованы методом масс-спектрометрии и/или элементного анализа.
Пример 1. (2S)-1-((2'S)-2'-(1"-ацетоксиэтоксикарбониламино)-3,3'-диметилбутаноил)пирролидин-2-карбонитрил
O
O
O
O
N
H
N
O
CN
Раствор (2S)-1-((2'S)-2'-амино-3,3'-диметилбутаноил)пирролидин-2-карбонитрил гидрохлорида (180 мг, 0,73 ммоль; получен согласно Jenkins и др., WO95/15309), α-ацетоксиэтил пара-нитрофенилкарбоната (220 мг, 0,82 ммоль; получен согласно Alexander и др.,
J. Med. Chem. 31, 318, 1988) и триэтиламина (90 мг, 0,90 ммоль) в дихлорметане (25 мл)
перемешивают при комнатной температуре в течение 18 часов. После этого растворитель
удаляют в вакууме и переносят остаток в этилацетат (70 мл). Данный раствор промывают
0,3 М KHSO4, насыщенным NaHCO3, водой и насыщенным раствором соли, сушат
(Na2SO4) и выпаривают. Остаток очищают способом флэш-хроматографии (элюент:
EtOAc:петр.эфир 60-80 °С, 3:7), получая белое твердое вещество, идентифицированное
как указанное в заголовке соединение (170 мг, 0,50 ммоль, 68 %).
МС: ионизация при электрораспылении {М + Н}+= 340,2
1
Н ЯМР (CDCl3) : δ 1,02, 1,03 (9Н, 2хс), 1,42-1,46 (3Н, м), 2,03, 2,05 (3Н, 2хс), 2,15-2,25
(4Н, м), 3,69-3,76 (2Н, м), 4,23-4,28 (1Н, м), 4,77-4,79 (1Н, м), 5,43 (1Н, д, J = 9,5 Гц), 6,736,77 (1Н, м) ч/млн.
Пример 2. (2S)-1-(N'-(1"-Ацетоксиэтоксикарбонил)изолейцил)пирролидин-2-карбонитрил
O
O
O
O
N
H
12
N
O
CN
BY 9035 C1 2007.04.30
Раствор (2S)-1-(изолейцил)пирролидин-2-карбонитрил гидрохлорида (500 мг, 2,04 ммоль;
получен согласно Jenkins и др., WO95/15309), α-ацетоксиэтил пара-нитрофенилкарбоната
(610 мг, 2,27 ммоль; получен согласно Alexander и др., J. Med. Chem. 31, 318, 1988) и триэтиламина (250 мг, 2,50 ммоль) в дихлорметане (40 мл) перемешивают при комнатной
температуре в течение 18 часов. После этого растворитель удаляют в вакууме и переносят
остаток в этилацетат (70 мл). Данный раствор промывают 0,3 М KHSO4, насыщенным
NaHCO3, водой и насыщенным раствором соли, сушат (Na2SO4) и выпаривают. Остаток
очищают способом флэш-хроматографии (элюент: EtOAc:петр.эфир 60-80 °С, 3:7), получая
бесцветное масло, идентифицированное как указанное в заголовке соединение (480 мг,
1,48 ммоль, 70 %).
МС: ионизация при электрораспылении {М + Н}+= 340,0
1
Н ЯМР (CDCl3) : δ 0,86-0,89 (6Н, м), 0,92-0,97 (1Н, м), 1,41-1,45 (3Н, м), 150-1,80 (2Н,
м), 2,02 (3Н, д, J = 5,2 Гц), 2,14-2,27 (4Н, м), 3,60-3,75 (2Н, м), 4,23-4,26 (1Н, т, J = 7,6 Гц),
4,77 (1Н, д, J = 2,3 Гц), 5,30-5,50 (1Н, м), 6,73-6,77 (1Н, м) ч/млн.
Пример 3. (2S)-1-(N'-(Метоксикарбонил)изолейцил)пирролидин-2-карбонитрил
O
O
N
N
H
O
CN
Раствор (2S)-1-(изолейцил)пирролидин-2-карбонитрил гидрохлорида (300 мг, 1,22 ммоль;
получен согласно Jenkins и др., WO95/15309), метилхлорформиата (125 мг, 1,3 ммоль) и
триэтиламина (150 мг, 1,50 ммоль) в дихлорметане (40 мл) перемешивают при комнатной
температуре в течение 18 часов. После этого растворитель удаляют в вакууме и переносят
остаток в этилацетат (70 мл). Данный раствор промывают 0,3 М KHSO4, насыщенным
NaHCO3, водой и насыщенным раствором соли, сушат (Na2SO4) и выпаривают. Остаток
очищают способом флэш-хроматографии (элюент: EtOAc:петр.эфир 60-80 °С, 4:6), получая
бесцветное масло, идентифицированное как указанное в заголовке соединение (310 мг,
1,16 ммоль, 95 %).
МС: ионизация при электрораспылении {М + Н}+= 268,2
1
Н ЯМР (CDCl3) : δ 0,85-0,95 (6Н, м), 1,10-1,25 (1Н, м), 1,54-1,77 (2Н, м), 2,11-2,26 (4Н,
м), 3,62 (3Н, с), 3,66-3,79 (2Н, м), 4,21 (1Н, т, J = 9,2 Гц), 4,74-4,78 (1Н, м), 5,30 (1Н, д,
J = 9,1 Гц) ч/млн.
Пример 4. (2S)-1-((N')-(4"-Оксопент-2"-ен-2"-ил)изолейцил)пирролидин-2-карбонитрил
O
N
H
N
O
CN
Раствор (2S)-1-(изолейцил)пирролидин-2-карбонитрил гидрохлорида (150 мг, 0,61 ммоль;
получен согласно Jenkins и др., WO95/15309), 2,4-пентандиона (68 мг, 0,68 ммоль) и триэтиламина (75 мг, 0,75 ммоль) в дихлорметане (25 мл) перемешивают при комнатной температуре в течение 18 часов. После этого растворитель удаляют в вакууме и переносят
остаток в этилацетат (70 мл). Данный раствор промывают 0,3 М KHSO4, насыщенным
NaHCO3, водой и насыщенным раствором соли, сушат (Na2SO4) и выпаривают. Остаток
очищают способом флэш-хроматографии (элюент: EtOAc:петр.эфир 60-80 °С, 7:3), полу-
13
BY 9035 C1 2007.04.30
чая бесцветное масло, идентифицированное как указанное в заголовке соединение (85 мг,
0,29 ммоль, 47 %).
МС: ионизация при электрораспылении {М + Н}+ = 292,3
1
H ЯМР (CDCl3) : δ 0,87-0,98 (6Н, м), 1,19-1,25 (1Н, м), 1,61-1,69 (2Н, м), 1,84 (3Н, с),
1,98 (3Н, с), 2,15-2,25 (4Н, м), 3,49-3,54 (1Н, м), 3,62-3,69 (1Н, м), 3,95-3,98 (1Н, м), 4,754,79 (1Н, м), 4,98 (1Н, с), 11,09 (1Н, д, J = 8,1 Гц) ч/млн.
Пример 5. (2S)-1-(Глицилизолейцил)пирролидин-2-карбонитрил
O
H2N
N
N
H
O
CN
(a) (2S)-1-(Изолейцил)пирролидин-2-карбонитрил
К раствору полугидрата Вос-изолейцина (0,96 г, 4 ммоль) и РуВОР® (2,34 г, 4,5 ммоль)
в дихлорметане (25 мл) добавляют DIPEA (1,74 мл, 10 ммоль). К данному раствору добавляют твердый (S)-пирролидин-2-карбонитрил гидрохлорид (0,60 г, 4,5 ммоль), а затем еще
порцию DIPEA (697 мкл, 4 ммоль). Реакционную смесь перемешивают в течение 2 часов.
Растворитель удаляют на роторном испарителе и переносят остаток в этилацетат. Полученный раствор промывают 0,3 М бисульфатом натрия (2х), насыщенным бикарбонатом
натрия (2х), водой и насыщенным хлоридом натрия. Органическую фазу сушат безводным
сульфатом натрия и удаляют растворитель на роторном испарителе. Остаток растворяют в
смеси TFA (95 %) и воды (5 %). Через 1 час TFA и воду удаляют при пониженном давлении, а остаток растирают с эфиром, в результате чего образуется осадок. Данный осадок
собирают и сушат в вакууме, получая трифторацетатную соль указанного в заголовке
продукта в виде белого твердого вещества; выход 0,58 г (1,8 ммоль, 45 %).
(b) (2S)-1-(Глицилизолейцил)пирролидин-2-карбонитрил
К раствору Воc-глицина (0,21 г, 1,2 ммоль) и РуВОР® (0,62 г, 1,2 ммоль) в дихлорметане (3 мл) добавляют DIPEA (522 мкл, 3 ммоль). К данному раствору добавляют продукт
примера 5а (0,28 г, 0,9 ммоль), а затем еще порцию DIPEA (157 мкл, 0,9 ммоль). Реакционную смесь перемешивают в течение ночи. Растворитель удаляют на роторном испарителе и переносят остаток в этилацетат. Полученный раствор промывают 0,3 М
бисульфатом натрия (2х), насыщенным бикарбонатом натрия (2х), водой и насыщенным
хлоридом натрия. Органическую фазу сушат безводным сульфатом натрия и удаляют растворитель на роторном испарителе. Остаток растворяют в смеси TFA (95 %) и воды (5 %)
и перемешивают смесь в течение ночи. Большую часть TFA и воды удаляют при пониженном давлении. Остаток очищают ВЭЖХ с обращенной фазой, получая трифторацетатную соль конечного продукта в виде белого порошка; выход 171 мг (50 %).
Пример 6. (2S)-1-(Аргинилизолейцил)пирролидин-2-карбонитрил
NH
H2N
N
H
O
NH2
14
N
H
N
O
CN
BY 9035 C1 2007.04.30
К раствору Boc-Arg (Mtr)-OH (0,58 г, 1,2 ммоль) и РуВОР® (0,62 г, 1,2 ммоль) в дихлорметане (3 мл) добавляют DIPEA (522 мкл, 3 ммоль). К данному раствору добавляют
продукт примера 5а (0,28 г, 0,9 ммоль), а затем еще порцию DIPEA (157 мкл, 0,9 ммоль).
Реакционную смесь перемешивают в течение ночи. Растворитель удаляют на роторном
испарителе и переносят остаток в этилацетат. Полученный раствор промывают 0,3 М бисульфатом натрия (2х), насыщенным бикарбонатом натрия (2х), водой и насыщенным
хлоридом натрия. Органическую фазу сушат безводным сульфатом натрия и удаляют растворитель на роторном испарителе. Остаток растворяют в смеси TFA (95 %) и воды (5 %)
и смесь перемешивают в течение ночи. Большую часть TFA и воды удаляют при пониженном давлении, а остаток растирают с эфиром. Эфирный слой декантируют, а остаток
очищают способом ВЭЖХ с обращенной фазой, получая трифторацетатную соль конечного продукта в виде белого порошка; выход 83 мг (19 %).
Пример 7. (2S)-1-((2'S)-2'-(Ацетоксиметоксикарбониламино)-3,3'-диметилбутаноил)пирролидин-2-карбонитрил
O
O
O
O
N
H
N
O
CN
Раствор (2S)-1-((2'S)-2'-амино-3,3'-диметилбутаноил)пирролидин-2-карбонитрил гидрохлорида (150 мг, 0,61 ммоль; получен согласно Jenkins и др., WO95/15309), ацетоксиметил
пара-нитрофенилкарбоната (168 мг, 0,66 ммоль; получен согласно Alexander и др., J. Med.
Chem. 31, 318, 1988) и триэтиламина (70 мг, 0,70 ммоль) в дихлорметане (25 мл) перемешивают при комнатной температуре в течение 18 часов. После этого растворитель удаляют в вакууме и переносят остаток в этилацетат (70 мл). Данный раствор промывают 0,3 М
KHSO4, насыщенным NaHCO3, водой и насыщенным раствором соли, сушат (Na2SO4) и
выпаривают. Остаток очищают способом флэш-хроматографии (элюент: EtOAc:петр.эфир
60-80 °С, 4:6), получая белое твердое вещество, идентифицированное как указанное в заголовке соединение (188 мг, 0,58 ммоль, 95 %).
МС: ионизация при электрораспылении {М + Н}+ = 326,1
1
H ЯМР (CDCl3) : δ 1,03 (9Н, с), 2,09 (3Н, с), 2,16-2,24 (4Н, м), 3,72-3,77 (2Н, м), 4,25
(1Н, д, J = 9,6 Гц), 4,77-4,80 (1Н, м), 5,68 (1Н, d), 5,68 (2Н, с) ч/млн.
Пример 8. (2S)-1-((2'S)-2'-(1"-Ацетоксиэтоксикарбониламино)-2'-циклогексилацетил)пирролидин-2-карбонитрил
O
O
O
O
N
H
N
O
CN
Раствор (2S)-1-((2'S)-2'-амино-2'-циклогексилацетил)пирролидин-2-карбонитрил трифторацетата (100 мг, 0,28 ммоль; получен согласно Jenkins и др., WO95/15309), α-ацетоксиэтил пара-нитрофенилкарбоната (76 мг, 0,29 ммоль; получен согласно Alexander и др.,
J. Med. Chem. 31, 318, 1988) и триэтиламина (35 мг, 0,35 ммоль) в дихлорметане (25 мл)
перемешивают при комнатной температуре в течение 18 часов. После этого растворитель
удаляют в вакууме и переносят остаток в этилацетат (70 мл). Данный раствор промывают
15
BY 9035 C1 2007.04.30
0,3 М KHSO4, насыщенным NaHCO3, водой и насыщенным раствором соли, сушат (Na2SO4) и
выпаривают. Остаток очищают способом флэш-хроматографии (элюент: EtOAc:петр.эфир
60-80 °С, 4:6), получая белое твердое вещество, идентифицированное как указанное в заголовке соединение (43 мг, 0,12 ммоль, 41 %).
МС: ионизация при электрораспылении {М + Н}+ = 366,2
1
Н ЯМР (CDCl3) : δ 0,97-1,21 (4Н, м), 1,40-1,48 (3Н, м), 1,67-1,77 (7Н, м), 2,02 (3Н, д,
J = 7,8 Гц), 2,11-2,26 (4Н, м), 3,65-3,73 (2H, м), 4,16-4,22 (1Н, м), 4,76 (1Н, д, J = 4,2 Гц),
5,36-5,41 (1H, м), 6,73-6,77 (1H, м) ч/млн.
Пример 9. (2S)-1-((2'S)-2'-(1"-Ацетоксиэтоксикарбониламино)-4',4'-диметилпентаноил)пирролидин-2-карбонитрил
O
O
O
O
N
H
N
O
CN
Раствор (2S)-1-((2'S)-2'-амино-4',4'-диметилпентаноил)пирролидин-2-карбонитрил трифторацетата (100 мг, 0,30 ммоль; получен согласно Jenkins и др., WO95/15309), α-ацетоксиэтил пара-нитрофенилкарбоната (87 мг, 0,33 ммоль; получен согласно Alexander и др.,
J. Med. Chem. 31, 318, 1988) и триэтиламина (40 мг, 0,40 ммоль) в дихлорметане (25 мл)
перемешивают при комнатной температуре в течение 18 часов. После этого растворитель
удаляют в вакууме и переносят остаток в этилацетат (70 мл). Данный раствор промывают
0,3 М KHSO4, насыщенным NaHCO3, водой и насыщенным раствором соли, сушат (Na2SO4) и
выпаривают. Остаток очищают способом флэш-хроматографии (элюент: EtOAc:петр.эфир
60-80 °С, 4:6), получая белое твердое вещество, идентифицированное как указанное в заголовке соединение (32 мг, 0,09 ммоль, 31 %).
МС: ионизация при электрораспылении {М + Н}+ = 354,2
1
Н ЯМР (CDCl3) : δ 0,97, 0,98 (9Н, 2хс), 1,41-1,43 (3Н, м), 1,44-1,62 (2Н, м), 2,03 (3Н, д,
J = 2,3 Гц), 2,16-2,21 (4Н, м), 3,61-3,63 (1Н, м), 3,74-3,78 (1Н, м), 4,45-4,52 (1Н, м), 4,754,77 (1Н, м), 5,24-5,29 (1Н, м), 6,73-6,78 (1Н, м) ч/млн.
Пример 10. (2S)-1-(N'-(1"-Ацетоксиэтоксикарбонил)-О'-трет-бутилсеринил)пирролидин-2-карбонитрил
O
O
O
O
O
N
H
N
O
CN
Раствор (2S)-1-(О'-трет-бутилсеринил)пирролидин-2-карбонитрил гидрохлорида (30 мг,
0,11 ммоль; получен согласно Jenkins и др., WO 95/15309), α-ацетоксиэтил пара-нитрофенилкарбоната (32 мг, 0,12 ммоль; получен согласно Alexander и др., J. Med. Chem. 31,
318, 1988) и триэтиламина (20 мг, 0,20 ммоль) в дихлорметане (25 мл) перемешивают при
комнатной температуре в течение 18 часов. После этого растворитель удаляют в вакууме
и переносят остаток в этилацетат (70 мл). Данный раствор промывают 0,3 М KHSO4, насыщенным NaHCO3, водой и насыщенным раствором соли, сушат (Na2SO4) и выпаривают.
Остаток очищают способом флэш-хроматографии (элюент: EtOAc:петр.эфир 60-80 °С,
16
BY 9035 C1 2007.04.30
4:6), получая белое твердое вещество, идентифицированное как указанное в заголовке соединение (14 мг, 0,038 ммоль, 35 %).
МС: ионизация при электрораспылении {М + Н}+ = 370,1
1
Н ЯМР (CDCl3) : δ 1,11-1,15 (9Н, м), 1,41-1,45 (3Н, м), 2,04 (3Н, д, J = 4,9 Гц), 2,102,15 (2Н, м), 3,43-3,62 (5Н, м), 3,90-4,00 (1Н, м), 4,50-4,65 (1Н, м), 4,73 (1Н, д, J = 5,2 Гц),
5,45-5,72 (1Н, м), 6,76-6,79 (1Н, м) ч/млн.
Пример 11. (2S)-1-(Nα-(1'-Ацетоксиэтоксикарбонил)-Nω-пара-толуолсульфониллизинил)пирролидин-2-карбонитрил
O
S
O
O
NH
O
O
O
N
H
N
O
CN
Раствор (2S)-1-(Nω-пара-толуолсульфониллизинил)пирролидин-2-карбонитрил трифторацетата (100 мг, 0,20 ммоль; получен согласно Jenkins и др., WO95/15309), α-ацетоксиэтил
пара-нитрофенилкарбоната (61 мг, 0,23 ммоль; получен согласно Alexander и др., J. Med.
Chem. 31, 318, 1988) и триэтиламина (30 мг, 0,30 ммоль) в дихлорметане (25 мл) перемешивают при комнатной температуре в течение 18 часов. После этого растворитель удаляют в вакууме и переносят остаток в этилацетат (70 мл). Данный раствор промывают 0,3 М
KHSO4, насыщенным NaHCO3, водой и насыщенным раствором соли, сушат (Na2SO4) и
выпаривают. Остаток очищают способом флэш-хроматографии (элюент: EtOAc:петр.эфир
60-80 °С, 7:3), получая белое твердое вещество, идентифицированное как указанное в заголовке соединение (51 мг, 0,10 ммоль, 49 %).
МС: ионизация при электрораспылении {М + Н}+ = 509,0
1
Н ЯМР (CDCl3) : δ 1,41-1,48 (6Н, м), 1,51-1,69 (2Н, м), 2,05 (3Н, д, J = 18,3 Гц), 2,122,28 (5Н, м), 2,41 (3Н, с), 2,86-2,93 (2Н, м), 3,63-3,64 (2Н, м), 4,38-4,42 (1Н, м), 4,72-4,73
(1Н, м), 4,74-4,79, 5,10-5,20 (1Н, 2хм), 5,54-5,62 (1Н, м), 6,74-6,79 (1Н, м), 7,29 (2Н, д,
J = 7,7 Гц), 7,71 (2Н, д, J = 8,4 Гц) ч/млн.
Пример 12. (2S)-1-(N'-(1'-Ацетоксиэтоксикарбонил)-N-(2"-(5"'-цианопиридин-2"'иламино)этил)глицинил)пирролидин-2-карбонитрил
O
O
O
O
N
N
O
N
CN
NH
NC
Раствор 1-([2-[(5-цианопиридин-2-ил)амино]этил]амино]-ацетил)-2-циано-(S)-пирролидин бис(трифторацетата) (100 мг, 0,19 ммоль; получен согласно Villhauer и др., WO98/19998),
α-ацетоксиэтил пара-нитрофенилкарбоната (56 мг, 0,21 ммоль; получен согласно Alexan-
17
BY 9035 C1 2007.04.30
der и др., J. Med. Chem. 31, 318, 1988) и триэтиламина (50 мг, 0,50 ммоль) в дихлорметане
(25 мл) перемешивают при комнатной температуре в течение 18 часов. После этого растворитель удаляют в вакууме и переносят остаток в этилацетат (70 мл). Данный раствор
промывают 0,3 М KHSO4, насыщенным NaHCO3, водой и насыщенным раствором соли,
сушат (Na2SO4) и выпаривают. Остаток очищают способом флэш-хроматографии (элюент:
EtOAc:петр.эфир 60-80 °С, 9:1), получая белое твердое вещество, идентифицированное
как указанное в заголовке соединение (13 мг, 0,03 ммоль, 16 %).
МС: ионизация при электрораспылении {М + Н}+ = 429,2
1
Н ЯМР (CDCl3) : δ 1,21-1,32 (3Н, м), 1,40-1,46 (1Н, м), 1,99-2,05 (4Н, м), 2,17-2,31 (4Н,
м), 3,50-3,63 (6Н, м), 4,40-4,50 (1Н, м), 4,77 (1Н, д, J = 5,9 Гц), 6,45-6,49 (1Н, м), 6,68-6,77
(1Н, м), 7,44-7,48 (1Н, м), 8,32 (1Н, с) ч/млн.
Пример 13. (2S)-1-(N'-(Бензилоксикарбонил)-О'-трет-бутилтреонинил)пирролидин2-карбонитрил
O
O
O
N
N
H
O
CN
Раствор (2S)-1-(О'-трет-бутилтреонинил)пирролидин-2-карбонитрил гидрохлорида (35 мг,
0,12 ммоль; получен согласно Jenkins и др., WO95/15309), бензилхлорформиата (32 мг,
0,13 ммоль) и триэтиламина (24 мг, 0,24 ммоль) в дихлорметане (25 мл) перемешивают
при комнатной температуре в течение 18 часов. После этого растворитель удаляют в вакууме и переносят остаток в этилацетат (70 мл). Данный раствор промывают 0,3 М
KHSO4, насыщенным NaHCO3, водой и насыщенным раствором соли, сушат (Na2SO4) и
выпаривают. Остаток очищают способом флэш-хроматографии (элюент : хлороформ : метанол, 98:2), получая белое твердое вещество, идентифицированное как указанное в заголовке соединение (47 мг, 0,12 ммоль, 100 %).
МС: ионизация при электрораспылении {М + Н}+ = 388,3
1
Н ЯМР (CDCl3) : δ 1,10-1,30 (3Н, м), 1,18 (9Н, с), 2,00-2,45 (4Н, м), 3,55-3,70 (1Н, м),
3,85-4,00 (2Н, м), 4,30-4,40 (1Н, м), 4,70-4,80 (1Н, м), 5,07 (2Н, с), 5,75 (1Н, д, J = 8,15 Гц),
7,20-7,45 (5Н, м) ч/млн.
Пример 14. (2S)-1-(S'-трет-бутил-N'-(этилоксикарбонил)цистеинил)пирролидин2-карбонитрил
O
O
S
N
H
N
O
CN
Раствор (2S)-1-(S')-трет-бутилцистеинил)пирролидин-2-карбонитрил трифторацетата
(100 мг, 0,27 ммоль; получен согласно Jenkins и др., WO95/15309), этилхлорформиата (35 мг,
0,32 ммоль) и триэтиламина (50 мг, 0,50 ммоль) в дихлорметане (25 мл) перемешивают
при комнатной температуре в течение 18 часов. После этого растворитель удаляют в вакууме и переносят остаток в этилацетат (70 мл). Данный раствор промывают 0,3 М
18
BY 9035 C1 2007.04.30
KHSO4, насыщенным NaHCO3, водой и насыщенным раствором соли, сушат (Na2SO4) и
выпаривают. Остаток очищают способом флэш-хроматографии (элюент: EtOAc:петр.эфир
60-80 °С, 8:2), получая белое твердое вещество, идентифицированное как указанное в заголовке соединение (30 мг, 0,092 ммоль, 35 %).
МС: ионизация при электрораспылении {М + Н}+ = 328,1
1
Н ЯМР (CDCl3) : δ 1,18 (3Н, т, J = 7 Гц), 1,30 (9Н, с), 2,17-2,24 (4Н, шир.м), 2,82-2,85
(2Н, м), 3,70-3,82 (2Н, шир.м), 4,05-4,09 (2Н, м), 4,48-4,53 (1Н, м), 4,74-4,77 (1Н, м), 5,415,44 (1Н, м) ч/млн.
Пример 15.
(2S)-1-(Nω-Ацетил-Nα-бензоиллизинил)пирролидин-2-карбонитрил
O
NH
O
N
N
H
O
CN
Раствор (2S)-1-(Nω-ацетиллизинил)пирролидин-2-карбонитрил трифторацетата (100 мг,
0,22 ммоль; получен согласно Jenkins и др., WO95/15309), бензоилхлорида (343 мг,
0,24 ммоль) и триэтиламина (45 мг, 0,45 ммоль) в дихлорметане (25 мл) перемешивают
при комнатной температуре в течение 18 часов. После этого растворитель удаляют в
вакууме и переносят остаток в этилацетат (70 мл). Данный раствор промывают 0,3 М
KHSO4, насыщенным NaHCO3, водой и насыщенным раствором соли, сушат (Na2SO4) и
выпаривают. Остаток очищают способом флэш-хроматографии (элюент: хлороформ:метанол,
97:3), получая белое твердое вещество, идентифицированное как указанное в заголовке
соединение (83 мг, 0,22 ммоль, 100 %).
МС: ионизация при электрораспылении {М + Н}+ = 387,6
1
Н ЯМР (CDCl3): δ 1,56-1,78 (4Н, шир.м), 1,94 (3Н, с), 2,12-2,20 (4Н, шир.м), 3,21-3,23
(2Н, м), 3,59-3,72 (2Н, м), 4,65-4,69 (2Н, м), 5,07 (2Н, с), 5,18-5,21 (1Н, м), 6,69-6,72 (1Н, м),
7,24-7,34 (5Н, м) ч/млн.
Пример 16. (2S)-1-(Nα-(Ацетил)-Nω-(бензилоксикарбонил)орнитинил)пирролидин2-карбонитрил
H
N
O
O
O
N
H
ω
N
O
CN
Раствор (2S)-1-(N -(бензилоксикарбонил)орнитинил)пирролидин-2-карбонитрил трифторацетата (100 мг, 0,23 ммоль; получен согласно Jenkins и др., WO95/15309), ацетилхлорида (20 мг, 0,26 ммоль) и триэтиламина (50 мг, 0,50 ммоль) в дихлорметане (25 мл)
перемешивают при комнатной температуре в течение 18 часов. После этого растворитель
удаляют в вакууме и переносят остаток в этилацетат (70 мл). Данный раствор промывают 0,3 М KHSO4, насыщенным NaHCO3, водой и насыщенным раствором соли, сушат
19
BY 9035 C1 2007.04.30
(Na2SO4) и выпаривают. Остаток очищают способом флэш-хроматографии (элюент: хлороформ:метанол, 97:3), получая белое твердое вещество, идентифицированное как указанное
в заголовке соединение (49 мг, 0,13 ммоль, 55 %).
МС: ионизация при электрораспылении {М + Н}+ = 371,2
1
Н ЯМР (CDCl3): δ 1,30-1,65 (4Н, м), 1,75-1,95 (2 Н, м), 1,90 (3Н, с), 2,10-2,40 (4Н, м),
3,10-3,30 (2Н, м), 3,65-3,90 (2Н, м), 4,70-4,90 (2Н, м), 5,90-6,00 (1Н, м), 7,30-7,50 (4Н, м),
7,70-7,80 (2Н, м) ч/млн.
Пример 17. In vitro ингибиторная активность относительно DP-IV
Соединения предыдущих примеров исследованы как ингибиторы DP-IV способами,
описанными в работе Ashworth и др. (Bioorg. Med. Chem. Lett. 1996, 6(10), 1163-66). He
обнаружено существенной ингибирующей активности до 10 мкМ, это указывает, что пролекарства данного изобретения являются, по меньшей мере, в 1000 раз менее активными,
чем активные ингибиторы, производными которых они являются. Следовательно, можно
сделать вывод, что любая видимая in vivo активность обусловлена биоконверсией в исходные ингибиторы.
Пример 18. In vivo активность на модели толерантности к глюкозе
Активность данных соединений исследуют на самцах крыс Zucker Fatty Rats 10- и
20-недельного возраста. Животных не кормят в течение ночи и затем вводят им перорально через зонд исследуемое соединение (10 мг/кг) в виде раствора. Через час берут образцы
крови (200 мкл) из хвостовой вены для определения базового уровня (t = 0) глюкозы, затем
животным дают перорально глюкозу (1 г/кг в виде 40 % мас./об. раствора). После этого
еще отбирают образцы крови при t = 10, 20, 30, 60 и 120 мин. Глюкозу определяют ферментативным исследованием. Типичные результаты представлены ниже в таблице.
Глюкоза в крови (мг/дл); средн.знач. ± ср.кв. откл., n = 4
t=0
t = 10
t = 20
t = 30
t = 60
t = 120
Наполнитель 95,1 ± 7,36 151,6 ± 8,12 164,3 ± 10,7 153,2 ± 7,8 153,4 ± 7,8 122,4 ± 7,0
Пример 2
80,2 ± 4,2 122,2 ± 7,8 117,8 ± 4,8 104,4 ± 5,6 117,6 ± 6,7 111,3 ± 12,1
Пример 3
86,4 ± 3,4 175,1 ± 3,8 148,5 ± 23,2 136,7 ± 16,9 120,6 ± 8,3 101,9 ± 4,5
Пример 5
80,5 ± 1,4 141,3 ± 14,5 134,2 ± 10,3 129,2 ± 8,2 114,6 ± 8,1 121,2 ± 5,8
Сравнение
91,4 ± 5,2 125,8 ± 8,9 110,0 ± 21,5 110,9 ± 4,4 112,2 ± 7,5 108,7 ± 8,9
Соединение
Ссылочным соединением в приведенных выше экспериментах является соединение
примера 11 из WO95/15309. Оно является исходным соединением, производными которого являются пролекарства примеров 2-6 настоящего описания.
Из приведенных выше результатов ясно, что пролекарства эффективны для снижения
гипергликемии после ввода глюкозы, но они не всегда так эффективны, как сравнительное
соединение в ранних временных точках. Это то, что следовало ожидать для пролекарств,
которые превращаются с высоким выходом в исходное лекарство. Результаты в ранних
временных точках являются результатом того, что необходима метаболическая конверсия
циркулирующего пролекарства.
В отдельном эксперименте исследуемое соединение дают при такой же дозе (10 мг/кг), но
за 12 часов до перорального ввода глюкозы. Результаты приведены ниже.
Глюкоза в крови (мг/дл); средн.знач. ± ср.кв.откл., n = 4
t=0
t = 10
t = 20
t = 30
t = 60
t = 120
145,5
±
6,6
122,9
±
8,7
112,2
± 8,6
84,2 ± 3,7
134,3 ± 8,0 127,2 ± 10,1
1 83,7 ± 3,8 113,5 ± 10,8 111,3 ± 9,9 91,9 ± 11,8 99,3 ± 10,0 116,9 ± 14,4
20
AUC
4556 ± 458
2430 ± 591
BY 9035 C1 2007.04.30
AUC (область под кривой "концентрация-время") сильно снижается, показывая, что
пролекарство обладает значительной антигипергликемической активностью, сохраняющейся в течение 12 часов.
Приведенные выше результаты показывают, что соединения настоящего изобретения
демонстрируют антигипергликемическую активность после перорального введения на
подходящих животных моделях непереносимости глюкозы. Следовательно, ожидается,
что они будут эффективны при лечении нарушенной толерантности к глюкозе и диабета
типа 2 у человека. Кроме того, результаты in vivo подтверждают, что пролекарства превращаются в активные ингибиторы DP-IV при циркуляции и что их можно применять при
лечении всех других патологий, для которых такие ингибиторы предполагаются в качестве терапевтических агентов.
Пример 19. Фармацевтические препараты
19А - Таблетки, 50 мг
Таблетки, содержащие 50 мг соединения примера 1, получают из следующих ингредиентов:
Соединение примера
154,5 г
Кукурузный крахмал
53,5 г
Гидроксипропилцеллюлоза
13,5 г
Карбоксиметилцеллюлоза кальция
11,0 г
Стеарат магния
2,0 г
Лактоза
165,5 г
Всего
400,0 г.
Вещества смешивают и затем прессуют, получая 200 таблеток по 200 мг, каждая из
которых содержит 50 мг соединения примера 1.
Соединения примеров 2, 3 и 5 готовят отдельно в виде соответствующих таблеток аналогичным образом. Соединения примеров 4 и 6-16 аналогично отдельно формулируют в
таблетки, содержащие 100 мг соответствующего соединения.
19В - Суппозитории, 100 мг
Суппозитории, содержащие 100 мг соединения примера 2, получают из следующих
ингредиентов:
Соединение примера 2
154,5 г
Кукурузный крахмал
210,0 г
Коллоидный диоксид кремния
2,5 г
Повидон 30
49,0 г
Стеарат магния
23,0 г
Адипиновая кислота
57,0 г
Бикарбонат натрия
43,0 г
Лаурилсульфат натрия
5,0 г
Лактоза
456,0 г
Всего
1000,0 г.
Вещества смешивают и затем прессуют, получая суппозитории по 1 г, каждый из которых содержит 100 мг соединения примера 2. Соединения примеров 1, 3-5 и 6-16 готовят
отдельно в виде соответствующих суппозиториев аналогичным образом.
Национальный центр интеллектуальной собственности.
220034, г. Минск, ул. Козлова, 20.
21
Документ
Категория
Без категории
Просмотров
0
Размер файла
243 Кб
Теги
09035, патент
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа